Name: Embriyonik ve Larva Zebra Balıklarında Yüksek Çözünürlüklü Hücre Nakli (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-07-05T15:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 8 s
Description: Öğrenin, embriyonik ve larva Danio rerio'ya yüksek çözünürlüklü hücre nakli yapmayı. Bu yöntem, farklılaşmış nöronların uzun süreli izlenmesini sağlayarak sinir sistemi gelişimi ve rejenerasyonu çalışmalarına katkı sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<meta charset="utf8"></head><body>Rejenerasyon ve Gelişim Araştırmaları için Sağlam Zebra Balığı Hücre Nakli

<ol><li>Solini, G. E., Dong, C., Saha, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Embryonic+transplantation+experiments%3A+Past%2C+present%2C+and+future%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Embryonic transplantation experiments: Past, present, and future.</a> Trends Dev Biol. 10, 13-30 (2017).</li>
<li>Gilbert, S. F. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aGilbert%2C+SF+%22A+Conceptual+History+of+Modern+Embryology%22">A Conceptual History of Modern Embryology</a>. , Springer. New York, NY. (1991).</li>
<li>Spemann, H., Mangold, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+of+embryonic+primordia+by+implantation+of+organizers+from+a+different+species.+1923%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Induction of embryonic primordia by implantation of organizers from a different species. 1923.</a> Int J Dev Biol. 45 (1), 13-38 (2001).</li>
<li>Kretzschmar, K., Watt, F. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lineage+Tracing%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Lineage Tracing.</a> Cell. 148 (1), 33-45 (2012).</li>
<li>Gansner, J. M., Dang, M., Ammerman, M., Zon, L. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chapter+22+-+Transplantation+in+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+in+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Chapter 22 - Transplantation in zebrafish.</a> Methods in Cell Biol. 138, 629-647 (2017).</li>
<li>Le Douarin, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Details+of+the+interphase+nucleus+in+Japanese+quail+%28Coturnix+coturnix+japonica%29%5BTitle%5D)+AND+%22Bull+Biol+Fr+Belg%22%5BJournal%5D)">Details of the interphase nucleus in Japanese quail (Coturnix coturnix japonica).</a> Bull Biol Fr Belg. 103 (3), 435-452 (1969).</li>
<li>Ho, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell+movements+and+cell+fate+during+zebrafish+gastrulation%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Suppl%22%5BJournal%5D)">Cell movements and cell fate during zebrafish gastrulation.</a> Dev Suppl. , 65-73 (1992).</li>
<li>Le Douarin, N. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developmental+patterning+deciphered+in+avian+chimeras%5BTitle%5D)+AND+%22Development%2C+Growth+%26+Differentiation%22%5BJournal%5D)">Developmental patterning deciphered in avian chimeras.</a> Development, Growth & Differentiation. 50, S11-S28 (2008).</li>
<li>Wagner, D. E., Wang, I. E., Reddien, P. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clonogenic+neoblasts+are+pluripotent+adult+stem+cells+that+underlie+planarian+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Clonogenic neoblasts are pluripotent adult stem cells that underlie planarian regeneration.</a> Science. 332 (6031), 811-816 (2011).</li>
<li>Balaban, E., Teillet, M. A., Le Douarin, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Application+of+the+quail-chick+chimera+system+to+the+study+of+brain+development+and+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Application of the quail-chick chimera system to the study of brain development and behavior.</a> Science. 241 (4871), 1339-1342 (1988).</li>
<li>Carmany-Rampey, A., Moens, C. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modern+mosaic+analysis+in+the+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Methods%22%5BJournal%5D)">Modern mosaic analysis in the zebrafish.</a> Methods. 39 (3), 228-238 (2006).</li>
<li>Kragl, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cells+keep+a+memory+of+their+tissue+origin+during+axolotl+limb+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Cells keep a memory of their tissue origin during axolotl limb regeneration.</a> Nature. 460 (7251), 60-65 (2009).</li>
<li>Rojo-Laguna, J. I., Garcia-Cabot, S., Saló, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue+transplantation+in+planarians%3A+A+useful+tool+for+molecular+analysis+of+pattern+formation%5BTitle%5D)+AND+%22Semin+Cell+Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Tissue transplantation in planarians: A useful tool for molecular analysis of pattern formation.</a> Semin Cell Dev Biol. 87, 116-124 (2019).</li>
<li>Tanaka, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+molecular+and+cellular+choreography+of+appendage+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">The molecular and cellular choreography of appendage regeneration.</a> Cell. 165 (7), 1598-1608 (2016).</li>
<li>Hu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Muscles+are+barely+required+for+the+patterning+and+cell+dynamics+in+axolotl+limb+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Genet%22%5BJournal%5D)">Muscles are barely required for the patterning and cell dynamics in axolotl limb regeneration.</a> Front Genet. 13, 1036641(2022).</li>
<li>Wells, K. M., Kelley, K., Baumel, M., Vieira, W. A., McCusker, C. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neural+control+of+growth+and+size+in+the+axolotl+limb+regenerate%5BTitle%5D)+AND+%22Elife%22%5BJournal%5D)">Neural control of growth and size in the axolotl limb regenerate.</a> Elife. 10, e68584(2021).</li>
<li>Otsuki, L., Tanaka, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Positional+memory+in+vertebrate+regeneration%3A+a+century%27s+insights+from+the+salamander+limb%5BTitle%5D)+AND+%22Cold+Spring+Harb+Perspect+Biol%22%5BJournal%5D)">Positional memory in vertebrate regeneration: a century's insights from the salamander limb.</a> Cold Spring Harb Perspect Biol. 14 (6), e040899(2022).</li>
<li>de Abreu, M. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zebrafish+as+a+model+of+neurodevelopmental+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Zebrafish as a model of neurodevelopmental disorders.</a> Neuroscience. 445, 3-11 (2020).</li>
<li>Alper, S. R., Dorsky, R. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Unique+advantages+of+zebrafish+larvae+as+a+model+for+spinal+cord+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Mol+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Unique advantages of zebrafish larvae as a model for spinal cord regeneration.</a> Front Mol Neurosci. 15, 983336(2022).</li>
<li>Blader, P., Strähle, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zebrafish+developmental+genetics+and+central+nervous+system+development%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Mol+Genet%22%5BJournal%5D)">Zebrafish developmental genetics and central nervous system development.</a> Hum Mol Genet. 9 (6), 945-951 (2000).</li>
<li>Kemp, H. A., Carmany-Rampey, A., Moens, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Generating+chimeric+zebrafish+embryos+by+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Generating chimeric zebrafish embryos by transplantation.</a> J Vis Exp. (29), e1394(2009).</li>
<li>Boulanger-Weill, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+interactions+between+newborn+and+mature+neurons+leading+to+integration+into+established+neuronal+circuits%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Biol%22%5BJournal%5D)">Functional interactions between newborn and mature neurons leading to integration into established neuronal circuits.</a> Curr Biol. 27 (12), 1707-1720 (2017).</li>
<li>Dong, J., Stuart, G. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transgene+manipulation+in+zebrafish+by+using+recombinases%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Transgene manipulation in zebrafish by using recombinases.</a> Methods Cell Biol. 77, 363-379 (2004).</li>
<li>Kawakami, K., Shima, A., Kawakami, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+a+functional+transposase+of+the+Tol2+element%2C+an+Ac-like+element+from+the+Japanese+medaka+fish%2C+and+its+transposition+in+the+zebrafish+germ+lineage%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Identification of a functional transposase of the Tol2 element, an Ac-like element from the Japanese medaka fish, and its transposition in the zebrafish germ lineage.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 97 (21), 11403-11408 (2000).</li>
<li>Hwang, W. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficient+genome+editing+in+zebrafish+using+a+CRISPR-Cas+system%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Efficient genome editing in zebrafish using a CRISPR-Cas system.</a> Nat Biotechnol. 31 (3), 227-229 (2013).</li>
<li>Elsen, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Determination+of+primary+motoneuron+identity+in+developing+zebrafish+embryos%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Determination of primary motoneuron identity in developing zebrafish embryos.</a> Science. 252 (5005), 569-572 (1991).</li>
<li>Elsen, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chapter+5+-+Cellular+methods%3A+detailed+procedure+for+transplanting+single+cells%5BTitle%5D)+AND+%22The+Zebrafish+Book%22%5BJournal%5D)">Chapter 5 - Cellular methods: detailed procedure for transplanting single cells.</a> The Zebrafish Book. , (2000).</li>
<li>Poulain, F. E., Gaynes, J. A., Stacher Hörndli, C., Law, M. -Y., Chien, C. -B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analyzing+retinal+axon+guidance+in+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Analyzing retinal axon guidance in zebrafish.</a> Methods Cell Biol. 100, 3-26 (2010).</li>
<li>Masai, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((N-cadherin+mediates+retinal+lamination%2C+maintenance+of+forebrain+compartments+and+patterning+of+retinal+neurites%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">N-cadherin mediates retinal lamination, maintenance of forebrain compartments and patterning of retinal neurites.</a> Development. 130 (11), 2479-2494 (2003).</li>
<li>Raible, D. W., Elsen, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regulative+interactions+in+zebrafish+neural+crest%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">Regulative interactions in zebrafish neural crest.</a> Development. 122 (2), 501-507 (1996).</li>
<li>White, R. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transparent+adult+zebrafish+as+a+tool+for+in+vivo+transplantation+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Stem+Cell%22%5BJournal%5D)">Transparent adult zebrafish as a tool for in vivo transplantation analysis.</a> Cell Stem Cell. 2 (2), 183-189 (2008).</li>
<li>Barsh, G. R., Isabella, A. J., Moens, C. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vagus+motor+neuron+topographic+map+determined+by+parallel+mechanisms+of+hox5+expression+and+time+of+axon+initiation%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Biol%22%5BJournal%5D)">Vagus motor neuron topographic map determined by parallel mechanisms of hox5 expression and time of axon initiation.</a> Curr Biol. 27 (24), 3812-3825 (2017).</li>
<li>Isabella, A. J., Stonick, J. A., Dubrulle, J., Moens, C. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intrinsic+positional+memory+guides+target-specific+axon+regeneration+in+the+zebrafish+vagus+nerve%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">Intrinsic positional memory guides target-specific axon regeneration in the zebrafish vagus nerve.</a> Development. 148 (18), 199706(2021).</li>
<li>Westerfield, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chapter+1%3A+General+methods+for+zebrafish+care%5BTitle%5D)+AND+%22The+Zebrafish+Book%22%5BJournal%5D)">Chapter 1: General methods for zebrafish care.</a> The Zebrafish Book. , (2000).</li>
<li>Grant, P. K., Moens, C. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+neuroepithelial+basement+membrane+serves+as+a+boundary+and+a+substrate+for+neuron+migration+in+the+zebrafish+hindbrain%5BTitle%5D)+AND+%22Neural+Dev%22%5BJournal%5D)">The neuroepithelial basement membrane serves as a boundary and a substrate for neuron migration in the zebrafish hindbrain.</a> Neural Dev. 5 (1), 9(2010).</li>
<li>Konantz, J., Antos, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reverse+genetic+morpholino+approach+using+cardiac+ventricular+injection+to+transfect+multiple+difficult-to-target+tissues+in+the+zebrafish+larva%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Reverse genetic morpholino approach using cardiac ventricular injection to transfect multiple difficult-to-target tissues in the zebrafish larva.</a> J Vis Exp. (88), e51595(2014).</li>
<li>Novoa, B., Figueras, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zebrafish%3A+model+for+the+study+of+inflammation+and+the+innate+immune+response+to+infectious+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Exp+Med+Biol%22%5BJournal%5D)">Zebrafish: model for the study of inflammation and the innate immune response to infectious diseases.</a> Adv Exp Med Biol. 946, 253-275 (2012).</li>
<li>Speirs, Z. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((What+can+we+learn+about+fish+neutrophil+and+macrophage+response+to+immune+challenge+from+studies+in+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Fish+Shellfish+Immunol%22%5BJournal%5D)">What can we learn about fish neutrophil and macrophage response to immune challenge from studies in zebrafish.</a> Fish Shellfish Immunol. 148, 109490(2024).</li>
<li>Trede, N. S., Langenau, D. M., Traver, D., Look, A. T., Zon, L. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+zebrafish+to+understand+immunity%5BTitle%5D)+AND+%22Immunity%22%5BJournal%5D)">The use of zebrafish to understand immunity.</a> Immunity. 20 (4), 367-379 (2004).</li>
<li>Lam, S. H., Chua, H. L., Gong, Z., Lam, T. J., Sin, Y. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+and+maturation+of+the+immune+system+in+zebrafish%2C+Danio+rerio%3A+a+gene+expression+profiling%2C+in+situ+hybridization+and+immunological+study%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Comp+Immunol%22%5BJournal%5D)">Development and maturation of the immune system in zebrafish, Danio rerio: a gene expression profiling, in situ hybridization and immunological study.</a> Dev Comp Immunol. 28 (1), 9-28 (2004).</li>
<li>Wienholds, E., Schulte-Merker, S., Walderich, B., Plasterk, R. H. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Target-selected+inactivation+of+the+zebrafish+rag1+gene%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Target-selected inactivation of the zebrafish rag1 gene.</a> Science. 297 (5578), 99-102 (2002).</li>
<li>Petrie-Hanson, L., Hohn, C., Hanson, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+rag1+mutant+zebrafish+leukocytes%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Immunol%22%5BJournal%5D)">Characterization of rag1 mutant zebrafish leukocytes.</a> BMC Immunol. 10, 8(2009).</li>
<li>Roh-Johnson, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Macrophage-dependent+cytoplasmic+transfer+during+melanoma+invasion+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Cell%22%5BJournal%5D)">Macrophage-dependent cytoplasmic transfer during melanoma invasion in vivo.</a> Dev Cell. 43 (5), 549-562 (2017).</li>
<li>Bukrinsky, A., Griffin, K. J. P., Zhao, Y., Lin, S., Banerjee, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Essential+role+of+spi-1-like+%28spi-1l%29+in+zebrafish+myeloid+cell+differentiation%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Essential role of spi-1-like (spi-1l) in zebrafish myeloid cell differentiation.</a> Blood. 113 (9), 2038-2046 (2009).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>10 mL "rezervuar şırıngası"</td><td>Fisher Scientific</td><td>14-955-459</td><td></td></tr><tr><td>150 mL tek kullanımlık vakum filtresi, .2 & m, PES</td><td>Corning</td><td>431153</td><td></td></tr><tr><td>20 x 12 mm ısıtma bloğu</td><td>Corning</td><td>480122</td><td></td></tr><tr><td>3 musluk</td><td>Braun Medical Inc.</td><td></td><td></td>455991</tr><tr><td>3 x 1 Buzlu cam sürgü</td><td>VWR</td><td>48312-004</td><td></td></tr><tr><td>40x su daldırma objektifi</td><td>Nikon</td><td>MRD07420</td><td></td></tr><tr><td>Kalsiyum klorür dihidrat</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C3306</td><td></td></tr><tr><td>Kaba Manipülatör</td><td>Narishige</td><td>MN-4</td><td></td></tr><tr><td>Özel mikroşırınga pompası</td><td>Oregon Üniversitesi</td><td>Yok</td><td>Oregon Üniversitesi makine atölyesi (tsa.uoregon@gmail.com) tarafından üretilmiştir. Ticari olarak temin edilebilen bir alternatif aşağıda listelenmiştir.</td></tr><tr><td>Dumont #5 Forseps</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>1129500</td><td></td></tr><tr><td>Eclipse FN1 "Nakil Mikroskobu"</td><td>Nikon</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>elektrot kolu</td><td>World Precision Instruments</td><td>5444</td><td></td></tr><tr><td>Tüy Steril Cerrahi Bıçak, #11</td><td>VWR</td><td>21899-530</td><td></td></tr><tr><td>İnce mikromanipülatör, Üç eksenli Yağ hidroliği&nbsp;</td><td>Narishige</td><td>MMO-203</td><td></td></tr><tr><td>HEPES pH 7.2</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>H3375-100G</td><td></td></tr><tr><td>Yüksek Hassasiyetli # 3 Stil Neşter Sapı</td><td>Fisher Scientific</td><td>12-000-163</td><td></td></tr><tr><td>Kimble Tek Kullanımlık Borosilikat Pastör Pipeti, Geniş Uç, DWK'da 5.75</td><td>Yaşam Bilimleri</td><td>63A53WT</td><td></td></tr><tr><td>KIMBLE Kromatografi Adaptörü&nbsp;</td><td>DWK Yaşam Bilimleri</td><td>420408-0000</td><td></td></tr><tr><td>Kimwipes</td><td>Kimberly-Clark Professional</td><td>34120</td><td></td></tr><tr><td>Hafif Mineral Yağ</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>M3516-1L</td><td></td></tr><tr><td>LSE dijital kuru banyo ısıtıcısı, 1 blok, 120 V</td><td>Corning</td><td>6875SB</td><td></td></tr><tr><td>Manuel mikroşırınga pompası</td><td>World Precision Instruments</td><td>MMP</td><td>Özel mikroşırınga pompasına ticari alternatif</td></tr><tr><td>Mikroelektrot Tutucu Dünya</td><td>Hassas Aletler</td><td>MPH310</td><td></td></tr><tr><td>MicroFil Pipet Dolgu</td><td>Dünyası Hassas Aletler</td><td>MF28G67-5</td><td></td></tr><tr><td>Oje</td><td>Elektron Mikroskopi Bilimleri</td><td>72180</td><td></td></tr><tr><td>Nükleaz içermeyen su</td><td>VWR</td><td>82007-334</td><td></td></tr><tr><td>P-97 Alevli/Kahverengi Tip Mikropipet Çektirme</td><td>Sutter Aletleri</td><td>P-97</td><td></td></tr><tr><td>Penisilin-streptomisin</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>p4458-100ML</td><td>5.000 birim penisilin ve 5 mg streptomisin/mL</td></tr><tr><td>pipet pompası 10 mL</td><td>Bel-Art</td><td>37898-0000</td><td></td></tr><tr><td>Potasyum klorür</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P3911</td><td></td></tr> Yuvarlak Tabanlı Polistiren Test Tüpleri <tr><td></td><td></td><td></td> LOC1365882 <td>Profesyonel</td>Süper Yapıştırıcı Lotikit</tr><tr><td></td><td>Falcon</td><td>352054</td><td></td></tr><tr><td>Sodyum klorür</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S9888</td><td></td></tr><tr><td>Sahne mikrometresi</td><td>Meiji Techno America</td><td>MA285</td><td></td></tr><tr><td>İğnesiz Şırıngalar, 50 mL</td><td>BD Medical</td><td>309635</td><td></td></tr><tr><td>Trikain Metanosülfonat</td><td>Syndel USA</td><td>SYNCMGAUS03</td><td></td></tr><tr><td>Trilene XL pürüzsüz döküm Olta</td><td></td><td>Berkley XLFS6-15</td><td></td></tr><tr><td>Boru, polietilen No. 205</td><td>BD Medical</td><td>427445</td><td></td></tr><tr><td>UltraPure Düşük Erime Noktalı Agaroz</td><td>Invitrogen</td><td>16520050</td><td></td></tr><tr><td>Wiretrol II kalibre edilmiş mikropipetler</td><td>Drummond</td><td>50002010</td><td></td></tr></tbody></table>

embriyonik ve larva zebra balıklarında yüksek Çözünürlüklü hücre nakli

High-resolution Cell Transplantation in Embryonic and Larval Zebrafish

Transplantasyon deneylerinin sonuçları, bir floresan mikroskobu kullanılarak transplantasyon sonrası uygun zaman noktalarında konakçı hayvanlarda floresan etiketli donör hücrelerin görselleştirilmesiyle doğrudan gözlemlenir. Burada, 3 dpf'de bireysel anterior vagus nöronlarını naklettik. Ev sahibi hayvanlar daha sonra 12 veya 48 saat inkübe edildi, anestezi uygulandı, LMA'ya bir cam lamel üzerine monte edildi ve konfokal mikroskop ile görüntülendi (Şekil 5). Transplantasyondan 12 saat sonra (hpt), başarılı bir şekilde nakledilen bir donör nöron gözlemliyoruz (Şekil 5A). Hücrenin, konak vagus motor çekirdeğinin ön bölgesindeki konak vagus nöronları arasında yer aldığı için doğru konumlandırıldığını doğrulayabiliriz; hücre ayrıca birkaç kısa nörit çıkıntısının uzamasıyla gösterildiği gibi sağlam ve sağlıklı görünür (Şekil 5A). Transplantasyondan (dpt) 2 gün sonra, tek bir nöronun konak çekirdeğinin doğru pozisyonuna başarılı bir şekilde nakledildiğini tekrar doğrulayabiliriz (Şekil 5B). Bu noktada, nöronun 4. faringeal ark'a yeni bir akson uzattığını gözlemliyoruz (Şekil 5B). Doğrudan gözlem, prosedürün ne zaman başarısız olduğunu da ortaya çıkarır. Bu örnekte, hiçbir donör nöronun bulunmadığı 2 dpt'lik bir konak gözlemliyoruz; daha ziyade, muhtemelen transplantasyondan sonra ölen bir donör nöronun bir parçası olan küçük bir yeşil leke belirgindir (Şekil 5C). Nakil başarı oranları, kullanıcı deneyimine ve nakledilen hücrelerin sayısına ve türüne bağlı olarak değişse de, 3-4 dpf33'te gerçekleştirilen vagus motor nöron naklleri için f'lık (n = 453 nakil) bir başarı oranı (konakta 2-3 dpt'de bir akson uzatan hayatta kalan bir nöronun varlığı olarak tanımlanır) yaşarız.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67218/67218fig01.jpg"> Şekil 1: Nakil aparatına genel bakış. (A) Dik floresan mikroskobu; (B) 40x suya daldırma hedefi; (C) kaba mikromanipülatör; (D) ince mikromanipülatör; (E) mikroelektrot tutucu; (F) elektrot kolu; (G) üç musluk; (H) mikroşırınga pompası; (I) polietilen boru; (J) kromatografi adaptörleri; (K) 10 mL rezervuar şırıngası. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67218/67218fig01large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67218/67218fig02.jpg"> Şekil 2: Nakil için hayvanların montajı. (A) Dikdörtgen bir çerçevede (kesikli çizgi) şeffaf oje uygulanmış 3 inç x 1 inç buzlu cam slayt. (B) Donör (ok) ve konakçı (ok ucu) hayvanlar, agaroz damlalarına monte edilmiş, transplantasyon hedef bölgesi (arka beyin) ile dikey olarak hizalanmış, sağa doğru yönlendirilmiş hayvanlar. (C) Transplantasyon hedef bölgesini ortaya çıkarmak için sağ kenarı ve takozları kesilmiş agaroz. İç: kutulu bölgenin yakınlaştırılması. (D) Nakil slaytı, penisilin-streptomisin ve trikat içeren Ringer çözeltisi ile sular altında kaldı. Ölçek çubukları = 5 mm. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67218/67218fig02large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67218/67218fig03.jpg"> Şekil 3: Nakil iğnesi hazırlığı. (A) Bir aşama mikrometresinin üzerinde kırık nakil iğnesi. (B) İğneyi mineral yağ ile doldurmak için nakil iğnesine (2) yerleştirilen pipet dolgusu (1). (C) Nakil mikroskobu üzerinde yerinde hazırlanmış nakil lamı ve iğne. 1: 40x daldırma hedefi ile su basmış slayt arasındaki su menisküsü 2: Nakil iğnesi 3: Mikroelektrot tutucusu. (D) 40x büyütmede nakil mikroskobu ile görüntülenen, stabil yağ menisküsü (ok ucu) olan kırık bir nakil iğnesinin ucu. Ölçek çubukları = 100 μm <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67218/67218fig03large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67218/67218fig04.jpg"> Şekil 4: Mikroskop altında yapılan nakil işlemi. (A) Donör hayvanın dışına yerleştirilmiş, vagus motor nöronları hedefleyen iğne (yeşil, ok ucu). (B) Floresan işaretli donör nöronları (ok uçları) aldıktan sonra donör hayvanın içine yerleştirilen iğne. (C) Anterior konak vagus motor nöronlarını (kırmızı, yıldız) hedefleyen, konakçı hayvanın dışına yerleştirilmiş birkaç donör nöron (ok ucu) içeren iğne. (D) Transplantasyon sonrası iğne çekilerek konakçı hayvan. GFP'yi (ok ucu) eksprese eden nakledilen bir donör nöron kümesi, konakçıya dışarı atılmıştır. Ölçek çubukları = 30 μm <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67218/67218fig04large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67218/67218fig05.jpg"> Şekil 5: Temsili sonuçlar. (A,B) Başarılı nakiller. (A) Bir donör nöron (A'da yeşil, siyah) içeren 12 hpt'lik bir konakçı vagus motor çekirdeğinin (macenta) ön bölgesi. Donör nöron birkaç nörit uzatmıştır (A' içindeki oklar). (B) Bir donör nöron (yeşil, B'', B') içeren 2 dpt'lik bir konağın (macenta) vagus motor çekirdeği (B-B'') ve faringeal akson dalları (B''-B'', akson dalları etiketli). Donör nöron, 4. dala (ok uçları) yeni bir akson uzattı. Şekil 5A,B farklı hayvanları temsil etmektedir. (C) Başarısız nakil. 2 dpt'lik bir konağın (macenta) vagus motor çekirdeği. Donör nöron mevcut değildir; daha ziyade, muhtemelen ölü bir donör nöronun (ok ucu) bir parçasını temsil eden küçük bir leke (yeşil, C'de siyah) mevcuttur. Ölçek çubukları = 20 μm. Kısaltmalar: dpt = transplantasyondan sonraki gün sayısı; hpt = transplantasyondan sonraki saat. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67218/67218fig05large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>

Embriyonik ve Larva Zebra Balıklarında Yüksek Çözünürlüklü Hücre Nakli

Development and regeneration occur by a process of genetically encoded spatiotemporally dynamic cellular interactions. The use of cell transplantation ...

high-resolution-cell-transplantation-in-embryonic-and-larval-zebrafish

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Gelişim Biyolojisi

Zebra balığı hücre nakli, doku spesifik kimeralar üretmek için genetik ve embriyoloji kombinasyonu sağlar. Bu video gastrula laboratuarımızda önbeyin komissür oluşumu sırasında, Astroglial nüfus ve özel rehberlik ipuçları rollerini araştırmak için izin hücre transplantasyon sahnelenen göstermektedir.

Doku Hedeflenen Embriyonik Chimeras: Zebra balığı Gastrula Hücre Nakli

Biz embriyogenez sırasında canlı görüntüleme hücresel davranışı için kimerik zebrafish embriyolar üretmek için bir protokol ortaya koymaktadır.

Transplantasyon GFP of-Kimerik Zebra balığı Embriyolar Retina ve Beyin Gelişimi Canlı Görüntüleme blastomer ifade

Zebra balığı, küçük tropikal balık, omurgalı geliştirme ve hastalık sırasında gen fonksiyonu çalışmak için popüler bir model haline gelmiştir. Hedef genlerin uzaysal ve zamansal ifade ile tespit...

Yüksek Çözünürlüklü Tüm Dağı<em&gt; Yerinde</emGen İfade ve Fonksiyon Eğitim için Zebra balığı Embriyolar içinde&gt; Hibridizasyon

Burada, zebra balığı iskelet kası ve embriyonal rabdomiyosarkomun (ERMS) erişkin bağışıklık sistemi baskılanmış rag2E450fs homozigot mutant zebra balığına hücre nakli için bir protokol sunuyoruz. Bu protokol, kas hücrelerinin rejenerasyonu ve malign dönüşümünün verimli bir şekilde analiz edilmesini sağlar.

Bağışıklık Aşılmasına Yetişkin Zebra balığı içine normal ve malign Kas Hücre Nakli

Bu protokol, zebra balığı embriyolarından tek hücreleri izole etmek, ilgilenilen hücreleri zenginleştirmek, mikroakışkan tabanlı tek hücreli multipleks sistemlerde zebra balığı hücrelerini yakalamak ve tek hücrelerden gen ekspresyonunu değerlendirmek için bir yöntemi tanımlar.

İzolasyon ve Zebra balığı Embriyolar gelen Tek Hücre Karakterizasyonu

farklı genetik kökenden bireysel WT retina atalarıdır Canlı izleme nöron sırasında hücre özerk olmayan sinyalizasyon katkısı değerlendirilmesi için izin verir. Burada, embriyo transplantasyonu yoluyla ve in vivo time-lapse konfokal görüntüleme gen demonte, kimera nesil bir arada bu amaçla kullanılmıştır.

Kimerik Zebra balığı Embriyolar Bireysel Retina progenitörlerin Transgenik Gen İfade Vivo Görüntüleme Hücre otonom olmayan Etkiler Eğitim için

Biz birincil hücre kültürleri zebra balığı embriyo transfection ve canlı hücre görüntüleme gibi primer hücre--dan yetişkin zebra balığı beyin hazırlamak için bir protokol için hazırlanması için etkili ve kullanımı kolay bir protokol mevcut.

Kültür ve zebra balığı primer hücre Transfection

Hücrelerin ekstirpasyonu ve nakli gibi embriyolojik manipülasyonlar erken gelişimi incelemek için önemli araçlardır. Bu protokol, zebra balığı embriyolarında bu manipülasyonları gerçekleştirmek için basit ve etkili bir transplantasyon cihazını tanımlar.

Zebra Balığı Embriyoları İçin Basit ve Etkili Bir Transplantasyon Cihazı

Bu çalışma, zebra balığı embriyolarına transgenik yapılar oluşturmak ve enjekte etmek için ağ geçidi tabanlı bir klonlama yöntemi olan modüler Tol2 transgenez sistemi için bir protokolü açıklamaktadır.

Zebra Balığı Tol2 Sistemi: Modüler ve Esnek Ağ Geçidi Tabanlı Transgenez Yaklaşımı

Şeffaf zebra balığı embriyolarının yumurta sarısına ksenotransplantasyon için basit, hızlı bir evreleme yöntemi ile optimize edilmiş bir protokol tarif ediyoruz. Enjeksiyon sonrası analizler, akış sitometrisi ile ksenotransplante edilen hücrelerin sağkalımını ve hastalık yükünün değerlendirilmesini içerir.

Şeffaf Zebra Balığı Embriyolarında Tümör Ksenotransplantasyon Analizi için Basit, Hızlı ve Etkili Bir Yöntem

Öğrenin, embriyonik ve larva Danio rerio'ya yüksek çözünürlüklü hücre nakli yapmayı. Bu yöntem, farklılaşmış nöronların uzun süreli izlenmesini sağlayarak sinir sistemi gelişimi ve rejenerasyonu çalışmalarına katkı sunar.

Embriyonik ve Larva Zebra Balıklarında Yüksek Çözünürlüklü Hücre Nakli

Daha fazla video keşfet