Name: Kemirgen Modellerinde Nöromüsküler Kavşak İletimini Değerlendirmek için Uyarılmış Tek Fiber Elektromiyografisi (SFEMG) (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-03-08T14:00:00.000+00:00
Duration: 4 min 30 s
Description: Öğrenin, kemirgen modellerinde tek fiber elektromiyografi (SFEMG) ile nöromüsküler kavşak iletimini değerlendirme yöntemini. Bu protokol, yaşlanma ve nöromüsküler hastalıklarda jitter ve blokaj ölçümü sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Tüm protokoller, Missouri Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi tarafından belirlenen düzenlemelere uygun olarak onaylandı ve uygulandı.
1. Hayvan hazırlama ve anestezi uygulaması
<ol><li>Uygun kişisel koruma ekipmanı giyin.</li>
	<li>İşlemden önce, kilo bazlı ilaçlar ve ventilatör ayarları için uygun dozu belirlemek için farenin ağırlığını ölçün.</li>
	<li>% 3 -% 5 inhale izofluran ile anesteziyi indükleyin. Yeterli bir anestezi seviyesi oluşturulduktan sonra, fareyi yüzüstü pozisyonda konumlandırın ve% 1 -% 3 inhale izofluran ile anesteziyi sürdürün.</li>
	<li>Geri çekilme yanıtının olmadığını gözlemlemek için arka bacak ayak pedine forseps ile hafifçe bastırarak anestezi derinliğinin yeterliliğini doğrulayın.</li>
	<li>Vücut ısısını 37 °C'de tutun.</li>
	<li>Kuruluğu önlemek için gözlere veteriner onaylı petrol bazlı merhem sürün. Forseps kullanarak ayak pedine baskı uygularken solunum hızını gözlemleyerek ve geri çekilme tepkilerini değerlendirerek anestezi derinliğini izleyin.</li>
	<li>Değerlendirilecek arka ayağı makas kullanarak tıraş edin. Yeterli epilasyondan sonra, yapışkan bant kullanarak, çalışılacak uzuvu, ayak bileği yaklaşık 90° dorsifleksiyonda sabitlenmiş, diz ekstansiyonda ve kalça abdüksiyonda olacak şekilde konumlandırın.</li>
	<li>Tüm deney boyunca farenin solunumunu ve kalp atış hızını sürekli olarak izleyin. NOT: Kalp atış hızındaki artış, yetersiz anestezik derinliğin bir göstergesi olarak yaygın olarak kullanılır.</li>
	<li>Solunum en az 3 dakika durana kadar,% 5 veya daha yüksek bir dozla sıçanı ötenazi yapmak için izofluran uygulayın. Ötenaziyi dekapitasyon ile onaylayın.</li>
</ol>2. Elektrot yerleşimi ve kurulumu
NOT: Siyatik sinir ve gastroknemius kasının NMJ iletimi elektromiyografi (EMG) sistemi kullanılarak değerlendirilir. Malzeme tablosuna bakın.
<ol><li>Siyatik siniri katot ile proksimal arka bacak bölgesine uyarmak için bir çift yalıtılmış 28 G monopolar iğne yerleştirin, anot ise sakrumu kaplayan deri altı dokusu içinde daha proksimal olarak bulunur.</li>
	<li>Siyatik sinire veya diğer bitişik yapılara doğrudan zarar vermemek için uyarıcı elektrotların siyatik sinirin hemen yakınına veya aşırı derine yerleştirilmediğinden emin olun.</li>
	<li>Kontralateral arka bacak veya kuyruğa tek kullanımlık bir toprak elektrodu yerleştirin.</li>
	<li>Tek lifli EMG için özel olarak tasarlanmış, platin-iridyum malzemeden yapılmış bir kayıt yüzeyine sahip 27 gauge, 25 mm'lik bir iğne elektrodu sağ gastroknemius kasına dikkatlice yerleştirin. Steriliteyi korumak için SFEMG elektrotlarının her kullanımdan önce otoklavlandığından emin olun.</li>
	<li>Tek lif aksiyon potansiyellerini (SFAP'ler) yakalamak için SFEMG iğne elektrodunu gastroknemius kas liflerine paralel olarak yerleştirin.</li>
	<li>SFEMG iğnesini kas içine sokarken ve manevra yaparken kas hasarından kaçının.</li>
</ol>3. Uyarılmış tek lifli elektromiyografi (SFEMG) prosedürü
<ol><li>Sağ siyatik sinire 0.3-10 mA yoğunluk aralığı ve 0.1 ms darbe süresi kullanarak 10 Hz frekansında sabit akım stimülasyonu uygulayın.</li>
	<li>Filtre ayarlarını 1 kHz'lik düşük frekans filtresinde ve 10 kHz'lik yüksek frekans filtresinde yapılandırın. Potansiyellerin görselleştirilmesini kolaylaştırmak için Kazancı bölme başına 200 μV ila 1000 μV arasında ayarlayın. Süpürme hızını bölme başına 500 μs'ye ayarlayın.</li>
	<li>Kayıt ve sonraki analiz için SFAP'leri tetiklemek ve izole etmek için uyaran yoğunluğunu ayarlayın.<ol><li>Bir yanıtı SFAP olarak tanımlamak ve analiz etmek için aşağıda belirtilen belirli kriterlerin karşılandığından emin olun: Başlangıç zirvesinden negatif faza yükselme süresinin 500 μs'den az olduğundan, minimum genliğin (temel tepe noktasından negatife) en az 200 μV olduğundan ve yanıtın sürekli olarak ya hep ya hiç davranışı (yanıtlar arasında kararlı boyut ve şekil) sergilediğinden emin olun. NOT: Yinelenen yanıtların, herhangi bir çentik veya bükülme noktası olmadan tutarlı yukarı doğru aşamalar sergilemesi önemlidir. Kaliteli bir sinyali birden çok sinyalin toplamından ayırt etmek için son kriterin çok önemli olduğunu unutmayın.</li>
	</ol></li>
	<li>En az 50 stimülasyonun (50-100 stimülasyon) ardından ardışık deşarjlar arasındaki Jitter'ı veya SFAP gecikmesinin değişkenliğini (SFAP'nin negatif zirvesinin yükselen fazı arasındaki süre) hesaplayın ve blokajı değerlendirin ve ölçün. NOT: Blokaj, her sinapsta varlığı veya yokluğu veya tek lif aksiyon potansiyeli oluşumunu tetikleyemeyen stimülasyonların yüzdesi olarak değerlendirilebilir. Jitter, aşağıdaki denklem7 kullanılarak hesaplanır (Jitter tipik olarak klinik elektromiyografi sistemleri tarafından otomatik olarak hesaplanır): <img alt="MCD seğirme formül diyagramı; Darbeler arası aralıkları kullanarak mikrosaniye cinsinden titreşimi hesaplama yöntemi." src="/files/ftp_upload/66452/66452eq01.jpg" style="margin: auto;" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Equation 1"> MCD = Ardışık Farkın Ortalama Değeri IPI = Potansiyeller Arası Aralık</li>
	<li>Ek SFAP yanıtları için işlemi tekrarlayın. Ortalama olarak, titreşimi hesaplamak için her hayvandan 10 sinaps değerlendirin ve ardından hayvan başına ortalama değerleri belirleyin.</li>
	<li>Doğrudan kas stimülasyonu ile uyarılmış olabilecek potansiyellerin dahil edilmesini önlemek için 4 μs'den daha az titreşimli SFAP'leri analizlerden hariç tutun11.</li>
	<li>Aralıklı blokaj gösteren potansiyelleri kaydederken, SFAP arızasının submaksimal stimülasyona atfedilemediğini doğrulamak için uyaran yoğunluğunu artırın.</li>
</ol>

<meta charset="utf8"></head><body>Kemirgenlerde SFEMG: Sağlık ve Hastalıkta NMJ Fonksiyonunun Değerlendirilmesi

<ol><li>Stalberg, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Propagation+velocity+in+human+muscle+fibers+in+situ%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Physiol+Scand+Suppl%22%5BJournal%5D)">Propagation velocity in human muscle fibers in situ.</a> Acta Physiol Scand Suppl. 287, 1-112 (1966).</li>
<li>Stålberg, E., Trontelj, J. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+study+of+normal+and+abnormal+neuromuscular+transmission+with+single+fibre+electromyography%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">The study of normal and abnormal neuromuscular transmission with single fibre electromyography.</a> J Neurosci Methods. 74 (2), 145-154 (1997).</li>
<li>Sanders, D. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Guidelines+for+single+fiber+EMG%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Neurophysiol%22%5BJournal%5D)">Guidelines for single fiber EMG.</a> Clin Neurophysiol. 130 (8), 1417-1439 (2019).</li>
<li>Chugh, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuromuscular+junction+transmission+failure+is+a+late+phenotype+in+aging+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiol+Aging%22%5BJournal%5D)">Neuromuscular junction transmission failure is a late phenotype in aging mice.</a> Neurobiol Aging. 86, 182-190 (2020).</li>
<li>Padilla, C. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Profiling+age-related+muscle+weakness+and+wasting%3A+Neuromuscular+junction+transmission+as+a+driver+of+age-related+physical+decline%5BTitle%5D)+AND+%22GeroScience%22%5BJournal%5D)">Profiling age-related muscle weakness and wasting: Neuromuscular junction transmission as a driver of age-related physical decline.</a> GeroScience. 43 (3), 1265-1281 (2021).</li>
<li>Selvan, V. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-fiber+EMG%3A+A+review%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Indian+Acad+Neurol%22%5BJournal%5D)">Single-fiber EMG: A review.</a> Ann Indian Acad Neurol. 14 (1), 64-67 (2011).</li>
<li>Sanders, D. B., Kouyoumdjian, J. A., Stålberg, E. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single+fiber+electromyography+and+measuring+jitter+with+concentric+needle+electrodes%5BTitle%5D)+AND+%22Muscle+Nerve%22%5BJournal%5D)">Single fiber electromyography and measuring jitter with concentric needle electrodes.</a> Muscle Nerve. 66 (2), 118-130 (2022).</li>
<li>Juel, V. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single+fiber+electromyography%5BTitle%5D)+AND+%22Handb+Clin+Neurol%22%5BJournal%5D)">Single fiber electromyography.</a> Handb Clin Neurol. 160, 303-310 (2019).</li>
<li>Chung, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evidence+for+dying-back+axonal+degeneration+in+age-associated+skeletal+muscle+decline%5BTitle%5D)+AND+%22Muscle+Nerve%22%5BJournal%5D)">Evidence for dying-back axonal degeneration in age-associated skeletal muscle decline.</a> Muscle Nerve. 55 (6), 894-901 (2017).</li>
<li>Iyer, C. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Follistatin-induced+muscle+hypertrophy+in+aged+mice+improves+neuromuscular+junction+innervation+and+function%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiol+Aging%22%5BJournal%5D)">Follistatin-induced muscle hypertrophy in aged mice improves neuromuscular junction innervation and function.</a> Neurobiol Aging. 104, 32-41 (2021).</li>
<li>Meekins, G. D., Carter, G. T., Emery, M. J., Weiss, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Axonal+degeneration+in+the+trembler-j+mouse+demonstrated+by+stimulated+single-fiber+electromyography%5BTitle%5D)+AND+%22Muscle+Nerve%22%5BJournal%5D)">Axonal degeneration in the trembler-j mouse demonstrated by stimulated single-fiber electromyography.</a> Muscle Nerve. 36 (1), 81-86 (2007).</li>
<li>Gooch, C. L., Mosier, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stimulated+single+fiber+electromyography+in+the+mouse%3A+Techniques+and+normative+data%5BTitle%5D)+AND+%22Muscle+Nerve%22%5BJournal%5D)">Stimulated single fiber electromyography in the mouse: Techniques and normative data.</a> Muscle Nerve. 24 (7), 941-945 (2001).</li>
<li>Chung, T., Tian, Y., Walston, J., Hoke, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increased+single-fiber+jitter+level+is+associated+with+reduction+in+motor+function+with+aging%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Phys+Med+Rehabil%22%5BJournal%5D)">Increased single-fiber jitter level is associated with reduction in motor function with aging.</a> Am J Phys Med Rehabil. 97 (8), 551-556 (2018).</li>
<li>Sokolow, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impaired+neuromuscular+transmission+and+skeletal+muscle+fiber+necrosis+in+mice+lacking+na%2Fca+exchanger+3%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Investig%22%5BJournal%5D)">Impaired neuromuscular transmission and skeletal muscle fiber necrosis in mice lacking na/ca exchanger 3.</a> J Clin Investig. 113 (2), 265-273 (2004).</li>
<li>Añor, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+jitter+by+stimulated+single-fiber+electromyography+in+normal+dogs%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vet+Intern+Med%22%5BJournal%5D)">Evaluation of jitter by stimulated single-fiber electromyography in normal dogs.</a> J Vet Intern Med. 17 (4), 545-550 (2003).</li>
<li>Mizrachi, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((NMO-IgG+and+AQP4+peptide+can+induce+aggravation+of+eamg+and+immune-mediated+muscle+weakness%5BTitle%5D)+AND+%22J+Immunol+Res%22%5BJournal%5D)">NMO-IgG and AQP4 peptide can induce aggravation of eamg and immune-mediated muscle weakness.</a> J Immunol Res. 2018, 5389282(2018).</li>
<li>Lin, T. S., Cheng, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stimulated+single-fiber+electromyography+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Muscle+Nerve%22%5BJournal%5D)">Stimulated single-fiber electromyography in the rat.</a> Muscle Nerve. 21 (4), 482-489 (1998).</li>
<li>Finley, D. B., Wang, X., Graff, J. E., Herr, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single+fiber+electromyographic+jitter+and+detection+of+acute+changes+in+neuromuscular+function+in+young+and+adult+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pharmacol+Toxicol+Methods%22%5BJournal%5D)">Single fiber electromyographic jitter and detection of acute changes in neuromuscular function in young and adult rats.</a> J Pharmacol Toxicol Methods. 59 (2), 108-119 (2009).</li>
<li>Khan, Z. H., Hajipour, A., Zebardast, J., Alomairi, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Muscle+relaxants+in+anesthesia+practice%3A+A+narrative+review%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Anesthesiol+Crit+Care%22%5BJournal%5D)">Muscle relaxants in anesthesia practice: A narrative review.</a> Arch Anesthesiol Crit Care. 4 (4), 547-552 (2018).</li>
<li>Padua, L., Caliandro, P., Stålberg, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+approach+to+the+measurement+of+motor+conduction+velocity+using+a+single+fibre+emg+electrode%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Neurophysiol%22%5BJournal%5D)">A novel approach to the measurement of motor conduction velocity using a single fibre emg electrode.</a> Clin Neurophysiol. 118 (9), 1985-1990 (2007).</li>
<li>Khoo, A., Hay Mar, H., Borghi, M. V., Catania, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electrophysiologic+evaluation+of+myasthenia+gravis+and+its+mimics%3A+Real-world+experience+with+single-fiber+electromyography%5BTitle%5D)+AND+%22Hosp+Pract%22%5BJournal%5D)">Electrophysiologic evaluation of myasthenia gravis and its mimics: Real-world experience with single-fiber electromyography.</a> Hosp Pract. 50 (5), 373-378 (2022).</li>
<li>Nannan, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+role+of+lamin+a%2Fc+in+preventing+neuromuscular+junction+decline+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">A role of lamin a/c in preventing neuromuscular junction decline in mice.</a> J Neurosci. 40 (38), 7203(2020).</li>
<li>Alley, D. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Grip+strength+cutpoints+for+the+identification+of+clinically+relevant+weakness%5BTitle%5D)+AND+%22J+Gerontol+A+Biol+Sci+Med+Sci%22%5BJournal%5D)">Grip strength cutpoints for the identification of clinically relevant weakness.</a> J Gerontol A Biol Sci Med Sci. 69 (5), 559-566 (2014).</li>
<li>Juel, V. C. Clinical Neurophysiology of Neuromuscular Junction Disease. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aJuel%2C+VC+%22Handbook+of+Clinical+Neurology%22">Handbook of Clinical Neurology</a>. 161, Elsevier. 291-303 (2019).</li>
<li>Rich, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+control+of+neuromuscular+transmission+in+health+and+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscientist%22%5BJournal%5D)">The control of neuromuscular transmission in health and disease.</a> Neuroscientist. 12 (2), 134-142 (2006).</li>
<li>Juel, V. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+neuromuscular+junction+disorders+in+the+electromyography+laboratory%5BTitle%5D)+AND+%22Neurol+Clin%22%5BJournal%5D)">Evaluation of neuromuscular junction disorders in the electromyography laboratory.</a> Neurol Clin. 30 (2), 621-639 (2012).</li>
<li>Arnold, W. D., Clark, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuromuscular+junction+transmission+failure+in+aging+and+sarcopenia%3A+The+nexus+of+the+neurological+and+muscular+systems%5BTitle%5D)+AND+%22Ageing+Res+Rev%22%5BJournal%5D)">Neuromuscular junction transmission failure in aging and sarcopenia: The nexus of the neurological and muscular systems.</a> Ageing Res Rev. 89, 101966(2023).</li>
<li>Kokubun, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reference+values+for+concentric+needle+single+fiber+EMG%5BTitle%5D)+AND+%22Rinsho+Shinkeigaku%22%5BJournal%5D)">Reference values for concentric needle single fiber EMG.</a> Rinsho Shinkeigaku. 52 (11), 1246-1248 (2012).</li>
<li>Testelmans, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rocuronium+exacerbates+mechanical+ventilation-induced+diaphragm+dysfunction+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Crit+Care+Med%22%5BJournal%5D)">Rocuronium exacerbates mechanical ventilation-induced diaphragm dysfunction in rats.</a> Crit Care Med. 34 (12), 3018-3023 (2006).</li>
<li>Suzuki, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intravenous+infusion+of+rocuronium+bromide+prolongs+emergence+from+propofol+anesthesia+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Intravenous infusion of rocuronium bromide prolongs emergence from propofol anesthesia in rats.</a> PLoS One. 16 (2), e0246858(2021).</li>
<li>Stålberg, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reference+values+for+jitter+recorded+by+concentric+needle+electrodes+in+healthy+controls%3A+A+multicenter+study%5BTitle%5D)+AND+%22Muscle+Nerve%22%5BJournal%5D)">Reference values for jitter recorded by concentric needle electrodes in healthy controls: A multicenter study.</a> Muscle Nerve. 53 (3), 351-362 (2016).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>&nbsp; 27 G Yeniden Kullanılabilir Tek Fiber İğne Elektrot</td><td>Technomed</td><td>202860-000</td><td>tek fiber kayıt elektrodu</td></tr><tr><td>2 mL Cam Şırınga</td><td>Kent Scientific Corporation</td><td>SOMNO-2ML</td><td></td></tr><tr><td>Çıkarılabilir Kablo</td><td>Technomed</td><td>202845-0000</td><td>kaydedici elektrodu elektrodiagnostik makinesine bağlamak için</td></tr><tr><td>Kurşunlu tek kullanımlık 2" x 2" disk elektrot</td><td>Cadwell</td><td>302290-000</td><td>toprak elektrodu</td></tr><tr><td>tek kullanımlık monopolar iğneler 28 G</td><td>Technomed</td><td>202270-000</td><td>katot ve anot uyarıcı elektrotlar</td></tr><tr><td>EMG iğne kablosu (Amp / stim anahtar kutusu)</td> <td>Monopolar elektrotları elektrodiagnostik stimülatöre bağlamak için</td> <td>Cadwell</td><td>190266-200</td></tr><tr><td>Demir tabanlı Yardım Eden Eller timsah klipsi Radyo</td><td>Kulübesi</td><td>64-079</td><td>Kayıt elektrot yerleşiminin sürdürülmesi&nbsp;</td></tr><tr><td>İzofluran (250 mL şişe)</td><td>Piramal Healthcare</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>monoject kavisli uçlu sulama şırıngası</td><td>Covidien</td><td>81412012</td><td>elektrot jeli uygulaması için kullanılır</td></tr><tr><td>RightTemp Homeotermik Isınma ile PhysioSuite Fizyolojik İzleme Sistemi</td><td>Kent Scientific Corporation</td><td>PS-RT</td><td>Kızılötesi ısıtma pedi, rektal prob ve ped sıcaklık probu içerir</td></tr><tr><td>Pro düzeltici Evcil Hayvan Bakım Seti</td><td>Oster</td><td>078577-010-003</td><td>epilasyon için makas</td></tr><tr><td>Sıçan Endotrakeal Tüpler (16 G)</td><td>Kent Scientific Corporation</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Rocoronium Bromür</td><td>Sigma</td><td>PHR2397-500MG</td><td>nöromüsküler bloker ajan</td></tr><tr><td>Sierra Zirvesi EMG sistemi</td><td>Cadwell Industries, Inc., Kennewick, WA</td><td>NA</td><td>taşınabilir elektrodiagnostik sistem</td></tr><tr><td>SomnoSuite Düşük Akış Dijital Anestezi Sistemi</td><td>Kent Scientific Corporation</td><td>SOMNO</td><td>Dökülme önleyici, buhar önleyici şişe üstü adaptör içerir; Y adaptör hortumu; Kömür Süpürücü Filtresi</td></tr><tr><td>Veteriner Petrol Bazlı Oftalmik Merhem&nbsp;</td><td>Puralube</td><td>26870</td>, <td>kornea yaralanmasını önlemek için anestezi sırasında uygulanır</td></tr></tbody></table>

kemirgen modellerinde nöromüsküler kavşak İletimini değerlendirmek için uyarılmış tek fiber elektromiyografisi (sfemg)

Stimulated Single Fiber Electromyography (SFEMG) for Assessing Neuromuscular Junction Transmission in Rodent Models

NMJ iletim arızası bağlamında artan jitter ve blokajı göstermek için, intravenöz roküronyum uygulaması ile ve intravenöz uygulama olmadan uyarılmış SFEMG gerçekleştirildi. Roküronyum, ameliyatlar veya tıbbi prosedürler sırasında kas felcini indüklemek için klinik ortamlarda yaygın olarak kullanılan, orta etkili, depolarize olmayan bir nöromüsküler bloke edici ajandır. NMJ19'daki nikotinik asetilkolin reseptörlerine rekabetçi bir şekilde bağlanarak çalışır. Roküronyum uygulamasından önce, yetişkin vahşi tip sıçan (Sprague Dawley) hazırlandı ve bölüm 1'de tarif edildiği gibi anestezi uygulandı. Roküronyumun neden olduğu felç nedeniyle, temsili veriler elde etmek için invaziv ventilasyon desteği kullanıldı (yukarıda bölüm 1'de açıklanan SFEMG kayıtları sırasında anestezi için tipik yaklaşımın aksine). Bir endotrakeal tüp yerleştirildi ve ventilasyon, 17 mmHg basınç ve 3 cm H2O pozitif ekspirasyon sonu basıncı ile basınç kontrollü bir mod kullanılarak 60 solunum / dk'da sürdürüldü ve% 2 -% 3 izofluran verdi. Ventilasyon desteği ve anestezi sağlandıktan sonra, roküronyum ile tedavi ile ve tedavi olmadan tek lif aksiyon potansiyelleri kaydedildi (bolus 0.05 mg / kg roküronyum bromür intravenöz). Şekil 1, yetişkin bir sıçanda aynı NMJ'den üç temsili tek lifli aksiyon potansiyeli kaydını göstermektedir. Şekil 1A, taban çizgisinden negatif tepe noktasına kadar 500 μs'den daha az bir yükselme süresi ve en az 200 μV'lik bir minimum genlik (tepeden tepeye) ile tek bir lif aksiyon potansiyelinin (tek bir stimülasyondan sonra) tipik morfolojisini göstermektedir. Şekil 1B, roküronyum enjeksiyonunu takiben artan titreme ve aralıklı blokajın özelliklerini göstermektedir. Şekil 1C, NMJ bloğunun çözünürlüğünden sonra aynı sinapstan seğirme ve blokajın normalleşmesini göstermektedir. Görüntüleme basitliği için, Şekil 1B,C yalnızca 9 ardışık stimülasyondan sonraki yanıtları gösterir. Ayrıca, daha iyi anlama için, Şekil 2, 10 ardışık stimülasyondan sonra gözlemlenen ve yüksek titreme ve blokajı ortaya çıkaran, üst üste binen üç tek lif aksiyon potansiyelinin ek bir örneğini göstermektedir.
Uyarılmış SFEMG kullanılarak roküronyumun NMJ iletimi üzerindeki etkisini ölçmek için, herhangi bir tedavi olmaksızın 5 NMJ'den ve roküronyum verilmesini takiben 5 NMJ'den kayıtlar yapıldı ve titreme ve blokaj açısından analiz edildi (Şekil 3). Roküronyumu takiben, titreme (Şekil 3A) ve blokaj (Şekil 3B) önemli ölçüde artmıştır.
<img alt="Gecikme ve genlik eğilimlerini gösteren tek fiber aksiyon potansiyeli grafikleri; Jitter analiz sonuçları." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66452/66452fig01.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 1"> Şekil 1: Aynı nöromüsküler kavşaktan (NMJ) üç temsili tek lifli elektromiyografi kaydı. (A) Tek bir lif potansiyeli olarak kabul edilmek için genlik (taban çizgisinden negatif tepe genliğine en az 200 μV) ve yükselme süresi (taban çizgisinden negatif tepeye 500 μs'den az) kriterlerini gösteren tek bir lif aksiyon potansiyeli örneği. (B) Roküronyum uygulamasını takiben NMJ iletiminin bozulduğunu gösteren artan titreşim ve blokajı gösteren 9 ardışık stimülasyonu takiben üst üste binen tek fiber aksiyon potansiyellerinin örneği (titreşim: 68.35 μs). (C) Roküronyum tedavisinin çözülmesinden sonra NMJ iletiminin normalleştiğini gösteren, azalmış titreme ve blokaj olmadığını gösteren 9 ardışık stimülasyonu takiben üst üste binen tek lif aksiyon potansiyellerinin örneği (titreme: 21.7 μs). Temsili SFEMG izleri, üst üste binen görünümde blokaj ve normal titreme olmadan sağlıklı bir sinapstan kaydedilen tek kas lifi aksiyon potansiyellerini ortaya çıkarır. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66452/66452fig01large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Tek lif aksiyon potansiyeli genlik grafiği; gecikme ve genlik; engellenen stimülasyon olayı." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66452/66452fig02.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 2"> Şekil 2: Roküronyum uygulaması sırasında ardışık stimülasyonlardan sonra kaydedilen üst üste binen üç tek lif aksiyon potansiyeli (SFAP). Roküronyum uygulaması sırasında 10 ardışık stimülasyondan sonra üst üste binen üç tek lif aksiyon potansiyeli (SFAP) kaydedildi, bu da artan titreme ve blokajı gösterdi. A, B ve C için titreşim değerleri sırasıyla 24.3 μs, 46.9 μs ve 88.7 μs idi. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66452/66452fig02large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="NMJ titremesi ve iletim engelleme çubuk grafikleri; ortalama gecikme, stimülasyon yüzdesi; Araştırma verileri." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66452/66452fig03.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 3"> Şekil 3: Depolarize olmayan bir NMJ bloke edici ajan ile tedaviyi takiben nöromüsküler kavşak iletiminin (NMJ) Tek Fiber Elektromiyografi değerlendirmesi. (A) Roküronyum uygulaması sırasında (0.05 mg / kg), SFEMG, sağlıklı duruma karşı iletim değişkenliği (jitter) gösterdi (tedavi edilmemiş: 12.9 μs,% 95 CI [7.2-16.9 μs] roküronyuma karşı: 40.70 μs,% 95 CI [34.7-70.7 μs]) (Mann Whitney testi: p = 0.0079). (B<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66452/66452fig03large.jpg" target="_blank"></a>

Kemirgen Modellerinde Nöromüsküler Kavşak İletimini Değerlendirmek için Uyarılmış Tek Fiber Elektromiyografisi (SFEMG)

As the final connection between the nervous system and muscle, transmission at the neuromuscular junction (NMJ) is crucial for normal motor function. ...

stimulated-single-fiber-electromyography-sfemg-for-assessing

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Sinirbilim

Ön kompartman kasları nöromüsküler elektriksel stimülasyon bir fare modeli (NMES), güvenli ve ucuz bir klinik yöntem, anlatılmıştır. Bu modelde, farelerde ve spesifik hedef kas kontraksiyonlarının ortaya çıkarmak amacıyla, kolayca bulunabilen bir klinik cihazı değiştirerek bir avantaja sahiptir.

Nöromüsküler Elektriksel Stimülasyon tarafından Kas Eğitimi A Mürin Modeli

Bu yeni yöntem, tek bir yetişkin fare motonöron ve kas lifleri tarafından üretilen kuvvet ölçümü aynı anda hücre içi kaydını verir. Normal ve genetik olarak değiştirilmiş hayvanların motor birimlerin elektrik ve mekanik özelliklerinin kombine soruşturma nöromüsküler sistemin çalışması için bir atılımdır.

Erişkin Fare yılında Motor Ünite tarafından üretilen bir Lomber Motonöron ve Kuvvet Eşzamanlı intrasellüler Kaydı<em&gt; In vivo</em

Bu videoda, fonksiyonel nöromüsküler kavşakları değerlendirmek için bir yöntem gösterilmektedir. Floresan mikroskobu ile birlikte kas dokusu ve motor nöronları içeren bir biyoreaktör kullanılarak, nöronlardaki ışığa duyarlı kanallar elektrik sinyalleri üretmek için uyarılır ve kas lifi kasılmalarına neden olur.

Eş Zamanlı Optik Stimülasyon ve Video Kaydı Yoluyla Fonksiyonel Bir Nöromüsküler Kavşağın Değerlendirilmesi

Kaynak: Marinello, M., et al. Kombine konfokal ve süper çözünürlüklü mikroskopi ile farelerde nöromüsküler kavşakların karakterizasyonu. J. Vis. Uzm. (2021)Bu video, presinaptik ve postsinaptik yapıları görselleştirmek ve analiz etmek için konfokal ve süper çözünürlüklü mikroskopi kullanılarak sıçan kas dokusundaki nöromüsküler kavşakların hazırlanmasını, immüno-boyanmasını ve görüntülenmesini göstermektedir.

Kombine Konfokal ve Süper Çözünürlüklü Mikroskopi ile Farelerde Nöromüsküler Kavşakların Karakterizasyonu

Nöromüsküler kavşak (NMJ) işlevsel bir değerlendirilmesi sinir ve kas arasındaki iletişimi ilgili gerekli bilgileri sağlar. Burada biz kapsamlı bir şekilde kullanarak iki farklı kas-sinir hazırlıklar, yani soleus siyatik ve diyafram frenik NMJ ve kas işlevselliğini değerlendirmek için bir protokol tanımlamak.

Nöromüsküler kavşak işlevleri ölçme

Sinir iletim ölçümü ateş fare modelleri değerlendirmek için yararlı bir araçtır ama sık sık öyle yalnızca hindlimbs siyatik sinir uyarmak için geçerlidir. Burada, bileşik kas aksiyon potansiyeli (CMAP) vivo brakiyal pleksus tarafından innervated fare forelimb kaslarda ölçmek için bir teknik açıklayın.

Vivo Bileşik kas aksiyon potansiyeli Motor nöron hastalığı, fare modellerinde ön ayakları üzerinden elektrofizyolojik ölçümü

Nöromüsküler kavşak bileşenlerini doğru bir şekilde tespit edebilme yeteneği, patolojik veya gelişimsel süreçler nedeniyle mimarisindeki değişikliklerin değerlendirilmesinde çok önemlidir. Burada, nicel ölçümler yapmak için kullanılabilecek tam montajlı nöromüsküler kavşakların yüksek kaliteli görüntülerini elde etmek için basit bir yöntemin tam bir açıklamasını sunuyoruz.

Tüm Mount Nöromüsküler Kavşakların İmmünofluoresan ve Morfometrik Analizleri için Tek İskelet Kas Liflerinin Diseksiyonu

Bu protokol, SMA ve ColQ ile ilişkili CMS'nin fare modellerindeki patolojik değişiklikleri ölçmek için kullanılan kombine konfokal ve STED mikroskopisi ile nöromüsküler kavşakların morfometrik analizi için bir yöntemi açıklamaktadır.

Farelerde Nöromüsküler Kavşakların Kombine Konfokal ve Süper Redüksiyonlu Mikroskopi ile Karakterizasyonu

Bu makalede, kemirgen gastroknemius kası üzerinde in vivo (yüzey ve iğne elektrot dizileri kullanılarak) ve ex vivo (dielektrik hücre kullanılarak) elektriksel empedans miyografisinin nasıl yapılacağı açıklanmaktadır. Hem farelerde hem de sıçanlarda tekniği gösterecek ve mevcut modifikasyonları detaylandıracak (yani, obez hayvanlar, yavrular).

Kemirgenlerde In Vivo ve Ex Vivo Elektriksel Empedans Miyografisi Gerçekleştirme

İnsan mühendisliği iskelet kası dokusu ve optogenetik motonöronlar kullanarak nöromüsküler kavşak fonksiyonunu karakterize etmek için tekrarlanabilir, otomatik ve tarafsız bir görüntüleme sistemi tanımladık. Bu sistem, zaman içinde nöromüsküler bağlantının fonksiyonel olarak ölçülmesine izin verir ve nörotoksinlerin ve myastenia gravis hasta serumunun neden olduğu azalmış nöromüsküler fonksiyonu tespit eder.

İnsan Nöromüsküler Kavşağının Optogenetik Modelinin Mühendisliği ve Karakterizasyonu

Protokol, sıçan medial gastroknemius kasındaki pre-sinaptik terminaller, post-sinaptik reseptörler ve peri-sinaptik Schwann hücreleri arasındaki uzamsal korelasyonu, farklı biyobelirteçlerle, yani nörofilament 200, veziküler asetilkolin taşıyıcısı, alfa-bungarotoksin ve S100 ile floresan immünohistokimya kullanarak incelemek için bir yöntem göstermektedir.

Sıçan Medial Gastroknemius Kasında Nöromüsküler Kavşağın Morfolojik Özelliklerinin Görselleştirilmesi

Öğrenin, kemirgen modellerinde tek fiber elektromiyografi (SFEMG) ile nöromüsküler kavşak iletimini değerlendirme yöntemini. Bu protokol, yaşlanma ve nöromüsküler hastalıklarda jitter ve blokaj ölçümü sağlar.

Kemirgen Modellerinde Nöromüsküler Kavşak İletimini Değerlendirmek için Uyarılmış Tek Fiber Elektromiyografisi (SFEMG)

Daha fazla video keşfet