Name: İnsan Vajinasından Primer Fibroblastların Doku İşlenmesi ve İzolasyonu (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-11-22T12:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 30 s
Description: Öğrenin, insan vajinal dokusundan primer fibroblast izolasyonu için mekanik ve enzimatik sindirim yöntemini. Bu protokol, menopoz sonrası kadınlarda pelvik organ prolapsusu araştırmalarında yüksek verim sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Mirin, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gender+disparity+in+the+funding+of+diseases+by+the+U.S%5BTitle%5D)+AND+%22J+Womens+Health%22%5BJournal%5D)">Gender disparity in the funding of diseases by the U.S.</a> J Womens Health. 30 (7), 956-963 (2021).</li>
<li>MacLennan, A. H., Taylor, A. W., Wilson, D. H., Wilson, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+prevalence+of+pelvic+floor+disorders+and+their+relationship+to+gender%2C+age%2C+parity%2C+and+mode+of+delivery%5BTitle%5D)+AND+%22BJOG%22%5BJournal%5D)">The prevalence of pelvic floor disorders and their relationship to gender, age, parity, and mode of delivery.</a> BJOG. 107 (12), 1460-1470 (2000).</li>
<li>Ruiz-Zapata, A. M., Kerkhof, M. H., Zandieh-Doulabi, B., Brölmann, H. A. M., Smit, T. H., Helder, M. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fibroblasts+from+women+with+pelvic+organ+prolapse+show+differential+mechanoresponses+depending+on+surface+substrates%5BTitle%5D)+AND+%22Int+Urogynecol+J+Pelvic+Floor+Dysfunct%22%5BJournal%5D)">Fibroblasts from women with pelvic organ prolapse show differential mechanoresponses depending on surface substrates.</a> Int Urogynecol J Pelvic Floor Dysfunct. 24 (9), 1567-1575 (2013).</li>
<li>Kaur, G., Dufour, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell+lines%5BTitle%5D)+AND+%22Spermatogenesis%22%5BJournal%5D)">Cell lines.</a> Spermatogenesis. 2 (1), 1-5 (2012).</li>
<li>Rorteau, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Maintenance+of+chronological+aging+features+in+culture+of+normal+human+dermal+fibroblasts+from+old+donors%5BTitle%5D)+AND+%22Cells%22%5BJournal%5D)">Maintenance of chronological aging features in culture of normal human dermal fibroblasts from old donors.</a> Cells. 11 (5), 858(2022).</li>
<li>Blum, M., Koehler, J., Yangdon, T., Chatterjea, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Generating+primary+murine+vaginal+fibroblast+cell+lines%5BTitle%5D)+AND+%22MethodsX%22%5BJournal%5D)">Generating primary murine vaginal fibroblast cell lines.</a> MethodsX. 7, 101100(2020).</li>
<li>Kufaishi, H., Alarab, M., Drutz, H., Lye, S., Shynlova, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((comparative+characterization+of+vaginal+cells+derived+from+premenopausal+women+with+and+without+severe+pelvic+organ+prolapse%5BTitle%5D)+AND+%22Reprod+Sci%22%5BJournal%5D)">comparative characterization of vaginal cells derived from premenopausal women with and without severe pelvic organ prolapse.</a> Reprod Sci. 23 (7), 931-943 (2016).</li>
<li>Ruiz-Zapata, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vaginal+fibroblastic+cells+from+women+with+pelvic+organ+prolapse+produce+matrices+with+increased+stiffness+and+collagen+content%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Vaginal fibroblastic cells from women with pelvic organ prolapse produce matrices with increased stiffness and collagen content.</a> Sci Rep. 6 (1), 22971(2016).</li>
<li>Khan, M., Gasser, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Generating+primary+fibroblast+cultures+from+mouse+ear+and+tail+tissues%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Generating primary fibroblast cultures from mouse ear and tail tissues.</a> J Vis Exp. (107), e53565(2016).</li>
<li>Kufaishi, H., Alarab, M., Drutz, H., Lye, S., Shynlova, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Static+mechanical+loading+influences+the+expression+of+extracellular+matrix+and+cell+adhesion+proteins+in+vaginal+cells+derived+from+premenopausal+women+with+severe+pelvic+organ+prolapse%5BTitle%5D)+AND+%22Reprod+Sci%22%5BJournal%5D)">Static mechanical loading influences the expression of extracellular matrix and cell adhesion proteins in vaginal cells derived from premenopausal women with severe pelvic organ prolapse.</a> Reprod Sci. 23 (8), 978-992 (2016).</li>
<li>Medel, S., Alarab, M., Kufaishi, H., Drutz, H., Shynlova, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Attachment+of+primary+vaginal+fibroblasts+to+absorbable+and+nonabsorbable+implant+materials+coated+with+platelet-rich+plasma%5BTitle%5D)+AND+%22Female+Pelvic+Med+Reconstr+Surg%22%5BJournal%5D)">Attachment of primary vaginal fibroblasts to absorbable and nonabsorbable implant materials coated with platelet-rich plasma.</a> Female Pelvic Med Reconstr Surg. 21 (4), 190-197 (2015).</li>
<li>Awwad, J., Sayegh, R., Yeretzian, J., Deeb, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prevalence%2C+risk+factors%2C+and+predictors+of+pelvic+organ+prolapse%5BTitle%5D)+AND+%22Menopause%22%5BJournal%5D)">Prevalence, risk factors, and predictors of pelvic organ prolapse.</a> Menopause. 19 (11), 1235-1241 (2012).</li>
<li>Waise, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+optimized+method+to+isolate+human+fibroblasts+from+tissue+for+ex+vivo+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Bio+Protoc%22%5BJournal%5D)">An optimized method to isolate human fibroblasts from tissue for ex vivo analysis.</a> Bio Protoc. 9 (23), e3440(2019).</li>
<li>Nadalutti, C. A., Wilson, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Using+human+primary+foreskin+fibroblasts+to+study+cellular+damage+and+mitochondrial+dysfunction%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Protoc+Toxicol%22%5BJournal%5D)">Using human primary foreskin fibroblasts to study cellular damage and mitochondrial dysfunction.</a> Curr Protoc Toxicol. 86 (1), (2020).</li>
<li>Da Silva Lara, L. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Menopause+Leading+to+Increased+Vaginal+Wall+Thickness+in+Women+with+Genital+Prolapse%3A+Impact+on+Sexual+Response%5BTitle%5D)+AND+%22J+Sex+Med%22%5BJournal%5D)">Menopause Leading to Increased Vaginal Wall Thickness in Women with Genital Prolapse: Impact on Sexual Response.</a> J Sex Med. 6 (11), 3097-3110 (2009).</li>
<li>Stasio, D. D., Lauritano, D., Iquebal, H., Romano, A., Gentile, E., Lucchese, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measurement+of+oral+epithelial+thickness+by+optical+coherence+tomography%5BTitle%5D)+AND+%22Diagnostics%22%5BJournal%5D)">Measurement of oral epithelial thickness by optical coherence tomography.</a> Diagnostics. 9 (3), 90(2019).</li>
<li>Zorina, A., Zorin, V., Kudlay, D., Kopnin, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Age-related+changes+in+the+fibroblastic+differon+of+the+dermis%3A+role+in+skin+aging%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Age-related changes in the fibroblastic differon of the dermis: role in skin aging.</a> Int J Mol Sci. 23 (11), 6135(2022).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Amfoterisin B</td><td>Bio Techne</td><td>B23192</td><td></td></tr><tr><td>Hücre süzgeci (100 &mu; m)</td> <td>ThermoFisher Scientific</td><td>22363549</td><td></td></tr><tr><td>Konik Santrifüj Tüpleri (15 mL)</td><td>Fisher Scientific&nbsp;</td><td>14-959-53A</td><td></td></tr><tr><td>DMEM/F12</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>11320033</td><td></td></tr><tr><td>Tüy Tek Kullanımlık Neşter No. 15</td><td>Socorex</td><td>FB.15</td><td></td></tr><tr><td>Fetal Sığır Serumu</td><td>Sigma Aldrich</td><td>NC1983075</td><td></td></tr><tr><td>Yüksek Berraklıklı Konik Santrifüj Tüpleri (50 mL)</td><td>Fisher Scientific&nbsp;</td><td>14-432-22</td><td></td></tr><tr><td>HulaMixer Numune Karıştırıcı</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>15920D</td><td></td></tr><tr><td>İnsan Fibronektin DuoSet ELISA</td><td>R& D Sistemleri</td><td>DY1918-05</td><td></td></tr><tr><td>İnsan Pro-Kollajen I alfa 1 DuoSet ELISA R</td><td>& D Systems</td><td>DY6220-05</td><td></td></tr><tr><td>Liberaz Araştırma Sınıfı</td><td>Sigma Aldrich</td><td>05 401 119 001</td><td></td></tr><tr><td>Penisilin / Streptomisin (5000U / ml)</td> <td>ThermoFisher Scientific</td><td>15070063</td><td></td></tr><tr><td>Petri kapları, polistiren (100 mm x 20 mm)</td> <td>Millipore Sigma</td><td>P5606</td><td></td></tr><tr><td>Serolojik pipetler (10 mL)</td><td>ThermoFischer Scientific</td><td>170356N</td><td></td></tr><tr><td>Steril şırıngalar (5 mL)</td><td>Fischer Scientific</td><td>14-955-458</td><td></td></tr></tbody></table>

İnsan vajinasından primer fibroblastların doku İşlenmesi ve İzolasyonu

Tissue Processing and Isolation of Primary Fibroblasts from the Human Vagina

Pelvik organ prolapsusu ameliyatı geçiren 10 bağımsız donörden vajinal doku toplandı. Tarif edilen protokol kullanılarak, hücreler insan vajinal dokusundan izole edildi. Hücre popülasyonları karakteristik uzun, düz ve iğ şeklinde bir görünüme sahipti. Diğer çalışmalarda olduğu gibi, donörün yaşı arttıkça fibroblastların klonojenik yeteneklerinin önemli ölçüde daha yavaş olduğunu ve hücre ikiye katlama kapasitelerinin azaldığını gözlemledik. Bu farklılıklar, yaşlı bireylerden (75-78 yaş) izole edilen fibroblastlar ile genç bireylerden (35-47 yaş) izole edilenler karşılaştırıldığında belirgindi. Orta yaşlı donörlerden alınan hücreler bir ara profil (56-61 yaş) sergiledi. Hücre proliferasyon oranları başlangıçta aynı bilinen tohumlama yoğunluğuna sahip bir faz kontrast mikroskobu kullanılarak doğrudan görselleştirme ile tahmin edildi.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65864/65864fig01.jpg"> Şekil 1: Protokolün şematik gösterimi. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65864/65864fig01large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
Şekil 1, ayrışma ve izolasyon protokolünün şematik bir temsilini göstermektedir. Bu adımları takiben, bu protokol, alt kültür hücrelerine izin vermek için yeterli hücre sayısında on donörden dokuzunda primer fibroblast izolasyonunda% 90'lık bir başarı oranı sağlamıştır. Bağışçıların ortanca yaşı 59 idi.
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td>Protokol (Yazar, yıl)</td>
			<td>Orijinal protokolün donör dokusu</td>
			<td>Bağışçı Sayısı</td>
			<td>Yıllar içinde donör yaşı</td>
			<td>Elde edilen fibroblastlar</td>
			<td>Morfoloji</td>
		</tr><tr><td>Ruiz-Zapata ve ark., 2013</td>
			<td>İnsan vajinası</td>
			<td>3</td>
			<td>56-78</td>
			<td>Hayır</td>
			<td>YOK</td>
		</tr><tr><td>Khan ve ark., 2016</td>
			<td>Fare kulağı ve kuyruğu</td>
			<td>2</td>
			<td>48-65</td>
			<td>Hayır</td>
			<td>YOK</td>
		</tr><tr><td>Waise ve ark., 2019</td>
			<td>İnsan dokusu</td>
			<td>3</td>
			<td>56-75</td>
			<td>Hayır</td>
			<td>YOK</td>
		</tr><tr><td>Nadalutti ve diğerleri, 2020</td>
			<td>İnsan sünnet derisi</td>
			<td>1</td>
			<td>65</td>
			<td>Hayır</td>
			<td>YOK</td>
		</tr><tr><td>Geçerli</td>
			<td>İnsan vajinası</td>
			<td>10</td>
			<td>35-79</td>
			<td>Evet</td>
			<td>Mil şeklinde</td>
		</tr></tbody></table>Tablo 1: İnsan Vajinal Fibroblastlarının Başarılı İzolasyonu için Protokollerin Karşılaştırılması. Mevcut farklı protokollerin bizimkiyle karşılaştırılması ve morfolojik sonuçlarla kanıtlanması.
Tablo 1 , bu çalışmada vajinal fibroblast izolasyonunu denemek için diğer protokollerin kullanılmasının sonuçlarını göstermektedir. Vajinal mukozadan ve daha yaşlı donörlerden primer fibroblastların izolasyonu için standart bir protokol geliştirdik5.
Tablo 1'de listelenenler de dahil olmak üzere birçok yerleşik protokolü test ettik ve çalışmamızda bu protokolleri kullanarak hücre izolasyonunda başarı gözlemlemedik. Sınırlamaları için aşağıdaki nedenleri öneriyoruz.
Ruiz ve ark.3 tarafından yayınlanan protokol, fasyanın kazınmasını ve dokunun küçük parçalara ayrılmasını içerir. Deneyimlerimize göre, fasyayı ayırt etmek zordur ve kazıma girişimleri hücre veriminde önemli bir azalmaya neden olabilir. Bu yöntem basit olsa da, genelleştirilebilirliğini sınırlayan kritik ayrıntılardan yoksundur. Ek olarak, bu protokoldeki mekanik sindirim, daha yoğun olma eğiliminde olan menopoz sonrası doku için yetersiz görünmektedir.
Khan ve ark.9 ve Waise ve ark.13 tarafından yayınlanan protokoller, neşter tekniğine kıyasla önemli çok yönlü kesme kuvvetleri oluşturmayan doku kıyma için makas kullanır. Deneyimlerimize göre, makas yöntemi de etkili bir şekilde işe yaramadı.
Son olarak, eksplant yöntemini kullanan Nadalutti ve ark.14 protokolü, elimizde başarılı bir şekilde fibroblast vermedi. Bu yöntem, fibroblastları başarılı bir şekilde ayırmak için daha agresif mekanik ve enzimatik işlem gerektirebilen menopoz sonrası dokunun doğası nedeniyle daha az etkili olabilir.
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65864/65864fig02.jpg"> Şekil 2: 0. günde askıya alınmış hücrelerin faz kontrast görüntüsü. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65864/65864fig02large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
Şekil 2, protokolümüzü kullanarak 0. günde askıya alınan hücreleri göstermektedir.
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65864/65864fig03.jpg"> Şekil 3: Üç adet 1cm2 doku biyopsisinden oluşan havuzlanmış hücre süspansiyonundan 100x büyütmede kültürün 14. gününde vajinal primer fibroblastların faz kontrast görüntüsü. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65864/65864fig03large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
Şekil 3 , 1 cm² boyutlarında 3 doku biyopsisinin havuzlanmış hücre süspansiyonundan 100x büyütmede primer fibroblastları göstermektedir.
Fibroblast kimliği, daha önce tarif edildiği gibi immünofloresan tekniklerle ve küçük modifikasyonlarla araştırıldı. Primer vajinal hücrelerin hücresel kökenini doğrulamak için, immünofloresan boyama yoluyla fibroblastik kökenli spesifik biyobelirteçler kullandık. Hücreler, premenopozal ve postmenopozal doku örneklerinden vimentin (Şekil 4), F-aktin ve α-SMA'nın pozitif boyanmasına dayalı olarak fibroblastlar olarak tanımlandı (Şekil 5). Fibroblastlar, deneylerde kullanılmak üzere yüksek canlılıkla (%&gt;90) genişlemeye kadar kültürlendi.
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65864/65864fig04.jpg"> Şekil 4: Vajinal fibroblastların vimentininin pozitif boyanması. İzole edilen premenopozal ve postmenopozal doku primer fibroblastları IF analizine tabi tutuldu ve görüntüler 200x büyütmede çekildi. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65864/65864fig04large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65864/65864fig05.jpg"> Şekil 5: Vajinal fibroblastların F-aktin ve α-SMA'sının pozitif boyanması. IgG kontrolü ile karşılaştırıldığında protein ekspresyonunun sonuçları. Görüntüler 200x büyütme ile toplanmıştır. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65864/65864fig05large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>

İnsan Vajinasından Primer Fibroblastların Doku İşlenmesi ve İzolasyonu

Pelvic organ prolapse is a disorder that seriously impacts the quality of life of women. It occurs when muscles and ligaments weaken and cause pelvic ...

tissue-processing-isolation-primary-fibroblasts-from-human

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Bu makalede, izolasyon ve bakım, cilt ve akciğer dokusunda yaban kemirgenler birincil fibroblast kültürlerinin için bir protokol tanımlamaktadır.

Kemirgenler itibaren İlköğretim Yetişkin Fibroblast Kültürleri kurulması

Insan derisi punch biyopsi gelen fibroblast eksplant kültür protokolü düşük bir geçit numaradan milyon 15-20 hücre bankacılığı için 4-8 hafta içinde cilt hücrelerini elde etmek teknik olarak sağlam ve basit bir yoludur.

İlköğretim İnsan Fibroblastlar türetilmesi için Cilt Punch Biyopsi Eksplantın Kültür

Birincil insan fibroblast ikinci naif multipotent ten türetilmiş öncü (SKP) hücreleri izole etmek için bir yöntem sunulmaktadır. Biz fibroblast kültürleri elde edilen bu SKPS insan deri biyopsisi doğrudan elde benzeyen kök hücre özelliklerini paylaşmak olduğunu göstermektedir. Bu hücreler, örneğin Oct4 ve Nanog olarak multipotent işaretleri ek olarak nöral tepe işaretleyici, Nestin, ifade eder.

İlköğretim İnsan fibroblast Kültürler gelen naif Erişkin Kök Hücre İzolasyon

Fibroblast davranışı, bir klinik antite spektrumunun temelini oluşturur, ancak büyük ölçüde doğal heterojenlikleri nedeniyle zayıf karakterize edilirler. Geleneksel fibroblast araştırmaları, in vivo fibroblast davranışını maskeleyen in vitro manipülasyona dayanır. Hücre kültürü gerektirmeyen fare derisi fibroblastlarının izolasyonu için FACS tabanlı bir protokol tanımladık.

FACS ile Murin Dermal fibroblast İzolasyonu

Burada, MF fenotipine sahip donmuş mide, ince bağırsak ve kolon dokusu oluşum hücrelerinden primer fibroblast/miyofibroblast (MF) kültürlerinin izole edilmesi ve oluşturulması için bir protokol sunulmaktadır. Bu hücreler CD90, α-SMA ve vimentin eksprese eder. MF'ler, enzimatik aktivite ve sitokin üretimi dahil olmak üzere çeşitli fonksiyonel testler için kullanılabilir.

İnsan Frozen Gastrointestinal örneklerden CD 90+ fibroblast / miyofibroblastlar İzolasyonu

Bu yazıda insan derisinden papiller ve retiküler fibroblastların yalıtımına yönelik FACS tabanlı bir protokol açıklanmaktadır. Eksplant kültürler aracılığıyla yaygın olarak kullanılan izolasyon protokolüyle kaçınılmaz olan in vitro kültürünü bozur. Yayılımlı fibroblast alt setleri işlevsel olarak farklıdır ve dermis içinde diferansiyel gen ifadesi ve lokalizasyonu görüntüler.

Floresan-aktif hücre sıralama ile ınsan derisinden papiller ve Reiküler fibroblastların izolasyonu

Birincil erişkin fibroblastları, yeni başlayanlar tarafından (örn. öğrenciler) kolay, hızlı ve güvenilir bir şekilde ayırmak için bir protokol sunuyoruz. Prosedür primer fibroblastlar elde etmek için enzimatik doku sindirim ve ultrasonik dalgalar ile mekanik ajitasyon birleştirir. Protokol, belirli deneysel gereksinimlere (örn. insan dokusu) kolayca adapte edilebilir.

Ultrasonik-Augmented primer yetişkin fibroblast yalıtım

Hücre yeniden programlama, pluripotent hücre durumunu düzenleyen ve koruyan anahtar genlerin tanıtılmasını gerektirir. Açıklanan protokol, insan dermal fibroblastlarından viral/entegre yöntemler olmadan ancak modifiye edilmeyen RNA'lar (NM-RNA) kullanarak hücresel savunma mekanizmalarını azaltan immün kaçırma faktörleri ile birlikte indüklenen pluripotent kök hücrelerin (iPSCs) kolonilerinin oluşmasını sağlar.

Erişkin İnsan Dermal Fibroblastlarının Abdominal Deriden İzolasyon ve İndüklenen Pluripotent Kök Hücrelerin Indüklenen Alacalı Kök Hücrelerin Indükleyici Olmayan Yöntemle Üretilmesi

Bu yazıda birincil, hastaya özgü insan aort düz kas hücrelerinin ve dermal fibroblastların izolasyonu ve kültürlenmesi için eksplant kültürüne dayalı bir yöntem anlatılmaktadır. Ayrıca, hücre kasılmasını ölçmek ve daha sonra bu hücrelerdeki hastaya özgü farklılıkları incelemek için kullanılabilecek yeni bir yöntem sunulmaktadır.

Primer Hastaya Özgü Aort Düz Kas Hücrelerinin İzolasyonu ve Yarı Kantitatif Gerçek Zamanlı Kasılma Ölçümleri In Vitro

Kas-iskelet sistemi yaralanması ile ilişkili yara iyileşmesinin incelenmesi genellikle Schwann hücreleri (SC'ler), keratinositler ve fibroblastlar arasındaki in vitro etkileşimlerin değerlendirilmesini gerektirir. Bu protokol, bu birincil hücrelerin insan sünnet derisinden izole edilmesini, kültürlenmesini ve karakterizasyonunu açıklar.

İnsan Sünnet Derisinden Primer Schwann Hücrelerinin, Keratinositlerin ve Fibroblastların İzolasyonu, Kültürü ve Karakterizasyonu

Bu çalışma, etkili ve istikrarlı bir şekilde saf ve canlı fibroblastlar sağlayabilen keloid dokulardan primer fibroblastlar oluşturmak için optimize edilmiş bir protokolü açıklamaktadır.

İnsan Keloid Dokusundan Primer Dermal Fibroblastların İzolasyonu, Kültürü ve Karakterizasyonu

Öğrenin, insan vajinal dokusundan primer fibroblast izolasyonu için mekanik ve enzimatik sindirim yöntemini. Bu protokol, menopoz sonrası kadınlarda pelvik organ prolapsusu araştırmalarında yüksek verim sağlar.

İnsan Vajinasından Primer Fibroblastların Doku İşlenmesi ve İzolasyonu

Daha fazla video keşfet