Name: Retinayı değerlendirmek için sıçan ve fare gözbebeklerinin histolojik slaytlarının hazırlanması ve analizi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-08-23T13:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 1 s
Description: Öğrenin, sıçan ve fare gözbebeklerinden histolojik slaytlar hazırlayarak iç retinayı değerlendirmeyi. Bu yöntem, oftalmik hastalıklarda hücresel detayları az artefaktlarla incelemeyi sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<meta charset="utf8"></head><body>Kemirgen Gözbebeklerinde Retina Kalınlığı ve Ganglion Hücre Tabakası Sayılarının Değerlendirilmesi

<ol><li>Kels, B. D., Grzybowski, A., Grant-Kels, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+ocular+anatomy%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Dermatol%22%5BJournal%5D)">Human ocular anatomy.</a> Clin Dermatol. 33 (2), 140-146 (2015).</li>
<li>Gupta, M. P., Herzlich, A. A., Sauer, T., Chan, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Retinal+anatomy+and+pathology%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Retinal anatomy and pathology.</a> Dev Ophthalmol. 55, 7-17 (2016).</li>
<li>Masland, R. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuronal+diversity+in+the+retina%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Neuronal diversity in the retina.</a> Curr Opin Neurobiol. 11 (4), 431-436 (2001).</li>
<li>Vecino, E., Rodriguez, F. D., Ruzafa, N., Pereiro, X., Sharma, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glia-neuron+interactions+in+the+mammalian+retina%5BTitle%5D)+AND+%22Prog+Retin+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Glia-neuron interactions in the mammalian retina.</a> Prog Retin Eye Res. 51, 1-40 (2016).</li>
<li>Boulton, M., Dayhaw-Barker, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+the+retinal+pigment+epithelium%3A+Topographical+variation+and+ageing+changes%5BTitle%5D)+AND+%22Eye+%28Lond%29%22%5BJournal%5D)">The role of the retinal pigment epithelium: Topographical variation and ageing changes.</a> Eye (Lond). 15 (Pt 3), 384-389 (2001).</li>
<li>Baden, T., Euler, T., Berens, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Understanding+the+retinal+basis+of+vision+across+species%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Understanding the retinal basis of vision across species.</a> Nat Rev Neurosci. 21 (1), 5-20 (2020).</li>
<li>Nguyen-Ba-Charvet, K. T., Chédotal, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+retinal+layers%5BTitle%5D)+AND+%22C+R+Biol%22%5BJournal%5D)">Development of retinal layers.</a> C R Biol. 337 (3), 153-159 (2014).</li>
<li>Adams, T., Chernoff, E., Wilson, J., Dharmarajan, S. Reactive muller glia as potential retinal progenitors. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aAdams%2C+T+%22InTech%22">InTech</a>. , (2013).</li>
<li>Salman, A., Mcclements, M. E., Maclaren, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Insights+on+the+regeneration+potential+of+m%C3%BCller+glia+in+the+mammalian+retina%5BTitle%5D)+AND+%22Cells%22%5BJournal%5D)">Insights on the regeneration potential of müller glia in the mammalian retina.</a> Cells. 10 (8), 1957(2021).</li>
<li>Marchesi, N., Fahmideh, F., Boschi, F., Pascale, A., Barbieri, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ocular+neurodegenerative+diseases%3A+Interconnection+between+retina+and+cortical+areas%5BTitle%5D)+AND+%22Cells%22%5BJournal%5D)">Ocular neurodegenerative diseases: Interconnection between retina and cortical areas.</a> Cells. 10 (9), 2394(2021).</li>
<li>Enoch, J., Mcdonald, L., Jones, L., Jones, P. R., Crabb, D. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluating+whether+sight+is+the+most+valued+sense%5BTitle%5D)+AND+%22JAMA+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Evaluating whether sight is the most valued sense.</a> JAMA Ophthalmol. 137 (11), 1317-1320 (2019).</li>
<li>Struebing, F. L., Geisert, E. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((What+animal+models+can+tell+us+about+glaucoma%5BTitle%5D)+AND+%22Prog+Mol+Biol+Transl+Sci%22%5BJournal%5D)">What animal models can tell us about glaucoma.</a> Prog Mol Biol Transl Sci. 134, 365-380 (2015).</li>
<li>Bouhenni, R. A., Dunmire, J., Sewell, A., Edward, D. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+glaucoma%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biomed+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Animal models of glaucoma.</a> J Biomed Biotechnol. 2012, 692609(2012).</li>
<li>Wilding, L. A., Uchihashi, M., Bergin, I. L., Nowland, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enucleation+for+treating+rodent+ocular+disease%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Assoc+Lab+Anim+Sci%22%5BJournal%5D)">Enucleation for treating rodent ocular disease.</a> J Am Assoc Lab Anim Sci. 54 (3), 328-332 (2015).</li>
<li>Lin, C. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+protocol+to+inject+ocular+drug+implants+into+mouse+eyes%5BTitle%5D)+AND+%22STAR+Protoc%22%5BJournal%5D)">A protocol to inject ocular drug implants into mouse eyes.</a> STAR Protoc. 3 (1), 101143(2022).</li>
<li>Lozano, D. C., Twa, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+a+rat+schematic+eye+from+in+vivo+biometry+and+the+correction+of+lateral+magnification+in+sd-oct+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthalmol+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">Development of a rat schematic eye from in vivo biometry and the correction of lateral magnification in sd-oct imaging.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 54 (9), 6446-6455 (2013).</li>
<li>Castro, G., Navajas, E., Farah, M. E., Maia, M., Rodrigues, E. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Migration%2C+integration%2C+survival%2C+and+differentiation+of+stem+cell-derived+neural+progenitors+in+the+retina+in+a+pharmacological+model+of+retinal+degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22ISRN+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Migration, integration, survival, and differentiation of stem cell-derived neural progenitors in the retina in a pharmacological model of retinal degeneration.</a> ISRN Ophthalmol. 2013, 752161(2013).</li>
<li>Chai, G. R., Liu, S., Yang, H. W., Chen, X. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quercetin+protects+against+diabetic+retinopathy+in+rats+by+inducing+heme+oxygenase-1+expression%5BTitle%5D)+AND+%22Neural+Regen+Res%22%5BJournal%5D)">Quercetin protects against diabetic retinopathy in rats by inducing heme oxygenase-1 expression.</a> Neural Regen Res. 16 (7), 1344-1350 (2021).</li>
<li>Igarashi, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tyrosine+triple+mutated+aav2-bdnf+gene+therapy+in+a+rat+model+of+transient+iop+elevation%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Vis%22%5BJournal%5D)">Tyrosine triple mutated aav2-bdnf gene therapy in a rat model of transient iop elevation.</a> Mol Vis. 22, 816-826 (2016).</li>
<li>Zhang, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Therapeutic+efficacy+of+neural+stem+cells+originating+from+umbilical+cord-derived+mesenchymal+stem+cells+in+diabetic+retinopathy%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Therapeutic efficacy of neural stem cells originating from umbilical cord-derived mesenchymal stem cells in diabetic retinopathy.</a> Sci Rep. 7 (1), 408(2017).</li>
<li>Dorfman, D., Aranda, M. L., Rosenstein, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enriched+environment+protects+the+optic+nerve+from+early+diabetes-induced+damage+in+adult+rats%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Enriched environment protects the optic nerve from early diabetes-induced damage in adult rats.</a> PLoS One. 10 (8), e0136637(2015).</li>
<li>Barber, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neural+apoptosis+in+the+retina+during+experimental+and+human+diabetes.+Early+onset+and+effect+of+insulin%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">Neural apoptosis in the retina during experimental and human diabetes. Early onset and effect of insulin.</a> J Clin Invest. 102 (4), 783-791 (1998).</li>
<li>Steinle, J. J., Kern, T. S., Thomas, S. A., Mcfadyen-Ketchum, L. S., Smith, C. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increased+basement+membrane+thickness%2C+pericyte+ghosts%2C+and+loss+of+retinal+thickness+and+cells+in+dopamine+beta+hydroxylase+knockout+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Increased basement membrane thickness, pericyte ghosts, and loss of retinal thickness and cells in dopamine beta hydroxylase knockout mice.</a> Exp Eye Res. 88 (6), 1014-1019 (2009).</li>
<li>Polley, E. H., Walsh, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+technique+for+flat+embedding+and+en+face+sectioning+of+the+mammalian+retina+for+autoradiography%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Method%22%5BJournal%5D)">A technique for flat embedding and en face sectioning of the mammalian retina for autoradiography.</a> J Neurosci Method. 12 (1), 57-64 (1984).</li>
<li>Turner, K. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hematoxylin+toluidine+blue-phloxinate+staining+of+glycol+methacrylate+sections+of+retina+and+other+tissues%5BTitle%5D)+AND+%22Stain+Technol%22%5BJournal%5D)">Hematoxylin toluidine blue-phloxinate staining of glycol methacrylate sections of retina and other tissues.</a> Stain Technol. 55 (4), 229-233 (1980).</li>
<li>Cheng, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Correlation+of+optical+coherence+tomography+and+retinal+histology+in+normal+and+pro23his+retinal+degeneration+pig%5BTitle%5D)+AND+%22Transl+Vis+Sci+Technol%22%5BJournal%5D)">Correlation of optical coherence tomography and retinal histology in normal and pro23his retinal degeneration pig.</a> Transl Vis Sci Technol. 7 (6), 18(2018).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Aseton&nbsp;</td><td>Chempur&nbsp;</td><td></td><td></td>111024800</tr><tr><td>Dumont Cımbız #5, 11cm, 0.05 x 0.01mm İpuçları</td><td>Dünya Hassas Aletler</td><td>14095</td><td>küçük, mikrocerrahi forseps</td></tr><tr><td>Eosin</td><td>Mar-Four</td><td>4P.05.2001/L</td><td>Sulu çözelti</td></tr><tr><td>Etil alkol %96 Chempur</td><td>&nbsp;</td><td>CH.ET. AL.96%CZDA. </td><td></td>CH</tr><tr><td>Etil alkol %99,9</td> <td>Chempur&nbsp;</td><td>Caner. ETIL. ALK.99,9% BW</td><td>EtOH Buzulu'nun %70 ve %80 çözeltilerini hazırlamak için kullanın</td></tr><tr><td>- 86 > C Ultra Düşük Sıcaklık Dondurucu NU-9483E</td><td>NuAire</td><td>13027D0034</td><td>Donma sıcaklığı - 80 ° C; C</td></tr><tr><td>Cam slaytlar</td><td>Mar-Four</td><td>MI.15.01673</td><td>Açıklama için çift taraflı mat alana sahip buzlu cam slaytlar</td></tr><tr><td>Leica CV5030 Tam Otomatik Cam Lamel</td><td>Leica Biosystems&nbsp;</td><td>14,04,78,80,101</td><td>Otomatik sürgü kapatıcı&nbsp;</td></tr><tr><td>Mayer'in hematoksilen</td><td>Chempur&nbsp;</td><td></td><td></td>124687402</tr><tr><td>Metal tabanlı kalıplar 15 mm&nbsp; x 15 mm</td><td>Leica Biosystems&nbsp;</td><td></td><td></td>3803081</tr><tr><td>Microme HM 340 E</td><td>Thermo Scientific</td><td>90-519-0</td><td>Microtome Microtome</td></tr><tr><td>tıraş bıçakları</td><td>Mar-Four</td><td>HI. N.35</td><td>Kesme açısı 35 derece;</td></tr><tr><td>Micro-Twin biyopsi kaseti</td><td>Mar-Four</td><td>LN.13874550</td><td></td></tr><tr><td>Mikrodalga Hibrit Doku İşlemcisi</td><td>Milestone</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Multistainer Leica ST5020</td><td>Leica Biosystems&nbsp;</td><td></td><td>Otomatik slayt boyayıcı&nbsp;</td></tr><tr><td>NanoZoomer 2.0-HT slayt tarayıcı</td><td>Hamamatsu</td><td>C9600</td><td>Histopatolojik slayt tarayıcı</td></tr><tr><td>NDP.view2 Görüntü görüntüleme yazılımı</td><td>Hamamatsu</td><td>U12388-01</td><td>Görüntü görüntüleme yazılımı</td></tr><tr><td>Parafin Pathowax Plus</td><td>Mar-Four</td><td>4P. PWP.010</td><td>Erime sıcaklığı 56 &°; C - 58 derece > C</td></tr><tr><td>Paraformaldehit</td><td>Sigma - Aldrich</td><td>441244-1KG</td><td>PBS Tabletlerde %4'lük bir çözelti hazırlayın</td></tr><tr><td>Merck</td><td>Millipore</td><td>524650-1EA</td><td>Üreticinin talimatlarına göre bir fosfat tampon salin çözeltisi hazırlamak için kullanın</td></tr><tr><td>Pierce Mikrosantrifüj Tüpleri, 1.5 mL</td><td>Thermo Scientific</td><td>69715</td><td></td></tr><tr><td>Electrolux</td><td></td> <td>EN14000AW buzdolabı-dondurucu925032562-00</td><td>Soğutma 4 & Derece; C</td></tr><tr><td>Neşter bıçağı</td><td>Swann-Morton</td><td>T.OST. SKAL00.024</td><td></td></tr><tr><td>Sükroz</td><td>Chempur&nbsp;</td><td></td><td></td>427720906</tr><tr><td>SuperCut Yaylı Makör, 12,5 cm, Kavisli</td><td>Dünya Hassas Aletler</td><td>501925</td><td>kavisli, küçük mikrocerrahi makas</td></tr><tr><td>Otomatik kapatıcılar için bant</td><td>Mar-Four</td><td>KP-3020/SMRH001</td><td></td></tr><tr><td>Ksilen</td><td>Chempur&nbsp;</td><td>Caner. KSYL.5l.METAL.OP&nbsp;</td><td></td></tr></tbody></table>

retinayı değerlendirmek için sıçan ve fare gözbebeklerinin histolojik slaytlarının hazırlanması ve analizi

Preparation and Analysis of Histological Slides of Rat and Mouse Eyeballs to Evaluate the Retina

Sunulan protokolün kullanılmasıyla, göz küresinin belirli yapılarının anatomisi ve morfolojisi ayrıntılı olarak değerlendirilebilir. Ekibimiz glokom, diyabetik retinopati ve hipertansif retinopati gibi retina bozukluklarında nörodejenerasyonun patomekanizmalarını araştırmaya odaklanmaktadır. Retinadaki nörodejenerasyonun özelliklerini değerlendirmek için RT (fare göz küresi -Şekil 2, sıçan göz küresi -Şekil 3), ONL, OPL, INL ve IPL (fare göz küresi -Şekil 4, sıçan göz küresi -Şekil 5) ve GCL'nin hücre sayısı (fare göz küresi -Şekil 6, sıçan göz küresi -Şekil 7) değerlendirildi. RT ve GCL hücrelerinin merkezi retinada en yüksek ve periferde en düşük olması beklenmektedir. Göz küresini göz bebeği seviyesinde keserek, merkezi (göz küresinin arka kutbunda) ve periferik (siliyer gövdeye yakın) retinadan tek bir slaytta kesitler elde edilir.
GCL hücrelerinin sayımı oldukça objektif olarak kabul edilebilirken, çarpık kesitlerin neden olduğu yanlılık, spesifik retina katmanlarının ölçülmesinin sonuçlarını etkileyebilir. Yanlılığı önlemek için, ölçümler belirli bir katmanın kalınlığının RT değerine oranı olarak sunulabilir: ONL/RT, OPL/RT, INL/RT ve IPL/RT.
<img alt="Etiketli parçaları gösteren göz anatomisi diyagramı: retina, sklera, lens, kornea, optik sinir, makula." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66663/66663fig01.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 1"> 
Şekil 1: Göz küresinin anatomisi. En büyük yapılarının etiketlenmesi ile bir göz küresinin sagital kesiti. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66663/66663fig01large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Doku katmanlarını gösteren retina kesitinin mikroskop görüntüsü, kalınlık ölçümü 125 μm." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66663/66663fig02.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 2"> 
Şekil 2: Bir farede retina kalınlığı. Dış sınırlayıcı membrandan iç limitan membrana kadar olan retina kalınlığının (RT) en geniş noktada, yeşil çubukla işaretlenmiş olarak ölçülmesi. Fare göz küresi (zorlanma: C57Bl / 6, yaş: 44 hafta). Sol köşedeki ölçek çubuğu 100 μm'lik uzunluğu gösterir. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66663/66663fig02large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="53.4 μm kalınlığında retina tabakalarını gösteren histolojik kesit; mikroskopi görüntüsü, doku çalışması." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66663/66663fig03.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 3"> 
Şekil 3: Bir sıçanda retina kalınlığı. Dış sınırlayıcı membrandan iç limitan membrana kadar olan retina kalınlığının (RT) en geniş noktada, yeşil çubukla işaretlenmiş olarak ölçülmesi. Sıçan göz küresi (zorlanma: Lewis, yaş: 16 hafta). Sol köşedeki ölçek çubuğu 100 μm'lik uzunluğu gösterir. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66663/66663fig03large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Retina dokusu kesit diyagramı; ölçülen katmanlar: IPL, INL, OPL, ONL; Mikroskopi analizi." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66663/66663fig04.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 4"> 
Şekil 4: Bir faredeki retina katmanları. Tek tek retina katmanlarının kalınlığının ölçümü: yeşil çubuklarla işaretlenmiş dış nükleer katman (ONL), dış pleksiform katman (OPL), iç nükleer katman (INL) ve iç pleksiform katman (IPL). Fare göz küresi (zorlanma: C57Bl / 6, yaş: 44 hafta). Sol köşedeki ölçek çubuğu 100 μm'lik uzunluğu gösterir. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66663/66663fig04large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Etiketli katmanlara sahip retina kesitinin mikroskop görüntüsü: OPL, ONL, IPL, INL; ölçek çubuğu 100 μm." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66663/66663fig05.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 5"> 
Şekil 5: Bir sıçanda retina tabakaları. Tek tek retina katmanlarının kalınlığının ölçümü: yeşil çubuklarla işaretlenmiş dış nükleer katman (ONL), dış pleksiform katman (OPL), iç nükleer katman (INL) ve iç pleksiform katman (IPL). Sıçan göz küresi (zorlanma: Lewis, yaş: 16 hafta). Sol köşedeki ölçek çubuğu 100 μm'lik uzunluğu gösterir. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66663/66663fig05large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Katmanlı hücresel yapıyı gösteren histoloji kesiti, mikroskop görüntüsü, doku analizi, 500 μm ölçeği." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66663/66663fig06.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 6"> 
Şekil 6: Bir farede ganglion hücre tabakasının hücrelerini sayma. Ganglion hücre tabakasının (GCL) hücrelerini retina boyunca 500 μm uzunluğunda sayma yöntemi. Tek hücreli cisimler, ganglion hücre tabakası içinde yer alan yuvarlak, hematoksilen lekeli cisimler olarak tanımlandı. Hücreler siyah dairelerle işaretlenmiştir. Fare göz küresi (zorlanma: DBA/2, yaş: 44 hafta). Sol köşedeki ölçek çubuğu 100 μm'lik uzunluğu gösterir. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66663/66663fig06large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Histoloji kayması, retina kesiti; doku katmanları görünür; mikroskobik inceleme, 100 μm ölçek." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66663/66663fig07.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 7"> 
Şekil 7: Bir sıçanda ganglion hücre tabakasının hücrelerinin sayılması. Ganglion hücre tabakasının (GCL) hücrelerini retina boyunca 100 μm uzunluğunda sayma yöntemi. Tek hücreli cisimler, ganglion hücre tabakası içinde yer alan yuvarlak, hematoksilen lekeli cisimler olarak tanımlandı. Hücreler siyah dairelerle işaretlenmiştir. Sıçan göz küresi (zorlanma: Lewis, yaş: 16 hafta). Sol köşedeki ölçek çubuğu 100 μm'lik uzunluğu gösterir. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66663/66663fig07large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>

Retinayı değerlendirmek için sıçan ve fare gözbebeklerinin histolojik slaytlarının hazırlanması ve analizi

A rodent eyeball is a powerful tool for researching the pathomechanisms of many ophthalmic diseases, such as glaucoma, hypertensive retinopathy, and many ...

preparation-analysis-histological-slides-rat-mouse-eyeballs-to

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Burada açıklanan protokol, tam montajlı bir retinal preparatın yapısal değerlendirmesi içindir. Bu, doku diseksiyonunun tanımlarını, hidrofilize politetrafloroetilen (PTFE) membran ekine montajı, floresan işaretleyicilerle bolus yüklemesini ve hücresel ve sinaptik bileşenlerin immünohistokimyasal analizi için karbodiimid ve paraformaldehit ile fiksasyonun karşılaştırılmasını içerir.

Görüntüleme ve İmmünhistokimyanın için Retina Wholemount Hazırlık için optimize edilmiş Protokolü

Kemirgen retina uzun beyin için erişilebilir bir pencere olarak kabul edilmiştir. Bu teknik yazıda iskemik yaralanma sonrası, merkezi sinir sistemi içinde, vasküler rejenerasyon başarısız olmasına yol mekanizmaları incelemek için oksijen kaynaklı retinopatinin fare modeli kullanan bir protokol sağlar. Anlatılan sistem, aynı zamanda, retina ve CNS içindeki fonksiyonel kan damarlarının büyümesini teşvik etmek için stratejiler keşfetmek için dönüştüğü edilebilir.

Fare Retina kullanma CNS&#39;deki Vasküler Rejenerasyon Değerlendirilmesi

Biz üç farklı doku hazırlama teknikleri immunohistokimyasal görselleştirme sıçan retina mikrovasküler perisitlerden, Yani, soğutucu bölümü, Bütün bağlar ve damar ağının hipotonik yalıtım için göstermek.

Retina Cryo-kesitler, Bütün bağlar ve mikrovasküler perisitlerden immunohistokimyasal görselleştirme hipotonik izole damarlara hazırlıkları

Bu raporda, immünhistokimya (ıHC) için dondurulmuş fare Retina bölümlerini hazırlamak için kapsamlı yöntemler açıklanmaktadır.  Tanımlanan yöntemlerle oküler posterior bardak diseksiyonu, paraformaldehit fikstasyon, optimum kesme sıcaklığı (OCT) medya ve doku oryantasyonu, seksiyonlama ve immünostasyonu katıştırma bulunmaktadır.

Immünhistokimya için fare retinal Cryo-bölümler hazırlanması

Diyabetik retinopati körlüğün önde gelen nedenlerinden biridir. Histoloji, kan-retinal bariyer parçalanma testi ve floresan anjiyografi, retinanın patofizyolojisini anlamak için değerli tekniklerdir ve bu da diyabetik retinopatiye karşı etkili ilaç taramasını daha da artırabilir.

Sıçan Modelinde Retinal Patofizyolojik Değerlendirme

Bu protokolün amacı, subakut oküler hipertansiyonu indükleyen limbal vasküler pleksusun 360° termik koterizasyonuna dayanan yeni bir glokomatöz nörodejenerasyon modelini karakterize etmektir.

Kemirgenlerde Cerrahi Olarak İndüklenen Glokom için Limbal Vasküler Pleksusun Tam Daire Koterizasyonu

Bu yazıda kemirgenlerde oküler mikrodiseksiyon için bir protokol sunulmaktadır. İşlem, göz küresinin niktitasyon zarı (yani üçüncü göz kapağı) ile birlikte enükleasyonunu içerir. Bunu daha sonra arka ve ön göz kapaklarının ayrılması izler.

Kemirgen Gözün Mikrodiseksiyonu

Fare modelleri, retinal pigmentli epitelin (RPE) biyolojisini araştırmak için yararlı araçlar olabilir. Farelerin bir dizi RPE patolojisi geliştirebileceği tespit edilmiştir. Burada, ışık, iletim elektronu ve konfokal mikroskopi kullanarak farelerde RPE patolojilerini aydınlatmak ve ölçmek için bir fenotipleme protokolü tarif ediyoruz.

Yaşa Bağlı Makula Dejenerasyonunun Fare Modellerinde Retinal Pigmentli Epitel Patolojilerini Değerlendirme ve Ölçme Protokolü

Fare retinal kriyoseksiyonlarının hazırlanması ve fotoreseptörler üzerinde immün boyama yapılması için bir protokol tanımlanmıştır. Bu makale, araştırmacıların iyi korunmuş morfoloji ve yüksek kaliteli immün boyama sonuçları ile fare retinal donmuş kesitlerini tutarlı bir şekilde üretmelerini sağlar.

Fare Retinasının Kriyoseksiyonu ve İmmün Boyanması

B7-H1 (PD-L1) ve PD-1 olarak bağlayıcı tümörün mikroçevresindeki önemli bir tümör kaynaklı immünsüpresif sinyal verin. Ifade ve pankreatik adenokarsinoma B7-H1 lokalizasyonu karakterize etmek için immünohistokimyasal boyama tekniği burada tanımlanmıştır.

Pankreas Adenokarsinom Doku B7-H1 immünohistokimyasal boyanma (PD-L1) parafin Slaytlar

Öğrenin, sıçan ve fare gözbebeklerinden histolojik slaytlar hazırlayarak iç retinayı değerlendirmeyi. Bu yöntem, oftalmik hastalıklarda hücresel detayları az artefaktlarla incelemeyi sağlar.

Retinayı değerlendirmek için sıçan ve fare gözbebeklerinin histolojik slaytlarının hazırlanması ve analizi

Daha fazla video keşfet