Name: Kök pamukçuk patojenlerinin neden olduğu kavak maceracı kökleri: Kök biyolojisi ve ışık tepkisi ile ilgili süreçleri incelemek için deneysel bir sistem (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-10-11T14:45:00.000+00:00
Duration: 8 min 4 s
Description: Keşfedin, mantar patojen inokülasyonuyla kavakta maceracı kök indüksiyonunu. Bu yöntem, kök biyolojisi ve ışık tepkisi süreçlerini incelemek için güvenilir bir deneysel sistem sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<meta charset="utf8"></head><body>Mantar Patojenlerinin Kavak Sapı Aftı ve Vasküler Taşınım Üzerine Etkisinin İncelenmesi

<ol><li>Xing, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fungal+pathogens+of+canker+disease+trigger+canopy+dieback+in+poplar+saplings+by+inducing+functional+failure+of+the+phloem+and+cambium+and+carbon+starvation+in+the+xylem%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Mol+Plant+Pathol%22%5BJournal%5D)">Fungal pathogens of canker disease trigger canopy dieback in poplar saplings by inducing functional failure of the phloem and cambium and carbon starvation in the xylem.</a> Physiol Mol Plant Pathol. 101523, 112(2020).</li>
<li>Xing, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stem+canker+pathogen+Botryosphaeria+dothidea+inhibits+poplar+leaf+photosynthesis+in+the+early+stage+of+inoculation%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Plant+Sci%22%5BJournal%5D)">Stem canker pathogen Botryosphaeria dothidea inhibits poplar leaf photosynthesis in the early stage of inoculation.</a> Front Plant Sci. 13, 1008834(2022).</li>
<li>Li, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fungal+canker+pathogens+trigger+carbon+starvation+by+inhibiting+carbon+metabolism+in+poplar+stems%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Fungal canker pathogens trigger carbon starvation by inhibiting carbon metabolism in poplar stems.</a> Sci Rep. 9, 10111(2019).</li>
<li>Li, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+Valsa+sordida+infection+on+photosynthetic+characteristics+and+carbon-water+metabolism+in+Populus+alba+var%5BTitle%5D)+AND+%22Pyramidalis.+For+Res%22%5BJournal%5D)">Effects of Valsa sordida infection on photosynthetic characteristics and carbon-water metabolism in Populus alba var.</a> Pyramidalis. For Res. 34 (05), 58-68 (2021).</li>
<li>Xing, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparisons+of+photosythetic+response+and+characteristics+in+leaves+of+Populus+alba+var.+pyramidalis+infected+by+the+stem+canker+pathogen+Valsa+sordida+and+Botryosphaeria+dothidea+at+Early+Stage%5BTitle%5D)+AND+%22Scientia+Silvae+Sinicae%22%5BJournal%5D)">Comparisons of photosythetic response and characteristics in leaves of Populus alba var. pyramidalis infected by the stem canker pathogen Valsa sordida and Botryosphaeria dothidea at Early Stage.</a> Scientia Silvae Sinicae. 57 (09), 121-129 (2021).</li>
<li>Li, M. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Physiological+and+molecular+mechanisms+of+adventitious+root+formation+in+poplar+induced+by+stem+canker+pathogens+%5BMaster%27s+%5D%22">Physiological and molecular mechanisms of adventitious root formation in poplar induced by stem canker pathogens [Master's Thesis]</a>. , Chinese Academy of Forestry. (2023).</li>
<li>Ahkami, A. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Systems+biology+of+root+development+in+Populus%3A+Review+and+perspectives%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Sci%22%5BJournal%5D)">Systems biology of root development in Populus: Review and perspectives.</a> Plant Sci. 335, 111818(2023).</li>
<li>Dickmann, D. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Silviculture+and+biology+of+short-rotation+woody+crops+in+temperate+regions%3A+then+and+now%5BTitle%5D)+AND+%22Biomass+Bioenergy%22%5BJournal%5D)">Silviculture and biology of short-rotation woody crops in temperate regions: then and now.</a> Biomass Bioenergy. 30, 696-705 (2006).</li>
<li>De Almeida, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Environmental+control+of+adventitious+rooting+in+Eucalyptus+and+Populus+cuttings%5BTitle%5D)+AND+%22Trees%22%5BJournal%5D)">Environmental control of adventitious rooting in Eucalyptus and Populus cuttings.</a> Trees. 31, 1377-1390 (2017).</li>
<li>Zavattieri, M. A., Ragonezi, C., Klimaszewska, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adventitious+rooting+of+conifers%3A+influence+of+biological+factors%5BTitle%5D)+AND+%22Trees%22%5BJournal%5D)">Adventitious rooting of conifers: influence of biological factors.</a> Trees. 30, 1021-1032 (2016).</li>
<li>Bhattacharyya, P. N., Jha, D. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Plant+growth-promoting+rhizobacteria+%28PGPR%29%3A+emergence+in+agriculture%5BTitle%5D)+AND+%22World+J+Microbiol+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Plant growth-promoting rhizobacteria (PGPR): emergence in agriculture.</a> World J Microbiol Biotechnol. 28, 1327-1350 (2012).</li>
<li>Khan, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Growth+enhancement+and+drought+tolerance+of+hybrid+poplar+upon+inoculation+with+endophyte+consortia%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Plant+Biol%22%5BJournal%5D)">Growth enhancement and drought tolerance of hybrid poplar upon inoculation with endophyte consortia.</a> Curr Plant Biol. 6, 38-47 (2016).</li>
<li>Paz, I. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Eucalyptus+growth+promotion+by+endophytic+Bacillus+spp%5BTitle%5D)+AND+%22Genet+Mol+Res%22%5BJournal%5D)">Eucalyptus growth promotion by endophytic Bacillus spp.</a> Genet Mol Res. 11, 3711-3720 (2012).</li>
<li>Olah, B., Briere, C., Becard, G., Denarie, J., Gough, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nod+factors+and+a+diffusible+factor+from+arbuscular+mycorrhizal+fungi+stimulate+lateral+root+formation+in+Medicago+truncatula+via+the+DMI1%2FDMI2+signalling+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+J%22%5BJournal%5D)">Nod factors and a diffusible factor from arbuscular mycorrhizal fungi stimulate lateral root formation in Medicago truncatula via the DMI1/DMI2 signalling pathway.</a> Plant J. 44, 195-207 (2005).</li>
<li>Maillet, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fungal+lipochitooligosaccharide+symbiotic+signals+in+arbuscular+mycorrhiza%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Fungal lipochitooligosaccharide symbiotic signals in arbuscular mycorrhiza.</a> Nature. 469, 58-63 (2011).</li>
<li>Felten, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+ectomycorrhizal+fungus+Laccaria+bicolor+stimulates+lateral+root+formation+in+poplar+and+Arabidopsis+through+auxin+transport+and+signaling%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Physiol%22%5BJournal%5D)">The ectomycorrhizal fungus Laccaria bicolor stimulates lateral root formation in poplar and Arabidopsis through auxin transport and signaling.</a> Plant Physiol. 151, 1991-2005 (1991).</li>
<li>Splivallo, R., Fischer, U., Gobel, C., Feussner, I., Karlovsky, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Truffles+regulate+plant+root+morphogenesis+via+the+production+of+auxin+and+ethylene%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Physiol%22%5BJournal%5D)">Truffles regulate plant root morphogenesis via the production of auxin and ethylene.</a> Plant Physiol. 150, 2018-2029 (2009).</li>
<li>Druege, U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+and+physiological+control+of+adventitious+rooting+in+cuttings%3A+phytohormone+action+meets+resource+allocation%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Bot%22%5BJournal%5D)">Molecular and physiological control of adventitious rooting in cuttings: phytohormone action meets resource allocation.</a> Ann Bot. 123, 929-949 (2019).</li>
<li>Steffens, B., Rasmussen, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+physiology+of+adventitious+roots%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Physiol%22%5BJournal%5D)">The physiology of adventitious roots.</a> Plant Physiol. 170, 603-617 (2016).</li>
<li>Bannoud, F., Bellini, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adventitious+rooting+in+Populus+species%3A+update+and+perspectives%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Plant+Sci%22%5BJournal%5D)">Adventitious rooting in Populus species: update and perspectives.</a> Front Plant Sci. 12, 668837(2021).</li>
<li>Li, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Signal+communication+during+microbial+modulation+of+root+system+architecture%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Bot%22%5BJournal%5D)">Signal communication during microbial modulation of root system architecture.</a> J Exp Bot. 75 (2), 526-537 (2024).</li>
<li>Pascale, A., Proietti, S., Pantelides, I. S., Stringlis, I. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modulation+of+the+root+microbiome+by+plant+molecules%3A+the+basis+for+targeted+disease+suppression+and+plant+growth+promotion%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Plant+Sci%22%5BJournal%5D)">Modulation of the root microbiome by plant molecules: the basis for targeted disease suppression and plant growth promotion.</a> Front Plant Sci. 10, 1741(2020).</li>
<li>Zoratti, L., Karppinen, K., Luengo Escobar, A., Häggman, H., Jaakola, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Light-controlled+flavonoid+biosynthesis+in+fruits%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Plant+Sci%22%5BJournal%5D)">Light-controlled flavonoid biosynthesis in fruits.</a> Front Plant Sci. 5, 534(2014).</li>
<li>Bellini, C., Pacurar, D. I., Perrone, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adventitious+roots+and+lateral+roots%3A+similarities+and+differences%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Plant+Biol%22%5BJournal%5D)">Adventitious roots and lateral roots: similarities and differences.</a> Annu Rev Plant Biol. 65, 639-666 (2014).</li>
<li>Sorin, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Auxin+and+light+control+of+adventitious+rooting+in+Arabidopsis+require+ARGONAUTE1%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Cell%22%5BJournal%5D)">Auxin and light control of adventitious rooting in Arabidopsis require ARGONAUTE1.</a> Plant Cell. 17 (5), 1343-1359 (2005).</li>
<li>Jung, J. K., McCouch, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Getting+to+the+roots+of+it%3A+Genetic+and+hormonal+control+of+root+architecture%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Plant+Sci%22%5BJournal%5D)">Getting to the roots of it: Genetic and hormonal control of root architecture.</a> Front Plant Sci. 4, 186(2013).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Agar</td><td>Güneş Enerjisi</td><td>A8190&nbsp; &nbsp;</td><td>Mantar büyümesi için besin sağlayın</td></tr><tr><td>Alüminyum folyo</td><td>Biyokeskin</td><td>BS-QT-027B</td><td>Enfekte bölge için gölgeleme sağlamak için</td></tr><tr><td>Kuşak bıçağı</td><td>MoGong Donanım aracı firmaları</td><td></td><td>Kavak saplarının/dallarının epidermisini kuşatın</td></tr><tr><td>Aşılama bandı</td><td>CAPI</td><td>5 cm</td><td>Bitkilerdeki mantarları düzeltmek için</td></tr><tr><td>PD (Patates ekstraksiyonu, Dekstroz)&nbsp;</td><td>Güneş Enerjisi</td><td>P7360 Serisi</td><td>Mantar büyümesi için besin sağlayın</td></tr><tr><td>PE plastik film</td><td>MiaoJie</td><td>413703</td><td>Bitkilerdeki mantarları düzeltmek için</td></tr><tr><td>Petri kapları</td><td>Bkman biyolojik Co.,Ltd&nbsp;</td><td>90 mm</td><td>PDA ortamını hazırlayın</td></tr><tr><td>Termostatik inkübatör</td><td>Shanghai Kuntian Laboratuvar Enstrümanı Co, Ltd</td><td>KTD-6000 Serisi</td><td>Mantar büyümesi için bir ortam sağlayın</td></tr></tbody></table>

kök pamukçuk patojenlerinin neden olduğu kavak maceracı kökleri: kök biyolojisi ve ışık tepkisi ile ilgili süreçleri incelemek için deneysel bir sistem

Poplar Adventitious Roots Induced by Stem Canker Pathogens: An Experimental System for Studying Roots Biology and Light Response-Related Processes

Kuşak aşılaması yoluyla adventif kökleri indükleyen kök pamukçuk patojenlerinin iş akışı Şekil 1'de gösterilmektedir. Burada yapılan deneyler, hem kök pamukçuk patojenlerinin, V. sordida, B. dothidea'nın hem de izolatlarının (farklı konakçılardan, bölgelerden veya patojeniteden) kavak türlerinde AR oluşumunu indükleyebileceğini göstermiştir. Bu protokolde, P. alba var. pyramidalis'te AR'ler üretmek için V. sordida izolatı CZC, CFCC86775 ve B. dothidea izolatları SD50 ve SD81'i kullandık. V sodida CZC, kullanılan tipik bir patojendir ve Çin Genel Mikrobiyolojik Kültür Toplama Merkezi'nde (CGMCC 40575) saklanmıştır; V. sordida izolatı CFCC86775, Çin Ormancılık Kültürü Toplama Merkezi'nden satın alınırken, Shandong Eyaletindeki pamukçuk hastalığı kavak ağaçlarından iki SD izolatı toplandı ve laboratuvarımıza bırakıldı. Şekil 2'de görüldüğü gibi kuşaklama bölgesinde kallus oluşmuştur (Şekil 2A, panel 1), yaldız ve kambiyum çıkarma işleminde az sayıda AR oluşmuştur (Şekil 2A, panel 2), floem kuşaklama aşılama işleminden sonra ise kırmızı, bol miktarda fibröz kök üretilmiştir (Şekil 2A, panel 3-6). Ayrıca, AR'lerin farklı kavak türlerinde veya klonlarda indüklendiğini gözlemledik, örneğin P. alba var. pyramidalis, Populus × beijingensis, P. alba × P. tremula var. glandulosa klonu 84K, P. euramericana cv. 'Bofeng 3' veya diğer melez kavaklar). Ancak bu protokolde AR'ler sadece 1 yaşındaki P. alba var. pyramidalis'in saplarında üretilmektedir. Son olarak, Şekil 2 panel 7'de gösterildiği gibi, AR yapıları, patojen V. sordida tarafından floem kuşaklama aşılamasından sonra 6 yaşındaki P. alba var. pyramidalis'in gövdelerinde de indüklenmiştir. Kavak gövdesinin çapları 6-7 cm civarındadır ve en uzun lifli köklerin uzunluğu 7.0 cm'den daha uzundur.
Şekil 2'de gösterildiği gibi, kırmızı segmentler, alüminyum folyo ile sarılmış kavaklar üzerinde üretilen beyaz sütlü veya açık kırmızı AR'lerden (Şekil 2B, panel 1) 3 gün sonra kırmızı AR'lere (Şekil 2B, panel 4) güneş ışığı koşuluna maruz kaldıktan sonra gölgelendirme kavak AR'lerinde üretilmiştir. Ayrıca, kırmızı pigmentlerin ışığa maruz kaldıktan kısa bir süre sonra üretildiğini fark ettik ve gen ekspresyon analizi, pigmentlerin biyosentezinin (esas olarak siyanidin-3-O-glukozit) fenilpropan metabolik yolununbaşlangıcından itibaren yeni biyosentez değil, doğrudan antosiyanidin substratlarından dönüştürüldüğünü gösterdi 6.
Bu protokolde, her iki kuşaklama yöntemi de (floem ve epidermis kuşaklama), patojen inokülasyonundan sonra kavak gövdelerinde AR oluşumunu indükleyebilir. Epidermis-kuşak aşılı kavaklarda daha az rüzgar siperi meydana geldi ve fizyoloji (su ve karbonhidratın taşınması gibi) üzerinde daha az etki oldu; ancak floem kuşaklamada AR üretiminin biraz hızlı ve verimli olduğu görülüyor. Bu nedenle kavak AR'lerinin araştırılmasında floem kuşak aşılama yöntemi önerilmektedir.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67304/67304fig01.jpg"> 
Şekil 1: Kavaklarda kuşak aşılama yöntemleri ile kök pamukçuk patojeni tarafından indüklenen maceracı köklerin (AR) oluşumunun şematik iş akışı. İlk olarak, kök pamukçuk patojeni (28 ° C'de karanlıkta 7-10 gün boyunca kültürlendi) miselyum halkalarına (1.2 cm genişliğinde) kesildi. Bir yaşındaki kavak fidanları veya bir yaşındaki dallar, gövdelere (zeminden veya dalların tabanından ~ 30 cm yükseklikte, mavi oklarla gösterilen) iki yöntemle kuşaklanmıştır: floem kuşaklama (saplarda epidermis, floem ve kısmi kambiyum dokuları içeren kuşaklı halkaların kuşaklanması ve atılması) veya epidermis kuşaklama (sadece sapların epidermisini içeren kuşaklı halkaların kuşaklanması ve atılması). Kuşaklı floem veya floem halkaların genişliği 1.0 cm'dir. Daha sonra kuşaklı bölgeler tamamen miselyum bantlarla kapatıldı ve hemen PE plastik bantla sarıldı; Kayışın miselyum kenarları kuşaklı bölgeye bakıyordu. Rizogenez ve kök gelişimi gibi kök biyolojisi araştırmaları için, aşılanan kavak fidanları/dalları düzenli yönetim altında 14-30 gün boyunca yetiştirilmiştir (Yol I, sarı oklarla vurgulanmıştır). Segmentlerin biyosentezi, fotomorfogenez veya ışıkla ilgili genlerin ekspresyon regülasyonu araştırması için, ek alüminyum folyo sargısı benimsendi, daha sonra aşılanan fidanlar/dallar, AR'leri üretmek için ~ 20 gün yetiştirildi. AR'ler üretildiğinde, alüminyum folyo gövdelerden/dallardan çıkarıldı ve kavak AR'leri güneş ışığı veya diğer ışık koşulları altında (ışık spektrumu, yoğunluk, periyot veya bunların kombinasyonlarına göre değişen) maruz bırakıldı (Yol II, kırmızı oklarla vurgulanmıştır). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67304/67304fig01large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67304/67304fig02.jpg"> 
Şekil 2: Kök pamukçuk patojenleri, kavaktaki AR'lerin ışık koşullarında maceracı köklerin (AR'ler) oluşumuna ve segment biyosentezine neden olmuştur. (A) Farklı gövde pamukçuk patojenleri kavak gövdelerinde AR oluşumuna neden olur. A1: kuşak kontrolü; A2: kuşaklama ve kambiyum çıkarma (GR); A3-6: Farklı gövde pamukçuk patojenleri (V. sordida ve B. dothidea) 1 yaşındaki P. alba var. pyramidalis fidanlarında; A7: 6 yaşındaki P. alba var. pyramidalis'in dalında üretilen AR'ler. (B) Işığa maruz kalma, kavak AR'lerindeki segmentlerin biyosentezini indükler. B1-B4, maruziyetten 0, 1, 2 ve 3 gün sonra ışık koşullarında maruz kalan kavak AR'lerini temsil eder. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67304/67304fig02large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>

Kök pamukçuk patojenlerinin neden olduğu kavak maceracı kökleri: Kök biyolojisi ve ışık tepkisi ile ilgili süreçleri incelemek için deneysel bir sistem

Valsa sordida and Botryosphaeria dothidea are two crucial necrotrophic fungal pathogens that damage many plant hosts, particularly species in the genus ...

Bu araştırma protokolünün kapsamı, kavak ağaçlarının dallarının gövdelerinde mantar patojenlerinin kuşatılması ve aşılanması yoluyla maceracı kökler üretmek için bir yöntem tanımlamaktır. Bu yöntemi, kök biyolojisi ve kavak-patojen etkileşimlerinde ışık tepkisi süreçlerinin incelenmesi için ideal bir deneysel sistem olarak öneriyoruz.Bitki büyümesini teşvik eden rizobakteriler, ekto-endofitik bakteriler veya vasküler mikorizal mantarlar veya ektomikorizal mantarlar gibi kökler üzerindeki faydalı mikroorganizmaların büyüme teşviki birçok bitki türünde bildirilmiş olmasına rağmen, patojenler tarafından tesadüfi büyümenin indüklenmesi belgelenmemiştir. Bu protokol, kavakta normal bir kök gelişimi fenomeni sunar.Kavak köklerinin gelişimi ve davranışı, çeşitli ortamlarda ve faydalı mikroorganizmalarla etkileşim halinde incelenmiştir. Bununla birlikte, araştırmamız, bitki büyüme biyolojisinin yeni bir alanını, mantar sapı patojenleri tarafından kavakta maceracı köklerin indüklenmesini tanıtmaktadır. Bu bulgunun sadece büyüme biyolojisi çalışmalarını değil, aynı zamanda bitki-patojen etkileşimlerinin anlaşılmasını da ilerleteceğine inanıyoruz.Bu araştırma protokolü, kök patojenlerin kavaklarda maceracı köklere neden olduğunu göstermiştir. Patojenlerin ayrıca maceracı köklerdeki gen ekspresyon modellerini transkripsiyonel, transkripsiyon sonrası ve epigenetik modifikasyon seviyelerinde değiştirebileceğini kabul edebiliriz. Bu nedenle, bu protokolde önerilen yöntemler, kavak adventif kökleri üzerine yapılan araştırmalara zemin hazırlamıştır.Gelecekte, kavakta maceracı köklerin oluşumunu indükleyen pamukçuk patojenlerinin fizyolojik ve moleküler mekanizmalarına odaklanacağız. Ayrıca patojen aşılamasından sonra kavak adventif köklerinin direnç mekanizmasını ve epigenetik modifikasyonunu araştıracağız ve bu fenomenin ağaçlandırma uygulamasını bulmaya çalışacağız.[Anlatıcı] Patates dekstroz agarı veya PDA ortamını hazırlamak için altı gram patates özütü, 20 gram dekstroz ve 20 gram agarı bir litre suda eritin. Ortamı 121.1 santigrat derecede 30 dakika sterilize edin. Ortamı, her biri 20 mililitre PDA ortamı içeren Petri kaplarına dökün. Petri kabının ortasına Valsa sordida veya Botryosphaeria dothidea'nın aktive edilmiş mantar miselyum küpünü aşılayın. Çanağı karanlıkta 28 santigrat derecede yedi ila 10 gün inkübe edin. İnkübasyondan sonra, mantar miselyumu içeren PDA ortamını şeritler halinde kesin. Ardından, bir ila iki yaşında, kuvvetli büyüyen bir kavak fidanı seçin ve fidandan olgun bir sap seçin. Aşılama bölgesini %75 etanol ile sterilize edin. Sterilize edilmiş kavak sapının epidermisini ve floemini dikkatlice kuşatın. İç kambiyum veya ksilem dokularını ortaya çıkarmak için kısmi kambiyum da dahil olmak üzere kuşaklı floem halkalarını çıkarın. Floem kuşak aşılama tedavisi olarak kuşak bölgesini mantar miselyum kayışlarıyla tamamen örtün. Nemi korumak için aşılanmış gövdeyi dört kat gerilebilir, şeffaf aşılama bandıyla sarın. Sterilize edilmiş bir bıçak kullanarak, maruz kalan bölgenin iç kambiyum dokusunu kazıyın ve zarar verin. Ardından, kambiyum giderme işleminin bir parçası olarak PDA kayışını kuşak bölgesine aşılayın. Daha sonra, kuşatma bölgelerini kuşatma kontrolü olarak doğrudan kültürlenmemiş PDA orta kayışlarla aşılayın. Nemi korumak için aşılanmış gövdeyi dört kat gerilebilir, şeffaf aşılama bandıyla sarın. Aşılanmış gövdeyi rüzgar siperine karşı korumak için bir çubukla bağlayın. 14 ila 30 günlük aşılamadan sonra, kavak maceracı köklerinin oluşumunu gözlemleyin ve kaydedin. Yeşil floem dokusunu ortaya çıkarmak için kavak sapının epidermisini dikkatlice kuşatın. Ardından, floem dokusunu dikey olarak kazıyın ve floemin iç yapısını ortaya çıkarın. Kuşaklı epidermis bölgesini daha önce gösterildiği gibi mantar miselyumu ve PDA kayışı ile aşılayın. Aşılanmış sapları dört kat gerilebilir, şeffaf aşılama bandı ile sarın. 14 ila 30 günlük aşılamadan sonra, kavak maceracı köklerinin veya maceracı köklerin oluşumunu gözlemleyin ve kaydedin. Kök kanseri patojenleri V. sordida ve B. dothidea, Populus alba var. piramidalis floem kuşak aşılamasından sonra saplanır. 6 yaşındaki P. alba var. pyramidalis'in gövdelerinde de folikül V. sordida tarafından floem kuşatıldıktan sonra kök uzunlukları 7.0 santimetreyi aşan. Floem kuşatma veya epidermis kuşatma aşılama yöntemini kullanarak kavakta maceracı kökler indükledikten sonra, gölgeleme tedavisi için patojen aşılanmış bölgeyi alüminyum folyo ile sarın. Rüzgar siperine karşı korumak için sapı bir çubukla bağlayın. 20 gün sonra alüminyum folyoyu saplarından çıkarın. Alüminyum folyo gölgeli ve gölgesiz kavak maceracı köklerini gözlemleyin ve fotoğraflayın. Gölgeli kavak maceracı köklerini güneş ışığında veya yapay ışık kaynakları altında yetiştirin. Bir ila beş gün ışığa maruz kaldıktan sonra aşılama bantlarını çıkarın ve kavak maceracı köklerini toplayın. Maceracı kökleri alüminyum folyo ile sarın. Maceracı kök örneklerini sıvı nitrojene batırın ve eksi 80 santigrat derecede saklayın. Işığa maruz kalma, beyaz veya açık kırmızı maceracı kökleri kırmızı maceracı köklere dönüştürdü. piramidal üç gün içinde, siyanidin 3-O-glukozit oluşumuna bağlı pigment biyosentezi ile.

poplar-adventitious-roots-induced-stem-canker-pathogens-an

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Bu makale RootChip içinde Arabidopsis fide ekimi için bir protokol, mikroskobik kök izleme ve hücre içi metabolit düzeylerinin FRET tabanlı ölçümü ile büyüme koşullarını otomatik kontrol birleştiren bir mikroakışkan görüntüleme platform sağlar.

RootChip kullanarak Kök Çevre Rapid manipülasyonu ile Arabidopsis Kök Büyüme Time-lapse Floresans Görüntüleme

Lateral Kök İndüklenebilir Sistemi (LRIS), lateral köklerin senkron indüksiyonuna izin verir ve Arabidopsis thaliana ve mısır için sunulmuştur.

Lateral Kök İndüklenebilir Sistemi<em&gt; Arabidopsis</em&gt; Ve Mısır

Bu protokol, ışık tabakası mikroskobu için bir bitki örneği hazırlama yöntemini gösterir. Kurulum, bitkinin bir jelin yüzeyine dikey olarak monte edilmesi ve kontrollü parlak koşullarda büyümesine izin verilmesiyle karakterize edilir. Bu, standartlaştırılmış koşullarda bitki organ gelişiminin uzun süreli gözlemlenmesini sağlar.

Bir Gel Yüzeyinde Büyüyen Bitki kökleri Işık Sac Flüoresan Mikroskopi

Bu protokol, bitki köklerini toprak kaynaklı mikroplarla aşılamak için stratejilerin ayrıntılı bir özetini sunar. Verticillium longisporum ve Verticillium dahliae mantarları için örneklendirilen üç farklı kök enfeksiyon sistemi tanımlanmıştır. Potansiyel uygulamalar ve olası aşağı akış analizleri vurgulanır ve her sistem için avantajlar veya dezavantajlar tartışılır.

Bitki Köklerini Toprak Kaynaklı Mikroorganizmalarla Enfekte Etmek için Aşılama Stratejileri

Arabidopsis ve Medicago'nun kök sistem mimarisini (RSA) incelemek için basit laboratuvar araçları kullanıyoruz. Fideler ağ üzerinde hidroponik olarak yetiştirilir ve RSA'yı ortaya çıkarmak için bir sanat fırçası kullanılarak yayılır. Görüntüler tarama veya yüksek çözünürlüklü bir kamera kullanılarak alınır, daha sonra özellikleri haritalamak için ImageJ ile analiz edilir.

Bitki kök sistemi mimari özelliklerini haritalamak için basit bir protokol

Bir in vivo yaprak aşılama yöntemi kullanarak kavağın kök pamukçuk patojenlerine karşı direncini değerlendirmek için adım adım bir protokol sunuyoruz. Bu yöntem özellikle Çin'deki kavak damızlık döllerde Cytospora chrysosperma ve Botryosphaeria dothidea pamukçuk hastalığı direncinin büyük ölçekli değerlendirmesi için uygundur.

İn Vivo Yaprak Aşılaması: Kök Pamukçuk Hastalığının Kavak Yetiştiriciliğinde Hibrit Klonların Hastalık Direncini Değerlendirmek İçin Alternatif Bir Yöntem

Stemgent Dox Đndüklenebilir Fare TF lentivirüs Set bağlı pluripotent kök (IPS) hücreleri fare embriyonik fibroblastlar (MEFS) yeniden programlamak. Burada fare reprogramming transkripsiyon faktörleri Oct4 DOX indüklenebilir ifade için protokol göstermek, Sox2, Klf4 ve c-Myc ifade ortak MES pluripotency belirteçlerinin iPS koloniler oluşturmak için.

Dört Transkripsiyon Faktör Fare Embriyonik Fibroblastlar yeniden programlanması Bağlı Pluripotent Kök Hücre Üretimi, Doksisiklin lentiviral İletim Sistemi Đndüklenebilir

Hematopoetik kök hücrelerin işaretleme Kombinatoryel 5 floresan proteinleri rejenerasyon sırasında kemik iliği hematopoetik mimarisi içine anlayışlar, confocal ve iki foton mikroskopi ile in vivo klonal izleme sağlar. Bu yöntem nakli aşağıdaki kapsamlı bir süre için sağlam dokularda spektral kodlu HSPCs kökenli hücrelerin non-invaziv kader haritalama sağlar.

Eşodaklı ve multiphoton Mikroskopi kullanarak beş Floresan Proteinleri ile işaretlenmiş Hematopoetik kök hücrelerin in vivo klonal Takip

Hematopoietik kök ve projenitör hücreler (HSPCs) ve kemik iliği niş arasındaki etkileşimin doğası tam olarak anlaşılamamıştır. Özel donanım modifikasyonları ve çok adımlı bir satın alma protokolü ex vivo görüntünün kemik iliği alanları içinde bağlantılı etiketli HSPCs, izleme etkileşimleri ve hareket için iki-foton ve konfokal mikroskopi kullanımına izin verir.

Yetişkin Fare Kalvaryal Kemik İliği içinde Hematopoietik kök hücrelerin Vivo 4-Boyutlu Takip

Kristalin selüloz, bitki hücre duvarının önemli bir bileşenidir. Bununla birlikte, hücresel bir çözünürlükte nicelleştirilmesi teknik olarak zordur.  Burada, uzay-zamansal bir çözünürlükte hücre duvarı bileşimi hakkında bilgi elde etmek için polarize ışık teknolojisinin ve kök kesitlerinin kullanımını rapor ediyoruz.

Kristalin Selüloz Birikimin Yüksek Çözünürlüklü Niceleme<em&gt; Arabidopsis</em&gt; Kökler Doku spesifik Hücre Duvarı Değişiklikler Monitör

Keşfedin, mantar patojen inokülasyonuyla kavakta maceracı kök indüksiyonunu. Bu yöntem, kök biyolojisi ve ışık tepkisi süreçlerini incelemek için güvenilir bir deneysel sistem sunar.

Kök pamukçuk patojenlerinin neden olduğu kavak maceracı kökleri: Kök biyolojisi ve ışık tepkisi ile ilgili süreçleri incelemek için deneysel bir sistem (Video) | JoVE Journal

Kök pamukçuk patojenlerinin neden olduğu kavak maceracı kökleri: Kök biyolojisi ve ışık tepkisi ile ilgili süreçleri incelemek için deneysel bir sistem

Daha fazla video keşfet