Name: Retinal Vaskülatürde Diyabete Bağlı Yapışık Lökositlerin Miktar Tayini (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-01-24T13:20:00.000+00:00
Duration: 5 min 54 s
Description: Öğrenin, diyabetik retinopatide retinal damarlarda lökosit birikimini görselleştirmek ve miktarını belirlemek için fare modelinde kullanılan bu yöntemi. Tedavi etkinliğini değerlendirmede kritik bir araçtır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

<ol><li>Swystun, L. L., Liaw, P. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+leukocytes+in+thrombosis%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">The role of leukocytes in thrombosis.</a> Blood. 128 (6), 753-762 (2016).</li>
<li>Barouch, F. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Integrin-mediated+neutrophil+adhesion+and+retinal+leukostasis+in+diabetes%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthalmol+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">Integrin-mediated neutrophil adhesion and retinal leukostasis in diabetes.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 41 (5), 1153-1158 (2000).</li>
<li>Macaron, W., Sargsyan, Z., Short, N. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hyperleukocytosis+and+leukostasis+in+acute+and+chronic+leukemias%5BTitle%5D)+AND+%22Leuk+Lymphoma%22%5BJournal%5D)">Hyperleukocytosis and leukostasis in acute and chronic leukemias.</a> Leuk Lymphoma. 63 (8), 1780-1791 (2022).</li>
<li>Kempen, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+prevalence+of+diabetic+retinopathy+among+adults+in+the+United+States%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">The prevalence of diabetic retinopathy among adults in the United States.</a> Arch Ophthalmol. 122 (4), 552-563 (2004).</li>
<li>Kohner, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diabetic+retinopathy%5BTitle%5D)+AND+%22Br+Med+Bull%22%5BJournal%5D)">Diabetic retinopathy.</a> Br Med Bull. 45 (1), 148-173 (1989).</li>
<li>Aouiss, A., Anka Idrissi, D., Kabine, M., Zaid, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Update+of+inflammatory+proliferative+retinopathy%3A+Ischemia%2C+hypoxia+and+angiogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Res+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">Update of inflammatory proliferative retinopathy: Ischemia, hypoxia and angiogenesis.</a> Curr Res Transl Med. 67 (2), 62-71 (2019).</li>
<li>Tsalamandris, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+inflammation+in+diabetes%3A+Current+concepts+and+future+perspectives%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Cardiol%22%5BJournal%5D)">The role of inflammation in diabetes: Current concepts and future perspectives.</a> Eur Cardiol. 14 (1), 50-59 (2019).</li>
<li>Adamis, A. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Is+diabetic+retinopathy+an+inflammatory+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Br+J+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Is diabetic retinopathy an inflammatory disease.</a> Br J Ophthalmol. 86 (4), 363-365 (2002).</li>
<li>Joussen, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+central+role+for+inflammation+in+the+pathogenesis+of+diabetic+retinopathy%5BTitle%5D)+AND+%22FASEB+J%22%5BJournal%5D)">A central role for inflammation in the pathogenesis of diabetic retinopathy.</a> FASEB J. 18 (12), 1450-1452 (2004).</li>
<li>Serra, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CD11b%2B+bone+marrow-derived+monocytes+are+the+major+leukocyte+subset+responsible+for+retinal+capillary+leukostasis+in+experimental+diabetes+in+mouse+and+express+high+levels+of+CCR5+in+the+circulation%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Pathol%22%5BJournal%5D)">CD11b+ bone marrow-derived monocytes are the major leukocyte subset responsible for retinal capillary leukostasis in experimental diabetes in mouse and express high levels of CCR5 in the circulation.</a> Am J Pathol. 181 (2), 719-727 (2012).</li>
<li>Kinukawa, Y., Shimura, M., Tamai, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantifying+leukocyte+dynamics+and+plugging+in+retinal+microcirculation+of+streptozotosin-induced+diabetic+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Quantifying leukocyte dynamics and plugging in retinal microcirculation of streptozotosin-induced diabetic rats.</a> Curr Eye Res. 18 (1), 49-55 (1999).</li>
<li>Linsenmeier, R. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Retinal+hypoxia+in+long-term+diabetic+cats%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthalmol+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">Retinal hypoxia in long-term diabetic cats.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 39 (9), 1647-1657 (1998).</li>
<li>Herdade, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+diabetes+on+microcirculation+and+leukostasis+in+retinal+and+non-ocular+tissues%3A+Implications+for+diabetic+retinopathy%5BTitle%5D)+AND+%22Biomolecules%22%5BJournal%5D)">Effects of diabetes on microcirculation and leukostasis in retinal and non-ocular tissues: Implications for diabetic retinopathy.</a> Biomolecules. 10 (11), 1583(2020).</li>
<li>Oakley, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Incorporating+hemoglobin+levels+to+map+leukostasis+risk+in+acute+leukemia+using+microvasculature-on-chip+technologies%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Incorporating hemoglobin levels to map leukostasis risk in acute leukemia using microvasculature-on-chip technologies.</a> Blood. 136 (Suppl 1), 9-10 (2020).</li>
<li>Miyamoto, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prevention+of+leukostasis+and+vascular+leakage+in+streptozotocin-induced+diabetic+retinopathy+via+intercellular+adhesion+molecule-1+inhibition%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Prevention of leukostasis and vascular leakage in streptozotocin-induced diabetic retinopathy via intercellular adhesion molecule-1 inhibition.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 96 (19), 10836-10841 (1999).</li>
<li>Veenstra, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diabetic+retinopathy%3A+Retina-specific+methods+for+maintenance+of+diabetic+rodents+and+evaluation+of+vascular+histopathology+and+molecular+abnormalities%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Protoc+Mouse+Biol%22%5BJournal%5D)">Diabetic retinopathy: Retina-specific methods for maintenance of diabetic rodents and evaluation of vascular histopathology and molecular abnormalities.</a> Curr Protoc Mouse Biol. 5 (3), 247-270 (2015).</li>
<li>Lester, T. J., Johnson, J. W., Cuttner, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pulmonary+leukostasis+as+the+single+worst+prognostic+factor+in+patients+with+acute+myelocytic+leukemia+and+hyperleukocytosis%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Med%22%5BJournal%5D)">Pulmonary leukostasis as the single worst prognostic factor in patients with acute myelocytic leukemia and hyperleukocytosis.</a> Am J Med. 79 (1), 43-48 (1985).</li>
<li>Porcu, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hyperleukocytic+leukemias+and+leukostasis%3A+a+review+of+pathophysiology%2C+clinical+presentation+and+management%5BTitle%5D)+AND+%22Leuk+Lymphoma%22%5BJournal%5D)">Hyperleukocytic leukemias and leukostasis: a review of pathophysiology, clinical presentation and management.</a> Leuk Lymphoma. 39 (1-2), 1-18 (2000).</li>
<li>Giammarco, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hyperleukocytosis+and+leukostasis%3A+management+of+a+medical+emergency%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+Rev+Hematol%22%5BJournal%5D)">Hyperleukocytosis and leukostasis: management of a medical emergency.</a> Expert Rev Hematol. 10 (2), 147-154 (2017).</li>
<li>Mank, V., Azhar, W., Brown, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Leukocytosis%5BTitle%5D)+AND+%22StatPearls%22%5BJournal%5D)">Leukocytosis.</a> StatPearls. , StatPearls Publishing. Treasure Island (FL). (2024).</li>
<li>Bernhard, W., Avrameas, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrastructural+visualization+of+cellular+carbohydrate+components+by+means+of+concanavalin+A%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Cell+Res%22%5BJournal%5D)">Ultrastructural visualization of cellular carbohydrate components by means of concanavalin A.</a> Exp Cell Res. 64 (1), 232-236 (1971).</li>
<li>Oliver, J. M., Zurier, R. B., Berlin, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Concanavalin+a+cap+formation+on+polymorphonuclear+leukocytes+of+normal+and+beige+%28chediak-higashi%29+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Concanavalin a cap formation on polymorphonuclear leukocytes of normal and beige (chediak-higashi) mice.</a> Nature. 253 (5491), 471-473 (1975).</li>
<li>Pink, J. R., Hoessli, D., Tartakoff, A., Hooghe, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterisation+of+Concanavalin+A-binding+glycoproteins+from+mouse+splenic+leukocytes+by+two-dimensional+electrophoresis%3A+preferential+binding+of+incompletely+glycosylated+forms+of+H-2+antigen+to+the+lectin%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Immunol%22%5BJournal%5D)">Characterisation of Concanavalin A-binding glycoproteins from mouse splenic leukocytes by two-dimensional electrophoresis: preferential binding of incompletely glycosylated forms of H-2 antigen to the lectin.</a> Mol Immunol. 20 (4), 491-497 (1983).</li>
<li>Janssen, B., Debets, J., Leenders, P., Smits, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+measurement+of+cardiac+output+in+conscious+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Regul+Integr+Comp+Physiol%22%5BJournal%5D)">Chronic measurement of cardiac output in conscious mice.</a> Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 282 (3), R928-R935 (2002).</li>
<li>Flecknell, P. A. Anaesthesia of common laboratory species: Special considerations. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aFlecknell%2C+PA+%22Laboratory+Animal+Anaesthesia%22">Laboratory Animal Anaesthesia</a>. Flecknell, P. A. , 3rd Edition, Academic Press. 181-241 (2009).</li>
<li>Seemann, S., Zohles, F., Lupp, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comprehensive+comparison+of+three+different+animal+models+for+systemic+inflammation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biomed+Sci%22%5BJournal%5D)">Comprehensive comparison of three different animal models for systemic inflammation.</a> J Biomed Sci. 24 (1), 60(2017).</li>
<li>Lessieur, E. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ICAM-1+on+the+luminal+surface+of+endothelial+cells+is+induced+to+a+greater+extent+in+mouse+retina+than+in+other+tissues+in+diabetes%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetologia%22%5BJournal%5D)">ICAM-1 on the luminal surface of endothelial cells is induced to a greater extent in mouse retina than in other tissues in diabetes.</a> Diabetologia. 65 (10), 1734-1744 (2022).</li>
<li>Kuwabara, T., Cogan, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Studies+of+retinal+vascular+patterns%3A+I.+Normal+architecture%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Studies of retinal vascular patterns: I. Normal architecture.</a> Arch Ophthalmol. 64, 904-911 (1960).</li>
<li>Tigner, A., Ibrahim, S. A., Murray, I. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Histology%2C+white+blood+cell%5BTitle%5D)+AND+%22StatPearls%22%5BJournal%5D)">Histology, white blood cell.</a> StatPearls. , StatPearls Publishing. Treasure Island, FL. (2024).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>10 mL şırınga</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>4 musluk Luer kilidi IV hat vanası</td><td>Baxter</td><td>2C6204</td><td></td></tr><tr><td>Concanavalin A çözeltisi</td><td>Vector&nbsp;</td><td>FL-1001</td><td>PBS'de hazırlayın 1 mg / mL</td></tr><tr><td>Diseksiyon aletleri seti</td><td></td><td></td><td>Hemostatlar, makaslar ve forseps içerir</td></tr><tr>Görüntü <td>işleme için</td><td>FIJI</td><td></td><td></td> Yazılımı</tr><tr><td>Floresan mikroskobu</td><td>Nikon</td><td>Eclipse Ni</td><td></td></tr><tr><td>Forseps, Dumont #5, Biyolojik sınıf ucu</td><td>Elektron Mikroskobu Bilimleri (EMS)</td><td>72700-D</td><td></td></tr><tr><td>Gavaj İğnesi 1,25 mm OD namlu ucu x 30 mm</td><td>Güzel Bilimler</td><td>18060-20</td><td></td></tr><tr><td>Halstead Sivrisinek Forseps</td><td>Fisher Scientific</td><td>13-812-10</td><td></td></tr><tr><td>I.V. Düzenleyici kelepçeli kateter seti 70 inç</td><td>Baxter</td><td>2C5417s</td><td></td></tr><tr><td>IV Kutup</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Tüy bırakmayan doku</td><td></td><td></td><td>Kimpwipes bir seçenektir</td></tr><tr><td>Mikro diseksiyon yaylı makas, Vannas, 3 mm düz</td><td>ROBOZ</td><td>RS-5620</td><td></td></tr><tr><td>Mikro spatula</td><td>Güzel Bilim Araçları (FST)</td><td>10091-12</td><td></td></tr><tr><td>Nikon</td><td></td><td>NIS-Elements (AR 5.30.03 64-bit)</td><td>Görüntü elde etme yazılımı</td></tr><tr><td>Petri kabı (100 mmx15 mm)</td><td>Corning</td><td>351029</td><td></td></tr><tr><td>Fosfat tamponlu salin (PBS)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Pembe diş mumu</td><td>Elektron Mikroskobu Bilimleri ( EMS)</td><td>72670</td><td></td></tr><tr><td>Basınçlı demlik</td><td>Infusurge</td><td>4010</td><td></td></tr><tr><td>Tıraş bıçakları, GEM tek kenarlı paslanmaz çelik, Teflon kaplı Elektron</td><td>Mikroskobu Bilimleri (EMS)</td><td>71970</td><td></td></tr><tr><td>Salin% 0.9, veteriner sınıfı, 1000 mL</td><td>Baxter</td><td>04925-04-10</td><td></td></tr><tr><td>Küçük diseksiyon makası, kavisli künt uç 22 mm</td><td>ROBOZ</td><td>RS 5983</td><td></td></tr></tbody></table>

retinal vaskülatürde diyabete bağlı yapışık lökositlerin miktar tayini

Quantification of Diabetes-induced Adherent Leukocytes in Retinal Vasculature

İyi uygulanmış bir perfüzyon ve boyama protokolü, konkanavalin A ile tanımlanan tüm retina vaskülatürünü gösterecektir (Şekil 1). Farenin zayıf perfüzyonu, tüm vasküler ağacın etiketlenmesini ve ardından lümene yapışan lökositlerin analizini önler (Şekil 2), oysa bir şırınganın hızlı bir şekilde sıkılmasından (30-35 saniyeden az) kaynaklanan aşırı basınç, vasküler geçirgenliğe ve kan damarlarının patlamasına neden olabilir (Şekil 3)...

Retinal Vaskülatürde Diyabete Bağlı Yapışık Lökositlerin Miktar Tayini

Leukostasis refers to the attachment of leukocytes to the luminal wall of the vasculature. This interaction of leukocytes with the wall of blood vessels ...

quantification-diabetes-induced-adherent-leukocytes-retinal

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Kaynak: Lani-Louzada, R.,  et al. Kemirgenlerde cerrahi olarak indüklenen glokom için limbal vasküler pleksusun tam daire koterizasyonu. J. Vis. Uzm. (2022). Bu video, limbal vasküler pleksusun tam daire koterizasyonuna tabi tutulan kimyasal olarak sabitlenmiş sıçan retinalarından retinal ganglion hücrelerinin nicelleştirilmesini göstermektedir. İşlem, geçirgenlik, antikor boyama ve nükleer karşı boyamayı içerir, ardından yüksek göz içi basıncının retinal ganglion hücresi canlılığı üzerindeki...

Koterizasyona Bağlı Oküler Hipertansiyon Sonrası Retinal Ganglion Hücreli Somaların Miktar Tayini 

İntravital mikroskopi, hayvanlarda retina vasküler çaplarını, kan dolaşım hızlarını ve toplam retinal kan akışını görselleştirmek ve ölçmek için kullanılabilir.

Farelerde Retinal Kan Akışının İntravital Video Mikroskobu Ölçümleri

Bir endotel hücre tek tabakası içindeki gerçek yapışkan hücre sayısının kantitasyonuna izin veren bir in vitro yöntem sunuyoruz.

Endotel Hücre yapışma miktarının belirlenmesi<em&gt; In Vitro</em

Retina önemli benzerlikler beyinle paylaşır ve böylece damarlara ve beyinde nöronal yapısında olmayan invaziv çalışmaya benzersiz bir pencereyi temsil eder. Bu iletişim kuralı demans retina görüntüleme teknikleri kullanarak çalışma yöntemi açıklanır. Bu yöntem potansiyel olarak demans tanı ve risk değerlendirmesine yardımcı olabilir.

Demans çalışması için retina Imaging'i kullanma

Burada, Yetişkin tg(fli:EGFP) Zebra balığı retina damarlara kolay bir analizini neoangiogenesis ve yapısal değişiklikler bağlantılı uzun vadeli vasküler patolojiler ayarlarında bir hızlı okuma olarak sağlayacak bir yöntem protokol tartışmak.

Diyabet ile gözleri bir balık eğitim: mikrodiseksiyon, görselleştirme ve yetişkin tg(fli:EGFP) Zebra balığı retina damarlara analizi

Biz üç farklı doku hazırlama teknikleri immunohistokimyasal görselleştirme sıçan retina mikrovasküler perisitlerden, Yani, soğutucu bölümü, Bütün bağlar ve damar ağının hipotonik yalıtım için göstermek.

Retina Cryo-kesitler, Bütün bağlar ve mikrovasküler perisitlerden immunohistokimyasal görselleştirme hipotonik izole damarlara hazırlıkları

Bu çalışma, eksplant kullanımı sırasında retina bütünlüğünü tehlikeye atmayı önleyen yeni bir insan organotipik retina kültürü (HORC) modeli geliştirmeyi amaçlamaktadır. Bu, retinanın aşırı vitreus ve alttaki retina pigment epitel-koroid (RPE-choroid) ve sklera ile kültleşmesi ile elde edilir.

Yeni bir İnsan Organotipik Retina Kültürü Tekniğinin Karakterizasyonu

Diyabetik retinopati körlüğün önde gelen nedenlerinden biridir. Histoloji, kan-retinal bariyer parçalanma testi ve floresan anjiyografi, retinanın patofizyolojisini anlamak için değerli tekniklerdir ve bu da diyabetik retinopatiye karşı etkili ilaç taramasını daha da artırabilir.

Sıçan Modelinde Retinal Patofizyolojik Değerlendirme

Bu makalede, tüm mount retinal preparatları için iyi kurulmuş ve tekrarlanabilir bir lektin lekesi testi ve proliferatif ve proliferatif olmayan retinopatilerde sıklıkla değiştirilen vasküler parametrelerin nicel ölçümü için gerekli protokoller açıklanmaktadır.

Proliferatif Olmayan ve Proliferatif Retinopatilerle Farelerin Tüm Mount Retinalarında Vasküler Parametrelerin Nicelemesi

Erkek SD sıçanlarda streptozotosin ile indüklenen diyabetik yara modeli şu anda tip I diabetes mellitusta yara iyileşmesini incelemek için en yaygın kullanılan modeldir. Bu protokol, bu modeli oluşturmak için kullanılan yöntemleri açıklar. Ayrıca potansiyel zorlukları sunar ve ele alır ve diyabetik yaraların ilerlemesini ve anjiyojenik özelliklerini inceler.

Tip 1 Diyabetin Sıçan Yara Modelini Oluşturmak İçin Bir Protokol

Retina damar sisteminin oksidatif stres ve sitokinler gibi diyabet/diyabetik retinopati ile ilişkili hakaretlerden ölüme karşı direncini izlemek için bir koruma testi geliştirilmiştir.

Farelerde Retina Damar Sisteminin Diyabete Bağlı Ölümden Korunmasını Saptamak İçin Bir Test

Öğrenin, diyabetik retinopatide retinal damarlarda lökosit birikimini görselleştirmek ve miktarını belirlemek için fare modelinde kullanılan bu yöntemi. Tedavi etkinliğini değerlendirmede kritik bir araçtır.

Retinal Vaskülatürde Diyabete Bağlı Yapışık Lökositlerin Miktar Tayini

Daha fazla video keşfet