Geri Dönüşümlü Tek Taraflı Üreter Tıkanıklığının Olgunlaşmamış Bir Murin Modeli

Bu çalışma, olgunlaşmamış sıçanlarda böbrek hasarının iyileşmesini araştırmak ve güvenilirliğini ve tıkanıklık sonrası böbrek onarımını incelemedeki uygulamasını değerlendirmek için geri dönüşümlü bir UU modeli oluşturmaktadır. Bu yaklaşımda önemli bir husus, ameliyat sırasında üreter hasarını en aza indirmektir, çünkü üreter yaralanması iltihaplanmaya neden olabilir ve potansiyel olarak yapışma, kapanma ve rekanalizasyon başarısızlığına yol açabilir. Özellikle olgunlaşmamış RUU böbreği bağlamında, tıkanıklık taburcu edildikten sonra böbrek fonksiyonunun ve böbrek hasarının dinamik iyileşmesine odaklanacağız.

[Ekran Okuyucusu] Başlamak için, bir silikon tüpü yaklaşık bir santimetrelik segmentlere kesmek için sterilize edilmiş makas kullanın. Daha sonra kullanmak için tüp duvarının bir tarafı boyunca uzunlamasına bir kesi yapın. Daha sonra, ayak parmağını sıkıştırdıktan sonra pedal çekme refleksi gibi refleks tepkilerinin yokluğunu kontrol ederek sıçanın yeterli anestezisini onaylayın. Kornea kurumasını önlemek için gözlere veteriner oftalmik merhem sürün. Sıçanın karnını ksifoid süreçten kasık simfizine kadar epilasyon yapın ve iki taraflı olarak orta hatta uzanın. Daha sonra fareyi ısıtılmış bir cerrahi ped üzerine sırtüstü pozisyonda yerleştirin ve uzuvlarını lastik iplerle sabitleyin. Ardından, steril bir alanı korumak için steril bir fenestre tabaka örtün. Şimdi böbrekleri ve üst üreterleri ortaya çıkarmak için karın boyunca, alt ksifoid bölgesinden göbek deliğinin hemen altına uzanan orta hat cilt kesisi yapın. Bir çift cerrahi makasla cilt altı dokuları ve fasyayı orta hat boyunca kesin. Cildi ve alttaki dokuları titizlikle katman katman inceleyin. Doku forsepsleri kullanarak retroperitoneal boşluğu tamamen açığa çıkarın. Geri dönüşümlü tek taraflı üreter tıkanıklığı için, önce steril bir çubuk kullanarak bağırsağı karın boşluğunun sağ tarafına geri çekin. Kurumayı önlemek için üreteri tuzlu suya batırılmış gazlı bezle örtün. Mikroskobik forseps ile sol üreteri diseke edin ve mobilize edin, çevre dokulardan yaklaşık 1.5 santimetre serbest bırakın. Daha sonra serbest kalan üreterin altına bir santimetre uzunluğunda silikon tüp yerleştirin. Tüpün içinde tam bir kılıf sağlamak için forseps kullanın. Silikon tüpü ve üreterin orta kısmını bağlamak için 3-0 ipek iplik kullanın ve üreter tıkanıklığını indükleyin. Güvenli ancak kaymayan ligasyon sağlamak için silikon tüpü üreterin uzunlamasına ekseni boyunca kademeli olarak çekin. Bağırsağı periton boşluğu içinde dikkatlice yeniden konumlandırın, gerginlik veya tıkanıklık olmadan uygun hizalamayı sağlayın. Karın kası ve fasyal tabakaları 3-0 emilmeyen sütür kullanarak kavisli bir kesme iğnesi ile sürekli olarak dikin. Ardından, cildi çalışan 4-0 emilemeyen bir sütürle kapatın, anatomik hizalama ve eşit gerginlik sağlayın. Rölyef ameliyatı için önce silikon tüpün düğümünü bir neşter bıçağı kullanarak dikkatlice inceleyin. Silikon tüpü ve ipek dikişleri çıkarın ve yapışma ve enfeksiyon riskini en aza indirmek için karın boşluğunu normal tuzlu su ile yıkayın. Bağırsağı yeniden konumlandırın ve karın duvarı kesisini 4-0 emilemeyen dikişler kullanarak katmanlar halinde dikin. Daha sonra, fareyi yedi gün boyunca kurtarma odasına aktarmadan önce cildi dikin. Ameliyat sonrası 14. günde, böbrek örneklerini toplamak için böbrekleri ikiye bölün. Histopatolojik inceleme için bir yarısını %4 paraformaldehit içinde saklayın ve sonraki moleküler analiz için eksi 80 santigrat derecede saklamak için diğer yarısını sıvı nitrojen içinde hızla dondurun. Cerrahi takip için ekran değerlendirmesini gerçekleştirin. Tek taraflı üreter tıkanıklığını takiben böbreklerin morfolojisi önemli ölçüde değişti ve UUO böbreği doğal böbreğe kıyasla genişlemiş ve şişmiş görünüyordu. Tıkanıklığın serbest bırakılmasından sonra, böbrek boyutu küçüldü ancak doğal böbrekten daha büyük kaldı. Üreter tıkanıklığı, tıkalı üreterden geçemeyen metilen mavisi enjeksiyonu kullanılarak doğrulandı. Tıkanıklık serbest bırakıldıktan sonra, ligasyon bölgesindeki üreter kırmızı bir renk sergiledi ve peristaltizm gösterdi. Histolojik analiz, doğal böbrekte sağlam böbrek yapıları gösterirken, UUO böbreği lümenlerde tübüler atrofi, vakuolasyon ve hücre kalıntısı sergiledi. RUUO böbreği, UUO böbreğinden daha az hasarlı tübül ile kısmi iyileşme gösterdi. Masson'un trikrom boyaması, UUO böbreğinde mavi lekeli kollajen liflerinin artmasıyla gösterilen ciddi interstisyel fibrozu ortaya çıkardı. R-UUO böbreği, UUO böbreğine kıyasla azalmış fibroz gösterdi. Böbrek hasarı skoru UUO grubunda doğal gruba göre anlamlı olarak artmıştır. RUUO grubu, UUO grubundan daha düşük bir böbrek hasarı skoruna sahipti, ancak doğal böbrekten anlamlı olarak daha yüksek kaldı. UUO grubu, diğer tüm gruplara kıyasla en büyük böbrek ağırlığını ve hacmini sergiledi. RUUO grubu böbrek ağırlığında ve hacminde bir azalma gösterdi, ancak kontrol seviyelerine tam olarak geri dönmedi.