October 27th, 2023
Mevcut protokol, fonksiyonelleştirilmiş manyetik boncuklar kullanılarak idrar hücre dışı veziküllerin etkili izolasyonu için ayrıntılı açıklamalar sağlar. Ayrıca, western blotlama, proteomik ve fosfoproteomik dahil olmak üzere sonraki analizleri kapsar.
Hücre dışı vezikül bazlı biyobelirteç keşfi üzerinde çalışıyoruz. Önemli bir adım, onları verimli ve seçici bir şekilde izole etmektir. Manyetik boncuk bazlı ayırmaya dayanan EVtrap, yüksek verim sağlayarak, kullanımı kolay, özellikle klinik uygulamalar için kolay olarak bize gerçekten yardımcı olabilir.
Bu protokolü, meme kanseri, böbrek kanserleri ve Parkinson Hastalığı gibi farklı hastalıklar için proteinlerde ve fosfoprotein biyobelirteçlerinde keşif için kullanıyoruz. Bu biyobelirteç biyosıvıdan elde edilir. EV'ler potansiyel olarak sıvı biyopsiler için kullanılabilir, bu da klinik tanı ve tedaviyi daha da iyileştirebilir.
Şu anda, hücre dışı vezikül izolasyonu için en yaygın kullanılan yaklaşım ultrasantrifüjleme ve çökeltmedir, ancak bu yöntemler kirleticilerin birlikte izolasyonu ve ayrıca düşük verimlilik ile sınırlıdır. Bu nedenle, EVtrap yöntemimiz, EV'leri izole etmek için daha etkili bir yol sağlayacak, bu da daha tekrarlanabilir ve hassas bir yönteme izin verecek ve aynı zamanda aşağı akış analizine fayda sağlayacaktır. İki şey üzerinde çalışıyoruz.
İlk olarak, EV izolasyonu ve aşağı akış analizi, özellikle de toplu yedekleme tabanlı bir analiz için yöntemler ve protokoller geliştirmeye devam ediyoruz. İkincisi, EVtrap'ın avantajı nedeniyle klinik alanda farklı uygulamaları araştırıyoruz.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
Bu protokol, fonksiyonel manyetik boncuklar kullanılarak idrar hücre dışı veziküllerinin (EV) verimli izolasyonunu özetlemektedir. Ayrıca, biyobelirteç keşfi için gerekli olan western blotting, proteomik ve fosfoproteomik gibi sonraki analizler detaylandırılmaktadır.
Efficient and selective isolation of extracellular vesicles (EVs) from biofluids is a critical inflection point for proteomics-driven biomarker discovery in biopharma R&D. This chemical affinity-based magnetic bead protocol enables high-yield, reproducible EV isolation, directly supporting quantitative proteomic and phosphoproteomic analyses essential for early disease detection and target validation. The method enhances predictive confidence in translational biomarker pipelines and supports risk-adjusted portfolio advancement.
This EV isolation protocol integrates at the interface of early discovery and translational research, bridging sample preparation with quantitative proteomics and phosphoproteomics analysis.