Name: İn Vivo ve İn Vitro Çamların Çam Ağacı Nematodu Bursaphelenchus xylophilus ile Enfeksiyonu ve İndüklenen Uçucuların İzolasyonu (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-09-27T14:10:00.000+00:00
Duration: 8 min 42 s
Description: Keşfedin çam ağacı nematodu Bursaphelenchus xylophilus ile Pinus pinaster enfeksiyonunu in vitro ve in vivo koşullarda. Bu yöntem, uçucu organik bileşiklerin izolasyonu ve bitki-patojen etkileşimlerinin incelenmesine olanak tanır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<meta charset="utf8"></head><body>Pinus pinaster'da Çam Ağacı Nematod Enfeksiyonunun Optimize Edilmesi

<ol><li>Back, M. A., Bonifácio, L., Inácio, M. L., Mota, M., Boa, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pine+wilt+disease%3A+A+global+threat+to+forestry%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Pathol%22%5BJournal%5D)">Pine wilt disease: A global threat to forestry.</a> Plant Pathol. 73 (5), 1026-1041 (2024).</li>
<li>Mumm, R., Hilker, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Direct+and+indirect+chemical+defence+of+pine+against+folivorous+insects%5BTitle%5D)+AND+%22Trend+Plant+Sci%22%5BJournal%5D)">Direct and indirect chemical defence of pine against folivorous insects.</a> Trend Plant Sci. 11 (7), 351-358 (2006).</li>
<li>Carrasquinho, I., Lisboa, A., Inácio, M. L., Gonçalves, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+variation+in+susceptibility+to+pine+wilt+disease+of+maritime+pine+%28Pinus+pinaster+Aiton%29+half-sib+families%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+Forest+Sci%22%5BJournal%5D)">Genetic variation in susceptibility to pine wilt disease of maritime pine (Pinus pinaster Aiton) half-sib families.</a> Annals Forest Sci. 75 (3), 85(2018).</li>
<li>Gaspar, M. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+of+the+pinewood+nematode+on+naturally-emitted+volatiles+and+scCO2+extracts+from+Pinus+pinaster+branches%3A+a+comparison+with+P.+pinea%5BTitle%5D)+AND+%22J+Supercritical+Fluids%22%5BJournal%5D)">Impact of the pinewood nematode on naturally-emitted volatiles and scCO2 extracts from Pinus pinaster branches: a comparison with P. pinea.</a> J Supercritical Fluids. 159, 104784(2020).</li>
<li>Rodrigues, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pinus+halepensis%2C+Pinus+pinaster%2C+Pinus+pinea+and+Pinus+sylvestris+essential+oils+chemotypes+and+monoterpene+hydrocarbon+enantiomers%2C+before+and+after+inoculation+with+the+pinewood+nematode+Bursaphelenchus+xylophilus%5BTitle%5D)+AND+%22Chem+Biodiver%22%5BJournal%5D)">Pinus halepensis, Pinus pinaster, Pinus pinea and Pinus sylvestris essential oils chemotypes and monoterpene hydrocarbon enantiomers, before and after inoculation with the pinewood nematode Bursaphelenchus xylophilus.</a> Chem Biodiver. 14 (1), e1600153(2017).</li>
<li>Faria, J. M. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+co-cultures+of+Pinus+pinaster+with+Bursaphelenchus+xylophilus%3A+a+biotechnological+approach+to+study+pine+wilt+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Planta%22%5BJournal%5D)">In vitro co-cultures of Pinus pinaster with Bursaphelenchus xylophilus: a biotechnological approach to study pine wilt disease.</a> Planta. 241 (6), 1325-1336 (2015).</li>
<li>Espinosa-Leal, C. A., Puente-Garza, C. A., García-Lara, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+plant+tissue+culture%3A+means+for+production+of+biological+active+compounds%5BTitle%5D)+AND+%22Planta%22%5BJournal%5D)">In vitro plant tissue culture: means for production of biological active compounds.</a> Planta. 248 (1), 1-18 (2018).</li>
<li>Bonga, J. M., von Aderkas, P. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBonga%2C+JM+%22In+Vitro+Culture+of+Trees%22">In Vitro Culture of Trees</a>. , Springer. Netherlands, Dordrecht. (1992).</li>
<li>Faria, J. M. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nematotoxic+and+phytotoxic+activity+of+Satureja+montana+and+Ruta+graveolens+essential+oils+on+Pinus+pinaster+shoot+cultures+and+P.+pinaster+with+Bursaphelenchus+xylophilus+in+vitro+co-cultures%5BTitle%5D)+AND+%22Indus+Crops+Prod%22%5BJournal%5D)">Nematotoxic and phytotoxic activity of Satureja montana and Ruta graveolens essential oils on Pinus pinaster shoot cultures and P. pinaster with Bursaphelenchus xylophilus in vitro co-cultures.</a> Indus Crops Prod. 77, 59-65 (2015).</li>
<li>Vallarino, J. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acquisition+of+volatile+compounds+by+gas+chromatography-mass+spectrometry+%28GC-MS%29%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Metabol.+Meth+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Acquisition of volatile compounds by gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS).</a> Plant Metabol. Meth Mol Biol. , 225-239 (2018).</li>
<li>Kikuchi, T., Aikawa, T., Oeda, Y., Karim, N., Kanzaki, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+rapid+and+precise+diagnostic+method+for+detecting+the+pinewood+nematode+Bursaphelenchus+xylophilus+by+loop-mediated+isothermal+amplification%5BTitle%5D)+AND+%22Phytopathology%22%5BJournal%5D)">A rapid and precise diagnostic method for detecting the pinewood nematode Bursaphelenchus xylophilus by loop-mediated isothermal amplification.</a> Phytopathology. 99 (12), 1365-1369 (2009).</li>
<li>Faria, J. M. S., Barbosa, P., Bennett, R. N., Mota, M., Figueiredo, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bioactivity+against+Bursaphelenchus+xylophilus%3A+Nematotoxics+from+essential+oils%2C+essential+oils+fractions+and+decoction+waters%5BTitle%5D)+AND+%22Phytochemistry%22%5BJournal%5D)">Bioactivity against Bursaphelenchus xylophilus: Nematotoxics from essential oils, essential oils fractions and decoction waters.</a> Phytochemistry. 94, 220-228 (2013).</li>
<li>Nickle, W. R., Golden, A. M., Mamiya, Y., Wergin, W. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((On+the+taxonomy+and+morphology+of+the+pine+wood+nematode%2C+Bursaphelenchus+xylophilus+%28Steiner+%26Buhrer+1934%29+Nickle+1970%5BTitle%5D)+AND+%22J+Nematol%22%5BJournal%5D)">On the taxonomy and morphology of the pine wood nematode, Bursaphelenchus xylophilus (Steiner &Buhrer 1934) Nickle 1970.</a> J Nematol. 13 (3), 385-392 (1981).</li>
<li>Viglierchio, D. R., Schmitt, R. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((On+the+methodology+of+nematode+extraction+from+field+samples%3A+baermann+funnel+modifications%5BTitle%5D)+AND+%22J+Nematol%22%5BJournal%5D)">On the methodology of nematode extraction from field samples: baermann funnel modifications.</a> J Nematol. 15 (3), 438-444 (1983).</li>
<li>IPPC. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((IPPC+DP+10%3A+Bursaphelenchus+xylophilus%5BTitle%5D)+AND+%22Diagnostic+protocols%2C+International+standard+for+phytosanitary+measures%22%5BJournal%5D)">IPPC DP 10: Bursaphelenchus xylophilus.</a> Diagnostic protocols, International standard for phytosanitary measures. 27, 1-40 (2016).</li>
<li>Rodrigues, A. M., Carrasquinho, I., António, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Primary+metabolite+adjustments+associated+with+pinewood+nematode+Resistance+in+Pinus+pinaster%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Plant+Sci%22%5BJournal%5D)">Primary metabolite adjustments associated with pinewood nematode Resistance in Pinus pinaster.</a> Front Plant Sci. 12, 10(2021).</li>
<li>Gonçalves, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+Monochamus+galloprovincialis+feeding+on+Pinus+pinaster+and+Pinus+pinea%2C+oleoresin+and+insect+volatiles%5BTitle%5D)+AND+%22Phytochemistry%22%5BJournal%5D)">Effect of Monochamus galloprovincialis feeding on Pinus pinaster and Pinus pinea, oleoresin and insect volatiles.</a> Phytochemistry. 169, September 2019 112159(2020).</li>
<li>Schenk, R. U., Hildebrandt, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Medium+and+techniques+for+induction+and+growth+of+monocotyledonous+and+dicotyledonous+plant+cell+cultures%5BTitle%5D)+AND+%22Canadian+J+Botany%22%5BJournal%5D)">Medium and techniques for induction and growth of monocotyledonous and dicotyledonous plant cell cultures.</a> Canadian J Botany. 50 (1), 199-204 (1972).</li>
<li>Tereso, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+axillary+and+adventitious+bud+regeneration+from+Portuguese+genotypes+of+Pinus+pinaster+AIT%5BTitle%5D)+AND+%22Propag+Ornam+Plants%22%5BJournal%5D)">Improved axillary and adventitious bud regeneration from Portuguese genotypes of Pinus pinaster AIT.</a> Propag Ornam Plants. 6 (1), 24-33 (2006).</li>
<li>Council of Europe European Directorate for the Quality of Medicines. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22European+Pharmacopoeia%22">European Pharmacopoeia</a>. , 241(2010).</li>
<li>Likens, S. T., Nickerson, G. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Detection+of+certain+hop+oil+constituents+in+brewing+products%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Ann+Meet+-+Am+Soc+Brewing+Chem%22%5BJournal%5D)">Detection of certain hop oil constituents in brewing products.</a> Proc Ann Meet - Am Soc Brewing Chem. 22 (1), 5-13 (1964).</li>
<li>Karimi, A., Gross, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+and+validation+of+an+innovative+headspace+collection+technique%3A+volatile+organic+compound+patterns+emitted+by+different+developmental+stages+of+Halyomorpha+halys%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Horti%22%5BJournal%5D)">Development and validation of an innovative headspace collection technique: volatile organic compound patterns emitted by different developmental stages of Halyomorpha halys.</a> Front Horti. 3, (2024).</li>
<li>Koedam, A., Scheffer, J. J. C., Baerheim Svendsen, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+isolation+procedures+for+essential+oils+-+II.+Ajowan%2C+Caraway%2C+Coriander+and+Cumin%5BTitle%5D)+AND+%22Zeitschrift+f%C3%BCr+Lebensmittel-Untersuchung+und+-Forschung%22%5BJournal%5D)">Comparison of isolation procedures for essential oils - II. Ajowan, Caraway, Coriander and Cumin.</a> Zeitschrift für Lebensmittel-Untersuchung und -Forschung. 168 (2), 106-111 (1979).</li>
<li>Abdulra'uf, L. B., Hammed, W. A., Tan, G. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((SPME+fibers+for+the+analysis+of+pesticide+residues+in+fruits+and+vegetables%3A+A+review%5BTitle%5D)+AND+%22Crit+Rev+Anal+Chem%22%5BJournal%5D)">SPME fibers for the analysis of pesticide residues in fruits and vegetables: A review.</a> Crit Rev Anal Chem. 42 (2), 152-161 (2012).</li>
<li>Gross, J., Gallinger, J., Rid, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Collection%2C+identification%2C+and+statistical+analysis+of+volatile+organic+compound+patterns+emitted+by+phytoplasma+infected+plants%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Collection, identification, and statistical analysis of volatile organic compound patterns emitted by phytoplasma infected plants.</a> Methods Mol Biol. 1875, 333-343 (2019).</li>
<li>ISO. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ISO+7609%3A1985+Essential+Oils-Analysis+by+Gas+Chromatography+on+Capillary+Columns-General+Method%5BTitle%5D)+AND+%22ISO%3A+Geneva%2C+Switzerland%22%5BJournal%5D)">ISO 7609:1985 Essential Oils-Analysis by Gas Chromatography on Capillary Columns-General Method.</a> ISO: Geneva, Switzerland. , (1985).</li>
<li>Rubiolo, P., Sgorbini, B., Liberto, E., Cordero, C., Bicchi, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Essential+oils+and+volatiles%3A+Sample+preparation+and+analysis.+A+review%5BTitle%5D)+AND+%22Flav+Fragr+J%22%5BJournal%5D)">Essential oils and volatiles: Sample preparation and analysis. A review.</a> Flav Fragr J. 25 (5), 282-290 (2010).</li>
<li>Fielding, N. J., Evans, H. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+pine+wood+nematode+Bursaphelenchus+xylophilus+%28Steiner+and+Buhrer%29+nickle+%28%3D+B.+lignicolus+Mamiya+and+Kiyohara%29%3A+An+assessment+of+the+current+position%5BTitle%5D)+AND+%22Forestry%22%5BJournal%5D)">The pine wood nematode Bursaphelenchus xylophilus (Steiner and Buhrer) nickle (= B. lignicolus Mamiya and Kiyohara): An assessment of the current position.</a> Forestry. 69 (1), 34-46 (1996).</li>
<li>Faria, J. M. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((First+report+on+the+synergistic+interaction+between+essential+oils+against+the+pinewood+nematode+Bursaphelenchus+xylophilus%5BTitle%5D)+AND+%22Plants%22%5BJournal%5D)">First report on the synergistic interaction between essential oils against the pinewood nematode Bursaphelenchus xylophilus.</a> Plants. 12 (13), 2438(2023).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>38 gözenekli test eleği</td><td>Retsch</td><td>60.131.000038</td><td></td></tr><tr><td>6-Benzilaminopurin (6-BAP)</td> <td>Duchefa Biochemie</td><td>B0904</td><td></td></tr><tr><td>Kömürle aktive edilen</td><td>Duchefa Biochemie</td><td>C1302</td><td></td></tr><tr><td>Clevenger aparatı</td><td>WINZER Laborglastechnik</td><td>25-000-02</td><td></td></tr><tr><td>Hidrojen peroksit çözeltisi</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>H1009-500ML</td><td></td></tr><tr><td>İndol-3-bütirik asit (IBA)</td> <td>Duchefa Biochemie</td><td>I0902</td><td></td></tr><tr><td>Likens-Nickerson aparatı</td><td>VitriLab LDA.</td><td>c/IN29/32</td><td></td></tr><tr><td>Microbox yuvarlak kaplar</td><td>Sac O2 O118</td><td>/80+OD118</td><td></td></tr><tr><td>n-Pentan</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>1.00882</td><td></td></tr><tr><td>PARAFILM M sızdırmazlık filmi</td><td>MARKA</td><td>HS234526B-1EA</td><td></td></tr><tr><td>Fito agar</td><td>Duchefa Biochemie</td><td>P1003</td><td></td></tr><tr><td>Patates Dekstroz Agar</td><td>BD DIFCO</td><td>213400</td><td></td></tr><tr><td>Neşter bıçağı no. 24</td><td>Romed Holland</td><td>BLADE24</td><td></td></tr><tr><td>Schenk & Hildebrandt Bazal tuz ortamı</td><td>Duchefa Biochemie</td><td>S0225</td><td></td></tr><tr><td>Schenk & Hildebrandt vitamin karışımı</td><td>Duchefa Biochemie</td><td>S0411</td><td></td></tr><tr><td>SPME elyaf montajı Polidimetilsiloksan (PDMS)</td><td>Supelco</td><td>57300-U</td><td></td></tr><tr><td>SPME Elyaf Tutucu</td><td>Supelco</td><td>57330-U</td><td></td></tr><tr><td>Sükroz</td><td>Duchefa Biochemie</td><td>S0809</td><td></td></tr><tr><td>Tenax TA- paslanmaz çelik borular- şartlandırılmış + kapaklı</td><td>Markes International</td><td>C1-AAXX-5003</td><td></td></tr></tbody></table>

İn vivo ve İn vitro Çamların Çam ağacı nematodu bursaphelenchus xylophilus ile enfeksiyonu ve İndüklenen uçucuların İzolasyonu

Infection of In Vivo and In Vitro Pines with the Pinewood Nematode Bursaphelenchus xylophilus and Isolation of Induced Volatiles

PWN, optimum koşullar altında hızlı bir şekilde çoğalır ve üretim süreleri 4 gün kadar düşük olabilir, her dişi yaşamı boyunca yaklaşık 80 yumurta bırakır28. Yukarıda açıklanan metodolojiyi kullanarak, mantar büyümesine bağlı olarak büyük miktarlarda PWN elde edilebilir. 8 günlük bir büyüme periyodu içinde, PWN'ler nüfus sayılarında 100 kat artışa sahip olabilir (Şekil 1). PWN miktarlarındaki tutarlılığı artırmak için sterilize edilmiş PWN'ler kullanın, çünkü bilinmeyen bakteri veya mantarlarla kontaminasyon PWN popülasyonunu olumsuz yönde etkileyecektir.
Çam fidelerinin PWN ile başarılı bir şekilde enfekte olması, enfeksiyondan yaklaşık 20 gün sonra PWD semptomlarına neden olacaktır (Şekil 2). Bununla birlikte, P. pinaster'ın PWD'ye duyarlılık üzerinde yüksek bir genetik değişkenliğe sahip olduğu bilinmektedir ve semptomların başlama zamanındaki değişiklikler çok yaygındır3.
İn vitro çam sürgünleri bu genetik değişkenliğe sahip değildir ve çevresel ve beslenme koşulları kontrol edilir ve kullanıcının ihtiyaçlarına göre ayarlanır. İn vitro deniz çamı filizi kültürleri, SH uzama ortamında iyi büyür ve haftada yaklaşık 0,9 mm'lik bir büyüme oranı gösterir6. İdeal olarak, steril PWN'ler en az 5 cm'lik sürgünlere (tabandan en yüksek iğneye kadar) eklenebilir. İn vitro çam sürgünleri daha küçük olduğundan ve PWN enfeksiyon alanı azaldığından, nematod popülasyon artışı daha az belirgindir, bu nedenle iki katına çıkma süreleri 6 ila 7 gün arasında olabilir6. Bununla birlikte, klorotik iğneler ko-kültürden sonraki bir ay içinde gözlenebilir (Şekil 3). Serada yetiştirilen çamlarla karşılaştırıldığında, in vitro çam sürgün kültürleri, PWD semptomlarının senkronizasyonuna, sıcaklık ve fotoperiyodun kontrolüne, beslenme durumunun kontrolüne ve kontaminasyonun önlenmesine izin verir.
İki yaşındaki P. pinaster fideleri, yaklaşık %0,2 ± %0,1 (h/taze ağırlık) uçucu yağ verimine ve düzenli kimyasal değişkenliğe sahip α-pinen, β-pinene veya δ-3-carene açısından zengin bir uçucu profile sahiptir. Şu anda, biri α-pinen ve β-pinenin baskın olduğu ve diğeri α-pinen ve β-pinenin δ-3-carene5 ile baskınlığı paylaştığı iki ana kemotip tanımlanmıştır. Deniz çamı in vitro sürgünleri, uçucuları GC-MS ile tam olarak profillenen istenen kemotipe göre kültürlenebilir. Damıtma-ekstraksiyon ile elde edilen uçucu maddelerden elde edilen uçucu profiller, uçucu yağlarınkinden farklı olabilirken, P. pinaster'da benzerdirler (Şekil 5A). Uçucu ekstraksiyon teknikleri, çam uçucu metabolit profillerinde indüklenen değişiklikleri değerlendirmek için yeterlidir. Uçucu yakalama teknikleri, çamların yaydığı uçucular hakkında bilgi verir. SPME tekniklerinden elde edilen kimyasal profiller farklı olabilir, ancak farklılıklar genellikle bitki materyalinin miktarına ve hapsedilen uçuculara bağlıdır (Şekil 5B, C).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67149/67149fig01.jpg"> Şekil 1: Çam ağacı nematodunun in vitro büyümesi. (A) Sterilize edilmiş hidratlı arpa tohumlarında ve (B) mantar miselyumu ile beslendikten sonra in vitro çam ağacı nematod kültüründe yetiştirilen sporsuz Botrytis cinerea suşu. Ölçek çubuğu = 1 cm. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67149/67149fig01large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67149/67149fig02.jpg"> Şekil 2: Çam fidanları ile sera denemeleri. (A) Çam Solgunluğu Hastalığı belirtileri olmayan ve (B) 2 yaşında bir Pinus pinaster fidanı. Ölçek çubuğu = 10 cm. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67149/67149fig02large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67149/67149fig03.jpg"> Şekil 3: Çam mikro filizleri ile in vitro deneyler. Pinus pinaster in vitro çekim kültürleri (A) çam ağacı nematod enfeksiyonundan önce ve (B) sonra. Nematod enfeksiyonu sonucu kloroz, mikro sürgün iğnelerinde (oklar) görülebilir. Ölçek çubuğu = 1,5 cm. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67149/67149fig03large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67149/67149fig04.jpg"> Şekil 4: Farklı uçucu izolasyon sistemleri için kurulum. (A) uçucu yağların hidrodamıtma (Clevenger aparatı), (B) uçucuların damıtma-ekstraksiyon (Likens-Nickerson aparatı) ve üst boşluk uçucularının (C) lifleri veya (D) paketlenmiş tüplerle katı faz mikroekstraksiyonu (SPME) ile izolasyonu. Ölçek çubuğu = 10 cm. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67149/67149fig04large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67149/67149fig05.jpg"> Şekil 5: Pinus pinaster sürgün uçucularının temsili kromatogramları. (A) uçucu yağ, (B) katı fazlı mikroekstraksiyon lifi tarafından toplanan uçucular ve (C) paketlenmiş tüpler kullanılarak yayılan uçucular. Laboratuvar tarafından oluşturulmuş bir referans kitaplığı kullanılarak tanımlanmıştır. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67149/67149fig05large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>

İn Vivo ve İn Vitro Çamların Çam Ağacı Nematodu Bursaphelenchus xylophilus ile Enfeksiyonu ve İndüklenen Uçucuların İzolasyonu

The pinewood nematode (PWN) is a phytoparasite that causes pine wilt disease (PWD) in conifer species. This plant parasitic nematode has heavily ...

infection-vivo-vitro-pines-with-pinewood-nematode-bursaphelenchus

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Çam ağacı nematodu Bursaphelenchus xylophilus'un çiftleşme davranışını araştırmak için bir protokol sunulmuştur. B. xylophilus'un davranışsal özellikleri çiftleşme sürecinde açıklanmaktadır.

Pinewood Nematodu gözlem ve Çiftleşme Davranış miktarının belirlenmesi, Orijinli olanlar

Burada, gen fonksiyonlarının incelenmesini kolaylaştırmak için Bursaphelenchus xylophilus'ta RNA girişiminin ayrıntılı bir ıslatma yöntemini tanıtıyoruz.

RNA Girişiminin Çam Ağacı Nematodunda Uygulanması, Bursaphelenchus xylophilus

Burada, bir orman odun kurdundan entomopatojenik mantarlar elde etmek için bir protokol ve bir Coleopteran model böcek kullanarak entomopatojenik aktivitelerini değerlendirmek için ikame edici bir yol sunuyoruz. Bu yöntem, doğal ormanlardaki odun delici böcek zararlılarından entomopatojenik mantar kaynaklarını keşfetmek için etkili ve kullanışlıdır.

Bir Orman Ağaç Kurdundan Entomopatojenik Mantarların İzolasyonu, Davranışsal Tanımlama ve Patojenite Değerlendirmesi

Mevcut protokol, potasyum klorür (KCl) iyonlarının ozmotik regülasyonu yoluyla Bursaphelenchus xylophilus'un üçüncü aşama gençlerinin (pre-dauer juveniles, JIII.) kriptobiyoza dağılmasını indüklemek için bir yöntemi açıklamaktadır. Bu yöntem, B. xylophilus'un stres direnç mekanizmaları üzerine yapılan araştırmalar için teknik destek sağlayabilir.

Bursaphelenchus xylophilus'un Üçüncü Aşama Dağılmış Yavrularının Ozmotik Regülasyon Yoluyla Kriptobiyoza Girişinin İndüklenmesi

Protokol, Solanum tuberosum köklerinin in vivo sera koşullarında bitki parazitik nematodları ve optik mikroskopi ile kök yapısının histokimyasal analizi için patates in vitro transgenik kökleri ile enfeksiyonunu açıklar.

İndüklenen Yapısal Değişikliklerin Değerlendirilmesi için Patates Köklerinin Bitki Paraziti Nematodlarla İn vivo ve İn vitro Enfeksiyonu

Clathrin-aracılı endositoz kargo seçimi ve clathrin kat montaj koordine adaptör proteinler bağlıdır. Burada bir model olarak maya endositik adaptör protein Sla1p kullanarak adaptörü clathrin fiziksel etkileşim ve canlı hücre görüntüleme yaklaşımları incelemek için prosedürler açıklanmaktadır.

In vivo ve in vitro Adaptör-clathrin Etkileşim Çalışmaları

Bitki uçucu toplamak için bir itme-çekme yöntemi açıklanmıştır. Bu yöntem, otçul beslenme, eksojen metil jasmonate ve mekanik hasar kaynaklanan uçucu bir karşılaştırma için sağlar. Bu teknik aynı zamanda yaban mersini bitkileri içinde hasarlı dalları otobur uçucu için maruz hasarsız şube uçucu yanıtını araştırmak için kullanılır.

Otobur bağlı Blueberry uçucu ve Intra-bitki Sinyalleşme

Sitometrisi kemik iliği hematopoietik öncü dağıtımı yanı sıra verimli yalıtmak için son derece saf hematopoetik kök hücreleri (HKH'ler) analiz etmek için bir yöntem tarif edilir. İzolasyon ^ işleminde esas olarak hücresel ve moleküler çalışmalar için HKH'ler arındırmak için sıralama c-Kit + hücreleri ve hücre manyetik zenginleştirme dayanmaktadır.

Mürin Hematopoetik Kök Hücreler ve Lineage-kararlı progenitörlerin Fenotipik Analizi ve İzolasyon

İlköğretim hepatositler bir fizyolojik ilgili deneysel sistem biyokimyasal, moleküler ve metabolik fonksiyonlarını değerlendirmek için değerli bir araç sağlar. Biz sürekli to1.0 × 10 kadar yaşayabilir hepatositler üretir yerinde karaciğer perfüzyon, sıçan için güvenilir bir protokol...

Sıçan Karaciğer Hücreleri İzolasyon ve İlköğretim Kültür

MRNA üzerindeki translasyonel duraklama siteleri tanımlamak için bir teknik tarif edilmiştir. Bu prosedür bir denatüre jel elektroforez ile olgunlaşmamış zincirlerinin boyutu analizi ve ardından bir hedef mRNA in vitro için, içerisinde sırasında ribozom üzerinde biriken olgunlaşmamış polipeptidlerin izolasyonu dayanmaktadır.

Ribozom Bağlı Doğan Polipeptitler İzolasyonu<em&gt; In vitro</em&gt; MRNA boyunca Translasyonel Duraklat Siteleri Belirleme

Keşfedin çam ağacı nematodu Bursaphelenchus xylophilus ile Pinus pinaster enfeksiyonunu in vitro ve in vivo koşullarda. Bu yöntem, uçucu organik bileşiklerin izolasyonu ve bitki-patojen etkileşimlerinin incelenmesine olanak tanır.

İn Vivo ve İn Vitro Çamların Çam Ağacı Nematodu Bursaphelenchus xylophilus ile Enfeksiyonu ve İndüklenen Uçucuların İzolasyonu

Daha fazla video keşfet