Olumsuz Bir Embriyonik Ortamın Yetişkin Sosyal Davranışı Üzerindeki Etkisini Karakterize Etmek için Zebra Balıklarında Fetal Alkol Spektrum Bozukluklarının Modellenmesi

Laboratuvarımızın kapsamı, davranışı etkilemek için genlerin beyin gelişimi ile nasıl etkileşime girdiğini anlamaktır. Laboratuvarımızda, gelişim sırasında alkole maruz kalma gibi çevresel bir faktörün bir zebra balığının genlerinde nasıl değişikliklere yol açtığını ve dolayısıyla beyin gelişimini nasıl etkilediğini ve davranışta değişikliklere yol açtığını anlamak için zebra balığı kullanıyoruz. Genel hedefimiz, bir kişinin genetik profilinin embriyonik alkol maruziyetinden etkilenme olasılığını daha fazla veya daha az hale getirip getirmediğini anlamaktır. Bu yüzden bizim alanımızda, şu anda verimi artıran otomatik izleme kullanıyoruz ve CRISPR teknolojisi gibi gelişmiş genetik düzenleme kullanıyoruz. Bu ikisini bir araya getirmek, gen-çevre etkileşimlerinin davranışta değişikliklere nasıl yol açtığını daha fazla deşifre etmemizi sağlar. İlk kez gösterebildiğimiz şey, zebra balığının fetal alkol spektrum bozukluklarıyla ilişkili sosyal eksiklikleri modellemek için kullanılabileceğiydi. Geçmişte, zebra balığı doğum öncesi alkol maruziyetinin daha ciddi sonuçlarını modellemek için kullanılıyordu. Spesifik olarak, uzun süre yüksek alkol dozlarının neden olduğu fiziksel kusurları aramak için kullanıldılar. Bir alan olarak, zebra balığının fetal alkol spektrum bozuklukları ile ilişkili sosyal kusurları modellemek için kullanılıp kullanılamayacağını bilmiyorduk. Çok kısa bir süre için düşük dozda alkol kullanmanın yetişkin zebra balıklarında sosyal kusurlara yol açtığını ilk kez gösterebildik.

[Öğretim Görevlisi] Başlamak için, 1.4 litrelik tankları 37 litrelik bir tankın genişliği boyunca yerleştirin. Deney balığı ile arka plan arasındaki kontrastı artırmak için 37 litrelik tankın arkasını ve altını beyaz oluklu plastikle kaplayın. Ardından, deneysel balıklar için sosyal uyaranın kontrastını artırmak için oluklu plastiği 1.4 litrelik tankların dış duvarına yerleştirin. Ardından, balıkların yerleşim sırasında birbirlerini görmelerini önlemek için 1,4 litrelik ve 37 litrelik tankların arasına beyaz oluklu plastik yerleştirin. 37 litrelik tankın uzunluğunu ve 1,4 litrelik tankların yarısını yakalamak için kamerayı uygun bir mesafeye yerleştirin. 15 litrelik tankı aydınlatmak için 8 watt T37 tam spektrumlu lamba ile donatılmış akvaryum davlumbaz ışıklarını kullanın. Davranışsal tahlilleri gerçekleştirmeden önce tüm denemeleri randomize etmek için çevrimiçi bir rastgele dizi üreteci kullanın. Ardından, davranışsal test için belirlenen 37 litrelik tankı, muhafaza rafına uygun suyla doldurun. Su sıcaklığının muhafaza rafı ile 2 santigrat derece aralığında hizalandığından ve tüm tanklardaki su seviyelerinin aynı olduğundan emin olun. 5 santimetrelik bir test tankı için her biri 37 santimetreye yayılan 10 bölge oluşturmak için üst ve alt kısımda 50 santimetrelik artışlarla işaretleyin. Daha sonra, sosyal uyaran olarak hareket etmek için deney balığı ile aynı kohorttan iki erkek ve iki dişi seçin. Bir ağ kullanarak, 16 haftalık deney balığını barınak tankında yakalayın ve balık suyu dolu bir kaba koyun. Ardından deney balığını test alanının ortasına yerleştirin. 20 dakikalık deneme sürümünü başlatmadan önce, algılama ayarlarının seçilen yazılıma göre kullanıcı tercihleriyle uyumlu olup olmadığını kontrol edin. İlk 10 dakika boyunca, 37 litrelik ve 1.4 litrelik tanklar arasındaki opak bariyeri koruyun. Daha sonra, opak engelleri dikkatlice kaldırın ve deney balığının sosyal uyaranı görmesine izin verin. Embriyonik etanol maruziyeti, bu balıklar sürüye yaklaşamadıkları için sürüleşme tepkisini köreltti. Kontrol balıkları, canlı sürüye %1 alkole maruz kalan balıklardan önemli ölçüde daha güçlü bir tepki verdi. Sosyal uyaranın varlığında, kontrol balığı etanol ile muamele edilen balıklara kıyasla 1. bölgede daha fazla zaman geçirdi. Embriyonik etanol maruziyeti hareketliliği bozmadı, çünkü sosyal uyaranın mevcut olmadığı alışkanlık sırasında bölgeler arasında gruplar arasında bir fark yoktu. Sosyal uyaranın görünmediği 1. bölgede balıkların geçirdiği süre arasında bir fark yoktur.