Pankreas β Hücrelerinde Mitofaji Akısını Sorgulamak İçin Tamamlayıcı Yaklaşımlar

Bu protokol, pankreas β hücrelerinde mitofajinin kantitatif analizi için iki yöntemi özetlemektedir: birincisi, hücre geçirgen mitokondriye özgü boyaların bir kombinasyonu ve ikincisi, genetik olarak kodlanmış bir mitofaji raporlayıcısı. Bu iki teknik tamamlayıcıdır ve belirli ihtiyaçlara göre konuşlandırılabilir, bu da mitokondriyal kalite kontrolünün nicel olarak ele alınmasında esneklik ve kesinlik sağlar.

Protokolümüz, akış sitometrisi yoluyla tek hücre çözünürlüğünde beta hücre mitofaji akısını incelemek için iki tamamlayıcı yöntemi açıklar. mt-Keima protokolü genetik bir mitofaji raportörü kullanırken, MtPhagy protokolü üç floresan boyayı birleştirir, bu da insan örneklerinde transfekte edilmesi zor hücrelere ekstrapolasyon yapmayı kolaylaştırır. Geleneksel biyokimyasal yaklaşımlar ve görüntüleme yaklaşımları kullanılarak mitofajinin değerlendirilmesi hem zaman alıcı hem de zordur.

Bu nedenle, beta hücrelerinde mitofaji akısını incelemek için yeni, sağlam ve etkili yöntemler geliştirmek önemlidir. Hem mt-Keima hem de MtPhagy yöntemi, pankreas beta hücrelerinde mitofaji akısını incelemek için etkili olan kantitatif değerlendirmelerdir. Bu nedenle, Soleimanpour laboratuvarı pankreas beta hücre yetmezliği ve diyabeti yönlendiren farklı mekanizmalara odaklanmaktadır.

Ve özellikle mitokondriyal fonksiyondaki kusurların diyabet gelişimini nasıl yönlendirdiğini anlamak için mitofaji de dahil olmak üzere mitokondriyal yaşam döngüsünün farklı yönlerine odaklanıyoruz.