Name: Farelerde Kullanılmayan Sepsis ile İndüklenen Miyopatinin Preklinik Modeli (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-06-14T13:50:00.000+00:00
Duration: 4 min 1 s
Description: Öğrenin, farelerde sepsis kaynaklı miyopati ve kas disuse etkileşimini inceleyen preklinik modeli. Bu yöntem, yatak bağımlı septik hastalarda kas disfonksiyonu mekanizmalarını anlamak ve tedavi stratejileri geliştirmek için kullanılır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<meta charset="utf8"></head><body>Arka Bacak Süspansiyonu ile Sepsis Kaynaklı Miyopatiyi İncelemek için Fare Modeli

<ol><li>Prescott, H. C., Angus, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhancing+recovery+from+sepsis%5BTitle%5D)+AND+%22JAMA%22%5BJournal%5D)">Enhancing recovery from sepsis.</a> JAMA. 319 (1), 62-75 (2018).</li>
<li>Stortz, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Benchmarking+clinical+outcomes+and+the+immunocatabolic+phenotype+of+chronic+critical+illness+after+sepsis+in+surgical+intensive+care+unit+patients%5BTitle%5D)+AND+%22J+Trauma+Acute+Care+Surg%22%5BJournal%5D)">Benchmarking clinical outcomes and the immunocatabolic phenotype of chronic critical illness after sepsis in surgical intensive care unit patients.</a> J Trauma Acute Care Surg. 84 (2), 342-349 (2018).</li>
<li>Laitano, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+impact+of+hindlimb+disuse+on+sepsis-induced+myopathy+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Physiological+Rep%22%5BJournal%5D)">The impact of hindlimb disuse on sepsis-induced myopathy in mice.</a> Physiological Rep. 9 (14), e14979(2021).</li>
<li>Callahan, L. A., Supinski, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sepsis-induced+myopathy%5BTitle%5D)+AND+%22Crit+Care+Med%22%5BJournal%5D)">Sepsis-induced myopathy.</a> Crit Care Med. 37, 10 Suppl S354-S367 (2009).</li>
<li>Cuthbertson, B. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mortality+and+quality+of+life+in+the+five+years+after+severe+sepsis%5BTitle%5D)+AND+%22Crit+Care%22%5BJournal%5D)">Mortality and quality of life in the five years after severe sepsis.</a> Crit Care. 17 (2), R70(2013).</li>
<li>Schmitt, R. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Muscle+stem+cells+contribute+to+long-term+tissue+repletion+following+surgical+sepsis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cachexia+Sarcopenia+Muscle%22%5BJournal%5D)">Muscle stem cells contribute to long-term tissue repletion following surgical sepsis.</a> J Cachexia Sarcopenia Muscle. 14 (3), 1424-1440 (2023).</li>
<li>Owen, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+muscle+weakness+and+mitochondrial+dysfunction+in+the+absence+of+sustained+atrophy+in+a+preclinical+sepsis+model%5BTitle%5D)+AND+%22eLife%22%5BJournal%5D)">Chronic muscle weakness and mitochondrial dysfunction in the absence of sustained atrophy in a preclinical sepsis model.</a> eLife. 8, e49920(2019).</li>
<li>Chen, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cellular+senescence+implicated+in+sepsis-induced+muscle+weakness+and+ameliorated+with+metformin%5BTitle%5D)+AND+%22Shock%22%5BJournal%5D)">Cellular senescence implicated in sepsis-induced muscle weakness and ameliorated with metformin.</a> Shock. 59 (4), 646(2023).</li>
<li>Granger, J. I., Ratti, P. L., Datta, S. C., Raymond, R. M., Opp, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sepsis-induced+morbidity+in+mice%3A+effects+on+body+temperature%2C+body+weight%2C+cage+activity%2C+social+behavior+and+cytokines+in+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Psychoneuroendocrinology%22%5BJournal%5D)">Sepsis-induced morbidity in mice: effects on body temperature, body weight, cage activity, social behavior and cytokines in brain.</a> Psychoneuroendocrinology. 38 (7), 1047-1057 (2013).</li>
<li>Ruiz, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sepsis+modeling+in+mice%3A+ligation+length+is+a+major+severity+factor+in+cecal+ligation+and+puncture%5BTitle%5D)+AND+%22Intensive+Care+Med+Exp%22%5BJournal%5D)">Sepsis modeling in mice: ligation length is a major severity factor in cecal ligation and puncture.</a> Intensive Care Med Exp. 4 (1), 22(2016).</li>
<li>Laitano, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Xiphoid+surface+temperature+predicts+mortality+in+a+murine+model+of+septic+shock%5BTitle%5D)+AND+%22Shock+%28Augusta%2C+Ga%29%22%5BJournal%5D)">Xiphoid surface temperature predicts mortality in a murine model of septic shock.</a> Shock (Augusta, Ga). 50 (2), 226-232 (2018).</li>
<li>Park, S., Brisson, B. K., Liu, M., Spinazzola, J. M., Barton, E. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mature+IGF-I+excels+in+promoting+functional+muscle+recovery+from+disuse+atrophy+compared+with+pro-IGF-IA%5BTitle%5D)+AND+%22J+App+Physiol%22%5BJournal%5D)">Mature IGF-I excels in promoting functional muscle recovery from disuse atrophy compared with pro-IGF-IA.</a> J App Physiol. 116 (7), 797-806 (2013).</li>
<li>Spradlin, R. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Deletion+of+muscle+Igf1+exacerbates+disuse+atrophy+weakness+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+App+Physiol%22%5BJournal%5D)">Deletion of muscle Igf1 exacerbates disuse atrophy weakness in mice.</a> J App Physiol. 131 (3), Bethesda, Md. 881-894 (2021).</li>
<li>Shrum, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+robust+scoring+system+to+evaluate+sepsis+severity+in+an+animal+model%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Res+Notes%22%5BJournal%5D)">A robust scoring system to evaluate sepsis severity in an animal model.</a> BMC Res Notes. 7 (1), 233(2014).</li>
<li>Mai, S. H. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Body+temperature+and+mouse+scoring+systems+as+surrogate+markers+of+death+in+cecal+ligation+and+puncture+sepsis%5BTitle%5D)+AND+%22Intensive+Care+Med+Exp%22%5BJournal%5D)">Body temperature and mouse scoring systems as surrogate markers of death in cecal ligation and puncture sepsis.</a> Intensive Care Med Exp. 6 (1), 20(2018).</li>
<li>Vankrunkelsven, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+muscle+weakness+in+a+mouse+model+of+critical+illness%3A+does+fibroblast+growth+factor+21+play+a+role%5BTitle%5D)+AND+%22Skelet+Muscle%22%5BJournal%5D)">Development of muscle weakness in a mouse model of critical illness: does fibroblast growth factor 21 play a role.</a> Skelet Muscle. 13 (1), 12(2023).</li>
<li>Supinski, G., Stofan, D., Nethery, D., Szweda, L., DiMarco, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Apocynin+improves+diaphragmatic+function+after+endotoxin+administration%5BTitle%5D)+AND+%22J+Appl+Physiol%22%5BJournal%5D)">Apocynin improves diaphragmatic function after endotoxin administration.</a> J Appl Physiol. 87 (2), Bethesda, Md. 776-782 (1999).</li>
<li>Li, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sepsis+leads+to+impaired+mitochondrial+calcium+uptake+and+skeletal+muscle+weakness+by+reducing+the+micu1%3Amcu+protein+ratio%5BTitle%5D)+AND+%22Shock+%28Augusta%2C+Ga%29%22%5BJournal%5D)">Sepsis leads to impaired mitochondrial calcium uptake and skeletal muscle weakness by reducing the micu1:mcu protein ratio.</a> Shock (Augusta, Ga). 60 (5), 698-706 (2023).</li>
<li>Wang, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeting+NAT10+protects+against+sepsis-induced+skeletal+muscle+atrophy+by+inhibiting+ROS%2FNLRP3%5BTitle%5D)+AND+%22Life+Sci%22%5BJournal%5D)">Targeting NAT10 protects against sepsis-induced skeletal muscle atrophy by inhibiting ROS/NLRP3.</a> Life Sci. 330, 121948(2023).</li>
<li>Mankowski, R. T., Laitano, O., Clanton, T. L., Brakenridge, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathophysiology+and+treatment+strategies+of+acute+myopathy+and+muscle+wasting+after+sepsis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clinical+Med%22%5BJournal%5D)">Pathophysiology and treatment strategies of acute myopathy and muscle wasting after sepsis.</a> J Clinical Med. 10 (9), 1874(2021).</li>
<li>Oliveira, J. R. S., Mohamed, J. S., Myers, M., Brooks, M. J., Alway, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+hindlimb+suspension+and+reloading+on+gastrocnemius+and+soleus+muscle+mass+and+function+in+geriatric+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Gerontol%22%5BJournal%5D)">Effects of hindlimb suspension and reloading on gastrocnemius and soleus muscle mass and function in geriatric mice.</a> Exp Gerontol. 115, 19-31 (2019).</li>
<li>Ashare, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Insulin-like+growth+factor-1+improves+survival+in+sepsis+via+enhanced+hepatic+bacterial+clearance%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Respir+Crit+Care+Med%22%5BJournal%5D)">Insulin-like growth factor-1 improves survival in sepsis via enhanced hepatic bacterial clearance.</a> Am J Respir Crit Care Med. 178 (2), 149-157 (2008).</li>
<li>Starr, M. E., Saito, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Age-related+increase+in+food+spilling+by+laboratory+mice+may+lead+to+significant+overestimation+of+actual+food+consumption%3A+implications+for+studies+on+dietary+restriction%2C+metabolism%2C+and+dose+calculations%5BTitle%5D)+AND+%22J+Gerontol+A+Biol+Sci+Med+Sci%22%5BJournal%5D)">Age-related increase in food spilling by laboratory mice may lead to significant overestimation of actual food consumption: implications for studies on dietary restriction, metabolism, and dose calculations.</a> J Gerontol A Biol Sci Med Sci. 67 (10), 1043-1048 (2012).</li>
<li>Crowell, K. T., Soybel, D. I., Lang, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Restorative+mechanisms+regulating+protein+balance+in+skeletal+muscle+during+recovery+from+sepsis%5BTitle%5D)+AND+%22Shock%22%5BJournal%5D)">Restorative mechanisms regulating protein balance in skeletal muscle during recovery from sepsis.</a> Shock. 47 (4), 463-473 (2017).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>4-0 Ethicon Coated Vicryl</td><td>Ethicon</td><td>D5792</td><td>Kas tabakasının kapatılması ve çekumun ligasyonu için kullanılan emilebilir sütür.</td></tr><tr><td>4-0 Ethilon Siyah 18"&nbsp;</td><td>Ethicon</td><td>662G</td><td>Cilt tabakasının kapatılması için emilemeyen sütür.</td></tr><tr><td>BD&nbsp; PrecisionGlide İğne 26-28 G</td><td>BD</td><td>305136 27g iğne için</td><td>Çekumu delmek için iğne.</td></tr><tr><td>C57BL/6J fareler&nbsp;</td><td>Jackson Laboratuvarı&nbsp;</td><td>suş #000664</td><td></td></tr><tr><td>Pamuk Uçlu Aplikatörler</td><td>Puritan</td><td>S-18991</td><td>İyotun topikal uygulaması için swablar.</td></tr><tr><td>Kriyostat</td> <td>(Leica CM1950)</td><td></td><td></td></tr> <tr><td>Dynarex Povidone İyot Hazırlama Çözeltisi</td><td>Dynarex</td><td>1415</td><td>Cilt ve Mukoza için Topikal Antiseptik</td></tr><tr><td>Sıvı Etanol 200 Kanıt (% 100)</td> <td>Fisher Scientific</td><td></td><td>Cildi temizlemek için% 70 etanol yapmak için.</td></tr><tr><td>Arka Bacak Süspansiyon Kafesleri</td><td>Özel Yapılmış</td><td>Yok</td><td>Bu özel yapım kafesler, MS'in video kayıtlarında vurgulanacaktır.</td></tr><tr><td>Optixcare Göz Yağları</td><td>Hayatta kalma ameliyatı sırasında koruma için</td> <td>Optixcare</td><td></td> Göz yağı.</tr><tr><td>Neşter bıçakları #11</td><td>İnce Bilim</td><td></td><td>Bıçağı cilt ve kas üzerinde kesikler yapmak için kullanılır.</td></tr><tr><td>Skin-Trac</td><td>Zimmer</td><td>736579</td><td>Kuyruğu süspansiyon aparatına sabitlemek için köpük bant.</td></tr><tr><td>SomnoSuite Düşük Akışlı Dijital Buharlaştırıcı</td><td>Kent Scientific Corporation</td><td>SS-01</td><td>İzofluran Anestezi</td></tr><tr><td>Doku banyosu aparatı için Buharlaştırıcı&nbsp;</td><td>Aurora Scientific</td><td>Model 800A, Çift Modlu Kas Kolu 300C</td><td></td></tr></tbody></table>

farelerde kullanılmayan sepsis ile İndüklenen miyopatinin preklinik modeli

A Preclinical Model of Sepsis-Induced Myopathy with Disuse in Mice

Sonuçlarda gösterilen temsili veriler için, vücut kütlesi 27 ila 34 g arasında değişen 17 haftalık erkek C57BL / 6J fareleri kullanıldı. Tüm protokolün tamamlanması on bir gün sürer ve cerrahi müdahale (CLP veya sahte), salin ve analjezik destek (0 ila 4. günler) ve HLS'nin kullanılmamasından (4 ila 11. günler) oluşur. Terminal deneyleri, süspansiyon fazı boyunca herhangi bir noktada gerçekleştirilebilir. Modelin iskelet kası fonksiyonu üzerindeki etkisini daha iyi anlamak için, sonuçlar laboratuvarımızda gerçekleştirilen çeşitli deneylerden derlenmiştir. Protokolden elde edilen sonuçlar, deneylerin CLP sonrası 7. günde yapıldığı bağışıklık hücresi popülasyonu dışında, ilk ameliyattan 11 gün sonra CLP ve/veya sahte ameliyatlar, HLS ve/veya NA geçiren eşleşen hayvanlarla karşılaştırılır. Sunulan veriler ortalama± standart hatadır.
Tipik bir sağkalım eğrisi Şekil 2'de<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66685/66685fig01.jpg"> <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66685/66685fig01large.jpg" target="_blank"></a><img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66685/66685fig02.jpg"> <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66685/66685fig02large.jpg" target="_blank"></a><img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66685/66685fig03.jpg"> <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66685/66685fig03large.jpg" target="_blank"></a><img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66685/66685fig04.jpg"> <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66685/66685fig04large.jpg" target="_blank"></a><img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66685/66685fig05.jpg"> <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66685/66685fig05large.jpg" target="_blank"></a><img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66685/66685fig06.jpg"> <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66685/66685fig06large.jpg" target="_blank"></a><a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66685/Supplementary%20Figure%201.zip" target="_blank"></a><a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66685/Supplementary%20File%201.zip" target="_blank"></a>

Farelerde Kullanılmayan Sepsis ile İndüklenen Miyopatinin Preklinik Modeli

Sepsis is a major cause of in-hospital deaths. Improvements in treatment result in a greater number of sepsis survivors. Approximately 75% of the ...

a-preclinical-model-of-sepsis-induced-myopathy-with-disuse-in-mice

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Ön kompartman kasları nöromüsküler elektriksel stimülasyon bir fare modeli (NMES), güvenli ve ucuz bir klinik yöntem, anlatılmıştır. Bu modelde, farelerde ve spesifik hedef kas kontraksiyonlarının ortaya çıkarmak amacıyla, kolayca bulunabilen bir klinik cihazı değiştirerek bir avantaja sahiptir.

Nöromüsküler Elektriksel Stimülasyon tarafından Kas Eğitimi A Mürin Modeli

Sepsis bir mikrobik enfeksiyon sonucu ortaya çıkan bir sistemik inflamatuvar yanıt sendromu ifade eder ve çekal ligasyon ve delme (CLP) diye adlandırdıkları bir cerrahi teknik ile simüle edilebilir. Burada tedavi ajanları için şifalı otlar taranması amacıyla CLP bağlı hayvan modelinde kullanılacak bir yöntem açıklanmaktadır.

Roman Bitkisel Tedaviler Değerlendirmek için Sepsis Hayvan Modeli kullanımı

Kas fonksiyonunun measurements kas patoloji için potansiyel terapötik değerlendirilmesi yanı sıra, bu dokuda fizyolojik altında yatan mekanizmaların belirlenmesi için katkıda bulunur. Biz fonksiyonel testleri için ekstansör digitorum longus ve diyafram kaslarının hazırlanması gösterecektir. Izometrik ve eksantrik kasılmalar için Protokoller patolojik bir devleti temsil eden distrofik kaslar arasındaki sonuçlar farklılıklar, ve yabani-tip kaslar yanı sıra görünecek.

İskelet Kası İzometrik ve Eksantrik Kuvvet Oluşturma Değerlendirme İzole Müsküler Distrofisi arasında murin Models

Tibial sinir kesisi modeli iskelet kas atrofi bir, iyi tolere doğrulanmış ve tekrarlanabilir bir model. Model cerrahi protokol C57Black6 farelerde açıklanan ve gösterilmiştir.

Tibial Sinir transeksiyonu - Farelerde denervasyon bağlı İskelet Kas Atrofi için bir Standart Model

Nöromüsküler hastalıklar için klinik çalışmalarda birincil sonuç ölçütü genellikle kas fonksiyonunu artırıldı. Bu nedenle, fare modellerinde klinik öncesi kas performansı üzerindeki potansiyel terapötik bileşiklerin etkisini değerlendirmek büyük önem taşımaktadır. Biz burada bu adrese birkaç fonksiyonel testler açıklar.

Fonksiyonel Performans değerlendirilmesi<em&gt; Mdx</em&gt; Fare Modeli

Bu protokol, uzun süreli kritik hastalığın merkezi olarak kateterize edilmiş bir fare modelini tanımlar. Sepsisi indüklemek için çekal ligasyon ve ponksiyon yöntemini, insan klinik ortamını taklit etmek için sıvılar, ilaçlar ve besin uygulaması için merkezi bir venöz hat kullanımı ile birleştiriyoruz.

Kritik Hastalık Fare Modeli Sıvılar, Uyuşturucu ve Besin İdaresi için Santral Venöz Hattı Kullanımı

Sinir iletim ölçümü ateş fare modelleri değerlendirmek için yararlı bir araçtır ama sık sık öyle yalnızca hindlimbs siyatik sinir uyarmak için geçerlidir. Burada, bileşik kas aksiyon potansiyeli (CMAP) vivo brakiyal pleksus tarafından innervated fare forelimb kaslarda ölçmek için bir teknik açıklayın.

Vivo Bileşik kas aksiyon potansiyeli Motor nöron hastalığı, fare modellerinde ön ayakları üzerinden elektrofizyolojik ölçümü

Bu iletişim kuralı kurmak ve 7 günlük eski farelerde neonatal sepsis değerlendirmek için gerekli adımları sağlar.

Yenidoğan Polymicrobial Sepsis için kontrollü fare modeli

Ölçüm kemirgen iskelet kası contractile işlevinin hastalık ilerleme ve terapötik müdahale etkinliğini izlemek için kullanılan yararlı bir araçtır. Burada zaman içinde aynı fare tekrarlanan dorsiflexor kasları non-invaziv, vivo içinde değerlendirilmesi açıklayın.

Non-invaziv Dorsiflexor kas fonksiyonu farelerde değerlendirilmesi

Bu protokol, bir fare sepsis modelinde çekal ligasyon ve ponksiyonun (CLP) operatif ayrıntılarını sunar. CLP, sepsisin hayvan modelini oluşturmak için en yaygın kullanılan tekniklerden biridir. Bu nedenle, güvenilir araştırma sonuçlarının elde edilmesi için standartlaştırılmış bir CLP protokolü gereklidir.

Sepsisin Çekal Ligasyonu ve Delinmeye Bağlı Fare Modelinde Güvenilir Bir Biyobelirtecin Değerlendirilmesi

Bu protokol, bir fare modeli sisteminde Gram-negatif monobakteriyel sepsisin indüksiyonunu açıklar. Model, sepsis sırasında inflamatuar ve ölümcül konakçı yanıtlarının araştırılmasında yararlıdır.

Farelerde Salmonella Typhimurium ile İndüklenen Septik Peritonitin Karakterizasyonu

Öğrenin, farelerde sepsis kaynaklı miyopati ve kas disuse etkileşimini inceleyen preklinik modeli. Bu yöntem, yatak bağımlı septik hastalarda kas disfonksiyonu mekanizmalarını anlamak ve tedavi stratejileri geliştirmek için kullanılır.

Farelerde Kullanılmayan Sepsis ile İndüklenen Miyopatinin Preklinik Modeli

Daha fazla video keşfet