Name: Mezenkimal Kök Hücreler ve Retinal Pigment Epiteli Arasında İn Vitro Tünelleme Nanotüpleri Yoluyla Mitokondriyal Transfer (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-10-04T13:55:00.000+00:00
Duration: 6 min 50 s
Description: Öğrenin, mezenkimal kök hücreler ve retinal pigment epiteli arasında tünelleme nanotüpleri aracılığıyla çift yönlü mitokondriyal transferi incelemeyi. Bu yöntem, hasarlı retinal hücrelerin kurtarılması için hücresel iletişimi anlamaya katkı sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<meta charset="utf8"></head><body>MSC ve ARPE19 Ko-Kültürlerinde Mitokondriyal Transferin İncelenmesi

<ol><li>Caprara, C., Grimm, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((From+oxygen+to+erythropoietin%3A+Relevance+of+hypoxia+for+retinal+development%2C+health+and+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Prog+Retin+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">From oxygen to erythropoietin: Relevance of hypoxia for retinal development, health and disease.</a> Prog Retin Eye Res. 31 (1), 89-119 (2012).</li>
<li>Ferrington, D. A., Fisher, C. R., Kowluru, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitochondrial+defects+drive+degenerative+retinal+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Mol+Med%22%5BJournal%5D)">Mitochondrial defects drive degenerative retinal diseases.</a> Trends Mol Med. 26 (1), 105-118 (2020).</li>
<li>Spees, J. L., Olson, S. D., Whitney, M. J., Prockop, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitochondrial+transfer+between+cells+can+rescue+aerobic+respiration%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Mitochondrial transfer between cells can rescue aerobic respiration.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 103 (5), 1283-1288 (2006).</li>
<li>Wei, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitochondrial+transfer+from+bone+mesenchymal+stem+cells+protects+against+tendinopathy+both+in+vitro+and+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Res+Ther%22%5BJournal%5D)">Mitochondrial transfer from bone mesenchymal stem cells protects against tendinopathy both in vitro and in vivo.</a> Stem Cell Res Ther. 14 (1), 104(2023).</li>
<li>Borcherding, N., Brestoff, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+power+and+potential+of+mitochondria+transfer%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">The power and potential of mitochondria transfer.</a> Nature. 623 (7986), 283-291 (2023).</li>
<li>Liu, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intercellular+mitochondrial+transfer+as+a+means+of+tissue+revitalization%5BTitle%5D)+AND+%22Signal+Transduct+Target+Ther%22%5BJournal%5D)">Intercellular mitochondrial transfer as a means of tissue revitalization.</a> Signal Transduct Target Ther. 6 (1), 65(2021).</li>
<li>Rustom, A., Saffrich, R., Markovic, I., Walther, P., Gerdes, H. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nanotubular+highways+for+intercellular+organelle+transport%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Nanotubular highways for intercellular organelle transport.</a> Science. 303 (5660), 1007-1010 (2004).</li>
<li>Cordero Cervantes, D., Zurzolo, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Peering+into+tunneling+nanotubes-the+path+forward%5BTitle%5D)+AND+%22Embo+j%22%5BJournal%5D)">Peering into tunneling nanotubes-the path forward.</a> Embo j. 40 (8), e105789(2021).</li>
<li>Qin, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+functions%2C+methods%2C+and+mobility+of+mitochondrial+transfer+between+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Oncol%22%5BJournal%5D)">The functions, methods, and mobility of mitochondrial transfer between cells.</a> Front Oncol. 11, 672781(2021).</li>
<li>Jiang, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bioenergetic+crosstalk+between+mesenchymal+stem+cells+and+various+ocular+cells+through+the+intercellular+trafficking+of+mitochondria%5BTitle%5D)+AND+%22Theranostics%22%5BJournal%5D)">Bioenergetic crosstalk between mesenchymal stem cells and various ocular cells through the intercellular trafficking of mitochondria.</a> Theranostics. 10 (16), 7260-7272 (2020).</li>
<li>Domhan, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intercellular+communication+by+exchange+of+cytoplasmic+material+via+tunneling+nano-tube+like+structures+in+primary+human+renal+epithelial+cells%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Intercellular communication by exchange of cytoplasmic material via tunneling nano-tube like structures in primary human renal epithelial cells.</a> PLoS One. 6 (6), e21283(2011).</li>
<li>Zhang, J., Zhang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Membrane+nanotubes%3A+Novel+communication+between+distant+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+China+Life+Sci%22%5BJournal%5D)">Membrane nanotubes: Novel communication between distant cells.</a> Sci China Life Sci. 56 (11), 994-999 (2013).</li>
<li>Cheng, X. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+ipscs+derived+astrocytes+rescue+rotenone-induced+mitochondrial+dysfunction+and+dopaminergic+neurodegeneration+in+vitro+by+donating+functional+mitochondria%5BTitle%5D)+AND+%22Transl+Neurodegener%22%5BJournal%5D)">Human ipscs derived astrocytes rescue rotenone-induced mitochondrial dysfunction and dopaminergic neurodegeneration in vitro by donating functional mitochondria.</a> Transl Neurodegener. 9 (1), 13(2020).</li>
<li>Ahmad, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Miro1+regulates+intercellular+mitochondrial+transport+%26+enhances+mesenchymal+stem+cell+rescue+efficacy%5BTitle%5D)+AND+%22Embo+J%22%5BJournal%5D)">Miro1 regulates intercellular mitochondrial transport & enhances mesenchymal stem cell rescue efficacy.</a> Embo J. 33 (9), 994-1010 (2014).</li>
<li>Li, C. J., Chen, P. K., Sun, L. Y., Pang, C. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhancement+of+mitochondrial+transfer+by+antioxidants+in+human+mesenchymal+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Oxid+Med+Cell+Longev%22%5BJournal%5D)">Enhancement of mitochondrial transfer by antioxidants in human mesenchymal stem cells.</a> Oxid Med Cell Longev. 2017, 8510805(2017).</li>
<li>Paliwal, S., Chaudhuri, R., Agrawal, A., Mohanty, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regenerative+abilities+of+mesenchymal+stem+cells+through+mitochondrial+transfer%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biomed+Sci%22%5BJournal%5D)">Regenerative abilities of mesenchymal stem cells through mitochondrial transfer.</a> J Biomed Sci. 25 (1), 31(2018).</li>
<li>Lin, T. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitochondrial+transfer+of+wharton%27s+jelly+mesenchymal+stem+cells+eliminates+mutation+burden+and+rescues+mitochondrial+bioenergetics+in+rotenone-stressed+melas+fibroblasts%5BTitle%5D)+AND+%22Oxid+Med+Cell+Longev%22%5BJournal%5D)">Mitochondrial transfer of wharton's jelly mesenchymal stem cells eliminates mutation burden and rescues mitochondrial bioenergetics in rotenone-stressed melas fibroblasts.</a> Oxid Med Cell Longev. 2019, 9537504(2019).</li>
<li>Hu, X., Duan, T., Wu, Z., Xiong, Y., Cao, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intercellular+mitochondria+transfer%3A+A+new+perspective+for+the+treatment+of+metabolic+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Biochim+Biophys+Sin+%28Shanghai%29%22%5BJournal%5D)">Intercellular mitochondria transfer: A new perspective for the treatment of metabolic diseases.</a> Acta Biochim Biophys Sin (Shanghai). 53 (7), 958-960 (2021).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>% 0.25 Tripsin-EDTA</td><td>Gibco</td><td>25200-056</td><td></td></tr><tr><td>%4 paraformaldehit</td><td>Solarbio</td><td>P1110</td><td></td></tr><tr><td>6 oyuklu plaka</td><td>NEST</td><td>703001</td><td></td></tr><tr><td>15 mL santrifüj tüpü</td><td>BD Falcon</td><td>352097</td><td></td></tr><tr><td>24 oyuklu plaka</td><td>NEST</td><td>702001</td><td></td></tr><tr><td>ARPE19 hücreleri</td><td>ATCC</td><td>CRL-2302</td><td>Hücre hatları</td></tr><tr><td>Sığır serum albümini (BSA)</td><td>Beyotime</td><td>ST025</td><td></td></tr><tr><td>CellTrace menekşe</td><td>Invitrogen</td><td>C34557</td><td></td></tr><tr><td>Kapak slaytı</td><td>NEST</td><td>801007</td><td></td></tr><tr><td>DMSO</td><td>sigma</td><td>D2650</td><td></td></tr><tr><td>DPBS</td><td>Gibco</td><td>C141905005BT</td><td></td></tr><tr><td>DMEM/F-12-GlutaMAX</td><td>Gibco</td><td>10565-042</td><td></td></tr><tr><td>Fetal Sığır Serum (FBS)</td><td>VivaCell</td><td>C04002-500</td><td></td></tr><tr><td>MSC'ler</td><td></td><td></td><td></td> 345789</tr><tr><td></td><td></td><td>FluorSave Reaktifi</td><td>Millipore</td></tr> Nuwacell RC02003 Hücre hatları <tr><td>ncMission</td><td>Shown</td><td>RP02010</td><td></td></tr><tr><td>Pen Strep</td><td>Gibco</td><td>15140-122</td><td></td></tr><tr><td>pCT-Mito-GFP</td><td>SBI</td><td>CYTO102-PA-1</td><td>Plasmid; Kimden&nbsp; https://www.systembio.com/mitochondria-cyto-tracer-pct-mito-gfp-cmv</td></tr><tr><td>Puromycin</td><td>MCE</td><td>HY-B1743A</td><td></td></tr><tr><td>Pipet</td><td>Axygen</td><td>TF-1000-RS</td><td></td></tr><tr><td>Phalloidin</td><td>Invitrogen</td><td>A22287</td><td></td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>Solarbio</td><td>T8200</td><td></td></tr><tr><td>Transwell plakası</td><td>Corning</td><td>3470</td><td></td></tr></tbody></table>

mezenkimal kök hücreler ve retinal pigment epiteli arasında İn vitro tünelleme nanotüpleri yoluyla mitokondriyal transfer

Mitochondrial Transfer Via Tunneling Nanotubes Between Mesenchymal Stem Cells and Retinal Pigment Epithelium In Vitro

Mezenkimal kök hücrelerin (MSC) ve ARPE19 hücrelerinin doğrudan ko-kültürünü gösteren şematik diyagram Şekil 1'de gösterilmiştir. Donör hücreler olarak mito-GFP'yi eksprese etmek üzere tasarlanmış MSC'ler ve alıcı hücreler olarak menekşe işaretli sitoplazmik membranlara sahip ARPE19-mito-RFP hücreleri 1: 1 oranında birlikte kültürlendi. 24 saatlik bir ko-kültür periyodundan sonra, hücreler falloidin için boyandı ve konfokal mikroskopi kullanılarak incelendi. Elde edilen hücre popülasyonları arasında MSC-mito-GFP hücreleri, ARPE19-mito-RFP hücreleri, mito-GFP içeren ARPE19-mito-RFP hücreleri ve mito-RFP içeren MSC-mito-GFP hücreleri vardı. Özellikle, ARPE19 hücrelerinde mito-GFP'nin ve MSC'lerde mito-RFP'nin varlığı, mitokondriyal çift yönlü transferi önerdi.
TNT oluşumunun spesifik detayları Şekil 2'de sunulmuştur. Bu yapılar, aynı tipteki hücreler arasında (Şekil 2A-C) hücreler arası bağlantılar kurabildiği gibi, farklı tipteki hücreler arasında da (Şekil 2D) hücreler arası bağlantılar kurabilir. Tünel nanotüpleri (TNT'ler), bitişik hücreleri birbirine bağlayan kanallar görevi görür ve sitoplazmik sürekliliği ve mitokondrinin taşınmasını kolaylaştıran açık uçlara sahip belirgin bir F-aktin açısından zengin zar yapısı sergiler. Z ekseni görüntülemeyi kullanarak, TNT'lerin hücre dışı matrise sıkıca bağlı olmadığı, bunun yerine kültür ortamı içinde asılı kaldığı ve böylece onları geleneksel hücresel çıkıntılardan ayırdığı açıktır. Mitokondriyal transfer, mor pozitif ARPE19 hücrelerinin MSC'lerden kaynaklanan mitokondriyi gösteren dağınık, yeşil noktalı floresan sergilediği Şekil 3'te belirgindir (Şekil 3A). Kırmızı noktalı floresan içeren mor negatif MSC'ler, ARPE19 hücrelerinden mitokondriyal transferi temsil eder (Şekil 3B). Şekil 4, TNT yoluyla mitokondriyal transferin daha fazla ayrıntısını görebileceğimiz süper çözünürlüklü görüntüleme altında TNT oluşumunu ve mitokondriyal transferi göstermektedir. Video 1, TNT yoluyla mitokondriyal taşınmanın dinamiklerini göstermektedir.
Mitokondriyal transfer için ön koşulun, mitokondriyal sekresyon ve alımdan ziyade TNT gibi fiziksel temas olduğunu daha fazla göstermek için, daha önce bildirilen bir ko-kültür yöntemi10 kullandık. Şekil 5A'da gösterildiği gibi, MSC'ler ve ARPE19 hücreleri, sırasıyla bir transwell plakasının üst ve alt odalarına ekildi. MSC'ler ve ARPE19 hücreleri arasındaki doğrudan teması bloke eden ancak mitokondrinin geçişine izin veren 0.4 μm gözenekli bir filtre ile ayrıldılar. 24 saatlik ko-kültürden sonra, alt odadaki ARPE19 hücreleri test edildi ve üst odadaki MSC'lerden çok az mito-GFP gözlendi (Şekil 5B). Bu sonuçlar, mitokondriyal transferin MSC'ler ve ARPE19 hücreleri arasında doğrudan temas gerektirdiğini göstermektedir.
Sonuç olarak, TNT oluşumunun ve mitokondriyal transferin nicelleştirilmesi gerçekleştirildi ve karşılık gelen sonuçlar Şekil 6'da gösterildi. MSC'ler, ARPE19 hücrelerinden önemli ölçüde daha fazla mitokondri bağışlama yeteneğine sahipti (p = 0.0286). Bu bulgular, MSC'lerin mitokondriyi retinal pigment epitel hücrelerine aktarma yeteneğine sahip olduğunu göstermektedir.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66917/66917fig01.jpg"> Şekil 1: MSC'lerin ve ARPE19 hücrelerinin ko-kültürünün şematik görünümü. CellTrace Violet ile etiketlenmiş mito-GFP ve ARPE19-mito-RFP hücrelerini eksprese eden MSC'ler, 1: 1 oranında 24 saat boyunca birlikte kültürlenir. Menekşe + hücrelerdeki Mito-GFP, mitokondrinin MSC'lerden ARPE19 hücrelerine transferini işaret ederken, mor hücrelerdeki Mito-RFP, mitokondrinin ARPE19 hücrelerinden MSC'lere transferini işaret eder. Kısaltmalar: GFP = yeşil floresan proteini; RFP = kırmızı floresan proteini; MSC'ler = mezenkimal kök hücreler. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66917/66917fig01large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66917/66917fig02.jpg"> Şekil 2: MSC'ler ve ARPE19 hücreleri arasında TNT oluşumu. Beyaz ok uçları TNT oluşumunu, yeşil ok uçları mito-GFP'li mitokondriyi ve kırmızı ok uçları mito-RFP'li mitokondriyi gösterir. (A,B) ARPE19 hücreleri arasında TNT oluşumu. (C) MSC'ler arasında TNT oluşumu. (D) MSC'ler ve ARPE19 hücreleri arasında TNT oluşumu. Kültür ortamında asılı TNT'leri gösteren Z ekseni görüntüleme. Ölçek çubukları = 25 μm. Kısaltmalar: MSC'ler = mezenkimal kök hücreler; TNT'ler = tünel açan nanotüpler. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66917/66917fig02large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66917/66917fig03.jpg"> Şekil 3: MSC'lerden ARPE19 hücrelerine mitokondriyal transfer. (A) Beyaz kesikli daire, MSC'lerden ARPE19 hücrelerine mitokondriyal (mito-GFP) transferini ve (B) sarı kesikli daire, ARPE19 hücrelerinden MSC'lere mitokondriyal (mito-RFP) transferini gösterir. Ölçek çubukları = 20 μm. Kısaltma: GFP = yeşil floresan proteini; RFP = kırmızı floresan proteini; MSC'ler = mezenkimal kök hücreler. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66917/66917fig03large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66917/66917fig04.jpg"> Şekil 4: Süper çözünürlüklü mikroskopi ile MSC'ler ve ARPE19 hücreleri arasında TNT oluşumu ve mitokondriyal transfer. (A ve B) MSC'lerden ARPE19 hücrelerine mitokondriyal taşıma. (C) Süper çözünürlüklü görüntüleme altında TNT'lerin ayrıntıları. (D) Süper çözünürlüklü görüntüleme altında ARPE19 hücrelerinde bulunan MSC'lerden yeşil mitokondri. Ölçek çubuğu = 5 μm. Kısaltmalar: MSC'ler = mezenkimal kök hücreler; TNT'ler = tünel açan nanotüpler. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66917/66917fig04large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66917/66917fig05.jpg"> Şekil 5: MSC'lerin ve ARPE19 hücrelerinin transwell sisteminde dolaylı ko-kültürde neredeyse tespit edilemeyen mitokondriyal transfer. (A) Transwell sistemindeki MSC'lerin ve ARPE19 hücrelerinin ko-kültürünün şematik görünümü. (B) 24 saat boyunca MSC'lerle dolaylı ko-kültürden sonra transwell plakasının altındaki ARPE19 hücrelerinin temsili görüntüleri. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66917/66917fig05large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66917/66917fig06.jpg"> Şekil 6: TNT oluşumu ve mitokondriyal transferin miktarının belirlenmesi. (A) TNT oluşumu, (B) mitokondriyal transfer. Kısaltmalar: M = MSC'ler = mezenkimal kök hücreler; A = ARPE19 hücreleri; TNT'ler = tünel nanotüpleri; M-A = MSC'ler ve ARPE19 hücreleri arasında TNT oluşumu; M-M = MSC'ler arasında TNT oluşumu; A-A = ARPE19 hücreleri arasında TNT oluşumu. n = 4, ortalama ± SD, Mann-Whitney U-testi, *p &lt; 0.05. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66917/66917fig06large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
Ek Şekil S1: Plazmid pCT-Mito-copGFP'nin haritalanması. Mito-GFP (CYTO102-PA-1) satın alındı. Mitokondri Sito-İzleyici, pCT-Mito-GFP (CMV), bir Cox8 etiketi aracılığıyla copGFP ile birleşir ve mitokondrinin copGFP ile etiketlenmesine neden olur. Bu copGFP füzyonu, CMV promotörü tarafından yönlendirilir ve HeLa, HEK293 ve HT1080 gibi hücre hatlarında sağlam ekspresyon sağlar. Mito-RFP, GFP'yi RFP ile değiştirerek mito-GFP'den modifiye edildi; bir Puromisin direnç geni taşır. Bu plazmidin lentiviral ambalajı uzman şirketler tarafından yapılır. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66917/66917_Supplementary%20figure.zip" target="_blank">Bu dosyayı indirmek için lütfen buraya tıklayın.</a>
Video 1: MSC'ler ve ARPE19 hücreleri arasında TNT aracılı mitokondriyal taşıma. TNT, MSC ve ARPE19 hücrelerinin çift yönlü hareketi yoluyla üretilir ve mitokondrinin MSC hücrelerinden ARPE19 hücrelerine transferini kolaylaştırır. Kısaltmalar: MSC'ler = mezenkimal kök hücreler; TNT'ler = tünel açan nanotüpler. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66917/66917_TNT_Video.zip" target="_blank">Bu videoyu indirmek için lütfen buraya tıklayın.</a>

Mezenkimal Kök Hücreler ve Retinal Pigment Epiteli Arasında İn Vitro Tünelleme Nanotüpleri Yoluyla Mitokondriyal Transfer

Mitochondrial transfer is a normal physiological phenomenon that occurs widely among various types of cells. In the study to date, the most important ...

mitochondrial-transfer-via-tunneling-nanotubes-between-mesenchymal

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Bu videoda, floresan olarak işaretlenmiş mitokondrinin santrifüjleme yoluyla glioblastoma kök hücrelerine (GSC'ler) transferini sağlayan bir yöntem gösterilmektedir. Donör mitokondrinin başarılı alımı ve fonksiyonel entegrasyonu, konfokal mikroskopi kullanılarak floresanın tespit edilmesiyle doğrulanır.

Glioblastoma Kök Hücrelerine Santrifüj Destekli Mitokondriyal Transfer

Burada, sıçanlarda ve farelerde bir RPE hücresi bolusunu subretinal olarak enjekte etmek için multimedya formatında topluluk tarafından kabul edilen bir protokol sunuyoruz. Bu yaklaşım, retinal dejenerasyonun hayvan modellerinde implantasyon üzerine aşılanmış RPE hücrelerinin kurtarma potansiyellerini, güvenlik profillerini ve hayatta kalma kapasitelerini belirlemek için kullanılabilir.

Süspansiyon Retina pigment epiteli Hücreleri sunun Kemirgenler Subretinal Enjeksiyonları Sahne

Burada, bir protokol (MitoCeption) GSC metabolizması ve fonksiyonları üzerine biyolojik etkilerini inceleyerek amacı ile glioblastoma kök hücreler (GSC) için, insan mezenkimal kök hücrelerin (MSC) izole mitokondri, transfer sunulmaktadır. Benzer bir protokol için diğer hücre tipleri arasında mitokondri aktarmak için adapte edilebilir.

MitoCeption: Glioblastoma Kök Hücreleri için İzole İnsan MSC kondriyayı aktarma

Retina pigment epitel hücrelerinin insan amniyotik membran ve hayvan modellerinde aşılama için hazırlık üstüne kültürlü insan pluripotent kök hücreler elde oluşan bir retina doku mühendisi bir yöntem açıklanmaktadır.

Transplantasyonu uygun Retina Pigment epitel doku mühendisliği insan embriyonik kök hücrelerden türetilmiş

Kriyoprezervasyon sonrası hESC kaynaklı fotoreseptör progenitör hücrelerin hazırlanması ve bu hücrelerin rd10 farelerde retina altı verilmesi için ayrıntılı bir protokol tanımladık.

Rd10 Farelerde İnsan Embriyonik Kök Hücre Kaynaklı Fotoreseptör Progenitörlerinin Sub-Retinal Verilmesi

Burada, insan epidermal keratinositleri ile dermal fibroblastlar arasında tünel nanotüplerinin görselleştirilmesi için zar ve F-aktin etiketleme ile z-stack konfokal görüntüleme ile standartlaştırılmış bir protokol gösterilmiştir; isteğe bağlı olarak α-tubulin ko-boyama ile doku mühendisliği uygulamaları için tekrarlanabilir tespit ve sitoskelet karakterizasyonu sağlanmaktadır.

İnsan Cilt Hücrelerinde Tünel Nanotüplerinin Tespit Edilmesi İçin Doku Mühendisliği Uygulamaları İçin Standartlaştırılmış Yöntem

Sunumun Amaç, kıkırdak defektleri, MR görüntüleme ile görüntülendi olabilir matris ilişkili kök hücre implantları üretmek için son derece tekrarlanabilir bir yöntem göstermektir. Kök hücreler, agaroz ile karışık FDA onaylı Ferumoxides, kıkırdak hasarlarının içine implante edilerek 7T MR tarayıcı ile görüntülü olarak etiketlenir.

Ferumoxides implantasyonu Kıkırdak Kusur İnsan Mezenkimal Kök Hücreler Etiketli

Doğrudan bir yöntem, hücre tiplerinde çeşitli mezenkimal geçiş (EMT) epitel indüklenmesi için tarif edilmektedir. Immünositokimya EMT eyalette hücrelerin analiz yöntemleri dahildir.

Mezenkimal Geçiş indüksiyon ve Epitel Analizi

MıkroRNA (miRNA) insan kaynaklı-pluripotent kök (iPS) hücreleri (iPS-RPE), ve fetal RPA'nin türetilen insan kaynaklı-pluripotent kök profilleri (iPS) hücreleri, retina pigment epiteli (RPE), karşılaştırıldı.

İnsan iPS Hücreleri MicroRNA İfade Profilleri, iPS Kaynaklanan Retina pigment epiteli ve Fetal Retina pigment epiteli

Retina pigment epitel hücreleri hücre-replasman tedavisi için Kuru yaşa bağlı makula dejenerasyonu gelişmiş form olarak hizmet verebilir. Bu iletişim kuralı coğrafi Atrofi büyük gözlü modeli ve hastalık bu modeline insan embriyonik kök hücre kaynaklı retina pigment epitel hücrelerinin nakli subretinal nesil açıklar.

Büyük gözlü manken coğrafi Atrofi, içine insan embriyonik kök hücre elde edilen retina Pigment epitel hücrelerinin subretinal nakli

Öğrenin, mezenkimal kök hücreler ve retinal pigment epiteli arasında tünelleme nanotüpleri aracılığıyla çift yönlü mitokondriyal transferi incelemeyi. Bu yöntem, hasarlı retinal hücrelerin kurtarılması için hücresel iletişimi anlamaya katkı sağlar.

Mezenkimal Kök Hücreler ve Retinal Pigment Epiteli Arasında İn Vitro Tünelleme Nanotüpleri Yoluyla Mitokondriyal Transfer

Daha fazla video keşfet