Doğal Mikrobiyomlu Laboratuvar Fareleri için Bir Tesisin İşletilmesi ve Biyolojik Muhafaza Prosedürleri: İmmünofenotipleme Prosedürü

Beslenmenin bağışıklık sistemi üzerindeki etkilerini araştırıyoruz. Ve özellikle kalori kısıtlaması ve açlık rejimlerinin yaşlanma karşıtı ve antienflamatuar etkileri ve mikrobiyotanın bu süreçlerdeki rolü ile ilgileniyoruz. Yabani fareler, laboratuvar faresi suşlarının iyi karakterize edilmiş genetik arka planını ve serbest dolaşan farelerin doğal mikrobiyomunu birleştirir.

Bununla birlikte, bu yabani farelerin doğal mikrobiyomu virüsler, bakteriler ve ayrıca parazitler içerir ve bu nedenle hayvancılık tesisleri için bir zorluk teşkil eder. QUEST Sorumlu Araştırma Merkezi'nin katkısı, Russell ve Burch'tan bildiğimiz üç R'yi, değiştirme, iyileştirme ve azaltmayı üç ek R sağlamlığı, kayıt ve raporlama ekleyerek geliştiren altı R çerçevesinin geliştirilmesiydi. Bu çerçeve, klinik öncesi araştırmaların tekrarlanabilirliğini ve şeffaflığını artırmayı amaçlamaktadır.

Ve fikir, deneysel bulguların daha güvenilir, güvenilir ve nihayetinde klinik bağlamlara çevrilebilir olmasıdır. Geçtiğimiz dört yıl boyunca, farklı biyolojik muhafaza prosedürlerine sahip vahşi fareler için bir tesis konseptini geliştirdik. Doğal mikrobiyomlu fareleri çalışmalarına dahil etmelerini sağlamak için uzmanlığımızı araştırmacılarla paylaşmak istiyoruz.

İnme en sık yaşlanan kişilerde görülür. Bağışıklık sistemi, bulaşıcı parçacıklarla savaşmaktan ve heterojen mikrobiyota ile yaşamaktan kaynaklanan hafıza hücrelerine sahiptir. Bu nedenle, yabani farelerde inme modellemesi, kemirgenlerde hastaların koşullarını daha iyi yansıtan rafine bir modeldir.

Alan pantolonu, kazak ve tek kullanımlık galoşları değiştirdikten sonra, hava duşunun antresindeki ayakkabıları ve çorapları çıkarın. Tyvek tulumları, saç filesi, pamuklu eldivenler, nitril eldivenler ve yüz maskeleri dahil olmak üzere alan çorapları ve tam vücut kişisel koruyucu ekipman giyin. Yapışkanlı zemin kaplaması ile hava duşu giyme alanı çoraplarına girin.

Hava duşu yaparken kollarınızı kaldırın ve 360 derecelik bir dönüş yapın. Hava duşundan çıkın ve diğer taraftaki alan ayakkabılarını giyin. Fareyi kapalı, ayrı ayrı havalandırılan bir kafesteki odasından prosedür odasına aktarın.

Anestezi uygulanmış fareyi dezenfekte edilmiş masaya yüzüstü yatırın ve boyun damarlarını sıkıştırmak için boynunun tırnağını kavrayın. Bir elinizi kullanarak farenin kafasını başparmağınız ve işaret parmağınızla sabitleyin. Gözün medial kantusuna 45 derecelik bir açıyla güzel zarın altına yeni bir kılcal damar yerleştirin.

Kan akmaya başlayana kadar kılcal damarı yörüngenin arkasındaki sinüs zarı boyunca eksenel olarak döndürün. Bir damla EDTA içeren bir kan alma tüpünde en az 15 mikrolitre kan toplayın. Dokuya kanamayı en aza indirmek için kılcal damarı çıkarmadan önce boynun tırnağındaki tutuşu gevşetin.

Kanamayı durdurmak ve hemostazı sağlamak için temiz bir gazlı bez veya çubukla kullanın. Kanı ve EDTA'yı sallamadan karıştırmak için tüpü hafifçe döndürün ve kan örneğini buz üzerinde saklayın. Kan örneklemesini tamamladıktan sonra eldivenleri değiştirin ve tüm malzemeleri ve yüzeyleri dezenfekte edin.

LAF kabininin önünde bulunan erişim laminer hava akışında veya LAF'ta yeni koruyucu giysiler giyin. Numune kaplarını dezenfekte edin ve LAF kabininin cam duvarındaki sürgülü kapıdan çıkarın. Numune kaplarını ikinci kişiye aktardıktan sonra tüm yüzeyleri dezenfekte edin.

LAF kabininin cam duvarındaki kayar kapıdan doğrudan temas etmeden vahşi yaşam alanından dezenfekte edilmiş numune kaplarını alın. Daha sonra tek kullanımlık tulum ve alan ayakkabılarını belirlenen alanın içinde bırakın. Saç filesini, lastik eldivenleri ve yüz maskesini atın.

Alan çoraplarıyla hemen hava duşuna girin. Hava duşu yaparken kollarınızı kaldırın ve 360 derecelik bir dönüş yapın. Hava duşundan çıkın ve alan çoraplarını çamaşır toplayıcıya yerleştirin.

Kişisel çoraplar, ayakkabılar ve tek kullanımlık galoşlar giyin. Alan kıyafetlerini soyunma odası çamaşır toplayıcısına bırakın ve normal kıyafetlere dönüştürün.