Name: Farelerde Isırma Kuvveti ve Von Frey Filament Deneyleri ile Temporomandibular Eklem Ağrısı Ölçümü (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-09-13T14:50:00.000+00:00
Duration: 6 min 37 s
Description: Öğrenin farelerde ısırma kuvveti ve Von Frey filament deneyleriyle temporomandibular eklem ağrısı ölçüm yöntemlerini. Bu protokol nörobilim ve davranış analizi araştırmalarında standartlaştırılmış ağrı değerlendirmesi sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Chen laboratuvarındaki meslektaşlarımıza tartışmaları teşvik ettikleri için teşekkür ederiz. Fare görüntülerine yardımcı olduğu için Thach-Vu Ho'nun desteğini takdir ediyoruz. Bu çalışma, Ulusal Diş ve Kraniyofasiyal Araştırma Enstitüsü'nden (NIDCR) hibe R01DE033511 (J.C.) tarafından desteklenmiştir.

Tüm hayvan prosedürleri, Güney Kaliforniya Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi (IACUC) tarafından onaylanmıştır. Bu çalışmada vücut ağırlığı 19-20 g arasında olan sekiz haftalık C57BL / 6 dişi fareler kullanıldı. Fareler, düzenlenmiş nem ve 12 saatlik aydınlık / karanlık döngüleri ile çevresel koşullar altında standart kafeslere yerleştirildi. Kullanılan reaktifler ve ekipman Malzeme Tablosunda listelenmiştir.
1. TMJOA'yı indüklemek için CFA eklem içi enjeksiyon
<ol>
	<li>İndüksiyon için% 3 izofluran ve% 1 -% 2 iprofloran kullanarak fareleri izofluran ile uyuşturun (kurumsal olarak onaylanmış protokolleri izleyerek). Anesteziyi sürdürmek için tüm prosedür için bir nosekon kullanın. Yeterli anestezik derinliği doğrulamak için ayak parmağınızı sıkıştırın.</li>
	<li>Anesteziye maruz kalmalarını en aza indirirken uygun solunum durumunu sağlamak için farelerin solunumunu yakından izleyin. İşlem sırasında gözleri korumak için göz jeli uygulayın. 
	NOT: Fareler, orofasiyal ağrının gelişimi ve ağrı davranışının ölçülmesi üzerinde önleyici analjezik etkilerden kaçınmak için cerrahi sonrası ağrı için analjezi alamadı.</li>
	<li>Steril bir insülin şırıngası veya 31 G'lik bir iğne hazırlayın Tam Freund Adjuvanı (CFA) 5 mg / mL'yi TME'ye enjekte etmek için, iğneyi steril polietilen tüpten yapılmış bir kılıfla kaplayarak, iğne ucunun sadece 2 mm'sini çıkıntılı bırakarak, çok derine sokulmasını önlemek için.</li>
	<li>Anesteziden sonra saçı çıkarın ve kulak öncesi bölgeyi povidon-iyot ve% 70 alkol ile dezenfekte edin.</li>
	<li>TME enjeksiyon bölgesini bulmak için elmacık kemerini palpe ederek tanımlayın. 
	NOT: Elmacık arkının arka ucunda, kulak kanalının yaklaşık 2 mm önünde çökük bir alan vardır. TME enjeksiyon bölgesi bu alanın etrafında yer alır ve göz hizasından kulak kanalına kadar çizilen hayali çizginin dışına taşmamalıdır (Şekil 1A,B).</li>
	<li>İğneyi, elmacık kemerinin arka ucunun altındaki enjeksiyon bölgesine yerleştirin. İğnenin ucu kemiğe 2 mm derinlikte temas etmelidir (Şekil 1A,E).</li>
	<li>TME kapsülüne yavaşça 10 μL CFA enjekte edin ve iğneyi kademeli olarak geri çekmeden önce en az 5 saniye bekleyin. Aynı prosedürü izleyerek kontrol farelerinde aynı miktarda PBS'yi TME'ye enjekte edin.</li>
	<li>1.4-1.8 adımlarını tekrarlayın ve CFA'yı karşı TME'ye enjekte edin. Fareleri tamamen iyileşene kadar ısı yastığı üzerinde gözlemleyin. 
	NOT: CFA, nispeten viskoz olan bir yağda su emülsiyonudur, bu nedenle, enjeksiyon sırasında CFA sızıntısını önlemek için CFA enjeksiyonu ve iğne çekilmesi yavaş olmalıdır. Enjeksiyonun hassasiyetini sağlamak için, 5 μL hızlı yeşil boya uygulayarak ve ardından enjeksiyon doğruluğunu incelemek için masseter kasını diseksiyon yaparak enjeksiyon alıştırması yapın (Şekil 1D,E). Enjeksiyondan sonra, hızlı yeşil boya hızla yayılır ve kullanılan miktarın azaltılmasını gerekli kılar. Bu azalma sadece enjeksiyon hassasiyetini artırmakla kalmaz, aynı zamanda komşu bölgelere istenmeyen difüzyonu da önler. Farelerde TMJOA'yı indüklemek için uygulanan CFA miktarı ve konsantrasyonu, önceki çalışmalarda belirlenen protokole göre belirlenmiştir16,17.</li>
</ol>
2. Isırma kuvvetinin ölçülmesi
<ol>
	<li>Fareleri, testten önce davranış odasında en az 1 saat boyunca fare kafesinde tutmak için tasarlanmış tüpü yerleştirerek test ortamına alıştırın.</li>
	<li>Enflamasyonu indüklemeye başlamadan önce ısırma kuvvetinin temel ölçümünü kaydedin. Fareleri, CFA veya PBS enjeksiyonundan önce 3 gün boyunca test ortamında ısırmaları için eğitin. Ortalama değerleri temel eğitim değerleri olarak kaydedin.</li>
	<li>Bilgisayardaki programa bağlı bir ısırma kuvveti dönüştürücü kullanarak ısırma kuvvetini ölçmek için uyumlu yazılımı açın (Şekil 2A,B).
	<ol>
		<li>Osilografı göstermek için NBIT RSD-V2.6.3 programını açın (Şekil 2C).</li>
		<li>Uygun iletişim seçeneklerini aşağıdaki gibi seçin: Katılımlı Mod: UDP (Şekil 2E). Uygun Yerel IP'yi seçin ve Ara'ya tıklayarak Cihaz IP'sini ve Bağlantı Noktasını arayın. Hedef IP ve Hedef Bağlantı Noktası görünecek, ardından Aç'a tıklayın.</li>
		<li>Y Aralığında 10'a tıklayarak Y eksenini ayarlayın. Ardından Ayarla'ya tıklayın (Şekil 2F) . Satın Alma'ya tıklayın.</li>
		<li>Mavi grafik için yalnızca Kanal 1'i (Ch1) seçin ve cihaza bağlı olmayan diğer kanalları kapatın (Şekil 2D).</li>
		<li>Isırma kuvvetini kaydetmeye başlamak için Oynat'a tıklayın (Şekil 2F). 
		NOT: Kayda başlamak için "Oynat"a tıklamadan önce, doğru bir kayıt süresi elde etmek için fare zaten şırınganın içinde olmalı ve ısırma kuvvetini kaydetmeye hazır olmalıdır.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Fareyi, fareyi gevşek bir şekilde dizginlemek için modifiye edilmiş 50 mL'lik plastik bir tüpe koyun. Bir taraftaki geniş açıklık, farenin kafasının rahatça hareket etmesi için özel olarak tasarlanmıştır.</li>
	<li>Isırma plakasını ağza doğru hareket ettirin. 
	NOT: Fareler, ısırma plakası ağızlarına dokunduğunda otomatik olarak ısırmaya başlayacaktır. Bununla birlikte, farelerin ilk eğitimde ısırmaya başlaması yaklaşık 30 saniye sürebilir. Eğitimden sonra, fareler 10 saniye içinde ısırmaya başlamalıdır. Fareler üçüncü eğitim gününden sonra 10 saniye içinde ısırmaya başlamazlarsa, deneyden çıkarılacaklar. Bu nedenle, fareleri test ortamına aşina olmaları için eğitmek önemlidir.</li>
	<li>İstemli ısırmayı 2 dakika / seans boyunca kaydedin. Ardından, kaydı durdurmak için Duraklat'a tıklayın ve Kaydet'e tıklayın (Şekil 2E). Isırma kuvveti kaydından elde edilen sonuçlar otomatik olarak bir Excel dosyasına (Ek Dosya 1) aktarılacaktır. 
	NOT: Excel dosyasında (Ek Dosya 1), sol sütundaki veriler kayıt süresini temsil eder. Soldan ikinci sütun, her bir zaman noktasındaki ısırma kuvvetinin genliğidir.</li>
	<li>Excel dosyasındaki ikinci sütundaki verileri maksimumdan minimuma doğru sıralayın. Daha fazla analiz için ısırma kuvveti genliğinin ilk beşini seçin. 
	NOT: İlk beş genlik farklı zaman noktalarında olmalıdır, örneğinample, aynı ısırma olayından verilerin seçilmesini önlemek için kayıt süresinin her 20 saniyesinde veya 1000'inde bir.</li>
	<li>Programdan Ch1 Değerini (Şekil 2D) kaydedin ve bu testten ısırma kuvvetinin nispi değerlerini elde etmek için ısırma kuvveti genliğinin ilk beş değerini çıkarın veya ekleyin. Ardından, bir fare için ortalama bağıl ısırma kuvvetini elde etmek için bu beş değerin ortalamasını alın.</li>
	<li>Sonraki fareler için ısırma kuvvetini kaydetmek için 2.3.5-2.8 adımlarını tekrarlayın. 
	NOT: TME ağrısının ilerlemesindeki ısırma kuvvetini değerlendirmek için, göreceli ısırma kuvveti değerleri temel eğitim sırasında kaydedilir ve CFA enjeksiyonundan sonra farklı zaman noktalarında (1. Gün, 3. Gün, 5., 7. ve 12. Gün gibi) ölçülür.</li>
</ol>
3. Kafa çekme eşiğinin ölçülmesi
<ol>
	<li>Fare kafesine bir tel örgü kafes koyun ve fareleri test prosedürlerinden önce en az 1 saat davranışsal bir odada alışkanlık haline getirin.</li>
	<li>Fareleri test ortamında eğitin ve CFA veya PBS enjeksiyonundan önce 3 gün boyunca temel kafa çekme eşiğini kaydedin.</li>
	<li>Kafa çekme eşiğini ölçmek için elektronik von Frey test makinesini açın (Şekil 3A,B).
	<ol>
		<li>MAX düğmesine basın ve ardından birimi, makine tarafından ayarlanan isteğe bağlı bir birim olan 500 g'a ayarlayın.</li>
		<li>Kayda başlamak için sıfırı ayarlayın. Ekrandaki kuvvet değeri sıfır olmalıdır (Şekil 3C,D).</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Fareleri tel örgü kafese yerleştirin (Şekil 3B). Von Frey filamentini TME bölgesine dik olarak uygulayın. 
	NOT: Test alanı, gözler ile kulak kanalı arasındaki bağlantı seviyesinde, kulak kanalının yaklaşık 2 mm önündedir. Baş geri çekilme eşiği, von Frey filamentinden gelen ve geri çekilme refleksini ortaya çıkarabilen minimum kuvvet olarak tanımlanır.</li>
	<li>İlk test olarak filamentten uygulanan kuvvetin değerini veya reaksiyonları tetikleyen uyaran yoğunluğunu (g) kaydedin (Şekil 3E).</li>
	<li>Ekrandaki kuvvet değerini Sıfır olarak ayarlayın ve fare hala kafesin içindeyken 10 saniye bekleyin.</li>
	<li>Filamenti tekrar uygulamaya başlayın ve değeri kaydedin.</li>
	<li>Ölçümü tekrarlayın (adım 3.5-3.7) ve her fare için 10 s'lik aralıklarla en az beş test kaydedin.</li>
	<li>Bu beş değerin ortalamasını alın. Ortalama değer, bir fareden kafa çekme eşiği olarak kabul edilir. 
	NOT: Von Frey filament ölçümü bir fare için 5 kez gerçekleştirilecektir. Sağlam bir varyasyon varsa, ölçüm kayda değer bir yaralanma olmadan 8 defaya kadar tekrarlanabilir. Önce ısırma kuvveti veya von Frey testi başlayabilir. Deneyimlerimize dayanarak hangi testin önce başladığı konusunda önemli bir fark yoktur. Ancak, tüm deney boyunca tutarlı olmalıdır. Isırma kuvveti ile von Frey arasındaki aralık süresi en az 30 dakikadır. İlk tahlilden sonra fareler tekrar kafese konuldu. 30 dakika dinlendirin ve ikinci teste başlayın.</li>
</ol>

Inflammatory TMJ Pain Mouse Model: Bite Force and Von Frey Filament Assessments

<ol><li>Han, M. D., Lieblich, S. E. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aHan%2C+MD+%22Peterson%27s+principles+of+oral+and+maxillofacial+surgery%22">Peterson's principles of oral and maxillofacial surgery</a>. Miloro, M., Ghali, G. E., Larsen, P. E., Waite, P. , Springer International Publishing. Cham. 1535-1550 (2022).</li>
<li>Ferrillo, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pain+management+and+rehabilitation+for+central+sensitization+in+temporomandibular+disorders%3A+A+comprehensive+review%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Pain management and rehabilitation for central sensitization in temporomandibular disorders: A comprehensive review.</a> Int J Mol Sci. 23 (20), 12164(2022).</li>
<li>Schiffman, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diagnostic+criteria+for+temporomandibular+disorders+%28DC%2FTMD%29+for+clinical+and+research+applications%3A+Recommendations+of+the+international+RDC%2FTMD+consortium+network+and+orofacial+pain+special+interest+group%5BTitle%5D)+AND+%22J+Oral+Facial+Pain+Headache%22%5BJournal%5D)">Diagnostic criteria for temporomandibular disorders (DC/TMD) for clinical and research applications: Recommendations of the international RDC/TMD consortium network and orofacial pain special interest group.</a> J Oral Facial Pain Headache. 28 (1), 6-27 (2014).</li>
<li>Kalladka, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Temporomandibular+joint+osteoarthritis%3A+Diagnosis+and+long-term+conservative+management%3A+A+topic+review%5BTitle%5D)+AND+%22J+Indian+Prosthodont+Soc%22%5BJournal%5D)">Temporomandibular joint osteoarthritis: Diagnosis and long-term conservative management: A topic review.</a> J Indian Prosthodont Soc. 14 (1), 6-15 (2014).</li>
<li>Yi, Y., Zhou, X., Xiong, X., Wang, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuroimmune+interactions+in+painful+TMD%3A+Mechanisms+and+treatment+implications%5BTitle%5D)+AND+%22J+Leukoc+Biol%22%5BJournal%5D)">Neuroimmune interactions in painful TMD: Mechanisms and treatment implications.</a> J Leukoc Biol. 110 (3), 553-563 (2021).</li>
<li>Chung, M. K., Wang, S., Alshanqiti, I., Hu, J., Ro, J. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+degeneration-pain+relationship+in+the+temporomandibular+joint%3A+Current+understandings+and+rodent+models%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Pain+Res+%28Lausanne%29%22%5BJournal%5D)">The degeneration-pain relationship in the temporomandibular joint: Current understandings and rodent models.</a> Front Pain Res (Lausanne). 4, 1038808(2023).</li>
<li>Zhao, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+temporomandibular+joint+osteoarthritis%3A+Classification+and+selection%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Physiol%22%5BJournal%5D)">Animal models of temporomandibular joint osteoarthritis: Classification and selection.</a> Front Physiol. 13, 859517(2022).</li>
<li>Deuis, J. R., Dvorakova, L. S., Vetter, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methods+used+to+evaluate+pain+behaviors+in+rodents%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Mol+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Methods used to evaluate pain behaviors in rodents.</a> Front Mol Neurosci. 10, 284(2017).</li>
<li>Kogawa, E. M., Calderon, P. S., Lauris, J. R., Araujo, C. R., Conti, P. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+maximal+bite+force+in+temporomandibular+disorders+patients%5BTitle%5D)+AND+%22J+Oral+Rehabil%22%5BJournal%5D)">Evaluation of maximal bite force in temporomandibular disorders patients.</a> J Oral Rehabil. 33 (8), 559-565 (2006).</li>
<li>Ferrier, J., Marchand, F., Balayssac, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+mechanical+allodynia+in+rats+using+the+electronic+von+Frey+test%5BTitle%5D)+AND+%22Bio-protocol%22%5BJournal%5D)">Assessment of mechanical allodynia in rats using the electronic von Frey test.</a> Bio-protocol. 6 (18), e1933(2016).</li>
<li>Guo, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Voluntary+biting+behavior+as+a+functional+measure+of+orofacial+pain+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Behav%22%5BJournal%5D)">Voluntary biting behavior as a functional measure of orofacial pain in mice.</a> Physiol Behav. 204, 129-139 (2019).</li>
<li>Cao, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alleviation+of+temporomandibular+joint+osteoarthritis+by+targeting+RIPK1-mediated+inflammatory+signalling%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Mol+Med%22%5BJournal%5D)">Alleviation of temporomandibular joint osteoarthritis by targeting RIPK1-mediated inflammatory signalling.</a> J Cell Mol Med. 28 (5), e17929(2023).</li>
<li>Xu, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Peripheral+and+central+substance+p+expression+in+rat+cfa-induced+TMJ+synovitis+pain%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Pain%22%5BJournal%5D)">Peripheral and central substance p expression in rat cfa-induced TMJ synovitis pain.</a> Mol Pain. 15, 1744806919866340(2019).</li>
<li>Morel, M., Ruscitto, A., Pylawka, S., Reeve, G., Embree, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extracellular+matrix+turnover+and+inflammation+in+chemically-induced+TMJ+arthritis+mouse+models%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Extracellular matrix turnover and inflammation in chemically-induced TMJ arthritis mouse models.</a> PLoS One. 14 (10), e0223244(2019).</li>
<li>Dias, F. C., Wang, Z., Scapellato, G., Chen, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Silencing+of+TRPV4-expressing+sensory+neurons+attenuates+temporomandibular+disorders+pain%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Pain%22%5BJournal%5D)">Silencing of TRPV4-expressing sensory neurons attenuates temporomandibular disorders pain.</a> Molecular Pain. 19, 17448069231185696(2023).</li>
<li>Chen, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Temporomandibular+joint+pain%3A+A+critical+role+for+TRPV4+in+the+trigeminal+ganglion%5BTitle%5D)+AND+%22PAIN%22%5BJournal%5D)">Temporomandibular joint pain: A critical role for TRPV4 in the trigeminal ganglion.</a> PAIN. 154 (8), 1295-1304 (2013).</li>
<li>Bai, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tnf%CE%B1+in+the+trigeminal+nociceptive+system+is+critical+for+temporomandibular+joint+pain%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Tnfα in the trigeminal nociceptive system is critical for temporomandibular joint pain.</a> Mol Neurobiol. 56 (1), 278-291 (2019).</li>
<li>Ohrbach, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+orofacial+characteristics+associated+with+risk+of+first-onset+TMD%3A+The+oppera+prospective+cohort+study%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pain%22%5BJournal%5D)">Clinical orofacial characteristics associated with risk of first-onset TMD: The oppera prospective cohort study.</a> J Pain. 14 (12 Suppl), T33-T50 (2013).</li>
<li>Hansdottir, R., Bakke, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Joint+tenderness%2C+jaw+opening%2C+chewing+velocity%2C+and+bite+force+in+patients+with+temporomandibular+joint+pain+and+matched+healthy+control+subjects%5BTitle%5D)+AND+%22J+Orofac+Pain%22%5BJournal%5D)">Joint tenderness, jaw opening, chewing velocity, and bite force in patients with temporomandibular joint pain and matched healthy control subjects.</a> J Orofac Pain. 18 (2), 108-113 (2004).</li>
<li>O'neill, T. W., Felson, D. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms+of+osteoarthritis+%28OA%29+pain%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Osteoporos+Rep%22%5BJournal%5D)">Mechanisms of osteoarthritis (OA) pain.</a> Curr Osteoporos Rep. 16 (5), 611-616 (2018).</li>
<li>Knuutila, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Association+of+temporomandibular+disorders+with+pain+sensitivity%3A+A+cohort+study%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Pain%22%5BJournal%5D)">Association of temporomandibular disorders with pain sensitivity: A cohort study.</a> Eur J Pain. 26 (1), 143-153 (2022).</li>
<li>Sperry, M. M., Kartha, S., Winkelstein, B. A., Granquist, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+methods+to+inform+diagnostic+approaches+for+painful+TMJ+osteoarthritis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Dent+Res%22%5BJournal%5D)">Experimental methods to inform diagnostic approaches for painful TMJ osteoarthritis.</a> J Dent Res. 98 (4), 388-397 (2019).</li>
<li>Xu, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Activation+of+voltage-gated+KCNQ%2FKV7+channels+by+anticonvulsant+retigabine+attenuates+mechanical+allodynia+of+inflammatory+temporomandibular+joint+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Pain%22%5BJournal%5D)">Activation of voltage-gated KCNQ/KV7 channels by anticonvulsant retigabine attenuates mechanical allodynia of inflammatory temporomandibular joint in rats.</a> Mol Pain. 6, 49(2010).</li>
<li>Schmid-Schwap, M., Bristela, M., Kundi, M., Piehslinger, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sex-specific+differences+in+patients+with+temporomandibular+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22J+Orofac+Pain%22%5BJournal%5D)">Sex-specific differences in patients with temporomandibular disorders.</a> J Orofac Pain. 27 (1), 42-50 (2013).</li>
<li>Delay, L., Gonçalves Dos Santos, G., Dias, E. V., Yaksh, T. L., Corr, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sexual+dimorphism+in+the+expression+of+pain+phenotype+in+preclinical+models+of+rheumatoid+arthritis%5BTitle%5D)+AND+%22Rheum+Dis+Clin+North+Am%22%5BJournal%5D)">Sexual dimorphism in the expression of pain phenotype in preclinical models of rheumatoid arthritis.</a> Rheum Dis Clin North Am. 47 (2), 245-264 (2021).</li>
<li>Sannajust, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Females+have+greater+susceptibility+to+develop+ongoing+pain+and+central+sensitization+in+a+rat+model+of+temporomandibular+joint+pain%5BTitle%5D)+AND+%22Pain%22%5BJournal%5D)">Females have greater susceptibility to develop ongoing pain and central sensitization in a rat model of temporomandibular joint pain.</a> Pain. 160 (9), 2036-2049 (2019).</li>
<li>Wang, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spontaneous+and+bite-evoked+muscle+pain+are+mediated+by+a+common+nociceptive+pathway+with+differential+contribution+by+trpv1%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pain%22%5BJournal%5D)">Spontaneous and bite-evoked muscle pain are mediated by a common nociceptive pathway with differential contribution by trpv1.</a> J Pain. 18 (11), 1333-1345 (2017).</li>
<li>Suttle, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sensory+neuron-TRPV4+modulates+temporomandibular+disorder+pain+via+CGRP+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pain%22%5BJournal%5D)">Sensory neuron-TRPV4 modulates temporomandibular disorder pain via CGRP in mice.</a> J Pain. 24 (5), 782-795 (2023).</li>
</ol>

Yazarlar, bu çalışmaların nesnelliğini etkilediği düşünülebilecek herhangi bir rakip finansal çıkar olmadığını beyan ederler.

Farelerde inflamatuar kaynaklı bir TMJOA, TMJOA'daki ağrı mekanizmalarını araştırmak için bir hayvan modeli görevi görür, çünkü eklem içi CFA enjeksiyonu ağrı ve iltihaplanmayı indükleyerek sinovit, kemik kaybı ve kıkırdak yeniden şekillenmesine neden olabilir. Bu koşullar, insanlarda gözlenen patolojiye bir dereceye kadar benzemektedir ve hastalarda eklem ağrısı ve iltihaplanma gibi TMJOA'nın temel özelliklerine katkıda bulunmaktadır13,18. TMJOA ile ilişkili ağrılı semptomlar, hastaların tıbbi yardım almasının ana nedenidir. Hayvan modellerinde ağrının varlığını ve şiddetini tespit edebilmek, ağrı patogenezini ve potansiyel yeni tedavileri araştırmak için fırsatlar sağlar. Bu rapor, ısırma kuvveti ve baş çekme eşiği ölçümleri yoluyla TME ağrı davranışını değerlendirme yöntemini tanımlamıştır. TME, ağız açma-kapama, ısırma ve çiğneme dahil olmak üzere tüm çene hareketlerinde yer alan anahtar yapılardan biridir. Ek olarak, TMD'nin baskın klinik belirtisi çiğneme veya çiğneme ile ilişkili ağrıdır. TME ağrısı olan TMD hastaları, sağlıklı bireylere kıyasla tipik olarak daha düşük ısırma kuvvetine sahiptir 9,19. Klinik çalışmalarla tutarlı olarak, fare modellerinde eklem içi CFA enjeksiyonu, insanlarda TME ağrısı ve işlev bozukluğu ile ilgili semptomlara eşdeğer olarak kabul edilebilecek ısırma kuvvetinde önemli bir azalmaya yol açabilir11.
TME ağrısının klinik tanısı, TME'nin palpe edilmesini ve hastanın raporuna göre ağrının şiddetinin kaydedilmesini içerir. Bu prosedür, kafa geri çekilme davranışına yol açan en düşük eşik kuvvetini ölçen von Frey filament testine benzer. Başın çekilmesi, orofasiyal bölgenin ağrı tepkisini ve hiperaljezi durumunu gösterir20. Azalmış bir baş çekme eşiği, TME ağrısı olan hastalarda eklem hassasiyetini ve daha düşük basınçlı ağrı eşiğini gösterebilir 18,19,21. Sonuç olarak, von Frey filament testi, TMD için basınç ağrı eşiğini değerlendirmek için yararlıdır. CFA ile indüklenen TMJOA fare modelinde, ısırma kuvveti ve baş çekme eşiğinin ölçülmesi, ağrı davranışını değerlendirmek için güvenilir bir yöntem olarak doğrulanmıştır22.
Çoğu davranışsal sonuç biraz özneldir. Diğer birçok davranışsal tahlil gibi, orofasiyal ağrıyı ölçerken varyasyon her zaman bir endişe kaynağıdır. TME ağrısının güvenilir, tekrarlanabilir ve hassas ölçümleri hedefine ulaşmak için deneysel tasarımımız, uygulamamız ve sonuç yorumlamamızdaki sınırlamaları ve potansiyel çözümleri not etmek önemlidir. Bir uyarı, ısırma kuvvetinin azalmasının, eklem ağrısından gerekli olmayan TME disfonksiyonundan kaynaklanabileceğidir. Örneğin, kaslar TME hareketinde ve ısırmada çok önemli bir rol oynar. Azalan ısırma kuvveti, eklem ağrısından ziyade kas disfonksiyonundan kaynaklanıyor olabilir. Bununla birlikte, CFA'nın neden olduğu TME ağrısını kas ağrısından ayırt etmek için radyografik ve histolojik bulgular kullanılabilir. CFA enjeksiyonundan kaynaklanan TME ağrısı daha sonra kıkırdak ve kemik kaybına yol açarken, CFA'nın neden olduğu kas ağrısının kemik kaybına neden olma olasılığı daha düşüktür16.
Bu çalışmanın, kuvvet uygulamalarının sayısını en aza indirebilen ve böylece test alanındaki23 yüz derisinin yaralanmasını önleyebilen, sürekli bir ölçekte baş çekme eşiğini ölçmek için elektronik von Frey kullandığına dikkat edilmelidir. Manuel ve elektronik von Frey'den elde edilen para çekme eşik değerlerinde dikkate değer farklılıklar olduğu bildirilmiştir. Tipik olarak, elektronik von Frey ile ölçülen para çekme eşiği, manuel von Frey 8,10 ile ölçülenden daha yüksek olma eğilimindedir. Elektronik von Frey'imizin plastik ucu, manuel von Frey filamentlerinden farklı değerlere yol açabilecek yüz derisi yaralanmasını önlemek için keskin değildir. Ayrıca elektronik von Frey testindeki "g" birimi gerçek bir kuvvet değil, makine tarafından ayarlanan keyfi bir birimdir. Ek olarak, cilt ağrısını en aza indirmek için, temel eğitime başlamadan önce enjeksiyon bölgesinden kıllar alındı. Bu yaklaşım, cilt ağrısı ve hassasiyeti gibi kafa karıştırıcı faktörleri azaltmalı ve potansiyel enfeksiyon kontaminasyonunu önlemelidir. Bu arada, cilt ağrısından kaynaklanan kafa karıştırıcı etkileri maksimum düzeyde dışlamak ve ölçümün eklem ağrısından olmasını sağlamak için aynı prosedür altında sahte gruba PBS de enjekte edildi. CFA'nın eklem içi enjeksiyonu TME bölgesine özgü olmasına rağmen, CFA'nın neden olduğu doku iltihabı muhtemelen eklemin kendisiyle sınırlı değildir, bu da ısırma kuvvetinin azalması ve baş çekme eşiğinin azalması dahil olmak üzere potansiyel olarak bazı ağrı tepkilerine katkıda bulunur. Genel olarak, genel sonuca katkıda bulunabilecek TME iltihabından kaynaklanan cilt veya kas ağrısının ikincil etkisini tamamen dışlayamayacağımızı kabul ediyoruz.
Her bir cihazdan elde edilen ısırma kuvveti ve baş çekme eşiği değerleri, bireysel testler için özel olarak ayarlanmış farklı birimlere, parametrelere ve protokollere sahip olduklarından farklı olabilir. Bu çalışmada dişi fareler kullanılmış olsa da, ağrılı TMJOA'yı incelemek için erkekler de kullanılabilir. Bununla birlikte, kemirgenlerin bazal nosiseptif eşiklerinde cinsel dimorfizm vardır. Erkekler ve kadınlar, ağrılı uyaranlara 24,25,26 farklı fizyolojik ve davranışsal tepkilerle karakterize edilebilen çeşitli ağrı deneyimleri sergilediler. Ek olarak, erkek fareler dişilere göre daha yüksek bir baş çekme eşiğine ve ısırma kuvvetine sahip olma eğilimindedir. Yaş ve vücut ağırlığı da ısırma kuvveti değerlerinietkiler 11,16,27. Önceki bir çalışma, gözlemin ilk iki haftasında ısırma kuvveti ile vücut ağırlığı arasında pozitif bir korelasyon olduğunu bildirmiştir11. Bu çalışmada başlangıçta 8 haftalık dişi C57BL / 6 fareleri için ısırma kuvveti değerleri 4.5-5.5 N arasında değişmiştir (Şekil 4A). CFA enjeksiyonundan sonra, erken fazda ısırma kuvvetinin 2-3 N'ye düşmesi, MIA inflamatuar maddesi6 kullanılarak TMJOA'nın indüksiyonunu içeren önceki çalışmalarla tutarlıdır. Bununla birlikte, ısırma kuvvetindeki yüzde değişimin kullanılması, her laboratuvarın farklı araçlara ve protokollere sahip olabileceğinden ve farklı değerlerle sonuçlanabileceğinden, bulguların önceki diğer çalışmalarla tutarlılığını doğrulamak için bir araç olarak hizmet edebilir27,28.
Ağrı davranışı ölçümündeki varyasyonu azaltmak için kritik adım, farelerin başlangıçta eğitilmesinde tutarlılığı doğrulamak ve sağlamaktır. Varyasyon, cinsiyet, vücut ağırlığı ve yaştaki farklılıklardan kaynaklanabilir ve bunların tümü ısırma kuvveti ve baş çekme eşiği ölçümlerini etkileyebilir. Örneğin, 8 haftalık dişi fareler tipik olarak yaklaşık 19-20 g ağırlığındadır; bağıl ısırma kuvveti değerleri, temel eğitimden elde edilen verilere dayanarak genellikle 4,5-5,5 N aralığındadır. Bu nedenle, temel eğitim aralıklarının dışında ortalama ısırma kuvveti değerlerine sahip fareler deneyden çıkarılmalıdır. Benzer şekilde, başlangıç antrenmanı sırasında baş çekme eşiği 22-35 g arasında değişmektedir. Baş çekme eşiği bu aralığın dışında olan fareler deneyden çıkarılmalıdır. Genel olarak, resmi davranış testlerinden önce hayvan eğitimi sırasında ısırma kuvveti ve baş çekme eşiğinin ölçütünü belirlemek önemlidir.

Temporomandibular bozukluklar (TMD), temporomandibular eklemleri (TME), çiğneme kaslarını ve ilişkili yapıları etkileyen kas-iskelet ve nöromüsküler yapıların ağrı ve işlev bozukluğunu ifade eder. TME günlük hayatta en sık kullanılan sinovyal eklemdir. TMD hastalarının yaklaşık% 80'i, yaşam kalitelerini önemli ölçüde etkileyebilecek TME hastalıklarının belirti ve semptomlarını gösterir1,2,3. Ek olarak, TME osteoartriti (TMJOA), TMD'nin önemli bir alt tipidir ve ilerleyici bir dejeneratif eklem hastalığı olarak tanımlanır. TMJOA'lı hastalar sıklıkla eklem ağrısı ile başvururlar. Ağrılı TME, hastaların tedavi aramasının başlıca nedenlerinden biridir4,5. Bununla birlikte, ağrılı TMJOA'yı hafifletmek için daha etkili tedaviler için karşılanmamış bir tıbbi ihtiyaç vardır. Ağrılı TMJOA'yı anlamak, hastalık modifiye edici OA ilaçları (DMOAD'ler) geliştirmek için çok önemlidir.
TMJOA ağrısı olan hastalardan klinik örnekler almak zor olduğundan, hayvan modelleri TMJOA patolojilerini incelemek için temel araçlar haline gelmiştir6,7. Ağrı davranışının değerlendirilmesini entegre etmek, altta yatan mekanizmalar ve potansiyel yeni terapötik müdahaleler hakkında değerli bilgiler sağlayabilir. Hayvan modellerinde ağrı ölçümü, insan olmayan deneklerde ağrı algısı ve ifadesinin öznel doğası nedeniyle zordur6,8. Nispeten az sayıda çalışma, kraniyofasiyal olmayan eklemlere kıyasla TME'de ağrı davranışsal deneyleri kullanmıştır. Bu nedenle, TMJOA'nın hayvan modellerinde ağrı deneyimini güvenilir bir şekilde yakalamak için ağrı davranışını değerlendirme yöntemlerini tanımlamak önemlidir.
Bu makalede, TMJOA'nın fare modellerinde ağrıyı değerlendirmek için tasarlanmış iki farklı yöntemi gösterdik: ısırma kuvveti ölçümü ve von Frey filament testi. Çene ve kas koordinasyonu çiğneme fonksiyonu için gereklidir ve TME ve kas fonksiyonu ile ilişkili ağrı, TMD hastalarında ısırma kuvvetini azaltabilir3,9. Bu nedenle, çiğneme fonksiyonuna ikincil ağrı ile ilgili davranış, eklem ağrısı ile ilgili TME fonksiyonunu etkili bir şekilde yansıtan ısırma kuvveti ölçümü kullanılarak değerlendirilebilir. Ek olarak, von Frey filament testi, mekanik hassasiyeti değerlendirmek için kafa çekme eşiğini ölçer. Bu yöntemde, farelerin derisine artan kuvvete sahip von Frey filamentleri, bir çekilme tepkisi gözlenene kadar uygulanır. Kafa çekme tepkisini tetikleyen kuvvet, kafa çekme eşiği olarak kaydedilir. Bu teknik, orofasiyal ağrı ile ilişkili periferik nosiseptör duyarlılığını gösteren mekanik allodiniyi değerlendirmek için yaygın olarak kullanılmaktadır8,10,11.
Önceki çalışmalar ağrı davranışını ölçmek için bu yöntemleri kullanmış olsa da, hiçbiri doğrudan uygulama için ayrıntılı protokoller sağlamamış veya CFA12,13,14,15. Bu nedenle, bu yöntemler, ağrının şiddetini ve ilerlemesini ölçmede duyarlılıklarını ve tekrarlanabilirliklerini göstermek için geliştirilmiş ve doğrulanmıştır. Bu iki tamamlayıcı yaklaşım, ağrı davranışı değerlendirmesi için çapraz doğrulama sağlar. Daha da önemlisi, bu tekniklerden elde edilen ağrı davranışsal sonuçları, ağrılı TMJOA farelerindeki histolojik ve patolojik özelliklerle ilişkilendirilebilir14,16. Ek olarak, ısırma kuvvetinin ölçülmesi çene fonksiyonunu değerlendirmek için değerli veriler sağlarken, von Frey testi mekanik nosisepsiyon8'i ölçer. Bu nedenle, bu protokoller odontojenik ağrı, TME ağrısı, kas ağrısı ve nöropatik ağrı dahil olmak üzere çeşitli orofasiyal ağrı durumlarında ağrı davranışını değerlendirmek için uygulanabilir.

<table><tbody><tr><td>Isırma kuvveti dönüştürücü&nbsp;</td><td>Nanjing Shen-yuan-sheng Akıllı Teknoloji Co</td><td>NBIT-YFM-1-100</td><td>0&ndash; 100 N, Nanjing Shen-yuan-sheng Intelligent Technology Co., PR'den NB IT RSD-V2.6.3 programına (NST2000 veri toplayıcı) bağlı bir ısırma kuvveti dönüştürücüsü.</td></tr><tr><td>Komple Freund'un Adjuvanı (CFA)</td><td>Chondrex Inc</td><td>7023</td><td>CFA 5mg/mL</td></tr><tr><td>İzofloran</td><td>Floriso</td><td>MWI501017</td><td></td></tr><tr><td>NBIT RSD-V2.6.3 programı</td><td>Nanjing Shen-yuan-sheng Akıllı Teknoloji Co</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Polietilen tüp</td><td>Scientific Commodities Inc</td><td>NC0923369</td><td>PE Boru 0.38 x 1.09 mm 100 Ft</td></tr><tr><td>Von Frey analgezyometre</td><td>Bioseb</td><td>BIO-EVF4</td><td>Elektrikli Von Frey</td></tr></tbody></table>

farelerde isırma kuvveti ve von frey filament deneyleri ile temporomandibular eklem ağrısı Ölçümü

Temporomandibular Joint Pain Measurement by Bite Force and Von Frey Filament Assays in Mice

Temporomandibular eklem (TME) ağrısı ve osteoartrit (OA), hastaların yaşam kalitesini bozan yaygın ve zayıflatıcı rahatsızlıklardır. Hastalıklara bağlı ağrıyı tetikleyen mekanizmalar tam olarak anlaşılamamıştır ve mevcut tedaviler etkili ve uzun vadeli terapötik etkiler sağlayamamaktadır. Ek olarak, araştırmalarda ağrı değerlendirmesi, özellikle orofasiyal ağrı, hem klinik hem de temel bilim ortamlarında çalışmaları karmaşıklaştıran çeşitli zorluklar ortaya çıkarmaktadır. Bu nedenle, CFA'nın (Tam Freund Adjuvanı) eklem içi enjeksiyonu yoluyla inflamatuar bir TME ağrılı fare modeli oluşturduk ve ağrı davranışlarını ısırma kuvveti ölçümü ve von Frey filament testi ile değerlendirdik. CFA enjeksiyonlu fareler, von Frey filament testinde azaltılmış ısırma kuvveti ve kafa çekme eşiği dahil olmak üzere PBS enjeksiyonuna kıyasla orofasiyal ağrı davranışları sergiledi. Bu yöntemlerin tekrarlanabilir sonuçlar elde etmek için uygulanması nispeten kolaydır ve potansiyel olarak TME bozuklukları ile ilgili diğer hastalık modelleri için ağrı çalışmalarına genişletilebilir. Birlikte, ısırma kuvveti ve von Frey filament testleri, CFA enjeksiyonunun neden olduğu ağrılı TMJOA fare modellerinde gösterildiği gibi, orofasiyal ağrının ölçülmesinde güvenilirdir.

Enflamasyon kaynaklı TMJOA ağrısı, TMJ'ye CFA enjeksiyonu ile oluşturulur. Çene hareketi sırasında sol ve sağ TMJ'nin koordineli çalışması gerektiğinden, TMJ ağrısını değerlendirmek için hem sol hem de sağ eklemlere CFA enjekte edilir. Sham grubu, kontrol olarak PBS enjeksiyonları alacaktır. CFA ve sham grupları arasındaki ağrı davranışı farklılıklarını istatistiksel olarak analiz etmek için Ortalama ± SEM ve Student t-testi kullanılır.
Farelerin TMJ ağrısı yaşayıp yaşamadıklarını incelemek için ısırma kuvveti ve baş geri çekilme eşiği ölçümleri kullanılmıştır. CFA uygulanan farelerde, CFA enjeksiyonunu takip eden 1. günde, bazal seviyelerine kıyasla hem ısırma kuvveti seviyelerinde hem de baş geri çekilme eşiklerinde belirgin azalmalar görülmüş, sonraki zaman noktalarında ise kademeli artışlar gözlemlenmiştir. Buna karşılık, PBS enjekte edilen kontrol grubu, bazal eğitimlerine kıyasla ısırma kuvvetinde veya von Frey filament testlerine verilen yanıtlarda anlamlı bir değişiklik göstermemiştir (Şekil 4A-D). Bu sonuçlar, CFA enjeksiyonu yapılan farelerin, mekanik allodini ve bozulmuş çiğneme fonksiyonu ile birlikte TMJ ağrısı yaşadıklarını göstermektedir.
<img alt="Sıçan kafatası diseksiyon şemaları; zigomatik ark, masseter kası, kulak kanalı; anatomik çalışma." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67203/67203fig01.jpg" data-altupdatedat="1788304762000" data-alt="Şekil 1"> 
Şekil 1: Fare modelinde TMJ intra-artiküler enjeksiyonu. (A) Fare, burun konisi kullanılarak isofluran ile anesteziye alındı. Sarı çizgi, göz seviyesinden kulak kanalına kadar olan hayali çizgiyi belirtmektedir. (B) Enjeksiyon için anatomik işaretleyici. Siyah kesikli çizgi, cilt üzerinden palpe edilebilen zigomatik arkı göstermektedir. Enjeksiyon bölgesi için basık alan kırmızı bir işaretle belirtilmiştir. (C) Masseter kası kaldırıldığında TMJ'nin kondiler başı görülebilir. (D,E) TMJ'nin kondiler başını göstermek için Fast Green boyası enjekte edilmiştir. Ölçek çubuğu: 1 mm. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67203/67203fig01large.jpg" target="_blank">Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Emisyon çalışması için bilgisayar arayüzü, sinyal veri grafiği ve analiz seçeneklerini içeren spektroskopi düzeneği." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67203/67203fig02.jpg" data-altupdatedat="1788304762000" data-alt="Şekil 2"> 
Şekil 2: Isırma kuvveti ölçümünün kaydedilmesi. (A,B) Isırma kuvveti cihazı ve ısırma kuvvetini kaydetmek için kullanılan bilgisayar. (C) Isırma kuvveti ölçümü sırasında ısırma kuvveti kaydının genliği. (D-F) Isırma kuvvetini kaydetmek için kullanılan programdaki parametreler. (D'-F') Her bir parametre bölümünün büyütülmüş görünümleri. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67203/67203fig02large.jpg" target="_blank">Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Ağrı ölçüm düzeneği; Von Frey filamenti, dijital kuvvet ölçer ekranları; statik denge analizi." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67203/67203fig03.jpg" data-altupdatedat="1788304762000" data-alt="Şekil 3"> 
Şekil 3: Elektronik Von Frey analjeziometresi. (A,B) Von Frey filamenti araçları. (C) Cihaz açıldığında görüntülenen ekran. (D) Kayda başlamak için cihazı sıfıra ayarlayın. (E) Baş çekme yanıtını tetiklemek için von Frey tarafından uygulanan kuvvet miktarı. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67203/67203fig03large.jpg" target="_blank">Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="CFA ve PBS enjeksiyonu sonrası ısırma kuvveti, geri çekilme eşiği analiz grafikleri; karşılaştırmalı zaman noktası sonuçları." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67203/67203fig04.jpg" data-altupdatedat="1788304762000" data-alt="Şekil 4"> 
Şekil 4: PBS kontrol grubuyla karşılaştırıldığında CFA ile indüklenen inflamatuar TMJOA'da ağrı davranışı değerlendirmesi. (A,B) Isırma kuvveti ölçümü ve ısırma kuvveti değerlerinin bazal seviyeye göre yüzde değişimi. (C,D) von Frey filament testi ile baş geri çekilme eşiğinin ölçümü ve baş geri çekilme eşiğinin bazal seviyeye göre yüzde değişimi. Değerler ortalama ± SEM'i temsil eder, Student's t-testi. *p &lt; 0.05, **p &lt; 0.01, ***p &lt; 0.001, ****p &lt; 0.0001. n = 6 fare PBS grubu için, n = 8 fare CFA grubu için. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67203/67203fig04large.jpg" target="_blank">Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
Ek Dosya 1: Isırma kuvveti ölçümü ve analizi. A Sütunu her bir ısırma olayının zaman noktasını belirtirken, B Sütunu ısırma kuvvetinin genliğini veya değerini kaydeder. Bu tablo, ısırma kuvvetinin maksimum mutlak değerine göre düzenlenmiş verileri sunmaktadır. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67203/Bite%20force%20measurement%20and%20analysisv2.zip" target="_blank">Bu dosyayı indirmek için lütfen buraya tıklayın.</a>

Bu protokol, Komple Freund Adjuvanı (CFA) ile indüklenen inflamatuar temporomandibular eklem (TME) ağrısında ısırma kuvveti ve baş çekilme eşiğinin ölçülmesinin ağrı davranışını nasıl yakalayabileceğini açıklar.

Farelerde Isırma Kuvveti ve Von Frey Filament Deneyleri ile Temporomandibular Eklem Ağrısı Ölçümü

Temporomandibular joint (TMJ) pain and osteoarthritis (OA) are common and debilitating disorders that impair patients' quality of life. The mechanisms ...

temporomandibular-joint-pain-measurement-bite-force-von-frey-filament

Research

JoVE Journal

Behavior

Davranış

Biz uyanık, bilinçli kemirgenlerde ağrı davranışların değerlendirilmesi için kullanıcı dostu, yüksek verimli edimsel sistemi mevcut. Orofasiyal Ağrı Değerlendirme Ölçeği (OPAD) böylece test daha insancıl bir şekilde sağlayan bir ödül / çatışma paradigma ile ağrı değerlendirebilir. Bu protokol kemirgenler daha fazla klinik ve öteleme veri verecektir.

Nosiseptif Davranış değişiklikler Tedbir Edimsel Orofasiyal Ağrı Değerlendirme Ölçeği (OPAD) kullanımı

Yemek süresinde bir uzatma, orofasiyal ağrısı olan insanların koruma davranışına benzer kemirgenlerde orofasiyal noseptif davranışı temsil eder. Yemek, eğitim veya hayvan manipülasyonu gerektirmeyen, kortikal katılım gerektiren ve bu tahlilleri alternatif refleks veya operant ölçümlerden ayıran diğer deneysel olarak indüklenen davranışlarla rekabet etmeyen bir davranıştır.

Kemirgenlerde Orofacial Noseptif Yanıtların Ölçüsü Olarak Yemek Süresi

Bu çalışmada, lifli ortak biyomekanik için mikro-X-ışını bilgisayarlı tomografi ile birlikte yerinde yükleme cihazının bir kullanımının tartışılacaktır. Ortak biyomekanik bir genel değişim ile tanımlanabilir deneysel okumalar içerecektir: 1) gerici deplasman vs kuvvet, alveol soket içinde yani diş deplasman ve yükleme onun gerici tepki, 2) üç boyutlu (3D) mekansal yapılandırma ve morfometrik, yani geometrik nedeniyle yükleme ekseni örneğin, konsentrik ya da eksantrik yükler bir değişiklik için...

Yerinde Basınç Yükleme ve Kemik-periodontal ligament-diş Lifli Joint Korelatif noninvaziv Görüntüleme

Elektronik von Frey ölçümleri, enflamatuar bir olaydan önce ve sonra sürekli olarak uygulanan basınç uyaranlarına kemirgen mekanik çekilme eşiklerindeki değişikliklerin hızlı ve hassas bir şekilde ölçülmesine izin verdiği için klasik von Frey filamentlerine etkili ve geliştirilmiş bir alternatiftir.

Elektronik von Frey aparatı kullanarak farelerin arka pençesindeki dokunsal hassasiyetteki değişikliklerin ölçülmesi

Osteoartrit (OA), ya da dejeneratif eklem hastalığı, yalnızca kısmen kullanılabilir analjezik tarafından kontrol kalır ağrı ile ilişkili bir zayıflatıcı bir durumdur. Hayvan modelleri OA ile ilgili ağrı mekanizmalarının anlayışımızı geliştirmek için geliştirilmektedir. Burada fare OA ağrısının monoiodoacetate modeli için bir yöntem tarif eder.

Fare Osteoartrit Ağrı Monoiodoacetate Modeli

Bu el yazması xarakteristikaları ve kemirgenler çene kemiğinde düzgün içinde hücresel değişikliklerin analizi için yöntemler sunar.

Bir xarakteristikaları ve fare çene kemiğinde düzgün için hücresel analiz yöntemi

Migrenin en önemli belirtisi şiddetli baş ağrısıdır ve bunun meninksleri innerve eden duyusal nöronlar tarafından aracılık ettiği varsayılmaktadır. Burada, yüz aşırı duyarlılığını bir çıktı olarak kullanırken, maddeleri duraya minimal invaziv bir şekilde lokal olarak uygulamak için bir yöntem sunuyoruz.

Preklinik Bir Baş Ağrısı Modeli Olarak Farelerde Dural Stimülasyon ve Periorbital von Frey Testi

Bu protokol, operant tabanlı bir orofasiyal ağrı değerlendirme cihazı kullanılarak nöropatik orofasiyal ağrının bir sıçan modelinde mekanik aşırı duyarlılığın değerlendirilmesini açıklar.

Sıçanlarda Sinir Hasarına Bağlı Mekanik Aşırı Duyarlılığın Orofasiyal Operant Ağrı Testi Kullanılarak Değerlendirilmesi

Mikrosertlik, mekanik bir özelliktir ve sert doku patofizyolojisini değerlendirmek için bilgilendirici bir parametredir. Burada, kemirgen ağız hastalığı modellerinde diş ve alveol kemiğinde mikrosertlik analizi, yani dental florozis ve ligatür kaynaklı periodontal kemik rezorpsiyonu için standart bir protokol (numune hazırlama, parlatma, düz yüzey ve girinti bölgeleri) gösteriyoruz.

Kemirgen Ağız Hastalığı Modellerinde Diş ve Alveol Kemiği Üzerinde Mikrosertlik Ölçümleri

Burada, ortodontik diş hareketini (OTM) incelemek için kemik adaptasyonu, kök rezorpsiyonu ve kemik hücrelerinin mekanik uyaranlara tepkisi mekanizmalarını araştırmak için uygun bir model olarak hizmet veren bir protokol sunuyoruz. Bu kapsamlı kılavuz, OTM modeli, mikro bilgisayarlı tomografi alımı ve sonraki analizler hakkında ayrıntılı bilgi sağlar.

Farelerde Ortodontik Diş Hareketinin İncelenmesi

Protokol, farelerde diz hiperaljezisinin nasıl ölçüleceğini açıklar. Akut diz ağrısının fare modellerinde ve osteoartrit (OA) modellerinde örnekler gösteriyoruz.

Farelerde Diz Hiperaljezisinin Basınç Uygulama Ölçümü Kullanılarak Değerlendirilmesi

Öğrenin farelerde ısırma kuvveti ve Von Frey filament deneyleriyle temporomandibular eklem ağrısı ölçüm yöntemlerini. Bu protokol nörobilim ve davranış analizi araştırmalarında standartlaştırılmış ağrı değerlendirmesi sağlar.

Farelerde Isırma Kuvveti ve Von Frey Filament Deneyleri ile Temporomandibular Eklem Ağrısı Ölçümü

Daha fazla video keşfet