Name: Murin Oküler ve Non-Oküler Dokularda Diyetle Alınan Vitamin A Metabolitlerinin Yüksek Performanslı Sıvı Kromatografisi Kullanılarak Kantitatif Analizi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-12-27T12:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 3 s
Description: Öğrenin, transgenik farelerde HPLC kullanarak STRA6 ve RBPR2 taşıyıcılarının retinoid metabolizmasındaki rolünü inceleyin. Bu yöntem, görsel fonksiyon ve sistemik vitamin A homeostazisi araştırmalarında önemli bilgiler sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<meta charset="utf8"></head><body>Rodopsin Fonksiyon Çalışmaları için Murin Dokusunda A Vitamini Metabolit Analizi

<table><tbody><tr><td>< güçlü > Reaktif< / güçlü ></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>1-Oktanol, HPLC için uygun, & %99,5</td> <td>Sigma-Aldrich, Millipore Sigma</td><td>203-917-6</td><td></td></tr><tr><td>1,4-Dioksan, HPLC, & ge için uygun; % 99.5</td> <td>Sigma-Aldrich, Millipore Sigma</td><td>204-661-8</td><td></td></tr><tr><td>11-cis-retinal</td><td>Ulusal Göz Enstitüsü</td><td>Yok</td><td></td></tr><tr><td>11-cis-Retinol</td><td>Toronto Araştırma Kimyasalları</td><td>TRC-R252105</td><td></td></tr><tr><td>13-cis-retinal</td><td>Toronto Araştırma Kimyasalları</td><td>TRC-R239900</td><td></td></tr><tr><td>13-cis-retinol</td><td>Toronto Araştırma Kimyasalları</td><td>TRC-R252110</td><td></td></tr><tr><td>All-trans-Retinal</td><td>Toronto Araştırma Kimyasalları</td><td>TRC-R240000</td><td></td></tr><tr><td>All-trans-Retinol</td><td>Toronto Araştırma Kimyasalları</td><td>TRC-R252002</td><td></td></tr><tr><td>Etil Asetat, HPLC, vb. için uygun; % 99,7</td> <td>Sigma-Aldrich, Millipore Sigma</td><td>205-500-4</td><td></td></tr><tr><td>Heksan, HPLC Sınıfı</td><td>Fisher Scientific, Spektrum Kimyasal</td><td>18-610-808</td><td></td></tr><tr><td>Metanol (HPLC)</td> <td>Fisher Bilimsel</td><td>A452SK-4</td><td></td></tr><tr><td>Retinil Palmitat</td><td>Toronto Araştırma Kimyasalları</td><td>TRC-R275450</td><td></td></tr><tr><td>Sodyum Klorür (Kristal / Sertifikalı ACS)</td><td>Fisher Scientific</td><td>S271-500</td><td></td></tr><tr><td><güçlü>Instruments</güçlü></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>1260 Infinity II Analitik Fraksiyon Toplayıcı</td><td>Agilent</td><td>G1364F</td><td></td></tr><tr><td>1260 Infinity II İkili Pompa</td><td>Agilent</td><td>G7112B</td><td></td></tr><tr><td>1260 Infinity II Diyot Dizi Dedektörü</td><td>Agilent</td><td>G7115A</td><td></td></tr><tr><td>1260 Infinity II Çok Sütunlu Termostat</td><td>Agilent</td><td>G7116A</td><td></td></tr><tr><td>1260 Infinity II Flakon Örnekleyici</td><td>Agilent</td><td>G7129A</td><td></td></tr><tr><td>ST40R Soğutmalı Santrifüj</td><td>Thermo Scientific</td><td>TSST40R</td><td></td></tr><tr><td>Vacufuge Plus Santrifüj Konsantratörü</td><td>Eppendorf</td><td>22820168</td><td></td></tr><tr><td><güçlü>Sarf Malzemeleri</güçlü></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>2 mL Amber Vidalı Üst Şişeler</td><td>Agilent</td><td>5188-6535</td><td></td></tr><tr><td>PTFE / kırmızı kauçuk septalı Sıkma Kapağı, 11 mm</td><td>Agilent</td><td>5183-4498</td><td></td></tr><tr><td>Tek Kullanımlık Cam Konik Santrifüj Tüpleri</td><td>Millipore Sigma</td><td>CLS9950215</td><td></td></tr><tr><td>Vidalı kapaklı tüp, 15 mL</td><td>Sarstedt</td><td>62.554.502</td><td></td></tr><tr><td>Flakon ek, 150 & mikro; L, polimer ayaklı cam</td><td>Agilent</td><td>5183-2088</td><td></td></tr></tbody></table>

murin oküler ve non-oküler dokularda diyetle alınan vitamin a metabolitlerinin yüksek performanslı sıvı kromatografisi kullanılarak kantitatif analizi

Quantitative Analysis of Dietary Vitamin A Metabolites in Murine Ocular and Non-Ocular Tissues Using High-Performance Liquid Chromatography

Burada, murin oküler ve sistemik dokudaki retinoidleri tespit etmek ve miktarını belirlemek için yukarıda açıklanan yöntemi kullandık ve temsili kromatogramlar oluşturduk. Ek olarak, bu dokularda tespit edilebilecek tipik retinoidlerin bir özetini vereceğiz.
6 aylıkken, farelere CO2 asfiksiasyonu yoluyla ötenazi yapıldı. Oküler retinoid içeriğini korumak için, fareler ötenazi ve ekstraksiyondan önce 2 gün boyunca karanlığa adapte edildi. Retinoid ekstraksiyonu ve ardından HPLC analizi için iki göz, 0.2 g karaciğer ve 75 μL kan alındı. Oküler doku için bir göz hidroksilamin ilavesi yapılmadan çıkarılırken, diğer göze hidroksilamin tedavisi uygulandı. Karaciğer ve kan için, retinaldehitler tipik olarak bu dokularda tespit edilmediğinden hidroksilamin tedavisine gerek yoktu.
Hidroksilamin ile muamele edilmeyen fare gözünün kromatogramında, kanonik olmayan iki retinalit izomerinden biri olan 13-cis-retinal tanımlandı. Ek olarak, iki kanonik retinalit izomeri olan hem 11-cis-retinal hem de all-trans-retinal tanımlandı. Her iki kromatogramda da, görsel döngü ara maddesi 11-cis-retinol ve ayrıca ana A vitamini taşıma formu all-trans-retinolün her ikisi de tanımlanmıştır (Şekil 4A).
Hidroksilamin ile muamele edilen fare gözünün kromatogramında, daha önce bahsedilen tüm retinaldehit izomerleri hala mevcuttu. Bununla birlikte, bu izomerler için alıkonma süreleri önemli ölçüde artmıştır. Ayrıca, bu retinaldehit izomerleri artık hem syn hem de anti izomerler olarak mevcuttur. Tepe entegrasyonu yoluyla niceleme sırasında, doğru bir entegrasyon değeri elde etmek için hem syn hem de anti tepe noktaları toplanmalıdır. Hem 11-cis-retinol hem de all-trans-retinol hala mevcuttu (Şekil 4B).
Fare hepatik dokusunun kromatogramında, bu dokular içinde retinil palmitat ve all-trans-retinol tanımlandı. Bir retinil ester olan retinil palmitat, memelilerde A vitamininin ana depolama formu olarak görev yapar ve memeli karaciğer dokusunda önemli miktarlarda bulunabilir. Karaciğer, A vitaminini sistemik dokulara holo-RBP4 olarak salgılar ve RBP4-transthryetin kompleksi içinde all-trans-retinol içerir. Daha sonra, bu kromatogram içinde büyük bir all-trans-retinol zirvesi tanımlanabilir (Şekil 4C).
Fare kanının kromatogramında, büyük bir all-trans-retinol zirvesi tanımlandı. Karaciğerden holo-RBP4'ün dolaşım sistemi yoluyla sistemik dokulara salındığı göz önüne alındığında, bu beklendiği gibidir (Şekil 4D). Zamana bağlı çözülmüş HPLC pikleri üzerindeki retinoid izoformlarının karakteristik UV spektrumu absorbansı (~ 250-400 nm), belirli bir ilgili pikte izoform varlığının kalitesini ilk çapraz doğrulamada yardımcı olabilir (Şekil 5).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67034/67034fig01.jpg"> Şekil 1: Retinoidlerin kimyasal yapıları. (A) Bu retinoidler tipik olarak ekstrakte edilmiş murin dokusunda bulunur. Farklı polar uç gruplarının yanı sıra retinoid izomerlerindeki cis çift bağlarının farklı konumlarına dikkat edin. (B) Retinaldehitlerin retinal oksimlere dönüştürülmesi, ekstraksiyon verimliliğini arttırır, piklerin retinil palmitat ile ko-elüsyonunu ve ayrıca retinaldehit izomerleri içinde ko-elüsyonunu önler. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67034/67034fig01large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67034/67034fig02.jpg"> Şekil 2: Doku toplama, homojenizasyon, retinoid ekstraksiyonu ve analizi için iş akışı. Karanlığa adapte olmuş farelerden alınan retinalar ve doku örnekleri homojenize edildi ve ekstrakte edildi. 1 Adım: Fareleri yönergelere göre ötenazi yaptıktan sonra kan ve çeşitli dokular toplanır. Adım 2-4: Doku homojenizasyonu daha sonra kantitatif analizler için salin ve metanol ile hidroksilamin hidroklorür ile yapılır. Adım 5-7: Retinoidler heksan kullanılarak muamele edilir, ardından buharlaştırma yapılır. Adım 8,9: Tüm retinoidlerin çözündüğünden emin olmak için 100 μL hekzan ile yeniden süspanse edilir. 10 Adım: Son olarak, numuneler HPLC kullanılarak analiz edilir. Kısaltma: HPLC = Yüksek Performanslı Sıvı Kromatografisi. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67034/67034fig02large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67034/67034fig03.jpg"> Şekil 3: Retinoid standartlarının kromatogramı ve hidroksilamin ile muamele edilmiş retinoid standartları. (A) Bu kromatogram, retinil palmitat, 13-cis-retinal, 11-cis-retinal, all-trans-retinal, 11-cis-retinol, 13-cis-retinol ve all-trans-retinol standartlarını içerir. (B) Bu kromatogram, retinil palmitat, 13-cis-retinal, 11-cis-retinal, all-trans-retinal, 11-cis-retinol, 13-cis-retinol ve all-trans-retinol standartlarını içerir. Bu kromatogram, retinol izomerlerine ek olarak syn ve anti oksim retinaldehit izomerlerini içerir. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67034/67034fig03large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67034/67034fig04.jpg"> Şekil 4: Temsili kromatogramlar. (A) Fare oküler dokusunun temsili kromatogramı. Bu kromatogram, retinol izomerlerine ek olarak, retinaldehit izomerleri de dahil olmak üzere tipik olarak murin oküler dokusunda bulunan retinoidleri içerir. (B) Hidroksilamin ile tedavi edilmiş fare oküler dokusunun temsili kromatogramı. Önceki kromatogramlarda (Şekil 4A) bulunan kimyasal olarak modifiye edilmemiş retinaldehitlerin yerine, bu kromatogramın retinol izomerlerine ek olarak syn ve anti oksim retinaldeyde izomerlerini içerdiğine dikkat edin. (C) Fare karaciğer dokusunun temsili kromatogramı. Bu kromatogram, tipik olarak retinil palmitat ve all-trans-retinol dahil olmak üzere murin karaciğer dokusunda bulunan retinoidleri içerir. (D) Fare kanının temsili kromatogramı. Bu kromatogram, all-trans-retinol dahil olmak üzere tipik olarak murin kanında bulunan retinoidleri içerir. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67034/67034fig04large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67034/67034fig05.jpg"> Şekil 5: Murin oküler dokusundan retinaldehit izomerlerinin UV absorbans spektrumu. (A) 13-cis-retinal, (B) 11-cis-retinal, (C) 9-cis-retinal, (D) all-trans-retinal, (E) syn 11-cis-retinal oksim, (F) anti 11-cis-retinal oksim absorbans spektrumları. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67034/67034fig05large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67034/67034fig06.jpg"> Şekil 6: HPLC modüllerine, mobil faz akışına ve diğer enstrümantasyona genel bakış. Mobil faz akışı, hazırlanan solvent şişelerinden başlar ve ikili pompa tarafından yüksek basınçta otomatik numune alma cihazına pompalanır ve burada analit, solvent akışına dahil edilir. Mobil faz ve analit, sıcaklık ayarlı kolon bölmesine ve son olarak ölçüm için diyot dizisi dedektörüne ulaşır. (A) Retinoidlerin fotoizomerizasyonunu en aza indiren kırmızı renkli monitör ekranı. (B) İkili pompa. (C) Flakon örnekleyici. (D) Çok sütunlu termostat. (E) Diyot dizisi dedektörü. (F) Analitik fraksiyon toplayıcı. (G) Yüksek yoğunluklu poli atık konteyneri. (H) Soldan sağa, alüminyum kıvrımlı kapak, polimer ayaklı 250 μL kesici uç, kehribar renkli kıvrımlı üst şişe, enjeksiyon şişesinin son montajı. (I) Sol, soğutmalı santrifüj. Doğru, santrifüj yoğunlaştırıcı. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67034/67034fig06large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td>Bileşik</td>
			<td>Molar Absorptivite (ε)</td>
			<td>Çözücü</td>
			<td>Referans</td>
		</tr><tr><td>Retinil Palmitat</td>
			<td>49260</td>
			<td>Etanol</td>
			<td>Hubbard ve ark.49</td>
		</tr><tr><td>13-cis-Retinal</td>
			<td>35500</td>
			<td>Etanol</td>
			<td>Hubbard ve ark.49</td>
		</tr><tr><td>11-cis-Retinal</td>
			<td>24935</td>
			<td>Etanol</td>
			<td>Hubbard ve ark.49</td>
		</tr><tr><td>9-cis-Retinal</td>
			<td>36100</td>
			<td>Etanol</td>
			<td>Robeson ve ark.51</td>
		</tr><tr><td>All-trans-Retinal</td>
			<td>42880</td>
			<td>Etanol</td>
			<td>Hubbard ve ark.49</td>
		</tr><tr><td>11-cis-retinol</td>
			<td>34890</td>
			<td>Etanol</td>
			<td>Hubbard ve ark.49</td>
		</tr><tr><td>13-cis-Retinol</td>
			<td>48305</td>
			<td>Etanol</td>
			<td>Robeson ve ark.50 ve Robeson ve ark.51</td>
		</tr><tr><td>All-trans-Retinol</td>
			<td>52770</td>
			<td>Etanol</td>
			<td>Hubbard ve ark.49</td>
		</tr></tbody></table>Tablo 1: Etanoldeki retinoidlerin molar absorptivitesi. Retinoidlerin molar absorptivite değerleri Kane ve Napoli44, Hubbard ve ark.46, Robeson ve ark.47 ve Robeson ve ark.48'den toplanmıştır. Molar absorptivite çözücüye bağlıdır. Burada listelenen değerler etanol içinde çözünen retinoidlere özgüdür.
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td>Doku</td>
			<td>Doku Toplama Miktarı</td>
			<td>Homojenizasyon için hacim</td>
		</tr><tr><td>Kan</td>
			<td>75 μL</td>
			<td>YOK</td>
		</tr><tr><td>Karaciğer</td>
			<td>0.2 gr</td>
			<td>2 mL</td>
		</tr><tr><td>Böbrek</td>
			<td>2 Bütün Böbrek</td>
			<td>2 mL</td>
		</tr><tr><td>Cilt</td>
			<td>0.2 gr</td>
			<td>1 mL – 1.5 mL arası</td>
		</tr><tr><td>Dalak</td>
			<td>1 bütün dalak</td>
			<td>1 mL</td>
		</tr><tr><td>Göz</td>
			<td>Hem Retina, hem de havuz 4 Retina</td>
			<td>1 mL</td>
		</tr><tr><td>Beyin</td>
			<td>1 Bütün Beyin</td>
			<td>2 mL</td>
		</tr><tr><td>Kalp</td>
			<td>1 Bütün Kalp</td>
			<td>1 mL</td>
		</tr><tr><td>Akciğer</td>
			<td>0.2 gr</td>
			<td>2 mL</td>
		</tr></tbody></table>Tablo 2: Analiz başına önerilen doku miktarı. Kane ve Napoli44 tarafından önerildiği gibi, analiz başına doku miktarı ve doku homojenizasyonu için P buz gibi tuzlu su (%0.9) ve P metanol hacmi.
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td>Bileşik</td>
			<td>Bekletme Süresi (dk)</td>
			<td>UV Absorbans Maxima (nm)</td>
		</tr><tr><td>Retinil Palmitat</td>
			<td>5.177</td>
			<td>326</td>
		</tr><tr><td>13-cis-Retinal</td>
			<td>7.268</td>
			<td>366</td>
		</tr><tr><td>11-cis-Retinal</td>
			<td>7.691</td>
			<td>366</td>
		</tr><tr><td>9-cis-Retinal</td>
			<td>7.931</td>
			<td>364</td>
		</tr><tr><td>All-trans-Retinal</td>
			<td>8.993</td>
			<td>370</td>
		</tr><tr><td>11-cis-retinol</td>
			<td>17.003</td>
			<td>318</td>
		</tr><tr><td>13-cis-Retinol</td>
			<td>17.83</td>
			<td>328</td>
		</tr><tr><td>All-trans-Retinol</td>
			<td>23.933</td>
			<td>326</td>
		</tr></tbody></table>Tablo 3: Retinoidlerin alıkonma süreleri ve maksimum absorbans dalga boyları. Bu değerler, referans alınan diyot dizisi dedektörü ile tespit edildiği gibi, açıklanan yöntem ve mobil faz ile kullanıldığında gözlemlenmiştir.
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td>Bileşik</td>
			<td>Bekletme Süresi (dk)</td>
			<td>UV Absorbans Maxima (nm)</td>
		</tr><tr><td>Syn 11-cis-Retinal Oksim</td>
			<td>9.59</td>
			<td>346</td>
		</tr><tr><td>Syn All-trans-Retinal Oksim</td>
			<td>10.6</td>
			<td>356</td>
		</tr><tr><td>Syn 13-cis-Retinal Oksim</td>
			<td>11.3</td>
			<td>352</td>
		</tr><tr><td>Anti 13-cis-Retinal Oksim</td>
			<td>13</td>
			<td>356</td>
		</tr><tr><td>Anti 11-cis-Retinal Oksim</td>
			<td>15.1</td>
			<td>350</td>
		</tr><tr><td>Anti All-trans-Retinal Oksim</td>
			<td>19.7</td>
			<td>360</td>
		</tr></tbody></table>Tablo 4: Hidroksilamin ile muamele edilmiş retinaldehitlerin alıkonma süreleri ve maksimum absorbans dalga boyları, her bir retinaldehitin syn ve anti oksim izomerleri ile sonuçlanır. Bu değerler, referans alınan diyot dizisi dedektörü ile tespit edildiği gibi, açıklanan yöntem ve mobil faz ile kullanıldığında gözlemlenmiştir.

Murin Oküler ve Non-Oküler Dokularda Diyetle Alınan Vitamin A Metabolitlerinin Yüksek Performanslı Sıvı Kromatografisi Kullanılarak Kantitatif Analizi

G protein-coupled receptors (GPCRs) are a superfamily of transmembrane proteins that initiate signaling cascades through activation of its G protein upon ...

quantitative-analysis-dietary-vitamin-metabolites-murine-ocular-non

Research

JoVE Journal

Biochemistry

Biyokimya

Burada, sıvı kromatografisi ve kütle spektrometresi ile, Staphylococcus aureus ve bunların daha sonraki analiz metabolitlerin ekstraksiyonu için bir protokol açıklar.

metabolit analizi için bir Tandem Sıvı Kromatografi-Kütle Spektrometresi tabanlı yaklaşım<em&gt; Stafilokok aureus</em

Bir örnek kullanarak biyolojik dokulardan lipidlerin, metabolitlerin ve proteinlerin kapsamlı şekilde ekstraksiyonu için bir protokol sunulmuştur.

Tek Bir Numuneden Metabolitlerin, Lipidlerin ve Proteinlerin Kapsamlı Analizi için Basit Fraksiyonlu Ekstraksiyon Metodu

Biz doğru bir şekilde sıvı Kromatografi yüksek çözünürlüklü bir Kütle Spektrometre için arabirim ile proteinler ile izobarik etiketleme, geniş ayırma, Biyoinformatik araçlarını ve kalite kontrol adımları birlikte quantitate için bir protokol mevcut.

Derin Proteom izobarik etiketleme, kapsamlı sıvı Kromatografi, kütle spektrometresi ve yazılım destekli miktar tarafından profil oluşturma

Yaprak sprey kütle spektrometresi numune hazırlama en aza indirir ve küçük moleküller bitki doku üzerinden hızlı tespiti için izin kromatografi, ortadan kaldırır bir doğrudan kimyasal analiz tekniğidir.

Yaprak sprey kütle spektrometresi: Doğrudan metabolitleri bitki doku üzerinden değerlendirmek için bir hızlı ortam iyonlaşma tekniği

Bu yöntem protein düzeyleri farklı dokular ve standartlaştırılmış bir nicel Batı blotting yaklaşım kullanarak farklı gelişim timepoints karşılaştırılması için sağlam ve tekrarlanabilir bir yaklaşım açıklar.

Sağlam dokulara ve standart nicel Western Blot kullanarak geliştirme boyunca Protein düzeylerinin karşılaştırılması

Bu yöntem, kültürhücreleri ve hayvan dokularından örnek hazırlanmasını, örneklerde koenzim A'nın çıkarılması nı ve türebenizasyonunu, türevleştirilmiş koenzim A'nın saflaştırılması ve nicelleştirilmesi için yüksek basınçlı sıvı kromatografisi absorbans veya floresan algılama.

Hücre ve Dokularda Koenzim A'nın Sayısallaştırılması

Saccharomyces cerevisiae'dekimajör hücresel lipitleri tanımlamak ve ölçmek için tandem kütle spektrometresi ile birleşen sıvı kromatografi kullanılarak bir protokol sayılmaktadır. Bir maya hücresi içindeki majör lipid sınıflarının nicel bir değerlendirme için açıklanan yöntem çok yönlü, sağlam ve duyarlıdır.

Tandem Kütle Spektrometresi Ile Birleşen Sıvı Kromatografi kullanarak Saccharomyces Cerevisiae'nin Hücresel Lipidomukan Analizi

Bu yöntem, ubiquitin zincir topolojislerindeki küresel değişikliklerin değerlendirilmesini açıklar. Değerlendirme, kütle spektrometresi tabanlı hedefli proteomik yaklaşımın uygulanmasıyla gerçekleştirilir.

Paralel Reaksiyon İzleme ile Ubiquitin Zincir Analizi

Buğday tanemetabolitleri ve lipitlerinin hedeflenmemiş analizi için bir yöntem sunulmuştur. Protokol, pozitif ve negatif elektrosprey iyonizasyon modlarında edinim ile bir asetonnril metabolit çıkarma yöntemi ve ters faz sıvı kromatografi-kütle spektrometresi metodolojisi içerir.

Hedefsiz Sıvı Kromatografisi-Kütle Spektrometresi Tabanlı Metabolomik Buğday Tanesi Analizi

Bu protokol, gelişmiş özellik ekstraksiyonu ve biyoinformatik analiz yazılımı ile birlikte sıvı kromatografi kütle spektrometresi kullanılarak peptidoglikan bileşiminin ayrıntılı bir analizini kapsar.

Peptidoglikanın Sıvı Kromatografisi, Kütle Spektrometrisi ve Biyoinformatik ile Yarı Kantitatif Analizi

Öğrenin, transgenik farelerde HPLC kullanarak STRA6 ve RBPR2 taşıyıcılarının retinoid metabolizmasındaki rolünü inceleyin. Bu yöntem, görsel fonksiyon ve sistemik vitamin A homeostazisi araştırmalarında önemli bilgiler sunar.

Murin Oküler ve Non-Oküler Dokularda Diyetle Alınan Vitamin A Metabolitlerinin Yüksek Performanslı Sıvı Kromatografisi Kullanılarak Kantitatif Analizi (Video) | JoVE Journal

Murin Oküler ve Non-Oküler Dokularda Diyetle Alınan Vitamin A Metabolitlerinin Yüksek Performanslı Sıvı Kromatografisi Kullanılarak Kantitatif Analizi

Daha fazla video keşfet