Name: RGD İşlevselleştirilmiş Avidin-Biotin Bağları Kullanarak Trombosit Migrasyonunu İncelemek İçin Bir İn Vitro Test (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-11-08T12:30:00.000+00:00
Duration: 5 min 43 s
Description: Keşfedin RGD işlevselleştirilmiş avidin-biotin bağları kullanarak trombosit migrasyonunu in vitro incelemeyi. Bu yöntem, hücre biyolojisinde mekanotransdüksiyon ve adezif mikroçevre etkileşimlerini anlamak için güvenilir bir yaklaşım sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

<meta charset="utf8"></head><body>Üç katmanlı bir kaplama sistemi kullanarak tek trombosit göçünün görüntülenmesi

<ol><li>Jackson, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Arterial+thrombosis--insidious%2C+unpredictable+and+deadly%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Med%22%5BJournal%5D)">Arterial thrombosis--insidious, unpredictable and deadly.</a> Nat Med. 17, 1423-1436 (2011).</li>
<li>Kaiser, R., Escaig, R., Nicolai, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hemostasis+without+clot+formation%3A+how+platelets+guard+the+vasculature+in+inflammation%2C+infection%2C+and+malignancy%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Hemostasis without clot formation: how platelets guard the vasculature in inflammation, infection, and malignancy.</a> Blood. 142 (17), 1413-1425 (2023).</li>
<li>Gaertner, F., Massberg, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Patrolling+the+vascular+borders%3A+Platelets+in+immunity+to+infection+and+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Immunol%22%5BJournal%5D)">Patrolling the vascular borders: Platelets in immunity to infection and cancer.</a> Nat Rev Immunol. 19 (12), 747-760 (2019).</li>
<li>Gaertner, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Migrating+platelets+are+mechano-scavengers+that+collect+and+bundle+bacteria%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Migrating platelets are mechano-scavengers that collect and bundle bacteria.</a> Cell. 171 (6), 1368-1382.e23 (2017).</li>
<li>Gros, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single+platelets+seal+neutrophil-induced+vascular+breaches+via+GPVI+during+immune-complex-mediated+inflammation+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Single platelets seal neutrophil-induced vascular breaches via GPVI during immune-complex-mediated inflammation in mice.</a> Blood. 126 (8), 1017-1026 (2015).</li>
<li>Nicolai, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vascular+surveillance+by+haptotactic+blood+platelets+in+inflammation+and+infection%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Comm%22%5BJournal%5D)">Vascular surveillance by haptotactic blood platelets in inflammation and infection.</a> Nature Comm. 11, 5778(2020).</li>
<li>Kaiser, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanosensing+via+a+GpIIb%2FSrc%2F14-3-3zeta+axis+critically+regulates+platelet+migration+in+vascular+inflammation%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Mechanosensing via a GpIIb/Src/14-3-3zeta axis critically regulates platelet migration in vascular inflammation.</a> Blood. 141 (24), 2973-2992 (2023).</li>
<li>Sarkar, A., LeVine, D. N., Kuzmina, N., Zhao, Y., Wang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell+migration+driven+by+self-generated+integrin+ligand+gradient+on+ligand-labile+surfaces%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Biol%22%5BJournal%5D)">Cell migration driven by self-generated integrin ligand gradient on ligand-labile surfaces.</a> Curr Biol. 30 (20), 4022-4032 (2020).</li>
<li>Hynes, R. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Integrins%3A+Bidirectional%2C+allosteric+signaling+machines%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Integrins: Bidirectional, allosteric signaling machines.</a> Cell. 110 (6), 673-687 (2002).</li>
<li>Kechagia, J. Z., Ivaska, J., Roca-Cusachs, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Integrins+as+biomechanical+sensors+of+the+microenvironment%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Mol+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Integrins as biomechanical sensors of the microenvironment.</a> Nat Rev Mol Cell Biol. 20, 457-473 (2019).</li>
<li>Shattil, S. J., Newman, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Integrins%3A+Dynamic+scaffolds+for+adhesion+and+signaling+in+platelets%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Integrins: Dynamic scaffolds for adhesion and signaling in platelets.</a> Blood. 104 (6), 1606-1615 (2004).</li>
<li>Yuan, C., Chen, A., Kolb, P., Moy, V. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Energy+landscape+of+streptavidin-biotin+complexes+measured+by+atomic+force+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Biochemistry%22%5BJournal%5D)">Energy landscape of streptavidin-biotin complexes measured by atomic force microscopy.</a> Biochemistry. 39 (33), 10219-10223 (2000).</li>
<li>Florin, E. L., Moy, V. T., Gaub, H. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adhesion+forces+between+individual+ligand-receptor+pairs%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Adhesion forces between individual ligand-receptor pairs.</a> Science. 264 (5157), 415-417 (1994).</li>
<li>Merkel, R., Nassoy, P., Leung, A., Ritchie, K., Evans, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Energy+landscapes+of+receptor-ligand+bonds+explored+with+dynamic+force+spectroscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Energy landscapes of receptor-ligand bonds explored with dynamic force spectroscopy.</a> Nature. 397, 50-53 (1999).</li>
<li>Jurchenko, C., Chang, Y., Narui, Y., Zhang, Y., Salaita, K. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Integrin-generated+forces+lead+to+streptavidin-biotin+unbinding+in+cellular+adhesions%5BTitle%5D)+AND+%22Biophys+J%22%5BJournal%5D)">Integrin-generated forces lead to streptavidin-biotin unbinding in cellular adhesions.</a> Biophys J. 106 (7), 1436-1446 (2014).</li>
<li>Fan, S., Lorenz, M., Massberg, S., Gaertner, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Platelet+migration+and+bacterial+trapping+assay+underflow%5BTitle%5D)+AND+%22Bio-Protocol%22%5BJournal%5D)">Platelet migration and bacterial trapping assay underflow.</a> Bio-Protocol. 8 (18), e3018(2018).</li>
<li>Lauffenburger, D. A., Horwitz, A. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell+migration%3A+A+physically+integrated+molecular+process%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Cell migration: A physically integrated molecular process.</a> Cell. 84 (3), 359-369 (1996).</li>
<li>Palecek, S. P., Loftus, J. C., Ginsberg, M. H., Lauffenburger, D. A., Horwitz, A. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Integrin-ligand+binding+properties+govern+cell+migration+speed+through+cell-substratum+adhesiveness%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Integrin-ligand binding properties govern cell migration speed through cell-substratum adhesiveness.</a> Nature. 385, 537(1997).</li>
<li>Zhao, Y., Wetter, N. M., Wang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Imaging+integrin+tension+and+cellular+force+at+submicron+resolution+with+an+integrative+tension+sensor%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Imaging integrin tension and cellular force at submicron resolution with an integrative tension sensor.</a> J Vis Exp. (146), e59476(2019).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Adenozin 5&asal;-difosfat sodyum tuzu (ADP)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A2754</td><td></td></tr><tr><td>Alexa Fluor 594 falloidin&nbsp;</td><td>Thermofisher</td><td>A12381</td><td></td></tr><tr><td>Kan sayacı</td><td>Sysmex</td><td>XN-1000</td><td></td></tr><tr><td>Dipsiz 6 kanallı yapışkan slayt</td><td>IBIDI, yapışkan slaytlar VI0.4</td><td>80608</td><td></td></tr><tr><td>Santrifüj</td><td>Eppendorf&nbsp;</td><td>5804</td><td></td></tr><tr><td>Konfokal mikroskop</td><td>Zeiss</td><td>LSM880</td><td></td></tr><tr><td>siklo [Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys (Biotin-PEG-PEG)]</td> <td>Peptit uluslararası</td><td>PCI-3697-PI</td><td></td></tr><tr><td>FACS tüpleri</td><td>Corning Markası&nbsp;</td><td></td><td></td>352052</tr><tr><td>FITC konjugat nötralidin</td><td>Thermofisher</td><td>A2662</td><td></td></tr><tr><td>Formaldehit&nbsp;</td><td>Thermofisher</td><td>28908</td><td></td></tr><tr><td>HEPES çözeltisi</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>H0887</td><td></td></tr><tr><td>Faz kontrastı ve epifloresan mikroskop</td><td>Olympus</td><td>IX83</td><td></td></tr><tr><td>Plazma temizleyici</td><td>Diener</td><td>116531</td><td></td></tr><tr><td>PLL(20)-g[3.5]-PEG(2)/PEG(3.4)-biotin(%50)</td><td>Susos</td><td>PLL(20)-g[3.5]-PEG(2)/PEG(3.4)-biyotin (%50)</td><td></td></tr>Poli<tr><td>(L-lizin)- greft-poli (etilen glikol) kopolimer</td><td>Susos</td><td>PLL (20) -g [3.5] -PEG (2)</td><td></td></tr> <tr><td>Prostaglandin I2 sodyum tuzu (PGI2)</td> <td>Abcam</td><td>ab120912</td><td></td></tr><tr><td>Sonicator</td><td>BANDELIN</td><td>SONNOREX RK514M</td><td></td></tr><tr><td>Ttriton X-100 %20 v/v</td><td>Cayman Chemical&nbsp;</td><td></td><td></td>600217</tr><tr><td>U46619</td><td>Enzo Yaşam Bilimleri</td><td>BML-PG023-0001)</td><td></td></tr></tbody></table>

rgd İşlevselleştirilmiş avidin-biotin bağları kullanarak trombosit migrasyonunu İncelemek İçin bir İn vitro test

An In Vitro Assay to Study Platelet Migration Using RGD-Functionalized Avidin-Biotin Tethers

Aktive edilmiş trombositler, PLL-PEG-biotin-nötravidin-FITC-biotin-cRGD kaplı slaytlara kolayca yapışır ve yayılır (Şekil 1C ve Şekil 2A; 0 dk ve 5 dk) ve daha sonra ön kenarda bir lamellipodyum oluşturarak polarize olur (Şekil 2A; 10 dk). Bu işlem sırasında, psödonükleus (trombositlerin merkezindeki koyu renkli alan) trombositin merkezinden arkasına doğru hareket etmiştir (Şekil 2A). Polarize trombositler daha sonra belirgin bir yönlülük olmadan göç etmeye başlar (Şekil 2A; 15 dakika ve 20 dakika ve Şekil 2B). PLL-PEG-biotin-nötravidin-FITC-biotin-cRGD kaplamalar üzerinde göç eden trombositlerin, göç yolu boyunca floresan yoğunluğundaki azalma ile kanıtlandığı gibi, nötravidin-FITC-biotin-PLL-PEG bağını kırabildiğini gözlemledik (Şekil 1C ve Şekil 2A,B). Ayrıca, bozulmuş nötravidin-FITC-biotin-cRGD kompleksi trombosit yüzeyinde birikir (Şekil 2A,B). Bu fenomen, göç eden trombositlerin fibrinojeni substrattan uzaklaştırdığı ve açık kanal sistemi (OCS) içinde biriktirdiği önceki bulgulara benzer4.
Ligand yoğunluğunun trombosit göçünü nasıl etkilediğini araştırmak için, cRGD yoğunluğu, ilk kaplama tabakasında PLL-PEG-biyotin'in PLL-PEG'ye oranı değiştirilerek ayarlandı. Bu veriler, fare trombositlerinin %2.5'lik bir PLL-PEG-biotin konsantrasyonunda optimal migrasyon elde ettiğini ortaya koymaktadır. Migrasyon, hem daha düşük (% 1) hem de daha yüksek (% 10) PLL-PEG-biyotin konsantrasyonlarında azalır (Şekil 3A, B). Göç davranışındaki bu substrata bağlı değişikliklere trombosit morfolojisindeki değişiklikler eşlik eder (Şekil 3C). Düşük ligand yoğunluklarında (% 1), düşük öngörülen trombosit alanı ve çevresi ile kanıtlandığı gibi trombositler yeterince yayılmaz (Şekil 3C). Bu, yetersiz integrin aktivasyonu ve dıştan içe sinyalleşme7'yi önerir. Sonuç olarak, trombositler cRGD ligandlarına kuvvet uygulayamaz, substratı yeniden şekillendiremez ve göç etmez (Şekil 3A,B).
Ara ligand yoğunluğunda (%2.5), trombosit alanı ve çevresinde önemli bir artış vardır (Şekil 3C). Trombositler etkili bir şekilde yayılır, kararsız cRGD ligandlarını mekanik olarak bozar ve göç eder (Şekil 3A,B). Bununla birlikte, yüksek ligand yoğunluklarında (% 10), yayılma artmasına rağmen, trombositler polarize olmaz, bu da azaltılmış bir en-boy oranı ile gösterilir (Şekil 3C). Bu koşullar altında, trombositler yapışkan substrata bağlı kalır ve kararsız cRGD ligandlarını kıramadıkları için göç etmezler (Şekil 3A,B).
Bu bulgular, trombosit göçünün kritik olarak substratın yapışkan özelliklerine bağlı olduğunu göstermektedir. Trombositler ancak yapışkan ligandlarla yeterince etkileşime girdiklerinde ve aynı anda yapışkan substratın 4,6,7,8 gerilim toleransının üstesinden gelmek için yeterince güçlü çekiş kuvvetleri ürettiğinde göç edebilir.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66757/66757fig01.jpg"> 
Şekil 1: Kaplama prosedürü ve trombosit-substrat etkileşiminin canlı görüntülenmesi. (A) Monte edilmiş odanın fotoğrafı. (B) Protokolün esası. Sol: Kaplamanın şeması. Plazma ile muamele edilmiş cam lameller üç kat ile kaplanmıştır. İlk katman, PLL-PEG ve PLL-PEG-biotin karışımıdır (PLL-PEG omurgası hücrelere karşı inerttir ve spesifik olmayan bağlanmayı önler). İkinci katman nötravidin-FITC'dir ve üçüncü katman biotin-cRGD'dir. Neutravidin-FITC, PLL-PEG-biotin ve biotin-cRGD arasında köprü kurar. Trombositler, plazma zarındaki integrinler aracılığıyla biotin-cRGD'ye bağlanır. Sağ: Trombosit integrinleri tarafından biotin-avidin bağlanmasının açılmasının gösterimi. Trombositler, integrin-cRGD bağlantısı yoluyla substrat üzerine kuvvet uygular ve üst cRGD-biotin - nötravidin-FITC - bağını veya alt nötravidin-FITC - PLL-PEG-biotin - bağını koparır. Nötravidin-FITC ve biotin-PLL-PEG arasındaki alt bağın yırtılması, floresan sinyalinin azalmasına neden olurken, biotin-cRGD ve nötravidin-FITC arasındaki üst bağın yırtılması olmaz. (C) Trombosit göçünü ve kararsız cRGD-ligandlarının tükenmesini gösteren zaman serileri. Floresan azalmış alanlar, trombositlerin göç izlerini gösterir (ayrıca bkz. Şekil 2A) ve artmış floresan alanları, göç eden trombositler üzerinde FTIC-nötravidin-biotin-cRGD birikimini gösterir. Ölçek çubuğu: 5 μm. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66757/66757fig01large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66757/66757fig02.jpg"> 
Şekil 2: Yeniden modellenmiş substrat tarafından kodlanan trombosit göçünün immünofloresan görüntülemesi. (A) Tek trombosit göçünün temsili film sekansı. Solda: Göç eden trombositlerin faz kontrast görüntüleri. Trombositler, ön kenarda bir lamellipodyum oluşturarak polarize olur ve ardından göç eder. Sağda: Neutravidin-FITC substrattan çıkarıldı ve trombosit göçünün "ayak izi" bırakıldı. Yırtılmış cRGD-biotin-nötravidin-FITC, göç eden trombositlerin merkezinde birikir. (B) Ligand kararsız cRGD-biotin-avidin kaplamalarda trombosit göçünün temsili görüntüleri. Üst: Phalloidin (Alexa FluorTM 594) ile boyanmış trombositler, büyük lamellipodyum oluşumu ve göç eden trombositleri anımsatan polarize bir şekil gösterdi. Göç eden trombositler, cRGD-biotin-nötravidin-FITC bağını koparır ve azaltılmış FITC sinyali ile gösterilen substrat üzerinde göç yolları oluşturur. Alt: daha büyük büyütme ile kırpılmış görüntü. (C) Fiji'de göç yolları sarı çizgilerle manuel olarak çizildi. Ölçek çubukları: 5 μm. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66757/66757fig02large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66757/66757fig03.jpg"> 
Şekil 3: PLL-PEG-biyotinin PLL-PEG'e oranı, trombosit göçünü ve şeklini belirler. (A) %1, %2.5 ve PLL-PEG-biyotin kaplamalarda trombositlerin temsili görüntüleri, ölçek çubuğu: 5μm. (B) Trombosit yapışması, migrasyon verimliliği ve migrasyon mesafesinin ölçülmesi, n = 4 bağımsız deney; Ortalama/SD; Tek yönlü ANOVA/Tukey; **p &lt; 0.01; p &lt; 0.001; p &lt; 0.0001, ns: önemli değil (C) Trombosit şekli tanımlayıcılarının nicelleştirilmesi (alan, çevre, dairesellik ve en boy oranı), n = 4 bağımsız deney; Ortalama/Min-Maks; Tek yönlü ANOVA/Tukey; **p &lt; 0.01; p &lt; 0.001; P &lt; 0.0001, NS: Önemli değil. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66757/66757fig03large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>

RGD İşlevselleştirilmiş Avidin-Biotin Bağları Kullanarak Trombosit Migrasyonunu İncelemek İçin Bir İn Vitro Test

Despite being anucleated cell fragments, platelets are now widely recognized for their multifaceted abilities. Not only do they form blood clots to ...

an-vitro-assay-to-study-platelet-migration-using-rgd-functionalized

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Trombosit adezyon kaskad kayma akışı varlığında yer alır, konvansiyonel (statik) iyi plaka deneyleri için bir faktör değildir. Bu makale, fizyolojik kesme akış koşulları taklit etmek için iyi bir mikroakışkan plaka formatı kullanan bir trombosit agregasyonu tahlil raporları.

Mikroakışkan Akış Hücreler kullanarak Akış altında Trombosit Yapışma ve toplama

Hem molekülleri etkileşen hücrelerin yüzeylerinde demirlemiş olan reseptör-ligand etkileşimi kinetiği ölçmek için bir yapışma frekans tahlil açıklanmıştır. Bu mekanik tabanlı test mikropipet basınçlı bir insan adezyon sensörü olarak kırmızı kan hücresi ve integrin αLβ2 ve hücrelerarası adezyon molekülü-1 reseptörleri ve ligandlar etkileşim olarak kullanarak örneklenir.

Yapışma için Frekans Testi Yerinde</emHücre-Hücre Arayüz Çapraz Junctional Moleküler Etkileşimler> Kinetik Analizi

Bu video, megakaryositlerin farklılaşması ve trombosit oluşumu için bir teknik göstermektedir. İnsan göbek kordonu kanından izole edilen hematopoietik kök progenitör hücreler, trombopoietin varlığında olgun megakaryositlere farklılaşır. Olgun megakaryositler, tek tek trombositlere yol açan proplateletler adı verilen sitoplazmik uzantılar üretir.

Megakaryositlerin Farklılaşması ve Trombosit Oluşumu için İn Vitro Yöntem

Burada vasküler inflamasyon ve canlı farelerde trombüs oluşumu sırasında aktive endotel üzerindeki heterotipik trombosit-nötrofil etkileşimleri görselleştirmek için floresan intravital mikroskobu deneysel bir tekniktir rapor. Bu mikroskobik teknoloji vasküler hastalığın moleküler mekanizmasını incelemek ve patofizyolojik durumlardaki farmakolojik ajanları test için değerli olacaktır.

Canlı Fare Damar İltihabı ve trombüs oluşumu sırasında Activated Endotel üzerinde heterotypic Trombosit nötrofil Etkileşimleri Gerçek zamanlı Görüntüleme

Bakterilerin kesme gerilimi altındaki kan damarları ile etkileşimini incelemek için, vasküler yapışmaya katkıda bulunan bakteri ve konak faktörlerini incelemeye izin veren bir akış odası ve in vivo mezenterik intravital mikroskopi modeli tanımlanmıştır.

In Vitro ve İn Vivo Modeli Gemi Duvar Altında Akış Koşulları Bakteriyel Yapışma Eğitim için

Bu çalışma, trombosit yapışması, yayılması ve akış altında salgı çalışması için bir floresan mikroskopi tabanlı yöntem açıklanmaktadır. Bu çok yönlü platform tromboz ve hemostaz üzerine mekanik araştırma için trombosit fonksiyonunun araştırılmasını sağlar.

Akım altında Trombosit Degranülasyonu ve Salgılamanın Canlı Hücreli Görüntüleme

Lökosit heyecanla damar hücreleri ve trombositlerin damar duvar yaralanma sonra veya enflamasyon sırasında etkileşim. Burada, lökosit ve hücresel eşleri arasındaki etkileşimler altında yatan moleküler mekanizmaları karakterize etmek için basit bir laminar akış tabanlı tahlil açıklayın.

Lökosit işe kültürlü damar hücreleri ve yapışık trombositler üzerinde araştırmak için Laminar akış tabanlı deneyleri

Koni plaka Viskozimetre kullanılarak trombosit yüzey reseptörlerine Tekdüzen kesme uygulamak için bir çözüm içi yöntem açıklanmaktadır. Bu yöntem, diğer hücre türlerine ve hücre parçalara kesme uygulamak için daha geniş ölçüde kullanılabilir ve belirli bir ligand-reseptör çifti hedeflemek gerekmez.

Koni-plaka viskozimetre ile ınsan trombosit ve hücre yüzeyi reseptörleri için Tekdüzen kesme tahlil

Prokoagülan trombosit oluşumu, artmış tromboz riski ile ilişkilendirilmiştir. Burada, prokoagülan trombositlerin ayırt edici özellikleri olan fosfatidilserin ve mikrovezikül salınımının maruziyetini ölçmeyi amaçlayan, yıkanmış trombositleri insan kanından izole etmek için kesin bir protokol sunulmaktadır.

İnsan Saflaştırılmış Trombositlerinden Fosfatidilserin Maruziyeti ve Mikrovezikül Salınımının Ölçülmesiyle Prokoagülan Trombosit Karakterizasyonu

Akış altındaki trombosit fonksiyonu değerlendirilebilir ve simüle edilmiş hemostatik resüsitasyon, travma ve transfüzyon tıbbında uygulamaları olan bir mikroakışkan cihaz kullanılarak modellenebilir.

Trombosit Fonksiyonunun Değerlendirilmesinde Mikroakışkanlar

Keşfedin RGD işlevselleştirilmiş avidin-biotin bağları kullanarak trombosit migrasyonunu in vitro incelemeyi. Bu yöntem, hücre biyolojisinde mekanotransdüksiyon ve adezif mikroçevre etkileşimlerini anlamak için güvenilir bir yaklaşım sunar.

RGD İşlevselleştirilmiş Avidin-Biotin Bağları Kullanarak Trombosit Migrasyonunu İncelemek İçin Bir İn Vitro Test

Daha fazla video keşfet