Name: Marmosetlerde yumurtalık döngüsündeki evreyi belirlemek için kan örneklemesi ve hormon ölçümü (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-07-05T13:20:00.000+00:00
Duration: 6 min 17 s
Description: Öğrenin marmosetlerde kan örneklemesi ve hormon ölçümü ile yumurtalık döngüsü evresini belirleme yöntemini. Bu protokol progesteron, östradiol ve koriyonik gonadotropin düzeylerini ölçerek ovulasyon tahminini iyileştirir.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<meta charset="utf8"></head><body>Marmosetlerde Yumurtalık Döngüsünün Kan Alma ve Hormon Analizi ile Değerlendirilmesi

<ol><li>Kholkute, S. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Plasma+progesterone+levels+throughout+the+ovarian+cycle+of+the+common+marmoset+%28Callithrix+jacchus%29%5BTitle%5D)+AND+%22Primates%22%5BJournal%5D)">Plasma progesterone levels throughout the ovarian cycle of the common marmoset (Callithrix jacchus).</a> Primates. 25 (1), 123-126 (1984).</li>
<li>Harding, R. D., Hulme, M. J., Lunn, S. F., Henderson, C., Aitken, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Plasma+progesterone+levels+throughout+the+ovarian+cycle+of+the+common+marmoset+%28Callithrix+jacchus%29%5BTitle%5D)+AND+%22J+Med+Primatol%22%5BJournal%5D)">Plasma progesterone levels throughout the ovarian cycle of the common marmoset (Callithrix jacchus).</a> J Med Primatol. 11 (1), 43-51 (1982).</li>
<li>Gilchrist, R. B., Wicherek, M., Heistermann, M., Nayudu, P. L., Hodges, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Changes+in+follicle-stimulating+hormone+and+follicle+populations+during+the+ovarian+cycle+of+the+common+marmoset%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Reprod%22%5BJournal%5D)">Changes in follicle-stimulating hormone and follicle populations during the ovarian cycle of the common marmoset.</a> Biol Reprod. 64 (1), 127-135 (2001).</li>
<li>Gromoll, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+subclass+of+the+luteinizing+hormone%2Fchorionic+gonadotropin+receptor+lacking+exon+10+messenger+RNA+in+the+New+World+monkey+%28Platyrrhini%29+lineage%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Reprod%22%5BJournal%5D)">A new subclass of the luteinizing hormone/chorionic gonadotropin receptor lacking exon 10 messenger RNA in the New World monkey (Platyrrhini) lineage.</a> Biol Reprod. 69 (1), 75-80 (2003).</li>
<li>Müller, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chorionic+gonadotrophin+beta+subunit+mRNA+but+not+luteinising+hormone+beta+subunit+mRNA+is+expressed+in+the+pituitary+of+the+common+marmoset+%28Callithrix+jacchus%29%5BTitle%5D)+AND+%22J+Mol+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">Chorionic gonadotrophin beta subunit mRNA but not luteinising hormone beta subunit mRNA is expressed in the pituitary of the common marmoset (Callithrix jacchus).</a> J Mol Endocrinol. 32 (1), 115-128 (2004).</li>
<li>Pacchiarotti, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ovarian+stimulation+protocol+in+IVF%3A+an+up-to-date+review+of+the+literature%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Pharm+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Ovarian stimulation protocol in IVF: an up-to-date review of the literature.</a> Curr Pharm Biotechnol. 17 (4), 303-315 (2016).</li>
<li>Ezcurra, D., Humaidan, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+of+luteinising+hormone+and+human+chorionic+gonadotropin+when+used+in+assisted+reproductive+technology%5BTitle%5D)+AND+%22Reprod+Biol+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">A review of luteinising hormone and human chorionic gonadotropin when used in assisted reproductive technology.</a> Reprod Biol Endocrinol. 12, 95(2014).</li>
<li>Lopez-Gatius, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ovarian+response+to+prostaglandin+F%282alpha%29+in+lactating+dairy+cows%3A+A+clinical+update%5BTitle%5D)+AND+%22J+Reprod+Dev%22%5BJournal%5D)">Ovarian response to prostaglandin F(2alpha) in lactating dairy cows: A clinical update.</a> J Reprod Dev. 68 (2), 104-109 (2022).</li>
<li>Marini, R. P., Wachtman, L. M., Tardif, S. D., Mansfield, K., Fox, J. G. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aMarini%2C+RP+%22The+Common+Marmoset+in+Captivity+and+Biomedical+Research%22">The Common Marmoset in Captivity and Biomedical Research</a>. , Elsevier Science. (2018).</li>
<li>Schultz-Darken, N. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sample+collection+and+restraint+techniques+used+for+common+marmosets+%28Callithrix+jacchus%29%5BTitle%5D)+AND+%22Comp+Med%22%5BJournal%5D)">Sample collection and restraint techniques used for common marmosets (Callithrix jacchus).</a> Comp Med. 53 (4), 360-363 (2003).</li>
<li>Hopper, J. Common marmosets. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aHopper%2C+J+%22Handbook+of+Exotic+Pet%22">Handbook of Exotic Pet</a>. Kubik, M. , 27-42 (2020).</li>
<li>Harlow, C. R., Hearn, J. P., Hodges, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ovulation+in+the+marmoset+monkey%3A+endocrinology%2C+prediction+and+detection%5BTitle%5D)+AND+%22J+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">Ovulation in the marmoset monkey: endocrinology, prediction and detection.</a> J Endocrinol. 103 (1), 17-24 (1984).</li>
<li>Ludlage, E., Mansfield, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+care+and+diseases+of+the+common+marmoset+%28Callithrix+jacchus%29%5BTitle%5D)+AND+%22Comp+Med%22%5BJournal%5D)">Clinical care and diseases of the common marmoset (Callithrix jacchus).</a> Comp Med. 53 (4), 369-382 (2003).</li>
<li>Summers, P. M., Wennink, C. J., Hodges, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cloprostenol-induced+luteolysis+in+the+marmoset+monkey+%28Callithrix+jacchus%29%5BTitle%5D)+AND+%22J+Reprod+Fertil%22%5BJournal%5D)">Cloprostenol-induced luteolysis in the marmoset monkey (Callithrix jacchus).</a> J Reprod Fertil. 73 (1), 133-138 (1985).</li>
<li>Takahashi, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Birth+of+healthy+offspring+following+ICSI+in+in+vitro-matured+common+marmoset+%28Callithrix+jacchus%29+oocytes%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Birth of healthy offspring following ICSI in in vitro-matured common marmoset (Callithrix jacchus) oocytes.</a> PLoS One. 9 (4), e95560(2014).</li>
<li>Tomioka, I., Takahashi, T., Shimada, A., Yoshioka, K., Sasaki, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Birth+of+common+marmoset+%28Callithrix+jacchus%29+offspring+derived+from+in+vitro-matured+oocytes+in+chemically+defined+medium%5BTitle%5D)+AND+%22Theriogenology%22%5BJournal%5D)">Birth of common marmoset (Callithrix jacchus) offspring derived from in vitro-matured oocytes in chemically defined medium.</a> Theriogenology. 78 (7), 1487-1493 (2012).</li>
<li>Abe, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficient+marmoset+genome+engineering+by+autologous+embryo+transfer+and+CRISPR%2FCas9+technology%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Efficient marmoset genome engineering by autologous embryo transfer and CRISPR/Cas9 technology.</a> Sci Rep. 11 (1), 20234(2021).</li>
<li>Summers, P. M., Shephard, A. M., Taylor, C. T., Hearn, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effects+of+cryopreservation+and+transfer+on+embryonic+development+in+the+common+marmoset+monkey%2C+Callithrix+jacchus%5BTitle%5D)+AND+%22J+Reprod+Fertil%22%5BJournal%5D)">The effects of cryopreservation and transfer on embryonic development in the common marmoset monkey, Callithrix jacchus.</a> J Reprod Fertil. 79 (1), 241-250 (1987).</li>
<li>Thomson, J. A., Kalishman, J., Hearn, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nonsurgical+uterine+stage+preimplantation+embryo+collection+from+the+common+marmoset%5BTitle%5D)+AND+%22J+Med+Primatol%22%5BJournal%5D)">Nonsurgical uterine stage preimplantation embryo collection from the common marmoset.</a> J Med Primatol. 23 (6), 333-336 (1994).</li>
<li>Hanazawa, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Minimally+invasive+transabdominal+collection+of+preimplantation+embryos+from+the+common+marmoset+monkey+%28Callithrix+jacchus%29%5BTitle%5D)+AND+%22Theriogenology%22%5BJournal%5D)">Minimally invasive transabdominal collection of preimplantation embryos from the common marmoset monkey (Callithrix jacchus).</a> Theriogenology. 78 (4), 811-816 (2012).</li>
<li>Ishibashi, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficient+embryo+transfer+in+the+common+marmoset+monkey+%28Callithrix+jacchus%29+with+a+reduced+transfer+volume%3A+a+non-surgical+approach+with+cryopreserved+late-stage+embryos%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Reprod%22%5BJournal%5D)">Efficient embryo transfer in the common marmoset monkey (Callithrix jacchus) with a reduced transfer volume: a non-surgical approach with cryopreserved late-stage embryos.</a> Biol Reprod. 88 (5), 115(2013).</li>
<li>Kishimoto, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment+of+novel+common+marmoset+embryonic+stem+cell+lines+under+various+conditions%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Res%22%5BJournal%5D)">Establishment of novel common marmoset embryonic stem cell lines under various conditions.</a> Stem Cell Res. 53, 102252(2021).</li>
<li>Diehl, K. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+good+practice+guide+to+the+administration+of+substances+and+removal+of+blood%2C+including+routes+and+volumes%5BTitle%5D)+AND+%22J+Appl+Toxicol%22%5BJournal%5D)">A good practice guide to the administration of substances and removal of blood, including routes and volumes.</a> J Appl Toxicol. 21 (1), 15-23 (2001).</li>
<li>Daskalaki, M., Drummer, C., Behr, R., Heistermann, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+alfaxalone+for+short-term+anesthesia+can+confound+serum+progesterone+measurements+in+the+common+marmoset%3A+a+case+report%5BTitle%5D)+AND+%22Primate+Biol%22%5BJournal%5D)">The use of alfaxalone for short-term anesthesia can confound serum progesterone measurements in the common marmoset: a case report.</a> Primate Biol. 9 (2), 23-28 (2022).</li>
<li>Hodges, J. K., Cottingham, P. G., Summers, P. M., Liang, Y. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Controlled+ovulation+in+the+marmoset+monkey+%28Callithrix+jacchus%29+with+human+chorionic+gonadotropin+following+prostaglandin-induced+luteal+regression%5BTitle%5D)+AND+%22Fertil+Steril%22%5BJournal%5D)">Controlled ovulation in the marmoset monkey (Callithrix jacchus) with human chorionic gonadotropin following prostaglandin-induced luteal regression.</a> Fertil Steril. 48 (2), 299-305 (1987).</li>
<li>Barrett, J., Abbott, D. H., George, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extension+of+reproductive+suppression+by+pheromonal+cues+in+subordinate+female+marmoset+monkeys%2C+Callithrix+jacchus%5BTitle%5D)+AND+%22J+Reprod+Fertil%22%5BJournal%5D)">Extension of reproductive suppression by pheromonal cues in subordinate female marmoset monkeys, Callithrix jacchus.</a> J Reprod Fertil. 90 (2), 411-418 (1990).</li>
<li>Barrett, J., Abbott, D. H., George, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sensory+cues+and+the+suppression+of+reproduction+in+subordinate+female+marmoset+monkeys%2C+Callithrix+jacchus%5BTitle%5D)+AND+%22J+Reprod+Fertil%22%5BJournal%5D)">Sensory cues and the suppression of reproduction in subordinate female marmoset monkeys, Callithrix jacchus.</a> J Reprod Fertil. 97 (1), 301-310 (1993).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>AIA-360</td><td>Tosoh Corporation</td><td>0019945</td><td>Hormon ölçümü (P4/E2)</td></tr><tr><td>AIA-PACK SEYRELTICI KONSANTRESI</td><td>Tosoh Corporation</td><td>0020956</td><td>Hormon ölçümü (P4/E2)</td></tr><tr><td>AIA-PACK SUBSTRAT SETI II</td><td>Tosoh Corporation</td><td>0020968</td><td>Hormon ölçümü (P4/E2)</td></tr><tr><td>AIA-PACK YIKAMA KONSANTRESİ</td><td>Tosoh Corporation</td><td>0020955</td><td>Hormon ölçümü (P4/ E2)</td></tr> <tr><td>CMS-1</td><td>CLEA Japonya</td><td></td><td>Marmoset gıda</td></tr><tr><td>Estrumate</td><td>MSD Hayvan Sağlığı</td><td></td><td>PGF2alpha analog (cloprostenol)</td></tr> <tr><td>Gonal-f Deri Altı Enjeksiyon 150</td><td>Merck Biopharma Co., Ltd.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Kas içi enjeksiyon için FSH Gonatropin 1000</td><td>ASKA Pharmaceutical Co., Ltd.</td><td>872413</td><td>hCG</td></tr><tr><td>Heparin sodyum enjeksiyon çözeltisi 5.000 birim / 5 mL</td><td>Mochida Pharmaceutical Co., Ltd.</td><td>224122458</td><td>Kan alma</td></tr><tr><td>Ortak Marmoset Koryonik Gonadotropinin Tespiti için İmmünokromatografik Test Kiti (Çift Denetleyici)</td><td>CLEA Japan, Inc.</td><td></td><td>CG seviyesinin belirlenmesi</td></tr><tr><td>Düşük profilli çift kollu mikroskop aydınlatması LPF-SD</td><td>SHIOKAZE GIKEN</td><td></td><td>Kan alma için masa lambası</td></tr><tr><td>Marmoset kan alma kısıtlama cihazı</td><td>JIC Japonya</td><td>JM-1006</td><td>Kan alma http://www.jic-japan.jp/prd/marmoset/prd016.html e-posta: vi@jic-japan.jp</td></tr><tr><td>Metacam %0,05</td> <td>Boehringer Ingelheim Hayvan Sağlığı Japan Co., ve Tic. Ltd. Şti</td><td></td><td>Hematom tedavisi</td></tr><tr><td>Örnek Kabı, 3 mL, PS, Tosoh 360 ve AIA-600 için II, 1000/Torba</td><td>Küre Bilimsel</td><td>110913</td><td>Hormon ölçümü (P4/E2)</td></tr><tr><td>ST AIA-PACK iE2</td><td>Tosoh Corporation</td><td>0025224</td><td>Hormon ölçümü (P4/E2)</td></tr><tr><td>ST AIA-PACK iE2 KALIBRATÖR SETİ</td><td>Tosoh Corporation</td><td>0025324</td><td>Hormon ölçümü (P4/E2)</td></tr><tr><td>ST AIA-PACK iE2 NUMUNE SEYRELTME ÇÖZELTİSİ</td><td>Tosoh Corporation</td><td>0025524</td><td>Hormon ölçümü (P4/E2)</td></tr><tr><td>ST AIA-PACK PROGIII</td><td>Tosoh Corporation</td><td>0025240</td><td>Hormon ölçümü (P4/E2)</td></tr><tr><td>ST AIA-PACK PROGIII KALIBRATÖR SETI</td><td>Tosoh Corporation</td><td>0025340</td><td>Hormon ölçümü (P4/E2)</td></tr><tr><td>ST AIA-PACK PROGIII NUMUNE SEYRELTME ÇÖZELTİSİ</td><td>Tosoh Corporation</td><td>&nbsp; 0025540</td><td>Hormon ölçümü (P4/E2)</td></tr><tr><td>25 G (0,50 x 25 mm) iğneli şırınga</td><td>TERUMO</td><td>SS-01T2525</td><td>Kan alma</td></tr><tr><td>Tensolvet 5.000 IE jel.</td><td>Dechra İlaç</td><td>14033492</td><td>Hematom tedavisi</td></tr><tr><td>TOSOH ÇOKLU KONTROL SETI</td><td>Tosoh Şirketi</td><td>0015965</td><td>Hormon ölçümü (P4/E2)</td></tr></tbody></table>

marmosetlerde yumurtalık döngüsündeki evreyi belirlemek için kan örneklemesi ve hormon ölçümü

Blood Sampling and Hormone Measurement for Determining the Stage in the Ovarian Cycle in Marmosets

Bu çalışmada kullanılan hayvanlarla ilgili detaylar Tablo 1'de listelenmiştir.
Femoral venin anatomik analizleri Femoral venin anatomik analizleri, ötenazi uygulanan 2 yaşında bir erkek ortak marmoset (I 7713M) kullanılarak yapıldı. Femoral venler ve arterler femoral üçgende bulunur. Femoral üçgen, karın duvarı ile uyluk kasları arasındaki sınırlarda oluşur (Şekil 1B-D). Uyluğun tabanında, ters üçgenin ortasından büyük bir damar geçer ve bir arter damarın dışına paralel olarak uzanır. Alt bölgede, damarlar ve arterler incelir ve üst üste biner, arterler damarların üstünde yer alır (Şekil 1D).
Kan örneklemesi için damar hedeflenmelidir, çünkü arteriyel bir yaralanma femoral arter hematomuna neden olabilir, bu da kanama şiddetli olduğunda kardiyovasküler şoka yol açabilir13. Üçgendeki damarın herhangi bir yerinden ve distal bölgesinden kan alınabilmesine rağmen, damarın büyük boyutu ve arter ile görünüşte çok az örtüşmesi nedeniyle femoral üçgenin proksimal bölgesinden damar delinmesi önerilir. Ek olarak, proksimal bölgedeki damar yüzeyseldir ve bir iğne kullanarak kolay konum sağlar. Nabız attığı için, femoral üçgendeki arter bazen görsel olarak veya palpasyonla tanımlanır ve ven sadece medial olarak uzanır. Böylece, arter nabzının gözlenmesi, damarın yerini tahmin etmeye yardımcı olur.
Ayrıca, damarı gösteren mavi bir renklenme genellikle üçgenin tepesindeki cilt altında görülür (Şekil 1B,C). Bununla birlikte, üçgendeki lenf düğümleri genellikle damara yakın bulunur ve koyu mavi bir renk gösterir, bu nedenle görünümleri benzerdir. Neyse ki, hareketlilikleri ile ayırt edilebilirler: damar sabittir ve lenf düğümleri hareketlidir. Bu nedenle, atardamarın nabzı ve damarın mavi rengi, damarı bulmak için kullanılan iki ana ipucudur, ancak bunları görselleştirmek için saçları tıraş etmek gerekebilir.
Yumurtalık döngüsündeki aşamanın belirlenmesi P4 ve E2 seviyeleri, foliküler ve luteal fazların süresini araştırmak için altı dişi marmosette (1 ila 3 yaş arasında) izlendi. Sonuçlar, foliküler ve luteal fazlar için sırasıyla ortalama 11.58 gün (dört marmosetten n = 6) ve 16.8 gün (üç marmosetten n = 5) gösterdi (Tablo 2). Aşağıda, altı marmosetten birinin (I6751F, 3 yaşında) P4 ve E2 dinamikleri ayrıntılı olarak açıklanmaktadır. Bu hayvanda kan örneklemesi ve hormon ölçümleri 38 gün boyunca birkaç günde bir yapılmıştır (Tablo 3).
Luteal faz (1-10 gün) Ölçümün başlangıç günü 1. gün olarak belirlendi. P4 seviyesine (21 ng / mL) dayanarak, hayvan muhtemelen luteal fazdaydı. 1 ila 10. günler arasında (≥21 ng / mL) yüksek bir P4 seviyesi gözlendi, bu da luteal fazı düşündürdü. 12. günde, keskin bir şekilde 4 ng / mL'ye düştü. Bu önemli azalma, lutealden foliküler faza geçişi gösterdi. E2 seviyesinin 10. günden (241 ng/mL) 12. güne (189 ng/mL) düşmesi de bu geçişi destekledi.
Foliküler faz (12-22 gün) Foliküler faza geçtikten sonra, P4 seviyesi 19. güne kadar düşük (4-6 ng/mL) kaldı ve daha sonra 19. günden 24. güne kadar hafifçe arttı (19. gün, 6 ng/mL; 22. gün, 8 ng/mL; 24. gün, 9 ng/mL). Buna karşılık, E2 seviyesi 19. günden (94 ng / mL) 22. güne (322 ng / mL) önemli ölçüde artmış ve daha sonra 22. günden 24. güne (158 ng / mL) düşmüştür. Artan P4 ve azalan E2 seviyelerine dayanarak, yumurtlamanın foliküler fazdan luteal faza geçiş yaparak 22 ve 24. günler arasında meydana geldiği tahmin edildi.
Luteal faz (24-36 gün) Yumurtlamadan sonra, P4 seviyesi 36. güne kadar yüksek kaldı ve daha sonra 38. günde 3 ng / mL'ye düştü. Bu nedenle, lutealden foliküler faza geçişin 36-38. günler arasında gerçekleşmesi muhtemeldir. Bu geçişle tutarlı olarak, E2 seviyesi bu dönemde azaldı (36. gün, 2517 ng / mL; 38. gün, 73 ng / mL).
Yumurtlama zamanlamasının tahmini ve belirlenmesi
İdrar CG düzeyi ile ovulasyon tarihi arasındaki ilişkiyi incelemek için yedi marmoset (No. 1-7) hazırlandı. Yumurtlama döngüsünü sıfırlamak için kloprostenol enjekte edildi (0. gün). Daha sonra 7. günden itibaren kan P4/E2 düzeyleri ve idrar CG düzeyleri izlendi. Aydınlatmadan hemen sonra idrar toplandı. Kan örneklemesi esas olarak sabahları yapıldı. Yumurtlamanın, E2 seviyesinin bir önceki güne göre büyük ölçüde düştüğü zaman meydana geldiği varsayılmıştır17. O gün, yumurtalıkların yüzeyinde foliküler yırtılma ve yumurta kanallarında zigot/oosit varlığı gözlendi (Tablo 4).
KG ilk olarak 7. ila 11. günlerde tespit edildi (7. gün, N = 1; 8. gün, N = 2; 9. gün, N = 1; 10. gün, N = 2; 11. gün, N = 1) (Tablo 4). E2 seviyelerindeki büyük düşüş (yumurtlamanın göstergesi) ilk CG sinyalinden 0-3 gün sonra gözlendi. İlk CG tespitinden E2 azalmasına kadar geçen süre, ilk CG tespiti daha erken olduğunda büyük görünüyordu (Şekil 3A). Örneğin, bir hayvan (No. 1), 7. gündeki ilk CG tespitinden 3 gün sonra E2 sinyalinde bir düşüş gösterdi (Tablo 4). Buna karşılık, ilk CG tespitinin birlikte ortaya çıkması ve E2 sinyalinin düşmesi, 10. günde bir hayvanda (No. 2) gözlendi. Bu nedenle, beş hayvandan birinde ilk CG tespiti ve yumurtlama aynı gün gözlenmesine rağmen, yumurtlama, CG'nin ilk tespitinden sonraki birkaç gün içinde meydana geldi.
Marmoset CG için immünokromatografik test kiti, test için idrar kullanmak üzere tasarlanmıştır. CG seviyesinin incelenmesi genellikle kan plazması kullanılarak P4 / E2 seviyelerinin belirlenmesine eşlik eder. CG testi için idrar yerine kan plazmasının kullanılması faydalı olacaktır. Bunu test etmek için, yukarıdaki deneylerde P4 / E2 seviyesi ölçümünden sonra kalan kan plazması incelendi. Yukarıdaki deneylerin yapıldığı günlerden herhangi birinde dört hayvandan kan plazması ve idrar toplandı (inceleme günleri Tablo 4'te çift yıldızla [**] gösterildi). İdrar kullanarak, dört hayvandan ikisi pozitif sonuçlar gösterdi (skor 5 ve 3) ve diğer ikisi negatif sonuçlar gösterdi (skor 1). Kan plazması esas olarak idrarla aynı sonuçları gösterdi (Şekil 3B). Daha güçlü sinyal kan plazması kullanılarak elde edildi. Bu nedenle, kan plazması kullanılırken, idrar için ayarlanan 10 dakikadan önce karar verilmelidir.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66691/66691fig01.jpg"> Resim 1: Marmosetlerden kan alınması. (A) Kan alımı için bir tutucu kullanılır. (B) Marmoset üst uyluk. (C) Femoral üçgen ve kan damarları. Üçgendeki femoral arter sıklıkla görülebilir ve nabız atar. Femoral venin mavi rengi bazen üçgenin proksimal bölgesinde (flebotomi bölgesi olarak gösterilir) görülebilir. Lenf düğümleri de mavi bir renk gösterir. Ancak lenf bezleri deriye yapışık olduğu için lenf bezleri hareketlidir. (D) Ötenazi yapılan hayvanın uyluğunun anatomik görünümü. Arter, ven ve flebotomi bölgesi endikedir. Aynı hayvan B-D'de gösterilmiştir. (E) Bir sınırlayıcı kullanarak kan alma. Marmosetin bacaklarının tutuş pozisyonu ve alınan kan gösterilir. (F) Bir marmosetten idrar toplama. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66691/66691fig01large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66691/66691fig02.jpg"> Şekil 2: Marmosetlerde yumurtalık döngüsü sırasında P4, E2 ve CG seviyelerinin tipik modelleri. FSH, hCG ve PGF2α enjeksiyonlarının zaman noktaları belirtilmiştir. Kesikli çizgiler PGF2α enjeksiyonundan sonra beklenen hormonal paterni gösterir. Kısaltmalar: P4 = progesteron; E2 = östradiol; CG = koryonik gonadotropin; FSH = folikül uyarıcı hormon; hCG = insan koryonik gonadotropini; PGF2α = prostaglandin F2α. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66691/66691fig02large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66691/66691fig03.jpg"> Şekil 3: Yumurtlama oluşumunu tahmin etmek için CG seviyesinin belirlenmesi. (A) CG tespitinin ilk günü (skor &gt; 1) ile yumurtlamaya kadar geçen süre (E2 düşüşü) arasındaki olası ilişki. (B) Kan plazması, immünokromatografik CG testleri için kullanılabilir. Her puanın temsili bir sonucu (üstte). Skor, numune yüklemesinden 10 dakika sonra belirlendi. Skor 2, 5 dakika içinde hiçbir bandın olmadığını, ancak 10 dakika içinde bir bandın ortaya çıktığını temsil eder. İdrar alındıktan kısa bir süre sonra kan alımı yapıldı. Dört marmoset ( Tablo S4'te No. 1, 2, 3, 5) incelendi. Burada kullanılan örnekler Tablo 4'te çift yıldız olarak belirtilmiştir. Kan plazması, E2 ölçümü için kullanılan seyreltme tamponu ile P'ye seyreltildi. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66691/66691fig03large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
Tablo 1: Bu çalışmada kullanılan hayvanlar. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66691/66691_Table%201v2.xlsx" target="_blank">Bu Tabloyu indirmek için lütfen buraya tıklayın.</a>
Tablo 2: Foliküler ve luteal fazların süresi. Faz, P4 seviyesine göre belirlendi (foliküler faz P4 ≤ 8, luteal faz P4 &gt; 8). Ölçümler arasında faz değişimi gözlendiğinde, ölçüm tarihleri arasındaki orta nokta değişim noktası olarak belirlenmiştir. İki değişim noktası arasındaki süre foliküler veya luteal fazlar olarak kabul edildi. Tek bir fazın süresinin ölçülmesini sağlamak için, iki fazı kapsadığı durumlar da dahil olmak üzere, aynı fazda uzun (≥7 gün) aralıklı veya ≥6 günlük aralıkların iki katı olan veriler analizler için kullanılmamıştır. Sadece aynı aşamada iki ölçüm yapıldığında veriler kullanılmıştır. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66691/66691_240320_Table2_rev.zip" target="_blank">Bu Tabloyu indirmek için lütfen buraya tıklayın.</a>
Tablo 3: Bir marmosette 38 gün boyunca P4 ve E2 ölçümlerinin sonuçları.<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66691/66691_240320_Table3_rev.zip" target="_blank">Bu Tabloyu indirmek için lütfen buraya tıklayın.</a>
Tablo 4: Yumurtlama günlerinin belirlenmesi ve tahmini. Yumurtalıklarda kanama yerleri veya yırtılma bölgeleri gözlenirse yumurtlama izlerinin mevcut olduğu düşünülmüştür. Oosit/zigot, E2 damlasının düştüğü gün yumurta kanallarından elde edilen oosit/zigotun evrelerini gösterir. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66691/66691_Table%204_revv2.xlsx" target="_blank">Bu Tabloyu indirmek için lütfen buraya tıklayın.</a>

Marmosetlerde yumurtalık döngüsündeki evreyi belirlemek için kan örneklemesi ve hormon ölçümü

Common marmosets are small New World monkeys. Since many of their biological mechanisms are similar to those of humans, marmosets are potentially useful ...

blood-sampling-hormone-measurement-for-determining-stage-ovarian

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Burada, basit, non-invaziv toplama ve vaginal smear örneklerinin sitolojik değerlendirmesi ile fare üreme (Proestrus, kızgınlık, metestrus veya diestrus) aşamasında nasıl belirleneceği açıklanmaktadır. Biz daha vajinal sitoloji fare üreme döngüsü boyunca geçiş yatan hormonal seviyeleri dolaşımdaki nasıl yansıttığını açıklar.

Fare Östrus Döngüsü Evreleme Tanımlaması Vajinal Lavaj, Kristal Violet Boyama ve Vajinal Sitolojik Değerlendirilmesi Sahne

Östrojen gibi gonadal hormonlar, korku, yok olma, hafıza dahil olmak üzere bir dizi deneysel paradigmada hafıza oluşumunu modüle eder. Bu protokol, östrus döngüsü izleme ve eksojen östrojen uygulaması da dahil olmak üzere, doğal döngüsel dişilerde özellikle yok olma sırasında gonadal hormonların etkisini araştırmak için bir dizi yöntemi açıklar.

Doğal Kadın Rats Bisiklet içinde Koşullandırılmışlıktan Korku Extinction incelenmesi için Protokol

Burada kontrolsüz farelerde sık örnek koleksiyon için bir kuyruk ucu kan örnekleme iletişim kuralı mevcut. Bu yöntem, pulsatil luteinizan hormon salgısı değerlendirilmesi desenleri yararlıdır ve dolaşımdaki diğer faktörleri analiz için adapte.

Pulsatil luteinizan hormon salgısı değerlendirilmesi için kuyruk ucu kan örnekleme farelerde sık

Biz bir yalın PCOS gibi fare modeli ile PCOS ve belgili tanımlık çoluk çocuk bu PCOS benzeri baraj üzerinden Patofizyoloji çalışmaya dihidrotestosteron Pelet gelişimi tanımlamak.

Polikistik over sendromu çalışmaya Hyperandrogenic fare modeli

Amfitiyoloji biyolojisinin incelenmesi, birçok taksononomik grubun organizmalarını kullanan üreme, fizyolojik, embriyolojik ve gelişimsel süreçler hakkında değerli bilgiler sağlar. Burada, biz ayı kontrol ve amfitezya izleme incelemek için kullanılabilecek farklı metodolojiler üzerinde kapsamlı bir rehber sunuyoruz.

Anbürlerde Ovaryalı Izleme ve kontrol için üreme teknikleri

Bu çalışma, dişi sıçanları içeren deneysel tasarımlarda göz önünde bulundurulması gereken önemli faktörleri detaylandırmaktadır. Daha geniş anlamda, bu veriler damgalamayı azaltmaya ve daha kapsayıcı teşhis ve müdahale araçlarının geliştirilmesine yardımcı olmaya hizmet eder.

Vajinal Lavaj Kullanarak Kemirgen Östrus Döngüsünün İzlenmesi: Normal Bir Döngü Olarak Böyle Bir Şey Yok

Burada, bir hayvan kuluçka makinesinde bebek marmosetlerini yetiştirmek için bir el yetiştirme yöntemini açıklıyoruz. Bu yöntem, farklı doğum sonrası ortamlarda yetiştirilen benzer genetik geçmişe sahip marmoset bebeklerin gelişimini inceleme fırsatı sağlayan marmoset bebeklerin hayatta kalma oranını büyük ölçüde artırır.

Bebek Marmosetleri için El Yetiştirme Yöntemi

Luteinize edici hormon (LH) pulsatilitesi, üreme fonksiyonunun ayırt edici özelliğidir. Seri otomatik kan alımına bağlı belirli nöronal popülasyonların uzaktan aktivasyonu için bir protokol açıklıyoruz. Bu teknik, bilinçli serbest hareket eden ve rahatsız edilmemiş hayvanlarda zamanlanmış hormonal modülasyona, çoğullamaya ve LH seviyeleri üzerindeki manipülasyon etkilerini en aza indirmeye izin verir.

Farelerde Dolaşımdaki Luteinize Edici Hormonu İndüklemek ve Ölçmek için Otomatik Kan Örneklemesi ile Birleştirilmiş Uzaktan Nöronal Aktivasyon

Burada, marmoset sendromunun (WMS, inflamatuar bağırsak hastalığı (IBD) benzeri hastalık olarak da bilinir) traneksamik asit ile israf edilmesi için modifiye tedavi yöntemlerini açıklıyoruz. Ayrıca terapötik ajanların oral, subkutan ve intravenöz olarak nasıl uygulanacağını da sunuyoruz.

Marmoset Sendromunun Traneksamik Asit ile Zayıflatılmasında Tedavi Yöntemlerinin Modifikasyonu ve Destekleyici Önlemler

Yumurtlama öncesi dönemde yumurtalık kan akışındaki değişiklikler yumurtlama için gereklidir. Doppler ultrasonografi insanlarda ve büyük hayvanlarda over hemodinamiği ve perfüzyonunu değerlendirmek için kullanılmıştır. Farelerde yumurtlama öncesi ve periovulatuar fazlarda yumurtalık hemodinamisini değerlendirmek için Doppler ultrasonografi uygulamak için bir protokol sunulmuştur.

Farelerde Canlı Görüntüleme ve Ovaryan Vasküler Fonksiyonun Ölçülmesi için Doppler Ultrasonografi

Öğrenin marmosetlerde kan örneklemesi ve hormon ölçümü ile yumurtalık döngüsü evresini belirleme yöntemini. Bu protokol progesteron, östradiol ve koriyonik gonadotropin düzeylerini ölçerek ovulasyon tahminini iyileştirir.

Marmosetlerde yumurtalık döngüsündeki evreyi belirlemek için kan örneklemesi ve hormon ölçümü

Daha fazla video keşfet