Name: Fibronektin Adezyonu ve Migrasyon Testi Kullanılarak Kondrosit ve Kondroprojenitörlerin İzolasyonu (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-10-04T14:30:00.000+00:00
Duration: 8 min 9 s
Description: Öğrenin fibronektin adezyonu ve migrasyon testleriyle insan kıkırdak doku mühendisliği için kondrosit ve kondroprogenitör izolasyonu. Bu yöntem rejeneratif tıpta iyileşme stratejileri geliştirmeye yardımcı olur.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<meta charset="utf8"></head><body>İnsan Eklem Kıkırdağından Kondroprogenitör ve Kondrosit İzolasyonu

<ol><li>Muthu, S., Visawanathan, V., Chellamuthu, G., Thabrez, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+effectiveness+of+various+treatments+for+cartilage+defects+compared+to+microfracture%3A+A+network+meta-analysis+of+randomized+controlled+trials%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cartilage+Joint+Preserv%22%5BJournal%5D)">Clinical effectiveness of various treatments for cartilage defects compared to microfracture: A network meta-analysis of randomized controlled trials.</a> J Cartilage Joint Preserv. 4 (2), 100163(2023).</li>
<li>Sophia Fox, A. J., Bedi, A., Rodeo, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+basic+science+of+articular+cartilage%5BTitle%5D)+AND+%22Sports+Health%22%5BJournal%5D)">The basic science of articular cartilage.</a> Sports Health. 1 (6), 461-468 (2009).</li>
<li>Brittberg, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+articular+cartilage+repair-An+up-to-date+review%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Joint%22%5BJournal%5D)">Clinical articular cartilage repair-An up-to-date review.</a> Annals of Joint. 3 (0), (2018).</li>
<li>Muthu, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Failure+of+cartilage+regeneration%3A+emerging+hypotheses+and+related+therapeutic+strategies%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Rheumatol%22%5BJournal%5D)">Failure of cartilage regeneration: emerging hypotheses and related therapeutic strategies.</a> Nat Rev Rheumatol. 19 (7), 403-416 (2023).</li>
<li>Lavrentieva, A., Hatlapatka, T., Neumann, A., Weyand, B., Kasper, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Potential+for+osteogenic+and+chondrogenic+differentiation+of+MSC%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Biochem+Eng+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Potential for osteogenic and chondrogenic differentiation of MSC.</a> Adv Biochem Eng Biotechnol. 129, 73-88 (2013).</li>
<li>Fernandez-Moure, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhanced+osteogenic+potential+of+mesenchymal+stem+cells+from+cortical+bone%3A+a+comparative+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Res+Ther%22%5BJournal%5D)">Enhanced osteogenic potential of mesenchymal stem cells from cortical bone: a comparative analysis.</a> Stem Cell Res Ther. 6, 203(2015).</li>
<li>Goldberg, A., Mitchell, K., Soans, J., Kim, L., Zaidi, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+mesenchymal+stem+cells+for+cartilage+repair+and+regeneration%3A+a+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22J+Orthop+Surg+Res%22%5BJournal%5D)">The use of mesenchymal stem cells for cartilage repair and regeneration: a systematic review.</a> J Orthop Surg Res. 12, 39(2017).</li>
<li>Zha, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heterogeneity+of+mesenchymal+stem+cells+in+cartilage+regeneration%3A+From+characterization+to+application%5BTitle%5D)+AND+%22NPJ+Regen+Med%22%5BJournal%5D)">Heterogeneity of mesenchymal stem cells in cartilage regeneration: From characterization to application.</a> NPJ Regen Med. 6 (1), 1-15 (2021).</li>
<li>Hayes, A. J., Tudor, D., Nowell, M. A., Caterson, B., Hughes, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chondroitin+Sulfate+sulfation+motifs+as+putative+biomarkers+for+isolation+of+articular+cartilage+progenitor+cells%5BTitle%5D)+AND+%22J+Histochem+Cytochem%22%5BJournal%5D)">Chondroitin Sulfate sulfation motifs as putative biomarkers for isolation of articular cartilage progenitor cells.</a> J Histochem Cytochem. 56 (2), 125-138 (2008).</li>
<li>Dowthwaite, G. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+surface+of+articular+cartilage+contains+a+progenitor+cell+population%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Sci%22%5BJournal%5D)">The surface of articular cartilage contains a progenitor cell population.</a> J Cell Sci. 117 (Pt 6), 889-897 (2004).</li>
<li>Williams, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+and+clonal+characterization+of+a+progenitor+cell+sub-population+in+normal+human+articular+cartilage%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+One%22%5BJournal%5D)">Identification and clonal characterization of a progenitor cell sub-population in normal human articular cartilage.</a> PloS One. 5 (10), e13246(2010).</li>
<li>Vinod, E., Parameswaran, R., Ramasamy, B., Kachroo, U. Pondering the potential of hyaline cartilage-derived chondroprogenitors for tissue regeneration: A systematic review. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aVinod%2C+E+%22Cartilage%22">Cartilage</a>. , (2020).</li>
<li>Khan, I. M., Bishop, J. C., Gilbert, S., Archer, C. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clonal+chondroprogenitors+maintain+telomerase+activity+and+Sox9+expression+during+extended+monolayer+culture+and+retain+chondrogenic+potential%5BTitle%5D)+AND+%22Osteoarthritis+Cartilage%22%5BJournal%5D)">Clonal chondroprogenitors maintain telomerase activity and Sox9 expression during extended monolayer culture and retain chondrogenic potential.</a> Osteoarthritis Cartilage. 17 (4), 518-528 (2009).</li>
<li>Fellows, C. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+a+divergent+progenitor+cell+sub-populations+in+human+osteoarthritic+cartilage%3A+the+role+of+telomere+erosion+and+replicative+senescence%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Characterization of a divergent progenitor cell sub-populations in human osteoarthritic cartilage: the role of telomere erosion and replicative senescence.</a> Sci Rep. 7, 41421(2017).</li>
<li>Vinod, E., Kachroo, U., Amirtham, S. M., Ramasamy, B., Sathishkumar, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+analysis+of+fresh+chondrocytes%2C+cultured+chondrocytes+and+chondroprogenitors+derived+from+human+articular+cartilage%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Histochem%22%5BJournal%5D)">Comparative analysis of fresh chondrocytes, cultured chondrocytes and chondroprogenitors derived from human articular cartilage.</a> Acta Histochem. 122 (1), 151462(2019).</li>
<li>Korpershoek, J. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selection+of+highly+proliferative+and+multipotent+meniscus+progenitors+through+differential+adhesion+to+Fibronectin%3A+A+novel+approach+in+meniscus+tissue+engineering%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Selection of highly proliferative and multipotent meniscus progenitors through differential adhesion to Fibronectin: A novel approach in meniscus tissue engineering.</a> Int J Mol Sci. 22 (16), 8614(2021).</li>
<li>Wang, J., Roberts, S., Li, W., Wright, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phenotypic+characterization+of+regional+human+meniscus+progenitor+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Bioeng+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Phenotypic characterization of regional human meniscus progenitor cells.</a> Front Bioeng Biotechnol. 10, 1003966(2022).</li>
<li>Koelling, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Migratory+chondrogenic+progenitor+cells+from+repair+tissue+during+the+later+stages+of+human+osteoarthritis%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Stem+Cell%22%5BJournal%5D)">Migratory chondrogenic progenitor cells from repair tissue during the later stages of human osteoarthritis.</a> Cell Stem Cell. 4 (4), 324-335 (2009).</li>
<li>Seol, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chondrogenic+progenitor+cells+respond+to+cartilage+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Arthritis+Rheum%22%5BJournal%5D)">Chondrogenic progenitor cells respond to cartilage injury.</a> Arthritis Rheum. 64 (11), 3626-3637 (2012).</li>
<li>Xue, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+and+identification+of+stem+cells+in+different+subtypes+of+cartilage+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+Opin+Biol+Ther%22%5BJournal%5D)">Isolation and identification of stem cells in different subtypes of cartilage tissue.</a> Expert Opin Biol Ther. 15 (5), 623-632 (2015).</li>
<li>McCarthy, H. E., Bara, J. J., Brakspear, K., Singhrao, S. K., Archer, C. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+comparison+of+equine+articular+cartilage+progenitor+cells+and+bone+marrow-derived+stromal+cells+as+potential+cell+sources+for+cartilage+repair+in+the+horse%5BTitle%5D)+AND+%22Vet+J%22%5BJournal%5D)">The comparison of equine articular cartilage progenitor cells and bone marrow-derived stromal cells as potential cell sources for cartilage repair in the horse.</a> Vet J. 192 (3), 345-351 (2012).</li>
<li>Elsaesser, A. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+a+migrative+subpopulation+of+adult+human+nasoseptal+chondrocytes+with+progenitor+cell+features+and+their+potential+for+in+vivo+cartilage+regeneration+strategies%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+%26+Biosci%22%5BJournal%5D)">Characterization of a migrative subpopulation of adult human nasoseptal chondrocytes with progenitor cell features and their potential for in vivo cartilage regeneration strategies.</a> Cell & Biosci. 6, 11(2016).</li>
<li>Batschkus, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mapping+the+secretome+of+human+chondrogenic+progenitor+cells+with+mass+spectrometry%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Anat%22%5BJournal%5D)">Mapping the secretome of human chondrogenic progenitor cells with mass spectrometry.</a> Ann Anat. 212, 4-10 (2017).</li>
<li>Vinod, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Migratory+chondroprogenitors+retain+superior+intrinsic+chondrogenic+potential+for+regenerative+cartilage+repair+as+compared+to+human+fibronectin-derived+chondroprogenitors%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Migratory chondroprogenitors retain superior intrinsic chondrogenic potential for regenerative cartilage repair as compared to human fibronectin-derived chondroprogenitors.</a> Sci Rep. 11, 23685(2021).</li>
<li>Vinod, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intraarticular+injection+of+allogenic+chondroprogenitors+for+treatment+of+osteoarthritis+in+rabbit+knee+model%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Orthop+Trauma%22%5BJournal%5D)">Intraarticular injection of allogenic chondroprogenitors for treatment of osteoarthritis in rabbit knee model.</a> J Clin Orthop Trauma. 10 (1), 16-23 (2018).</li>
<li>Xue, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cartilage+progenitor+cells+combined+with+PHBV+in+cartilage+tissue+engineering%5BTitle%5D)+AND+%22J+Trans+Med%22%5BJournal%5D)">Cartilage progenitor cells combined with PHBV in cartilage tissue engineering.</a> J Trans Med. 17 (1), 104(2019).</li>
<li>Carluccio, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Progenitor+cells+activated+by+platelet+lysate+in+human+articular+cartilage+as+a+tool+for+future+cartilage+engineering+and+reparative+strategies%5BTitle%5D)+AND+%22Cells%22%5BJournal%5D)">Progenitor cells activated by platelet lysate in human articular cartilage as a tool for future cartilage engineering and reparative strategies.</a> Cells. 9 (4), E1052(2020).</li>
<li>Wang, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intra-articular+delivery+of+extracellular+vesicles+secreted+by+chondrogenic+progenitor+cells+from+MRL%2FMpJ+superhealer+mice+enhances+articular+cartilage+repair+in+a+mouse+injury+model%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Res+Ther%22%5BJournal%5D)">Intra-articular delivery of extracellular vesicles secreted by chondrogenic progenitor cells from MRL/MpJ superhealer mice enhances articular cartilage repair in a mouse injury model.</a> Stem Cell Res Ther. 11 (1), 93(2020).</li>
<li>Wang, H. C., Lin, T. H., Hsu, C. C., Yeh, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Restoring+osteochondral+defects+through+the+differentiation+potential+of+cartilage+stem%2Fprogenitor+cells+cultivated+on+porous+scaffolds%5BTitle%5D)+AND+%22Cells%22%5BJournal%5D)">Restoring osteochondral defects through the differentiation potential of cartilage stem/progenitor cells cultivated on porous scaffolds.</a> Cells. 10 (12), 3536(2021).</li>
<li>Kellgren, J. H., Lawrence, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Radiological+assessment+of+osteo-arthrosis%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Rheum+Dis%22%5BJournal%5D)">Radiological assessment of osteo-arthrosis.</a> Ann Rheum Dis. 16 (4), 494-502 (1957).</li>
<li>Vinod, E., Kachroo, U., Rebekah, G., Yadav, B. K., Ramasamy, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+human+articular+chondrocytes+and+chondroprogenitors+derived+from+non-diseased+and+osteoarthritic+knee+joints+to+assess+superiority+for+cell-based+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Histochem%22%5BJournal%5D)">Characterization of human articular chondrocytes and chondroprogenitors derived from non-diseased and osteoarthritic knee joints to assess superiority for cell-based therapy.</a> Acta Histochem. 122 (6), 151588(2020).</li>
<li>Nelson, L., McCarthy, H. E., Fairclough, J., Williams, R., Archer, C. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evidence+of+a+viable+pool+of+stem+cells+within+human+osteoarthritic+cartilage%5BTitle%5D)+AND+%22Cartilage%22%5BJournal%5D)">Evidence of a viable pool of stem cells within human osteoarthritic cartilage.</a> Cartilage. 5 (4), 203-214 (2014).</li>
<li>Vinod, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+methods+for+the+isolation+and+culture+of+Migratory+chondroprogenitors+from+Human+articular+cartilage%5BTitle%5D)+AND+%22Connect+Tissue+Res%22%5BJournal%5D)">Comparison of methods for the isolation and culture of Migratory chondroprogenitors from Human articular cartilage.</a> Connect Tissue Res. 64 (4), 389-399 (2023).</li>
<li>Dominici, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Minimal+criteria+for+defining+multipotent+mesenchymal+stromal+cells.+The+International+Society+for+Cellular+Therapy+position+statement%5BTitle%5D)+AND+%22Cytotherapy%22%5BJournal%5D)">Minimal criteria for defining multipotent mesenchymal stromal cells. The International Society for Cellular Therapy position statement.</a> Cytotherapy. 8 (4), 315-317 (2006).</li>
<li>Vinod, E., Boopalan, P. R. J. V. C., Sathishkumar, S. Reserve or resident progenitors in cartilage? Comparative analysis of chondrocytes versus chondroprogenitors and their role in cartilage repair. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aVinod%2C+E+%22Cartilage%22">Cartilage</a>. , (2017).</li>
<li>Dicks, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prospective+isolation+of+chondroprogenitors+from+human+iPSCs+based+on+cell+surface+markers+identified+using+a+CRISPR-Cas9-generated+reporter%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Res+Ther%22%5BJournal%5D)">Prospective isolation of chondroprogenitors from human iPSCs based on cell surface markers identified using a CRISPR-Cas9-generated reporter.</a> Stem Cell Res Ther. 11 (1), 66(2020).</li>
<li>Vinod, E., et al. Prospective isolation and characterization of chondroprogenitors from human chondrocytes based on CD166/CD34/CD146 surface markers. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aVinod%2C+E+%22Cartilage%22">Cartilage</a>. , (2021).</li>
<li>Vinod, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Migratory+chondroprogenitors+retain+superior+intrinsic+chondrogenic+potential+for+regenerative+cartilage+repair+as+compared+to+human+Fibronectin-derived+chondroprogenitors%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Migratory chondroprogenitors retain superior intrinsic chondrogenic potential for regenerative cartilage repair as compared to human Fibronectin-derived chondroprogenitors.</a> Sci Rep. 11 (1), 23685(2021).</li>
<li>Vinod, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+fetal+cartilage-derived+chondrocytes+and+chondroprogenitors+display+a+greater+commitment+to+chondrogenesis+than+adult+cartilage+resident+cells%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+One%22%5BJournal%5D)">Human fetal cartilage-derived chondrocytes and chondroprogenitors display a greater commitment to chondrogenesis than adult cartilage resident cells.</a> PloS One. 18 (4), e0285106(2023).</li>
<li>Joos, H., Wildner, A., Hogrefe, C., Reichel, H., Brenner, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interleukin-1+beta+and+tumor+necrosis+factor-alpha+inhibit+migration+activity+of+chondrogenic+progenitor+cells+from+non-fibrillated+osteoarthritic+cartilage%5BTitle%5D)+AND+%22Arthritis+Res+Ther%22%5BJournal%5D)">Interleukin-1 beta and tumor necrosis factor-alpha inhibit migration activity of chondrogenic progenitor cells from non-fibrillated osteoarthritic cartilage.</a> Arthritis Res Ther. 15 (5), R119(2013).</li>
<li>Vinod, E., Parameswaran, R., Amirtham, S. M., Rebekah, G., Kachroo, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+analysis+of+human+bone+marrow+mesenchymal+stem+cells%2C+articular+cartilage+derived+chondroprogenitors+and+chondrocytes+to+determine+cell+superiority+for+cartilage+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Histochem%22%5BJournal%5D)">Comparative analysis of human bone marrow mesenchymal stem cells, articular cartilage derived chondroprogenitors and chondrocytes to determine cell superiority for cartilage regeneration.</a> Acta Histochem. 123 (4), 151713(2021).</li>
<li>Vinod, E., Padmaja, K., Ramasamy, B., Sathishkumar, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Systematic+review+of+articular+cartilage+derived+chondroprogenitors+for+cartilage+repair+in+animal+models%5BTitle%5D)+AND+%22J+Orthopaed%22%5BJournal%5D)">Systematic review of articular cartilage derived chondroprogenitors for cartilage repair in animal models.</a> J Orthopaed. 35, 43-53 (2022).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>22-Neşter Bıçağı&nbsp;</td><td>CAM VAN</td><td></td><td></td></tr><tr><td>6 kuyulu plaka&nbsp;</td><td>CORNING</td><td>3516</td><td></td></tr><tr><td>Alcian Mavisi</td><td>THERMO SCIENTIFIC</td><td>J6012</td><td></td></tr><tr><td>Alizarin Kırmızı&nbsp;</td><td>SIGMA</td><td>130223</td><td></td></tr><tr><td>Amfoterisin-B (2 & mu; g/mL).</td><td>GIBCO</td><td>15240062</td><td></td></tr><tr><td>Askorbik asit (62 & mu; g/mL)</td><td>SIGMA ALDRICH</td><td>A4544-25G</td><td></td></tr><tr><td>BC CytoFLEX LX akış sitometresi&nbsp;</td><td>BECKMAN COULTER</td><td>CYTExpert Yazılım Sürümü 2.5</td><td></td></tr><tr><td>CaCl2</td><td>SIGMA ALDRICH</td><td>&nbsp; C34006</td><td></td></tr><tr><td>CD105-FITC</td><td>BD BIYOBILIM</td><td></td><td></td></tr> 561443 <tr><td>CD106-APC</td><td>BD BIYOBILIM</td><td></td><td></td></tr> 551147 <tr><td>CD14-FITC</td><td>BD BIYOBILIM</td><td></td><td></td></tr> 555397 <tr><td>CD29-APC</td><td>BD BIYOBILIM</td><td></td><td></td></tr> 559883 <tr><td>CD34-PE</td><td>BD BIYOBILIM</td><td></td><td></td></tr> 348057 <tr><td>CD45-FITC</td><td>BD BIYOBILIM</td><td></td><td></td> 347463</tr><tr><td>CD49b-FITC</td><td>MILTENİL BİYOTEC</td><td>&nbsp; MACS 130/100337</td><td></td></tr><tr><td>CD49E-PE</td><td>BD BİYOBİLİM</td><td></td><td></td></tr> 555617 <tr><td>CD73-PE</td><td>BD BİYOBİLİM</td><td></td><td></td></tr> 550257 <tr><td>CD90-PE</td><td>BD BİYOBİLİM</td><td>561970</td><td></td></tr><tr><td>Hücre sayacı</td><td>DE NOVIX</td><td>Hücre Damlası BF</td><td></td></tr><tr><td>Hücre süzgeci</td><td>HIMEDIA</td><td>TCP024</td><td></td></tr><tr><td>Santrifüj</td><td>BECKMAN COULTER</td><td>Allegra X-30R</td><td></td></tr><tr><td>CO2 inkübatör&nbsp;</td><td>TERMO BİLİMSEL</td><td>MODEL-371</td><td></td></tr><tr><td>Kollajen tip X (COL10A1), Runt ile ilgili transkripsiyon faktörü (RUNX2), SRY-Box Transkripsiyon Faktörü 9 (SOX-9), Aggrekan (ACAN) ve Kollajen tip II (COL2A1)&nbsp;</td><td>EUROGENTEC, BELÇİKA</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Kollajenaz tip II</td><td>WORTHINGTON</td><td>LS004176</td><td></td></tr><tr><td>DMEM F-12 (Dulbecco'nun Modifiye Eagle's Medium F-12)</td><td>SIGMA ALDRICH</td><td>D8900-1L</td><td></td></tr><tr><td>ELISA plaka okuyucu</td><td>MOLEKÜLER CİHAZLAR</td><td>SpectraMax i3x Okuyucu</td><td></td></tr><tr><td>Hızlı Yeşil</td><td>FISHER SIENTIFIC</td><td>2353459</td><td></td></tr><tr><td>Fetal Sığır Serumu</td><td>GIBCO</td><td>10270106</td> FGF2 BULUT KLON CORP APA551Hu01 Fibronektin (10 & <td></td></tr> mikro<tr><td></td><td></td><td></td>;<td></td></tr><tr><td> L / mL)</td> <td>SIGMA ALDRICH</td><td>F1141</td><td></td></tr><tr><td>Birinci İplikli sentez sistemi</td><td>TAKARA BIO</td><td>6110A</td><td></td></tr><tr><td>Glutamax</td><td>GIBCO</td><td>35050061</td><td></td></tr><tr><td>Hematoksilen</td><td>QUALIGENS</td><td>Q39411</td><td></td></tr><tr><td>MgCl < alt>2< / alt> ve nbsp;</td><td>SIGMA ALDRICH</td><td>M8787</td><td></td></tr><tr><td>Yağ Kırmızısı O</td><td>SIGMA</td><td>1320065</td><td></td></tr><tr><td>PBS (Fosfat Tamponlu Salin)</td><td>GIBCO</td><td>10010023</td><td></td></tr><tr><td>PCR termocycler&nbsp;</td><td>UYGULAMALI BİYOSYSTEMS</td><td>Quantstudio 12K Flex ısı döngüleyici&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Penisilin-streptomisin (100 IU/mL)</td><td>GIBCO</td><td>15240062</td><td></td></tr><tr><td>Picrosirius Kırmızı</td><td>ALFA AESAR</td><td>2610108</td><td></td></tr><tr><td>Primer antikor (fare Kollajen tip II)</td><td>DSHB</td><td>DSHB II II6B3</td><td></td></tr><tr><td>Pronaz</td><td>ROCHE</td><td>10165913103</td><td></td></tr><tr><td>Quant-iT Picogreen dsDNA reaktifi</td><td>THERMO SCIENTIFIC</td><td>P7589</td><td></td></tr><tr><td>Buzdolabı</td><td>ELANPRO</td><td></td><td></td></tr><tr><td>RNeasy MiniKit</td><td>QIAGEN</td><td>74104</td><td></td></tr><tr><td>Safranin O</td><td>QUALIGENS</td><td>Q39962</td><td></td></tr><tr><td>İkincil antikor (Keçi Anti-Fare IgG Antikoru, HRP konjugat)</td><td>THERMO SCIENTIFIC</td><td>31430</td><td></td></tr><tr><td>Çalkalama su banyosu&nbsp;</td><td>REMI</td><td></td><td></td></tr><tr><td>StemPro farklılaştırma kitleri&nbsp;</td><td>GIBCO</td><td>1007201, A1007001 ve A1007101</td><td></td></tr><tr><td>T-25 şişesi&nbsp;</td><td>CORNING</td><td>430639</td><td></td></tr><tr><td>TakyonTM Düşük Rox SYBR Master Mix dTTP Mavi&nbsp;</td><td>EUROGENTEC</td><td>UF-LSMT-B0701</td><td></td></tr><tr><td>TGF VE BETA;</td><td>ABCAM</td><td>ab277760</td><td></td></tr><tr><td>Doku Kültürü Petridish</td><td>TARSONS</td><td>960010</td><td></td></tr><tr><td>Toluidin Mavisi</td><td>QUALIGENS</td><td>2040</td><td></td></tr><tr><td>Triphan mavisi&nbsp;</td><td>GIBCO</td><td>15250061</td><td></td></tr><tr><td>Tripsin EDTA</td><td>GIBCO</td><td>25200072</td><td></td></tr></tbody></table>

fibronektin adezyonu ve migrasyon testi kullanılarak kondrosit ve kondroprojenitörlerin İzolasyonu

Isolation of Chondrocytes and Chondroprogenitors Using Fibronectin Adhesion and Migratory Assay

86.9 mg kıkırdak diliminden, 1.72 x 105 hücreli bir kondrosit hücre verimi kaydedildi. Yükleme üzerine, kondrositler hemen yapışır, başlangıçta yuvarlak bir parke taşı görünümü sunar ve daha fazla genişleme üzerine fibroblastik bir duruma dönüşür (Şekil 1 A,B). Bu kondrositlerin fibronektin plakalarına ekilmesi tipik olarak% 2 yapışma ile sonuçlanır, her hücre klonal büyümeye uğrar (Şekil 2 C, D), 10-12. günlerde (32 hücre / klon) 5 kişilik bir popülasyona ulaşır. 10 cm²'lik alan içindeki klonlar birleştirilir ve FAA-CP'leri üretmek için gerekli geçide genişletilir. Kollajenaz inkübasyonunu takiben kültürde sürdürülen kıkırdak eksplantları, hücre dışı matriks gevşemesi gösterir ve migrasyon genellikle 7. gün gibi erken bir sürede gözlenir (Şekil 2E). Hem FAA-CP'ler hem de MCP'ler, birleşmeden önce bal peteği benzeri bir yapı elde eden, BM-MSC'lerle yaygın olarak ilişkilendirilen bir özellik olan mil şeklinde bir yapı sergiler (Şekil 1E,F).
İzole edilmiş üç tip hücre, yani kondrositler, FAA-CP'ler ve MCP'ler, faz kontrastlı görüntüleme kullanılarak yakından izlenir. FAA-CP'ler yalnızca beş popülasyon ikiye katlanmasının onaylanmasından sonra transfer edilir.
İzole edilmiş ve genişlemiş hücrelerin fenotipik karakterizasyonu tipik olarak kondrodogenezin varsayılan belirteçleri, yani CD146 ve CD166 için akış sitometrik analizinin yanı sıra kondrogenez belirteçleri (SOX-9, ACAN, COL2A1), fibrokartilaj belirteci COL1A1 ve hipertrofi belirteçleri (RUNX2 ve COL10A1) için gen ekspresyon analizini içerir. Her üç hücre grubu da CD105, CD73 ve CD90'ın yüksek ekspresyonunu (% &gt;95) gösterir; CD34 ve CD45'in düşük ila negatif ekspresyonu; ve CD166'nın yüksek ekspresyonu (%&gt;98), CD146'nın orta, donöre bağımlı ekspresyonu (@-u) (Şekil 2A).
qRT-PCR sonuçları, hücreler değerlendirmeden önce kültürlendikçe SOX-9, ACAN ve ayrıca bir fibrokartilaj belirteci olan COL1A1'in karşılaştırılabilir ve yüksek ekspresyonunu gösterir (Şekil 2B). Kondrodogenezin doğrulanması için, Safranin O'yu takiben GAG içeren alanlarda turuncu-kırmızı komplekslerin pozitif alımı ve Alcian Blue ve Toluidin Blue'yu takiben mavimsi ila morumsu kompleksler tüm hücre gruplarında gözlenir, FAA-CP ve MCP gruplarında daha yüksek bir oran vardır. Kollajen tip II için kondrojenik diferansiye peletlerin immünohistokimya analizi, her üç grupta da kahverengimsi fibriler tutulumu göstermektedir (Şekil 3). Ayrıca, GAG / DNA analizi, daha yüksek ekspresyon gösteren FAA-CP grupları ile kondrojenik farklılaşmanın doğrulandığını da gösterdi (Şekil 2C).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67160/67160fig01.jpg"> 
Şekil 1: Kondrositlerin ve kondroprojenitörlerin izolasyonu ve karakterizasyonu. Çalışma algoritması, izolasyondan hemen sonra ve birkaç günlük genişlemeden sonra bir faz kontrast mikroskobu altında üç hücre grubunun izolasyonunu ve morfolojik özelliklerini göstermektedir. (A) Yeni izole edilmiş kondrositler, kültürün ilk günlerinde yapışık kültürlere yapışır ve daha fazla genişleme ile fibroblastik bir görünüm elde eder (B). (C) Fibronektin adezyon testine tabi tutulan kondrositler klonal büyüme gösterir ve 10. günde 5 katına çıkan bir popülasyona ulaşır (D). (E) Kondroprogenitörler, kültürün 10. gününe kadar eksplantın kenarından göç eder ve daha fazla genişleme (F) ile iğ şeklinde bir büyüme modeli sergiler. Faz kontrast görüntü büyütme: 10x; Ölçek çubukları: 100 μm. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67160/67160fig01large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67160/67160fig02.jpg"> 
Şekil 2: Moleküler karakterizasyon verileri. (A) Pozitif ve negatif MSC belirteçleri ve potansiyel kondrogenez belirteçleri için akış sitometrik analizi. (B) Kondrojenik ve hipertrofik belirteçlerin gen ekspresyon analizi için üç hücre grubu için RT-PCR ekspresyon verileri. (C) Kondrojenik farklılaşmış peletlerin toplam GAG/DNA analizi. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67160/67160fig02large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67160/67160fig03.jpg"> 
Şekil 3: Kondrojenik farklılaşmayı takiben doğrulayıcı boyama. Safranin O ve üç hücre grubu arasında kollajen tip II için immünohistokimyasal analiz. Ölçek çubukları: 10x büyütme için, 50 μm; 40x büyütme, 200 μm. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67160/67160fig03large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>

Fibronektin Adezyonu ve Migrasyon Testi Kullanılarak Kondrosit ve Kondroprojenitörlerin İzolasyonu

Chondroprogenitor cells (CPCs), recently identified as a distinct subpopulation, exhibit promise due to their mesenchymal properties, heightened ...

isolation-chondrocytes-chondroprogenitors-using-fibronectin-adhesion

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Sinovyal sıvıda yüksek düzeyde insan eklem kondrosit kültür 3D sistemi açıklanmıştır. Sinovyal sıvı eklem kıkırdağı için en doğal mikroçevresinin yansıtır ve kolayca elde ve saklanabilir. Bu sistem, böylece kıkırdak rejenerasyon eğitim ve artrit tedavisi için tarama terapötikler için kullanılabilir.

Sinovya Sıvısı Kültürleme İnsan Eklem kondrosit 3D Sistemi

Kondrositler tarafından kıkırdak ekstraselüler matriks biyosentezi mekanik uyaranlara uygulama etkilenebilir. Bu yöntem, 3D yapıları ve kondrosit metabolizması bağlı değişikliklerin değerlendirilmesi kapsüllü kondrositler dinamik basınç suşların uygulama tekniği anlatılmaktadır.

Kondrosit-agaroz Hidrojeller mekanik stimülasyonu

Kıkırdak onarımı, karşılanmamış bir tıbbi zorluğu temsil eder ve insan eklem kıkırdağını tasarlamak için hücre temelli yaklaşımlar umut verici bir çözümdür. Burada, insan eklem kondrositlerinin genişlemesi ve olgunlaşması için ideal bir araç olarak üç boyutlu (3D) biyomimetik hidrojelleri tanımlıyoruz.

Eklem Kondrosit Kültür ve Kıkırdak Üretimi için 3D hidrojel iskeleleri

Embriyodik vücut (EB) oluşumu, fibroblastik hücrelerin genişlemesi ve kondrojenik indüksiyonu içeren entegrasyonsuz bir yöntem kullanarak, indüklenmiş pluripotent kök hücreler (iPSC'ler) yoluyla insan periferik kandan (PB) bir kondrojenik soy oluşturmak için bir protokol sunuyoruz.

Periferal Kan Türevi İnsan Kaynaklı Pluripotent Kök Hücrelerden Kondrositlerin Farklılaşması

Dendrimer tabanlı yerel arginin-glisin-aspartik asit (RGD) yüzey yoğunluğu Nano yönetilsin düzensiz nanopatterns elde etmek için bir yöntem açıklanan ve hücre adezyon ve chondrogenic farklılaşması çalışma için uygulanmıştır.

Düzensiz Nanopatterns Dendrimer tabanlı yerel olarak kumanda yüzeyi Adhesiveness için: Chondrogenic farklılaşma yönlendirmek için bir yöntem

Fibroblastların saf bir popülasyon elde yara onarımı ve fibrozis rollerini incelemek için çok önemlidir. Burada açıklanan yaralanmamış ve yaralı fare kalplerinden fibroblastlar ve miyofibroblastlar izole etmek için ayrıntılı bir yöntem immünofloresan, RTPCR, floresan destekli hücre sıralama ve saflık ve işlevsellik karakterizasyonu takip kollajen jel kontraksiyonu.

Erişkin Kardiyak Fibroblastlar ve Miyofibroblastların İzolasyon ve Karakterizasyonu

İnfrapatellar yağ yastığı mezenkimal kök hücreleri (IFP-MSC'ler) diz ekleminin infrapatellar yağ pedinden kolayca izole edilebilir. İn vitro olarak iyi çoğalırlar, CFU-F kolonileri oluştururlar ve adipojenik, kondrojenik ve osteojenik soylara farklılaşırlar. Burada, IFP-MSC'lerin keçi boğucu ekleminden izolasyonu, genişlemesi ve farklılaşması için metodoloji sağlanmaktadır.

Mezenkimal Kök Hücrelerin Keçi Stifle Ekleminin İnfrapatellar Yağ Pedinden İzolasyonu, Genleşmesi ve Farklılaşması

Bu çalışma, hücreleri yerçekimi kullanarak düşük yapışma koşulları altında sferoidler halinde toplayarak ve ardından elde edilen sferoidleri mini biyoreaktörlerde kültürleyerek kondrositik sferoidlerin üretilmesi için bir yöntemi açıklamaktadır.

Yerçekimi ve Ev Yapımı Mini Biyoreaktörler Altında Düşük Yapışkan Koşullar Kullanılarak Çeşitli Kondrositlerden Sferoidlerin Üretilmesi

Biz invaziv ve pseudohyphal farklılaşması bir önlem olarak maya yapışma ve agar işgali için kalitatif bir testtir açıklar. Bu basit testi çeşitli mutant gibi invaziv fenotip etkileri çevresel ipuçlarını değerlendirmek ve maya farklılaşma sinyalizasyon yollar kullanılabilir.

S. cerevisiae yapışma ve Agar Invasion için Testi

Kişinin kaş yapılan özel bir diseksiyon aracı - Bu video kaş bıçak kullanımı da dahil olmak üzere Xenopus laevis embriyolar, ajanda ve hayvan kutup eksplantlar hazırlanması için kullanılan tekniği göstermektedir. Yapışma tahlil montaj için protokol de önemli adezyon moleküllerinin varlığı için problar yüzey düzenleyen veya uygun şekilde gelişimi için kritik olan hayvan kutup hücreleri mevcut verilir.

Organizatör ve Hayvan Kutbu eksplantlar Xenopus laevis Embriyolar ve Hücre Yapışma Testi Meclisi diseksiyonu

Öğrenin fibronektin adezyonu ve migrasyon testleriyle insan kıkırdak doku mühendisliği için kondrosit ve kondroprogenitör izolasyonu. Bu yöntem rejeneratif tıpta iyileşme stratejileri geliştirmeye yardımcı olur.

Fibronektin Adezyonu ve Migrasyon Testi Kullanılarak Kondrosit ve Kondroprojenitörlerin İzolasyonu

Daha fazla video keşfet