İlaç Geliştirme Uygulamaları için Tüm İnsanlardan Oluşan Bir Hepatik Kültür Sistemi
20 Ekim 2023
Son teknik gelişmeler, ilaç metabolizması ve toksisite uygulamaları için bir in vitro platformun ölçekli üretimini mümkün kılmıştır. Tamamen insanlardan oluşan bir 2D+ hepatik sistem (TV2D+), geleneksel iki boyutlu kültür yöntemlerini kullanarak fizyolojik olarak ilgili sonuçlar sağlar. Bu protokol, sistemin kurulumu, bakımı ve uygulanmasında son kullanıcıları destekleyecektir.
TruVivo, fenotipik olarak stabil ve fonksiyonel primer insan hepatositlerini koruyan kullanışlı ancak sağlam in vitro platform ihtiyacını karşılamak için geliştirilmiştir. Bu nitelikleri nedeniyle sistem, klinik öncesi ilaç geliştirme ile ilgili çok çeşitli soruları yanıtlamak için temel bir platform görevi görür. Zorluklardan biri, günümüzün sorularını cevaplamak için gereken biyolojik karmaşıklığa sahip, ancak yine de kullanımı kolay olan çok hücreli bir sistem yaratma ihtiyacıdır.
Mevcut sistemler genellikle hepatosit morfolojisini koruyamamakta ve uzun süreli işlev görmekte başarısız olmakta veya rutin, tekrarlanabilir sonuçlar elde etmede teknik zorluklar ortaya koymaktadır. TruVivo ile kullanıcılar, geleneksel 2D hücre kültürü tekniklerinin basitliğine ve esnekliğine güvenmeye devam edebilirler. Ek olarak, özel bir ekipman gerekmez ve sistem geleneksel analitik yöntemlere uygundur.
TruVivo ile artık klinik öncesi değerlendirmeden önce uzun yarılanma ömürleri ile bileşiklerin metabolik klerensini, ana metabolitlerini, eliminasyonun temel yollarını ve diğer farmakokinetik özelliklerini daha doğru bir şekilde tahmin edebiliyoruz.
Genel Bakış
Bu çalışma, primer insan hepatositlerinin fonksiyonelliğini korurken ilaç metabolizması ve toksisite uygulamaları için tasarlanmış bir in vitro platform olan TruVivo'yu sunmaktadır. Platform, preklinik ilaç geliştirme için doğru metabolik öngörüler sağlarken geleneksel 2D kültür tekniklerinin kolayca kullanımını kolaylaştırır.
Temel Çalışma Bileşenleri
Araştırma Alanı
- İn vitro ilaç metabolizması
- Toksisite değerlendirmesi
- Preklinik ilaç geliştirme
Arka Plan
- Fonksiyonel primer insan hepatosit modellerine olan ihtiyaç.
- Mevcut çok hücreli sistemlerin hepatosit morfolojisinin korunmasındaki zorlukları.
- İlaç geliştirmede tekrarlanabilir sonuçların önemi.
Kullanılan Yöntemler
- Hücre kültürü için aseptik teknikler
- Hepatosit ekimi için kolajen kaplı plaka kullanımı
- Besleyici hücre ve hepatosit medya hazırlığı için çeşitli takviyeler
Temel Sonuçlar
- TruVivo sistemi, metabolik klerens öngörülerini geliştirmektedir.
- Tipik hepatik morfoloji ve fonksiyonu zaman içinde korur.
- Farmakokinetik özellikleri etkili bir şekilde değerlendirme yeteneği doğrulanmıştır.
Sonuçlar
- Çalışma, TruVivo'nun ilaç geliştirmedeki faydasını ortaya koymaktadır.
- Farmakolojide daha doğru preklinik değerlendirmeler için önemi.
Sıkça Sorulan Sorular
Sektörel Uygulama Alanları
Erken ilaç geliştirme süreçlerinde öngörücü ilaç metabolizması ve toksisite değerlendirmesi için uzun süreli, insanla ilişkili hepatik modeller kritik öneme sahiptir. TV2D+ tamamen insan kaynaklı hepatik kültür sistemi, standart 2D iş akışları kullanılarak primer insan hepatositlerinin sağlam ve tekrarlanabilir bir şekilde değerlendirilmesine olanak tanıyarak portföy genelinde risk azalmasını destekler. Bu platform, translasyonel güveni artıran ve preklinik karar verme süreçlerini kolaylaştıran, ölçeklenebilir ve fenotipik olarak stabil modellere olan ihtiyacı karşılamaktadır.
Biyofarma Ar-Ge'de Stratejik Uygulamalar
Erken Keşif ve Hedef Doğrulama
- Primer insan hücreleri kullanılarak hepatik ilaç metabolizma yollarının incelenmesine olanak tanır.
- Sürdürülebilir belirteç ekspresyonu ve canlılık aracılığıyla hepatik hedeflerin fonksiyonel validasyonunu destekler.
- Fizyolojik olarak ilgili albümin ve üre seviyelerini koruyarak mekanistik risk azaltımını kolaylaştırır.
Tarama ve Analiz Geliştirme
- İnsan hepatik bağlamında bileşik taraması için tekrarlanabilir ve ölçeklenebilir bir platform sağlar.
- Birden fazla PHH lotu ve ekim yoğunluğu genelinde analiz standardizasyonu ve kantitatif çıktı sağlar.
- Metabolik klirens ve farmakokinetik özelliklerin güvenilir değerlendirmesini destekler.
Translasyonel ve Preklinik Araştırmalar
- Translasyonel süreklilik için in vitro hepatik fonksiyonu, preklinik biyobelirteç gereksinimleri ile uyumlu hale getirir.
- İnsanla ilişkili ilaç metabolizmasını ve toksisitesini öngörerek riskten arındırılmış ilerleme kararlarına olanak tanır.
- Uzun süreli preklinik çalışmalar için yapısal bütünlüğü ve viabiliteyi korur.
Boru Hattı ve İş Akışı Entegrasyonu
TV2D+ sistemi; erken hedef doğrulaması, bileşik taraması ve translasyonel araştırmalar arasında köprü kurarak, keşiften preklinik aşamaya kadar olan sürece entegre olur.
- Keşif Biyolojisi: İnsan hepatositlerinde hipotez testlerini ve yolak aydınlatmasını destekler.
- Tarama: Bileşik ayıklama için tekrarlanabilir, kantitatif metabolik ve canlılık verileri sağlar.
- Analitik: Karşılaştırmalı analiz için albümin, üre ve metabolik klirens ölçümüne imkan tanır.
- Translasyonel Araştırma: In vitro bulgulardan preklinik biyobelirteç uyumuna kadar süreklilik sağlar.
- Kurumsal Yeniden Kullanım: İlaç geliştirme programları genelinde uyarlanabilen, standartlaştırılmış ve esnek bir platform sunar.
Operasyonel ve Kurumsal Etki
- Bilimsel Değer: İnsan ilaç metabolizması ve toksisite sonuçlarındaki öngörü güvenini artırır.
- Operasyonel Değer: Standart ekipmanlar ve güçlü tekrarlanabilirlik ile iş akışlarını basitleştirir.
- Stratejik Değer: Devam/dur kararlarını iyileştirir ve geç aşama kaybı riskini azaltır.
- Portföy Etkisi: Riskten arındırılmış önceliklendirmeyi ve verimli kaynak tahsisini sağlar.
Uygulama Hususları
- Primer insan hepatosit kültürü ve standart aseptik teknik konusunda uzmanlık gerektirir.
- Geleneksel 2D kültür ekipmanlarını ve analitik altyapıyı kullanır.
- Farklı PHH lotları arasında tekrarlanabilir sonuçlar elde etmek için ekipler arası standardizasyon gerektirir.
- Çeşitli ekim yoğunluklarına ve deneysel tasarımlara uyarlanabilir.
- Primer insan hepatositlerin kalitesine ve mevcudiyetine bağlıdır.
Biyofarma SSS
Chapters in this video
0:00
Introduction
1:08
Media Preparation for Setting Up the All‐Human 2D+ Hepatic Culture System
2:16
Plating Human Feeder Cells for Setting Up the All‐Human 2D+ Hepatic Culture System
3:54
Plating Primary Human Hepatocytes for Setting Up the All‐Human 2D+ Hepatic Culture System
