Name: Sıçan Femoranın Kortikal Kemiğinde Bir Kutu Boşluğu Defekti Modeli Oluşturma (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-11-21T14:50:00.000+00:00
Duration: 2 min 56 s
Description: Keşfedin sıçan femur kortikal kemiğinde kutu boşluğu defekti oluşturma yöntemini. Bu model biyomalzemelerin biyomekanik stres altında değerlendirilmesini ve kemik rejenerasyonu mekanizmalarının incelenmesini sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu çalışma, Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı 82101000 (HW), U21A20368 (LY) ve 82100982 (FL) tarafından finanse edildi ve Sichuan Bilim ve Teknoloji Programı 2023NSFSC1499 (HW) tarafından desteklendi.

Bu çalışmadaki tüm hayvan prosedürleri, Sichuan Üniversitesi Batı Çin Stomatoloji Okulu Etik Komitesi tarafından gözden geçirildi ve onaylandı (WCHSIRB-D-2021-597). Bu çalışma için Sprague-Dawley cinsi sıçanlar (erkek, vücut ağırlığı 300 g) kullanıldı.
1. Ameliyat öncesi hazırlık
<ol><li>Enstrüman hazırlığı<ol><li>Bu çalışmada kullanılan cerrahi aletler için Şekil 1A'ya bakın: elektrikli tıraş makinesi, doku makası, oftalmik makas, oftalmik forseps, tek kullanımlık neşter, periosteal ayırıcı, oral düşük hızlı el aleti, oral prob, tek kullanımlık irrigasyon vaku, iğne tutucu, 3.0 sütür.</li>
		<li>Oral bir prob hazırlayın ve probun büyük kavisli ucunu kusurun çapına göre bir işaretleyici kalemle işaretleyin (Şekil 1B). Ameliyat sırasında kusurun boyutunu belirlemek için bunu kullanın.</li>
		<li>Kullanmadan önce prosedürü gerçekleştirmek için kullanılan tüm cerrahi malzemeleri ve aletleri sterilize edin. İstenilen malzemeleri katlanmış bir bez veya ambalaj kağıdına koyun ve buhar sterilizasyonu için otoklav bandı ile kapatın (20-25 dakika boyunca 125-135 ° C).</li>
		<li>Cerrahi alan hazırlığı: Ameliyat masasını ve masanın etrafındaki ortamı %75 alkol püskürterek dezenfekte edin. Ameliyat masasında otoklavlanmış örtüler ile yaklaşık 60 cm x 90 cm steril bir alan oluşturun.</li>
	</ol></li>
	<li>Anestezi hazırlığı<ol><li>Sıçanları intraperitoneal olarak %10 ketamin hidroklorür (50-100 mg/kg) ve %2 ksilazin 2 mg/kg) ile anestezikleştirin. Preoperatif ve intraoperatif analjezi için deri altı carprofen (5 mg / kg) enjeksiyonu kullanın. Anestezi derinliğini ayak parmağı sıkışma testi ile inceleyin. Anesteziden sonra, kuru gözleri ve kornea yaralanmasını önlemek için gözlere steril göz merhemi sürün.</li>
	</ol></li>
</ol>2. Cerrahi prosedür
<ol><li>Fareyi steril cerrahi masaya yanal yaslanma pozisyonuna getirin ve alt ekstremite tüylerini elektrikli bir tıraş makinesi ile alın.</li>
	<li>Cerrahi bölgedeki cilt dokusunu dezenfekte etmek için %5 iyodofor solüsyonu ve %75 alkol kullanın.</li>
	<li>Proksimal ve distal uyluk kemiğini bulun ve sıçanın cilt dokusunu kesmek için uyluk kemiğinin uzun ekseni boyunca 2,5 cm'lik bir kesi yapın.<ol><li>Oftalmik forseps ve doku makası ile cilt tabakasını fasyadan ayırın ve pazı femoris ve lateral femoral kaslar yoluyla femura lateral yaklaşımı ortaya çıkarın.</li>
		<li>İki kas septasının (beyaz doku çizgisi) kesişimini bulun ve femur yüzeyine ulaşılana kadar kas sınırı boyunca tek kullanımlık bir cerrahi bıçakla dikkatlice ayırın. NOT: Kası ayırmak için tek kullanımlık bir bıçak kullanırken, kas septumu boyunca ayırmak ve yumuşak doku içinde vasküler yaralanmaya neden olmamak için dikkatli olmak önemlidir. Yeni başlayanlar ve anatomiye aşina olmayanlar, iki kas kütlesi arasındaki künt diseksiyonda oftalmik forseps ve periosteal ayırıcılar kullanmalıdır.</li>
	</ol></li>
	<li>Femoral yüzey kaslarını künt bir şekilde ayırmak ve femoral diyafizin ortasını ortaya çıkarmak için bir periosteal ayırıcı uygulayın.</li>
	<li>Femur başının lateral 1/3 eğik tepesinin üst kısmında bulunan femur diyafizinin orta yüzeyindeki kusur bölgesinin alanını işaretlemek için steril bir işaretleyici kalem kullanın.</li>
	<li>İşaretli bölgede kemik yüzeyine dik küçük bir delik açmak için 1,2 mm çapında yavaş hareket eden bilyalı matkapla oral düşük hızlı el aletini kullanın, periost ve kemik korteksini kemik iliği boşluğuna ulaşacak kadar derin bir derinlikle yok edin. Bu delme derinliği seviyesinde, bu derinliğe paralel olarak deliğin boyutunu her yöne genişletin ve bir kutu boşluğu şekli elde etmek için düzeltin.</li>
	<li>Hazırlık sırasında ve sonrasında defekt çapını ve morfolojisini belirlemek için defektin kenarına paralel etiketli bir oral prob kullanın.</li>
	<li>Kas ve cilt tabakalarını sırasıyla 3-0 monofilament emilebilir dikişlerle kapatın ve cerrahi bölgeyi içten dışa %5 iyodofor ile dezenfekte edin.</li>
</ol>3. Ameliyat sonrası bakım
<ol><li>Ameliyattan sonra, carprofen'i (5 mg / kg) deri altından uygulayın ve fareyi anesteziden iyileşene kadar sabit sıcaklıkta bir ısıtma yastığına koyun. Sıçan bilincini geri kazandığında, yavaşça kuru, otoklavlanmış yatak takımları içeren bir kafese taşıyın.</li>
	<li>Ameliyattan sonra 24 saat analjeziye ve 1 hafta boyunca ameliyat sonrası izlemeye devam edin.</li>
</ol>4. Numune toplama ve analiz
<ol><li>Ameliyattan sonra intraperitoneal olarak pentobarbital sodyum 100-200 mg / kg enjekte ederek sıçanı insan olarak ötenazi yapın. Femurun yüzeyindeki kas ve fasyal dokuyu dikkatlice ayırın ve ameliyat edilen taraftaki uyluk kemiğini tamamen çıkarın. Ameliyat sonrası 0 gün (Şekil 2A, B), 2 hafta, 4 hafta ve 6 hafta sonra örnekleri toplayın.</li>
	<li>Femoral örnekleri 24 saat boyunca% 4 paraformaldehit içinde sabitleyin. Mikro bilgisayarlı tomografi kullanarak femora'nın yapısını analiz edin. Tarama parametrelerini aşağıdaki gibi ayarlayın: X-ışını tüpü potansiyeli, 70 kVp; filtre, AL 0,5 mm; X-ışını yoğunluğu, 0.2 mA; voksel boyutu, 17 μm; ve entegrasyon süresi, 1 × 300 ms. Bitmap verilerini kullanarak 3B model görüntülerini yeniden oluşturun.</li>
	<li>Femoral örnekleri kademeli bir dizi etanol seyreltmesinde dehidre etmeden önce örnekleri 8 hafta boyunca% 10 EDTA'da kireçten arındırın. Ardından, numuneleri parafin mumu15'e gömün.<ol><li>Gömülü numuneleri sagital düzlemden 5 μm parafin kesitlerine kesin.</li>
		<li>Hem hematoksilen hem de eozin (H & E) boyama kiti ve bir Masson boyama kiti ile bölümleri boyayın. Histopatoloji ile defekt alanının iyileşmesini gözlemleyin.</li>
	</ol></li>
</ol>

Sıçan Femoral Kutusunun Kurulması ve Değerlendirilmesi: Kavite Defekti Modeli

<ol><li>Einhorn, T. A., Gerstenfeld, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fracture+healing%3A+mechanisms+and+interventions%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Rheumatol%22%5BJournal%5D)">Fracture healing: mechanisms and interventions.</a> Nat Rev Rheumatol. 11 (1), 45-54 (2015).</li>
<li>Claes, L., Recknagel, S., Ignatius, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fracture+healing+under+healthy+and+inflammatory+conditions%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Rheumatol%22%5BJournal%5D)">Fracture healing under healthy and inflammatory conditions.</a> Nat Rev Rheumatol. 8 (3), 133-143 (2012).</li>
<li>Holmes, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nonunion+bone+fracture%3A+a+quicker+fix%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Nonunion bone fracture: a quicker fix.</a> Nature. 550 (7677), S193(2017).</li>
<li>Dimitriou, R., Jones, E., McGonagle, D., Giannoudis, P. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bone+regeneration%3A+current+concepts+and+future+directions%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Med%22%5BJournal%5D)">Bone regeneration: current concepts and future directions.</a> BMC Med. 9, 66(2011).</li>
<li>Schmidt, A. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Autologous+bone+graft%3A+Is+it+still+the+gold+standard%3F+Injury%5BTitle%5D)+AND+%2252+%28Suppl+2%29%22%5BJournal%5D)">Autologous bone graft: Is it still the gold standard? Injury.</a> 52 (Suppl 2). , S18-S22 (2021).</li>
<li>Baldwin, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Autograft%2C+allograft%2C+and+bone+graft+substitutes%3A+Clinical+evidence+and+indications+for+use+in+the+setting+of+orthopaedic+trauma+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22J+Orthop+Trauma%22%5BJournal%5D)">Autograft, allograft, and bone graft substitutes: Clinical evidence and indications for use in the setting of orthopaedic trauma surgery.</a> J Orthop Trauma. 33 (4), 203-213 (2019).</li>
<li>Muscolo, D. L., Ayerza, M. A., Aponte-Tinao, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Massive+allograft+use+in+orthopedic+oncology%5BTitle%5D)+AND+%22Orthop+Clin+North+Am%22%5BJournal%5D)">Massive allograft use in orthopedic oncology.</a> Orthop Clin North Am. 37 (1), 65-74 (2006).</li>
<li>Yu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biomimetic+periosteum-bone+substitute+composed+of+preosteoblast-derived+matrix+and+hydrogel+for+large+segmental+bone+defect+repair%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Biomater%22%5BJournal%5D)">Biomimetic periosteum-bone substitute composed of preosteoblast-derived matrix and hydrogel for large segmental bone defect repair.</a> Acta Biomater. 113, 317-327 (2020).</li>
<li>Pearce, A. I., Richards, R. G., Milz, S., Schneider, E., Pearce, S. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+for+implant+biomaterial+research+in+bone%3A+a+review%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Cell+Mater%22%5BJournal%5D)">Animal models for implant biomaterial research in bone: a review.</a> Eur Cell Mater. 13, 1-10 (2007).</li>
<li>McGovern, J. A., Griffin, M., Hutmacher, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+for+bone+tissue+engineering+and+modelling+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Dis+Model+Mech%22%5BJournal%5D)">Animal models for bone tissue engineering and modelling disease.</a> Dis Model Mech. 11 (4), dmm033084(2018).</li>
<li>Bigham-Sadegh, A., Oryan, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selection+of+animal+models+for+preclinical+strategies+in+evaluating+the+fracture+healing%2C+bone+graft+substitutes+and+bone+tissue+regeneration+and+engineering%5BTitle%5D)+AND+%22Connect+Tissue+Res%22%5BJournal%5D)">Selection of animal models for preclinical strategies in evaluating the fracture healing, bone graft substitutes and bone tissue regeneration and engineering.</a> Connect Tissue Res. 56 (3), 175-194 (2015).</li>
<li>Horner, E. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long+bone+defect+models+for+tissue+engineering+applications%3A+criteria+for+choice%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Eng+Part+B+Rev%22%5BJournal%5D)">Long bone defect models for tissue engineering applications: criteria for choice.</a> Tissue Eng Part B Rev. 16 (2), 263-271 (2010).</li>
<li>Vajgel, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+systematic+review+on+the+critical+size+defect+model%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Oral+Implants+Res%22%5BJournal%5D)">A systematic review on the critical size defect model.</a> Clin Oral Implants Res. 25 (8), 879-893 (2014).</li>
<li>Samsonraj, R. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+versatile+protocol+for+studying+calvarial+bone+defect+healing+in+a+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Eng+Part+C+Methods%22%5BJournal%5D)">A versatile protocol for studying calvarial bone defect healing in a mouse model.</a> Tissue Eng Part C Methods. 23 (11), 686-693 (2017).</li>
<li>Yu, F., Li, F., Zheng, L., Ye, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epigenetic+controls+of+Sonic+hedgehog+guarantee+fidelity+of+epithelial+adult+stem+cells+trajectory+in+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Adv%22%5BJournal%5D)">Epigenetic controls of Sonic hedgehog guarantee fidelity of epithelial adult stem cells trajectory in regeneration.</a> Sci Adv. 8 (29), eabn4977(2022).</li>
<li>Colnot, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Skeletal+cell+fate+decisions+within+periosteum+and+bone+marrow+during+bone+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22J+Bone+Miner+Res%22%5BJournal%5D)">Skeletal cell fate decisions within periosteum and bone marrow during bone regeneration.</a> J Bone Miner Res. 24 (2), 274-282 (2009).</li>
<li>Bhandari, M., Shaughnessy, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+minimally+invasive+percutaneous+technique+of+intramedullary+nail+insertion+in+an+animal+model+of+fracture+healing%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Orthop+Trauma+Surg%22%5BJournal%5D)">A minimally invasive percutaneous technique of intramedullary nail insertion in an animal model of fracture healing.</a> Arch Orthop Trauma Surg. 121 (10), 591-593 (2001).</li>
<li>Muschler, G. F., Raut, V. P., Patterson, T. E., Wenke, J. C., Hollinger, J. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+design+and+use+of+animal+models+for+translational+research+in+bone+tissue+engineering+and+regenerative+medicine%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Eng+Part+B+Rev%22%5BJournal%5D)">The design and use of animal models for translational research in bone tissue engineering and regenerative medicine.</a> Tissue Eng Part B Rev. 16 (1), 123-145 (2010).</li>
<li><a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Primer+on+the+Metabolic+Bone+Diseases+and+Disorders+of+Mineral+Metabolism%22">Primer on the Metabolic Bone Diseases and Disorders of Mineral Metabolism</a>. Clifford, J., Rosen, M. D. , Wiley-Blackwell, UK. (2019).</li>
<li>Wong, R. M. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+systematic+review+of+current+osteoporotic+metaphyseal+fracture+animal+models%5BTitle%5D)+AND+%22Bone+Joint+Res%22%5BJournal%5D)">A systematic review of current osteoporotic metaphyseal fracture animal models.</a> Bone Joint Res. 7 (1), 6-11 (2018).</li>
</ol>

Tüm orijinal veriler ve görüntüler bu belgeye dahil edilmiştir. Yazarlar çıkar çatışması olmadığını beyan eder

Klinik öncesi hayvan modelleri, kemik iyileşmesini ve biyomalzemelerin kemik rejenerasyonu üzerindeki etkisini incelemek için hayati öneme sahiptir. Bu protokol, klinik kemik rejenerasyonu ile ilişkili intramembranöz kemik oluşum sürecini kopyalayan bir femur kutu boşluğu defekt modelini göstermektedir. Defekt alanı, önceden işaretlenmiş bir oral prob kullanılarak intraoperatif olarak standardize edildi. Mikro-BT ve histopatolojik boyama sonuçları, kalınlaşmış periost ve yeni trabeküler kemik oluşumu ile 6 hafta boyunca ...

Kırık ve kusurlu kemik sıklıkla travma, tümörler, iltihaplanma ve konjenital malformasyonlardan kaynaklanır 1,2. Genç sağlıklı bireylerde kemik dokusu tipik olarak güçlü rejeneratif yetenekleresahip olsa da 3, kritik bir boyutu aşan kusurlar veya sistemik hastalıklara (örneğin diyabet, osteoporoz ve enfeksiyonlar) bağlı iyileşme engelleri yine de kemik süreksizliği veya iyileşme bozukluğu gibi komplikasyonlara yol açabilir4. Bu klinik zorluğun üstesinden gelmek için, kemik grefti veya biyomateryaller, ciddi şekilde kusurlu kemiği değiştirmek veya büyük kemik segmentlerini yeniden yapılandırmak için yaygın olarak kullanılır. Bununla birlikte, bu tedavilerin sınırlamaları vardır. Örneğin, altın standart olarak kabul edilmesine rağmen, otolog kemik grefti, sınırlı donör tedariki ve potansiyel donör bölgesi komplikasyonlarından muzdariptir 5,6. Allogreftler ayrıca bağışıklık aracılı redd, hastalıkların potansiyel iletimi ve greftinbiyomekanik ve biyolojik özellikleri üzerindeki olumsuz etkiler gibi belirli riskler de sunar 7.
Son yıllarda, kemik defekti iyileşme mekanizmalarına odaklanan araştırmalarda bir artışa tanık olunmuştur. Alternatif biyomalzemelerin kullanımı ve doku mühendisliğindeki gelişmeler, kemikrejenerasyonu alanında öne çıkan konular olarak ortaya çıkmıştır8. Bu biyomateryaller insan tedavisine uygulanmadan önce, etkinliklerini ve güvenliklerini sağlamak için in vitro ve in vivo olarak test edilmelidirler. Bununla birlikte, in vitro ortamların karmaşıklığının azalması ve immün ve inflamatuar yanıtların olmaması, çeşitli biyomateryallerin in vitro olarak değerlendirilmesini sınırlamaktadır. Sonuç olarak, çeşitli kemik dokusu defektleri için hayvan modellerinin oluşturulmasına ihtiyaç duyulmaktadır9. Hayvan modelleri, biyomalzemelerin farklı yükleme koşulları altında değerlendirilmesine izin verir, türe özgü kemik özelliklerinin anlaşılmasını kolaylaştırır ve hayvan modelleri ile insan klinik durumları arasındaki benzerlik hakkında fikir verir. Bu avantajlar, kemik-iskele etkileşimlerini incelemek ve araştırma bulgularını klinik uygulamaya dönüştürmek için gereklidir 9,10.
Şu anda, mekanik kemik defekti hayvan modelleri, kranial kemik defekti modelleri ve segmental kemik defekti modelleri en yaygın olarak uygulanan yöntemler olmak üzere, biyomalzemelerin performansını doğrulamak için yaygın olarak kullanılmaktadır11. Sıklıkla kemik kaynamaması ile sonlanan şiddetli uzun kemik veya tibia travmasını taklit etmek için kullanılan segmental kemik defekti modelleri, tek tip boyutları ve tanımlanmış anatomik pozisyonları, yeni kemik oluşumu ve revaskülarizasyonun radyolojik veya histolojik değerlendirmelerini basitleştirmeleri nedeniyle avantajlıdır. Bununla birlikte, bu modeller bilateral kırık segmentlerini stabilize etmek için metal implantlar gerektirir ve hem endokondral hem de intramembranöz ossifikasyonu içeren karmaşık bir iyileşme süreci gerektirir12. Öte yandan, kalvarial kemik defekti modelleri, standardize defekt çapları, uygun cerrahi erişimleri ve dura mater ve yumuşak dokuyu destekleyici işlevleri nedeniyle biyomateryallerin değerlendirilmesinde birincil tarama aracı haline gelmiştir13. Klinik olarak ilgili senaryolarda intramembranöz kemik oluşumunu modellemek için yaygın olarak kullanılmalarına rağmen, iyileşme sürecinde yük taşımayan yapıları nedeniyle biyomekanik yükleme koşulları altında kemik iyileşmesini değerlendirmek için uygun değildirler14.
Bu sınırlamaları ele almak için, sıçanların femoral diyafiz dokusunda bir kutu boşluklu kortikal kemik defekti modeli oluşturduk. Mikro bilgisayarlı tomografi (BT), üç boyutlu (3D) rekonstrüksiyon ve histopatolojik boyama (Hematoksilen ve eozin [HE] ve Masson) kullanarak, bu modelin hemostaz koşulları altında iyileşme sürecini analiz ettik. Biyomekanik yükleme koşulları altında biyomalzeme performansını değerlendirmek ve intramembranöz ossifikasyona karşı kemik rejenerasyonunun biyomühendislik ve mekanizmasını incelemek için yeni bilgiler sunmayı amaçlıyoruz.

<table><tbody><tr><td>1,2 mm yavaş hızlı bilyalı matkap</td><td>Dreybird Medical Equipment Co., Ltd.</td><td>RA3-012</td><td>Kutu boşluğu kusurlarının hazırlanması için</td></tr><tr><td>3.0 sütür</td><td>Chengdu Shifeng Co., Ltd.</td><td>Yok Yaraları</td><td>dikmek için</td></tr><tr><td>%4 paraformaldehit</td><td>Biosharp</td><td>BL539A</td><td>Femoral örnekleri düzeltmek için</td></tr><tr><td>Pamuk topları</td><td>Haishi Hainuo Group Co.,&nbsp; Ltd.</td><td>20120047</td><td>Cilt sterilizasyonu ve cerrahi alanın temizliği için</td></tr><tr><td>Pamuk çubukları</td><td>Lakong Medical Devices Co., Ltd.</td><td>M6500R</td><td>Cilt dezenfeksiyonu için</td></tr><tr><td>Diş teknisyeni taşlama makinesi</td><td>Marathon</td><td>N3-140232</td><td>Kutu boşluğu kusurlarının hazırlanması için</td></tr><tr><td>Tek kullanımlık neşter</td><td>Hangzhou Huawei Medical Supplies Co., Ltd.</td><td>20100227</td><td>Cilt kesileri oluşturmak ve kas dokusunu keskin bir şekilde ayırmak için</td></tr><tr><td>Elektrikli tıraş makinesi</td><td>JASE</td><td>BM320210</td><td>Cerrahi alandan saç dokusunun çıkarılması</td></tr><tr><td>Hematoksilen ve Eozin Leke kiti</td><td>Biosharp</td><td>C1005</td><td>Örneklerin histolojik analizi için</td></tr><tr><td>Masson' s Trikrom Leke Kiti</td><td>Solarbio</td><td>G1340</td><td>Örneklerin histolojik analizi için Micro</td></tr><tr><td>CT</td><td>Scanco medical ag</td> <td>& micro; CT 45</td><td>Femoral örneklerdeki kusurların iyileşmesini analiz etmek için</td></tr><tr><td>İğne tutucu</td><td>Chengdu Shifeng Co., Ltd.</td><td>Yok</td><td>Sütür tutma iğneleri için</td></tr><tr><td>Olympus Research Grade Tüm Slayt Tarama Sistemi VS200</td><td>Chengdu Bilgi Teknolojisi A.Ş.</td><td>VS200</td><td>HE boyama ve Masson boyama sonuçlarını analiz etmek için</td></tr><tr><td>Oftalmik forseps</td><td>Chengdu Shifeng Co., Ltd.</td><td>Yok Cildi</td><td>, kas dokusunu sıkıştırmak için</td></tr><tr><td>Oftalmik makas</td><td>Chengdu Shifeng Co., Ltd.</td><td>Yok Deri</td><td>kesisi yaklaşımı oluşturmak için</td></tr><tr><td>Oral düşük hızlı el aleti</td><td>Maraton</td><td>Y221101003</td><td>Kutu boşluğu kusurlarının hazırlanması için</td></tr><tr><td>Oral prob</td><td>Shanghai Sangda Medical Insurance Co., Ltd.</td><td>20000143</td><td>Kusurların çapını ölçmek için</td></tr><tr><td>Periosteal ayırıcı</td><td>Chengdu Shifeng Co., Ltd.</td><td>Yok Kas</td><td>dokusunun künt ayrılması için</td></tr><tr><td>Sprague&ndash; Dawley sıçanları</td><td>Byrness Weil Biotech Ltd</td><td>Yok</td><td>Femur kemik kutulu kaviter defekt kurulması için</td></tr><tr><td>Doku makası</td><td>Chengdu Shifeng Co., Ltd.</td><td>Yok Deri</td><td>kesisi yaklaşımı oluşturmak için</td></tr></tbody></table>

sıçan femora'nın kortikal kemiğinde bir kutu boşluğu defekti modeli oluşturma

Creating a Box-Cavity Defect Model in the Cortical Bone of Rat Femora

Ciddi kemik kusurları veya karmaşık kırıklar, kaynamama veya yetersiz kemik iyileşmesi gibi ciddi komplikasyonlara neden olabilir. Hücrelerin, yapı iskelelerinin ve sitokinlerin uygulanmasını içeren doku mühendisliği, kemik rejenerasyonu için umut verici bir çözüm olarak kabul edilir. Sonuç olarak, kemik kusurlarını simüle eden çeşitli hayvan modelleri, kemik iyileşmesi için doku mühendisliğinin terapötik potansiyelini keşfetmede çok önemli bir rol oynamaktadır. Bu çalışmada, sıçanların orta uyluk kemiğinde, kemik iyileşmesini teşvik etmede biyomalzemelerin işlevini değerlendirmek için ideal bir model olarak hizmet edebilecek kutu şeklinde bir kortikal kemik defekti modeli oluşturduk. Bu kutu şeklindeki kortikal kemik defekti, oral düşük hızlı bir el aleti kullanılarak delindi ve bir torna iğnesi ile şekillendirildi. Kutu boşluklu kortikal kemik defektinin başarılı bir şekilde kurulduğunu doğrulamak için ameliyat sonrası mikro-BT analizi hemen yapıldı. Sıçanların ameliyat edilen tarafındaki femurlar daha sonra ameliyattan sonra birden fazla zaman noktasında (0 gün, 2 hafta, 4 hafta ve 6 hafta) toplandı. Her örneğin defekt alanının iyileşme süreci mikro-BT, hematoksilen ve eozin (H&E) boyaması ve Masson trikrom boyaması kullanılarak değerlendirildi. Bu sonuçlar, intramembranöz ossifikasyon ile tutarlı bir iyileşme paterni gösterdi ve iyileşme esasen 6 hafta boyunca tamamlandı. Bu hayvan modelinin iyileşme sürecinin sınıflandırılması, kemik dokusu defektinin iyileşmesi sırasında intramembranöz ossifikasyonu hedefleyen yeni biyomateryallerin ve ilaçların araştırılması için etkili bir in vivo yöntem sağlar.

Bu protokolde, delme işlemi ile 4,5 mm x 1,5 mm boyutlarında bir sıçan femur kutu boşluğu defekt modelini başarıyla kuruyoruz. İyileşme sürecini analiz etmek için, sıçanlarda femoral travmanın iyileşme sürecinde endokondral ossifikasyon, intramembranöz ossifikasyon ve kemik yeniden şekillenmesinin kilit zaman noktaları olan ameliyattan 0 gün, 2 hafta, 4 hafta ve 6 hafta sonra ameliyat edilen taraftaki femur dokusunu topladık2. Ameliyat sonrası 0. günde, mikro-BT bi...

Burada, sıçan femoral diyafiz dokusunda kutu boşluğu defekti oluşturmak için bir protokol sunuyoruz. Bu model, biyomekanik stres altında biyomalzeme performansını değerlendirebilir ve intramembranöz osteogenez ile ilgili kemik rejenerasyon mekanizmalarını keşfedebilir.

Sıçan Femora'nın Kortikal Kemiğinde Bir Kutu Boşluğu Defekti Modeli Oluşturma

Severe bone defects or complex fractures can result in serious complications such as nonunion or insufficient bone healing. Tissue engineering, which ...

Kemik iyileşmesi için doku mühendisliğinin terapötik potansiyelini araştırmak için kemik kusurlu çeşitli hayvan modelleri uygulanmaktadır. Bununla birlikte, çoğu, biyomekanik yükleme koşulları altında standart defektler oluşturamaz, bu da biyo materyallerin kemik iyileştirici etkisinin değerlendirilmesinde önemlidir. Geleneksel kemik defekti modelleriyle karşılaştırıldığında, son kutu boşluklu kortikal kemik defekti modeli önemli ilerlemeler sunmaktadır.Kemik iyileşmesinin daha doğru bir şekilde ölçülmesi için sadece standartlaştırılmış bir kemik defekti boyutu sağlamakla kalmaz, aynı zamanda ek fiksasyona ihtiyaç duymadan biyomekanik yükleme koşulları altında biyo malzemelerin değerlendirilmesine de olanak tanır. Protokolümüz, kemik rejenerasyon modellerinin in vivo çalışmasında intramembranöz kemik oluşumunu araştırmak için kapsamlı ve genelleştirilebilir bir yaklaşım sunmaktadır. Bu özellikle kemik dokusu mühendisliği alanı için faydalıdır.

creating-a-box-cavity-defect-model-in-the-cortical-bone-of-rat-femora

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Bu videoda, ilgilenilen kemik örneği ikame materyallerinin kemik rejenerasyon kapasitelerini değerlendirmek için bir tavşan kalvarial modeli oluşturmak için cerrahi prosedürü açıklıyoruz.

Bir Tavşan Kalvarial Defekt Modeli Oluşturma: Kemik Rejenerasyon Kapasiteleri için Kemik İkame Materyallerini Değerlendirmek için Tavşan Kafatasının Üst Kısmında Yuvarlak Defektler Oluşturmak İçin Cerrahi Bir Prosedür

Kemik onarımı alanındaki klinik öncesi araştırmaların bir kısıtlaması, iyileşen bir kemik lezyonundaki lokal mekanik ortam üzerinde deneysel kontrol eksikliğidir. Fiksatör sertliğini in vivo olarak değiştirme yeteneğine sahip kemik onarımı için eksternal bir fiksatörün tasarımını ve kullanımını rapor ediyoruz.

Ayarlanabilir Sertlik, Sıçan Femur Osteotomi ve Segmental Kemik Hata Modelleri için Eksternal Fiksatör

Biyomedikal araştırmalarda ciddi kemik yaralanmalarını taklit etmek için hayvan modelleri sıklıkla kullanılır. Küçük boyutları nedeniyle, farelerde stabilize kemik lezyonlarının kurulması çoğu araştırma grubunun yeteneklerinin ötesindedir. Burada, farelerde deneysel femur kusurlarını belirlemek ve analiz etmek için basit bir yöntem açıklıyoruz.

Farelerde Basit Kritik ölçekli Femoral Hata Modeli

Boyuna değerlendirilmiş vivo içinde bir semiautomated microcomputed tomografi tabanlı nicel yapısal analizi kullanarak olabilir bir çıplak sıçan vertebral kompresyon Osteoporoz ile ilgili kırık modeli oluşturmak için bu iletişim kuralını hedefidir.

Semiautomated boyuna Microcomputed tomografi tabanlı nicel yapısal analizi bir çıplak sıçan vertebra kırığı Osteoporoz ile ilgili Model

Vivo memeli modellerinin kritik ölçekli kemik defektleri ortopedik tedavi ve şifa mekanizmaları eğitim araştırmacılar için gereklidir. Burada, bir protokol tekrarlanabilir, gelen bir segmental, femur kusurları eksternal fiksasyon kullanarak stabilize Sıçanlarda oluşturulması için tanıtmak.

Güvenilir ve tekrarlanabilir kritik ölçekli gelen bir Segmental femur kusur manken özel eksternal fiksatör ile stabilize Sıçanlarda

Burada kemik değiştirme malzemelerini kemik rejenerasyon kapasiteleri açısından değerlendirmek amacıyla tavşanlarda cerrahi bir protokol sunacağız. Tavşan kafataslarına sabitlenmiş PEEK silindirleri kullanılarak, osteokondasyon, osteoindüksiyon, osteonezogenez ve vaskülogenez indüklenen malzemeler canlı veya ötenazi yapılan hayvanlarda değerlendirilebilir.

Kemik İkmal Malzemelerinde Kemik Büyümesi ve Neaskülarizasyonunun Değerlendirilmesi İçin Tavşanda Kemik Büyütmenin Kalvarial Modeli

Burada, Wistar albino sıçanlarının femurunun şaftını iyatrojenik olarak kırmak ve nasır gelişimini takip etmek için bir protokol sunuyoruz. Bu femur osteotomi modeli, araştırmacıların kırık iyileşme sürecini değerlendirmelerine ve bir ilacın kırık iyileşmesini nasıl etkileyebileceğini incelemelerine yardımcı olabilir.

Wistar Albino Sıçanlarında Femur Osteotomi Modeli Geliştirme Protokolü

Bu protokol, sıçanların femoral troklear oluğunda delikler açarak ve sonraki ağrı davranışını ve histopatolojik değişiklikleri ölçerek tam kat kıkırdak defektleri (FTCD) modeli oluşturur.

Tam Kat Kıkırdak Defektlerinin Sıçan Modelinin Geliştirilmesi ve Değerlendirilmesi

Bu protokol, kırık iyileşme çalışmaları için intramedüller tel ile stabilize edilen farelerin uyluk kemiğinde diyafiz kırığı oluşturulması için cerrahi bir prosedürü açıklar.

Farelerde Diafiz Femur Kırığı Modelinin Kurulması

Sıçanlarda kalvarial sütür-kemik kompozit defektlerinin ayrıntılı cerrahi prosedürlerini ve modelin kısa ve uzun vadeli prognozlarını araştırıyoruz. Sütür rejeneratif tedaviler geliştirmek için standart bir model oluşturmayı amaçlıyoruz.

Sıçanlarda Kalvarial Sütür-Kemik Kompozit Defektlerinin Saptanması: Sütür-Rejeneratif Tedavi İncelemesi İçin Standart Bir Model

Bu çalışma, kemik ikame malzemelerinin mekanik ve osteojenik performansını dahili veya dış fiksasyon kullanmadan, yük taşıyıcı koşullarda değerlendirmek için sıçan femur yarı-segmental defekt modeli oluşturmuştur.

Yük taşıyan bölgelerde kemik ikamesi performansını değerlendirmek için sıçanlarda yarı-segmental diyafizal kemik defekti modeli

Keşfedin sıçan femur kortikal kemiğinde kutu boşluğu defekti oluşturma yöntemini. Bu model biyomalzemelerin biyomekanik stres altında değerlendirilmesini ve kemik rejenerasyonu mekanizmalarının incelenmesini sağlar.

Sıçan Femora'nın Kortikal Kemiğinde Bir Kutu Boşluğu Defekti Modeli Oluşturma

Daha fazla video keşfet