Minipiglerde Tek Aşamalı Doku Mühendisliği Ürotelyal Tüpler için Cerrahi Model

Başlamak için, ameliyattan 12 saat önce yetişkin bir Göttingen mini domuzunu oruç tutun. Anestezi uygulanmış bir domuz üzerinde standart bir alt orta hat laparotomi yaptıktan sonra, interperitoneal idrar kesesini yaraya çekin. Şimdi, ön mesane duvarında profilaktik hemostaz yapın ve detrusor kasını diatermi ile kesin.

Ardından, tam bir duvar mesane segmentini çıkarmak için iç mukozal tabakayı makasla kesin. Mesane duvarını, bir santimetre karelik proksimal açıklık bırakırken hızlı emilebilir örgülü bir koşu ipliği ile kapatın. Rezeke edilen numunenin mukozal tabakasını steril koşullar altında dikkatlice inceleyin ve mukozal numuneyi iskele gömmek için bir milimetre kare mikro greftlere kıyın.

Forseps kullanarak, mukozal parçacıkları bir ila altı genleşme oranına sahip, biyolojik olarak parçalanabilen bir ağ üzerine yerleştirin. Ağı, mikro greftler yukarı bakacak şekilde kollajen solüsyonu ile doldurulmuş dikdörtgen bir çelik kalıbın içine yerleştirin. Katılaşmadan sonra, hidrojeli delikli bir çelik plaka üzerinde duran naylon bir ağ üzerine kaydırın ve kalıbı yavaşça çıkarın.

Bir naylon ağ ve ardından jelin üzerine çelik bir plaka yerleştirerek hidrojelden suyu dışarı atın ve ardından çelik plakanın üzerine yerleştirilen 120 gramlık bir ağırlıkla beş dakika boyunca pasif olarak sıkıştırın. Sıkıştırmadan sonra, ağırlığı ve naylon ağı yavaşça çıkarın. Artık greft cerrahi işlem için hazırdır.

Düzleştirilmiş iskeleyi, mikro greftler stente bakacak şekilde biyolojik olarak parçalanabilen bir stent etrafında yuvarlayın ve iskeleyi yavaş emilebilir bir monofilament koşu ipliği ile uzunlamasına yerine dikin. Stenti iki veya üç kesintili emilemeyen sütürle kapağa dikerek stentin lümeni içine bir antegrad kolon lavman durdurucusu sabitleyin. İskeleyi tamamladıktan sonra, boru şeklindeki yapıyı yavaş emilebilir bir monofilament koşu sütürü ile ön mesane duvarında kalan açıklığa anastomoz edin.

Anastomozu bir çanta ipi sütürü ile sıkın ve kanalın distal ucunu bağlayın. Pubovezikal ligamentten bir peritoneal flep alın ve boru şeklindeki iskeleyi çalışan, yavaş emilebilir bir monofilament sütür ile uzunlamasına yamalayın. Anastomoz açıklığını doğrulamak için üretral kateter yoluyla salin enjekte edin.

Sağ taraftaki kaudal meme bezinin yanındaki orta hatta lateral olarak bir trans fasyal kanalı künt bir şekilde inceleyin. Kanalı deri altı bir cebe yerleştirin ve kanalı emilemeyen cilt seviyesi dikişleriyle işaretleyin. Karın kasının ön kas fasyasını kapattıktan sonra, cildi emilmeyen monofilament koşu ipliği ile kapatın.

Altı haftalık gözlemin sonunda, kanal lümenini süreklilik ve epitel astarı açısından endoskopi ile inceleyin. Kanal açıklığını sağlamak için kontrastlı bilgisayarlı tomografi yapın. Altı haftalık gözlemden sonra, mikroskobik iskele dokusu değerlendirmesi, konak reddi veya enfeksiyon belirtisi göstermedi ve boru şeklindeki iskele patentli ve engelsiz kaldı.

Histolojik değerlendirmeler, tüm iskeleyi kaplayan ürotelyal kökenli tabakalı bir luminal epitel gösterdi ve takviye edici biyomalzemelerin kalıntıları altı hafta sonra hala görülebiliyor.