Name: Kornea Sütürleri ile Kombine Kornea Epitel Küretajına Dayalı Sıçanlarda Şiddetli Kornea İnflamasyonu Modelinin Oluşturulması (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-11-22T14:20:00.000+00:00
Duration: 4 min 48 s
Description: Öğrenin, sıçanlarda kornea epitel küretajı ve dikişle şiddetli kornea inflamasyonu modeli oluşturmayı. Bu yöntem, limbal kök hücreleri hasar vermeden inflamasyon mekanizmalarını incelemek için kullanılır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Ang, L. P., Tan, D. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ocular+surface+stem+cells+and+disease%3A+Current+concepts+and+clinical+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Acad+Med+Singap%22%5BJournal%5D)">Ocular surface stem cells and disease: Current concepts and clinical applications.</a> Ann Acad Med Singap. 33 (5), 576-580 (2004).</li>
<li>Mao, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Downregulation+of+p38+MAPK+signaling+pathway+ameliorates+tissue-engineered+corneal+epithelium%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Eng+Part+A%22%5BJournal%5D)">Downregulation of p38 MAPK signaling pathway ameliorates tissue-engineered corneal epithelium.</a> Tissue Eng Part A. 28 (23-24), 977-989 (2022).</li>
<li>Sprogyte, L., Park, M., Di Girolamo, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathogenesis+of+alkali+injury-induced+limbal+stem+cell+deficiency%3A+A+literature+survey+of+animal+models%5BTitle%5D)+AND+%22Cells%22%5BJournal%5D)">Pathogenesis of alkali injury-induced limbal stem cell deficiency: A literature survey of animal models.</a> Cells. 12 (9), 1294(2023).</li>
<li>He, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lacrimal+gland+microenvironment+changes+after+obstruction+of+lacrimal+gland+ducts%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthalmol+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">Lacrimal gland microenvironment changes after obstruction of lacrimal gland ducts.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 63 (3), 15(2022).</li>
<li>Le, Q., Chauhan, T., Deng, S. X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diagnostic+criteria+for+limbal+stem+cell+deficiency+before+surgical+intervention-+A+systematic+literature+review+and+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Surv+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Diagnostic criteria for limbal stem cell deficiency before surgical intervention- A systematic literature review and analysis.</a> Surv Ophthalmol. 65 (1), 32-40 (2020).</li>
<li>Li, W., Hayashida, Y., Chen, Y. T., Tseng, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Niche+regulation+of+corneal+epithelial+stem+cells+at+the+limbus%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Res%22%5BJournal%5D)">Niche regulation of corneal epithelial stem cells at the limbus.</a> Cell Res. 17 (1), 26-36 (2007).</li>
<li>Ou, S. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+ectodysplasin+a+on+the+ocular+surface+homeostasis%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">The role of ectodysplasin a on the ocular surface homeostasis.</a> Int J Mol Sci. 23 (24), 12(2022).</li>
<li>Lin, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Limbal+stem+cell+dysfunction+induced+by+severe+dry+eye+via+activation+of+the+p38+MAPK+signaling+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Pathol%22%5BJournal%5D)">Limbal stem cell dysfunction induced by severe dry eye via activation of the p38 MAPK signaling pathway.</a> Am J Pathol. 193 (11), 1863-1878 (2023).</li>
<li>Jiang, G. J., Li, B. B., Fan, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Timolol+induces+necroptosis%2C+apoptosis+and+senescence+concentration-dependently+in+rabbit+limbal+stem+cells+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Life+Sci%22%5BJournal%5D)">Timolol induces necroptosis, apoptosis and senescence concentration-dependently in rabbit limbal stem cells in vitro.</a> Life Sci. 277, 119453(2021).</li>
<li>Castro-Munozledo, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Review%3A+Corneal+epithelial+stem+cells%2C+their+niche+and+wound+healing%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Vis%22%5BJournal%5D)">Review: Corneal epithelial stem cells, their niche and wound healing.</a> Mol Vis. 19, 1600-1613 (2013).</li>
<li>Atalay, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+for+limbal+stem+cell+deficiency%3A+A+critical+narrative+literature+review%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmol+Ther%22%5BJournal%5D)">Animal models for limbal stem cell deficiency: A critical narrative literature review.</a> Ophthalmol Ther. 13 (3), 671-696 (2024).</li>
<li>Delic, N. C., Cai, J. R., Watson, S. L., Downie, L. E., Di Girolamo, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluating+the+clinical+translational+relevance+of+animal+models+for+limbal+stem+cell+deficiency%3A+A+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22Ocul+Surf%22%5BJournal%5D)">Evaluating the clinical translational relevance of animal models for limbal stem cell deficiency: A systematic review.</a> Ocul Surf. 23, 169-183 (2022).</li>
<li>Lin, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+mouse+model+of+limbal+stem+cell+deficiency+induced+by+topical+medication+with+the+preservative+benzalkonium+chloride%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthalmol+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">A mouse model of limbal stem cell deficiency induced by topical medication with the preservative benzalkonium chloride.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 54 (9), 6314-6325 (2013).</li>
<li>Ye, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biomimetic+nanocomplex+based+corneal+neovascularization+theranostics%5BTitle%5D)+AND+%22J+Control+Release%22%5BJournal%5D)">Biomimetic nanocomplex based corneal neovascularization theranostics.</a> J Control Release. 374, 50-60 (2024).</li>
<li>Zhu, H. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+synergistic+therapy+with+antioxidant+and+anti-VEGF%3A+Toward+its+safe+and+effective+elimination+for+corneal+neovascularization%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Healthc+Mater%22%5BJournal%5D)">A synergistic therapy with antioxidant and anti-VEGF: Toward its safe and effective elimination for corneal neovascularization.</a> Adv Healthc Mater. 13 (5), 10(2024).</li>
<li>Yu, J. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+assembly+drug+delivery+strategy+based+on+ultra-small+nanoparticles%3A+Toward+high+drug+permeation+and+accumulation+for+CNV+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22Chem+Eng+J%22%5BJournal%5D)">In vivo assembly drug delivery strategy based on ultra-small nanoparticles: Toward high drug permeation and accumulation for CNV treatment.</a> Chem Eng J. 450, 137968(2022).</li>
<li>Wu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+SU6668+pure+nanoparticle-based+eyedrops%3A+Toward+its+high+drug+accumulation+and+long-time+treatment+for+corneal+neovascularization%5BTitle%5D)+AND+%22J+Nanobiotechnol%22%5BJournal%5D)">A SU6668 pure nanoparticle-based eyedrops: Toward its high drug accumulation and long-time treatment for corneal neovascularization.</a> J Nanobiotechnol. 22 (1), 290(2024).</li>
<li>Long, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+tissue-engineered+corneal+epithelium+based+on+ultra-thin+amniotic+membrane+and+mesenchymal+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">A novel tissue-engineered corneal epithelium based on ultra-thin amniotic membrane and mesenchymal stem cells.</a> Sci Rep. 14 (1), 17407(2024).</li>
<li>Giroux, V., Rustgi, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metaplasia%3A+Tissue+injury+adaptation+and+a+precursor+to+the+dysplasia-cancer+sequence%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Cancer%22%5BJournal%5D)">Metaplasia: Tissue injury adaptation and a precursor to the dysplasia-cancer sequence.</a> Nat Rev Cancer. 17 (10), 594-604 (2017).</li>
<li>Herfs, M., Hubert, P., Delvenne, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epithelial+metaplasia%3A+Adult+stem+cell+reprogramming+and+%28pre%29neoplastic+transformation+mediated+by+inflammation%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Mol+Med%22%5BJournal%5D)">Epithelial metaplasia: Adult stem cell reprogramming and (pre)neoplastic transformation mediated by inflammation.</a> Trends Mol Med. 15 (6), 245-253 (2009).</li>
<li>Slack, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metaplasia+and+transdifferentiation%3A+From+pure+biology+to+the+clinic%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Mol+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Metaplasia and transdifferentiation: From pure biology to the clinic.</a> Nat Rev Mol Cell Biol. 8 (5), 369-378 (2007).</li>
<li>Slack, J. M., Tosh, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transdifferentiation+and+metaplasia--switching+cell+types%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Genet+Dev%22%5BJournal%5D)">Transdifferentiation and metaplasia--switching cell types.</a> Curr Opin Genet Dev. 11 (5), 581-586 (2001).</li>
<li>Wang, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+of+chronic+smoking+on+meibomian+gland+dysfunction%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Impact of chronic smoking on meibomian gland dysfunction.</a> PLoS One. 11 (12), e0168763(2016).</li>
<li>Wu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evolution+of+therapeutic+strategy+based+on+oxidant-antioxidant+balance+for+fuchs+endothelial+corneal+dystrophy%5BTitle%5D)+AND+%22Ocul+Surf%22%5BJournal%5D)">Evolution of therapeutic strategy based on oxidant-antioxidant balance for fuchs endothelial corneal dystrophy.</a> Ocul Surf. 34, 247-261 (2024).</li>
<li>Li, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Meibomian+gland+alteration+in+patients+with+systemic+lupus+erythematosus%5BTitle%5D)+AND+%22Lupus%22%5BJournal%5D)">Meibomian gland alteration in patients with systemic lupus erythematosus.</a> Lupus. 31 (4), 407-414 (2022).</li>
<li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Histopathology-based+diagnosis+of+Mooren%27s+ulcer+concealed+beneath+the+pterygium+on+eye%5BTitle%5D)+AND+%22J+Histotechnol%22%5BJournal%5D)">Histopathology-based diagnosis of Mooren's ulcer concealed beneath the pterygium on eye.</a> J Histotechnol. 45 (4), 195-201 (2022).</li>
<li>Tseng, S. C., Hatchell, D., Tierney, N., Huang, A. J., Sun, T. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expression+of+specific+keratin+markers+by+rabbit+corneal%2C+conjunctival%2C+and+esophageal+epithelia+during+vitamin+A+deficiency%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Expression of specific keratin markers by rabbit corneal, conjunctival, and esophageal epithelia during vitamin A deficiency.</a> J Cell Biol. 99 (6), 2279-2286 (1984).</li>
<li>Espana, E. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+corneal+pannus+removed+from+patients+with+total+limbal+stem+cell+deficiency%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthalmol+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">Characterization of corneal pannus removed from patients with total limbal stem cell deficiency.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 45 (9), 2961-2966 (2004).</li>
<li>Li, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Air+exposure+induced+squamous+metaplasia+of+human+limbal+epithelium%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthalmol+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">Air exposure induced squamous metaplasia of human limbal epithelium.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 49 (1), 154-162 (2008).</li>
<li>Marino, G. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epithelial+basement+membrane+injury+and+regeneration+modulates+corneal+fibrosis+after+pseudomonas+corneal+ulcers+in+rabbits%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Epithelial basement membrane injury and regeneration modulates corneal fibrosis after pseudomonas corneal ulcers in rabbits.</a> Exp Eye Res. 161, 101-105 (2017).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>10-0 sütür hattı</td><td>Alcon, Inc., ABD</td><td>8065698001</td><td></td></tr><tr><td>2 mm kornea trephine</td><td>Suzhou XVI Vision Company, Çin</td><td>http://www.66vision.com/</td><td></td></tr> <tr><td>20 & mu; L, 100 &mu; L, 1 mL pipet tabancası kafaları, hücre kültürü plakası kültür plakaları, santrifüj tüpleri</td><td>Guangzhou Jiete Biological Co., Ltd., Çin</td><td>https://www.jetbiofil.com/index.html-20</td><td></td></tr> <tr><td>/ -80 derece; C buzdolabı</td><td>Qingdao Haier Company, Çin</td><td>https://www.haier.com/cn/</td><td></td></tr> <tr><td>10 mL'lik bir şırınga</td><td>&nbsp; Zhejiang Condelai Medical Device Co., Ltd., Çin</td><td>https://en.kdlchina.com/zhejiang/25.html</td><td></td></tr><tr><td>ShiTai Company'nin</td><td></td> Amylene alkol Şangay 188105 <td></td><td>slaytına bağlı kalın</td></tr><tr><td></td><td>. Macklin Biochemical, Çin</td><td>http://www.macklin.cn/products/</td><td></td></tr> <tr><td>Anti-Cytokertin</td><td>Abcam, Birleşik Krallık</td><td>ab76318</td><td></td></tr><tr><td>Anti-Keratin 12 antikoru EPR17882</td><td>Abcam, Birleşik Krallık</td><td>ab185627</td><td></td></tr><tr><td>Anti-PAX6 antikoru</td><td>Abcam, Birleşik Krallık</td><td>ab195045</td><td></td></tr><tr><td>Sıyırma önleyici slaytlar, kapak fişleri</td><td>Jiangsu Shitai Experimental Equipment Co., Ltd. , Çin</td><td>https://cn.citotest.com/</td><td></td></tr> <tr><td>Otoklav</td><td>Hirayama, Japonya</td><td>https://hirayama.com.cn/about/</td><td></td></tr> <tr><td>Avertin</td><td>Shanghai Aladdin Biyokimyasal Teknoloji, Çin</td><td>https://www.aladdin-e.com/zh_cn/A111225.html</td><td></td></tr><tr><td>Chloroform</td><td>Shanghai Biological Engineering Co., Ltd., Çin</td><td>https://www.siobp.com/web</td><td></td></tr><tr><td>CO2 Fırın inkübatörü, ultrasonik kırıcı, santrifüj</td><td>Thermo Fisher Technologies Inc., ABD</td><td>https://www.thermofisher.cn/cn/zh/home.html</td><td></td></tr><tr><td>Konfokal mikroskop</td><td>Şangay Qinxiang Scientific Instrument Co., Ltd., Çin</td><td>https://www.clinx.cn/about</td><td></td></tr><tr><td>Kornea epitel forseps</td><td>Suzhou XVI Vizyon Şirketi, Çin</td><td>53418D</td><td></td></tr><tr><td>DAPI</td><td>Vektör. Inc., ABD</td><td>H-1000</td><td></td></tr><tr><td>DEPC suyu</td><td>&nbsp; Shanghai Biological Engineering Co., Ltd., Çin</td><td>https://www.siobp.com/web</td><td></td></tr><tr><td>Dicuro göz kremi (ofloksasin göz kremi)</td><td>Santian Pharmaceutical Corporation, Japonya</td><td>https://www.santen.com/asia</td><td></td></tr><tr><td>D-KSFM, kültür ortamı, çift antikor ve PBS</td><td>Thermo Fisher Scientific, Inc., ABD</td><td>https://www.thermofisher.cn/cn/zh/home.html</td><td></td></tr><tr><td>ED1</td><td>AbD Serote c, Birleşik Krallık</td><td>&nbsp; </td><td></td>MCA341GA</tr><tr><td>Elektronik denge</td><td>Şanghay Ohaus Biyoteknoloji Şirketi, Çin</td><td>http://shbio.com/company</td><td></td></tr><tr><td>Membranın Muhafazası</td><td>Parafilm, Inc., ABD</td><td>https://www.sigmaaldrich.cn</td><td></td></tr><tr><td>Floresein sodyum test şeridi oftalmolojide kullanıldı</td><td>Tianjin Jingming New Technology Development Co., Ltd., China</td><td>https://www.eworldtrade.com/c/jingmingtechnological/</td><td></td></tr><tr><td>Floresan ters faz kontrastlı mikrografik sistem</td><td>TE-2000U, Nikon, Japonya</td><td>https://www.microscopyu.com/museum/eclipse-te2000-inverted-microscope</td><td></td></tr><tr><td>Dondurulmuş masa üstü santrifüj</td><td>Eppendorf, Almanya</td><td>https://www.eppendorf.sh.cn&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Cam levha çerçeve</td><td>Xiamen Tianjing Biotechnology Co., Ltd., Çin</td><td>http://www.tagene.net/</td><td></td></tr> <tr><td>H-1200, DAPI sızdırmazlık maddesi ile</td><td>Xiamen Juin Biotechnology Co., Ltd., Çin</td><td>https://www.bosonbio.com.cn/</td><td></td></tr> <tr><td>HE boyama kiti</td><td>Auragene, Çin</td><td>http://jushengwu.com/a048/</td><td></td></tr> <tr><td>Hematoksilen-eozin boya çözeltisi kiti</td><td>AURAGEN, Amerika Birleşik Devletleri</td><td>P032IH</td><td></td></tr><tr><td>Yüksek ve düşük hassasiyetli elektronik terazi</td><td>Sdolis, Almanya</td><td>https://www.solisinverters.com/global</td><td></td></tr><tr><td>İzopropanol</td><td>Shanghai Sinopharm Chemical Reagents Co., Ltd., Çin</td><td>https://en.reagent.com.cn/</td><td></td></tr> <tr><td>Ki-67 antikoru</td><td>Abcam, Birleşik Krallık</td><td>ab16667</td><td></td></tr><tr><td>sıvı nitrojen</td><td>Xiamen Yidong Gas Co., Ltd., Çin</td><td>https://www.china.tdk.com.cn/tdk_chn_en/tdk_xiamen/</td><td></td></tr> <tr><td>Mikro el tutucu</td><td>Suzhou XVI Vision Company, Çin</td><td>http://www.66vision.com/</td><td></td></tr> <tr><td>Multiformaldehit tozu</td><td>Sigm, Amerika</td><td>https://www.sigmaaldrich.cn</td><td></td></tr><tr><td>Normal sıcaklık santrifüjü 46</td><td>Eppendorf, Almanya</td><td>https://www.thermofisher.cn</td><td></td></tr><tr><td></td><td>EKİM Şanghay Maokang Biotechnology Co., Ltd., Çin</td><td>4583</td><td></td></tr><tr><td>Sıradan biyolojik mikrografik sistem</td><td>Eclipse 50i, Nikon, Japonya</td><td>https://www.microscope.healthcare.nikon.com/zh_CN/products/upright-microscopes/eclipse-ni-series</td><td></td></tr><tr><td>PBS</td><td>Shanghai Anjin Biotechnology Co., Ltd, Çin</td><td>SH30256.01</td><td></td></tr><tr><td>PCR ve reaktör aparatı</td><td>Biometra Thermocycler, Almanya</td><td>https://www.analytik-jena.com/products/life-science/pcr-qpcr-thermal-cycler/thermal-cycler-pcr/biometra-tone-series/</td><td></td></tr> <tr><td>Çeşitli özelliklerde pipetler</td><td>Eppendorf Company, Almanya</td><td>https://www.eppendorf.com/cn-zh/</td><td></td></tr> <tr><td>Rt-PCR için astarlar</td><td>Shanghai Bio-Tech Co., Ltd.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Promeaine hidroklorür% 0.5 göz damlası</td><td>Alcon, Inc., ABD</td><td>https://www.alcon.com/about-us</td><td></td></tr><tr><td>Sıçan PMN antikoru</td><td>Fitzgerald, Amerika Birleşik Devletleri</td><td>20R-PR020</td><td></td></tr><tr><td>Gerçek zamanlı floresan kantitatif PCR</td><td>Uygulamalı Biyosistemler,&nbsp; Amerika Birleşik Devletleri</td><td>https://www.thermofisher.cn</td><td></td></tr><tr><td>Ters transkripsiyon kiti</td><td>TAKARA, Japonya</td><td>https://www.takarabiomed.com.cn/</td><td></td></tr> <tr><td>Yarık lamba</td><td>TOPCON, Japonya</td><td>https://topconchina.cn/</td><td></td></tr> <tr><td>Pürüzsüz forseps</td><td>Suzhou XVI Vision Company, Çin</td><td>http://www.66vision.com/</td><td></td></tr> <tr><td>Numune kutusu</td><td>Lambolid (Fuzhou) Biotechnology Co., Ltd., Çin</td><td>http://chuangdianbio.com/</td><td></td></tr> <tr><td>Superclean tezgah</td><td>Yeni Plus Pi Art Yüksek Teknoloji Limited Şirketi, Singapur</td><td>https://www.hi-p.com/</td><td></td></tr> <tr><td>Dişli forseps</td><td>Suzhou XVI Vision Company, Çin</td><td>http://www.66vision.com/</td><td></td></tr> <tr><td>Toppicamide göz damlası (Medol)</td><td>Alcon, Inc., ABD</td><td>https://www.alcon.com/about-us</td><td></td></tr><tr><td>Eser nükleik asit proteini konsantrasyon test cihazı</td><td>Thermo Fisher Technologies Inc., ABD</td><td>https://www.thermofisher.cn/cn/zh/home.html</td><td></td></tr><tr><td>Trizol</td><td>Invitrogen Amerika Birleşik Devletleri</td><td>https://www.fishersci.com/us/en/brands/IIAM0WMR/invitrogen.html</td><td></td></tr><tr><td>Zeiss, cerrahi mikroskop ile</td><td>Carl ZEIS, Almanya</td><td>https://www.zeiss.com/corporate/en/about-zeiss.html</td><td></td></tr></tbody></table>

kornea sütürleri ile kombine kornea epitel küretajına dayalı sıçanlarda Şiddetli kornea İnflamasyonu modelinin oluşturulması

Establishing a Severe Corneal Inflammation Model in Rats Based on Corneal Epithelium Curettage Combined with Corneal Sutures

Şekil 1A'da görüldüğü gibi, yarık lamba ile yapılan gözlem sonucunda kornea epitelinin iyileşmesinin bozulduğunu bulduk. Normal şartlar altında, merkezi kornea epiteli çıkarıldıktan sonra 24-48 saat içinde tamamen iyileşirdi, ancak kornea merkezi epitel eksizyonu bir sütür modeli ile birleştirildiğinde yeni kan damarları var olmaya devam etti. Model kurulduktan sonraki üçüncü günde, önemli kornea limbal ödemi ve neovaskülarizasyon gözlendi ve tipik kornea limbal kök hücre eksikliği belirtileri lokal olarak ortaya çıktı. Zamanla, 7. güne kadar iyileşme hala tamamlanmamıştı. Kornea inflamasyon indeksi siliyer tıkanıklık, parasantral kornea ödemi ve santral kornea ödemi kullanılarak değerlendirildi. Kornea ödemi giderek kötüleşti ve kornea iltihabı (Şekil 1A) bozulmaya devam etti. Ek olarak, kornea neovaskülarizasyonu inflamasyonun bir göstergesidir. İnflamasyonun ilerlemesi ile kornea neovaskülarizasyonu (Şekil 1B) ve inflamasyon indeksi (Şekil 1C) sürekli bir artış göstermiştir.
Model oluşturulduktan 7 gün sonra göz dokularına kriyo yerleştirme işlemi gerçekleştirdik. Hematoksilen ve eozin boyaması (Şekil 2A), limbus ve santral korneada epitel kalınlaşmasını gösterdi ve epitel düzenlemesi normal morfolojisini kaybetti ve atipik hiperplaziyi gösterdi. Kornea stroması, enflamatuar hücrelerin önemli ölçüde infiltrasyonu ile ödemli görünüyordu. PMN ve ED1 immünofloresan boyama (Şekil 2B) kullanılarak, nötrofillerin ve makrofajların infiltrasyonunda belirgin bir artış gözlendi. Çalışma, IL-1β (Şekil 2C) ve MIP-1α (Şekil 2D) kullanarak inflamatuar faktörleri değerlendirdi ve IL-1β'nın 3. günde zirve yaptığını ve daha sonra kademeli olarak azaldığını, MIP-1α'nın ise zamanla sürekli arttığını buldu.
Kronik inflamasyon tipik olarak Pax6 aşağı regülasyonu, azalmış Krt12 ekspresyonu ve kornea epitelinin skuamöz metaplazisi gibi bir dizi limbal kök hücre eksikliğine yol açar. Bu çalışmada geliştirilen modelin kornea epitel fenotipinde bu değişiklikleri indükleyip indükleyemeyeceğini doğrulamak için, kornea epitelinde Krt12 (Şekil 3A) ve Pax6 (Şekil 3B) için immünofloresan boyama yapıldı. Krt12 ekspresyonu uzun süreli inflamasyon ile azaldı, 7. günde sadece tek Krt12 pozitif hücreler gözlendi ve kornea epitelinde Pax6 ekspresyonu önemli ölçüde azaldı. mRNA düzeyinde, normal kornea epitel belirteçleri Krt12 (Şekil 3C) ve Pax6'nın (Şekil 3D) ekspresyon seviyeleri 7. günde önemli ölçüde azalmıştır. Bununla birlikte, skuamöz metaplazi belirteçleri Krt10 (Şekil 3E) ve Sprr1b'nin (Şekil 3F) ekspresyon seviyeleri 7. günde önemli ölçüde artmıştır.
Kornea epitelini boyamak için proliferasyon belirteci Ki67'yi kullandık ve sonuçlar 7. güne kadar Ki67 pozitif kornea epitel hücrelerinin sayısında önemli bir azalma olduğunu gösterdi (Şekil 4A). Kornea epitel kök hücrelerinin durumu, korneal limbal kök hücreye özgü belirteç ABCG2 (Şekil 4B) ve epitelyal progenitör hücre belirteci P63 (Şekil 4C) kullanılarak değerlendirildi. ABCG2 ve P63 düzeyleri normal gruptakilere göre anlamlı derecede düşüktü. Ek olarak, bu işlem sırasında kornea limbal kök hücrelerindeki değişiklikleri değerlendirmek için kök hücreler için altın standart olan klonal kültür yöntemini kullandık. Kornea limbal kök hücrelerinin klonal oluşum hızının (Şekil 4D) 3. günde azaldığını ve 7. günde önemli ölçüde azaldığını, ortalama klon alanının küçüldüğünü ve 7. günde sadece birkaç holoklonun görülebildiğini gözlemledik. Koloni oluşturma verimliliği (CFE), kültür kabının mikroskop alanında görülebilen hücre klonlarının sayılmasıyla elde edildi. CFE (Şekil 4E), enflamatuar koşullar altında kornea limbal kök hücrelerinin sayısında kademeli bir azalma olduğunu göstermiştir. Bu, bu modeldeki şiddetli inflamasyonun kornea limbal epitel kök hücrelerinin tükenmesine yol açtığını ve bu sürecin kornea limbal kök hücrelerinin fenotipik bir dönüşümünü indüklemediğini, bunun yerine farklılaşma veya kendini yenileme sorunları ortaya çıkardığını göstermektedir.
Bu çalışmada kullanılan inflamasyon modeli, enflamatuar hücrelerin korneaya geniş infiltrasyonu, kornea epitelinin displazisi ve normal kornea epitel fenotipinde Pax6 ve Krt12'nin ekspresyonunun bozulması veya azalması dahil olmak üzere LSCD'nin karakteristik kornea değişiklikleri ile sonuçlandı. Ek olarak, Krt10 mRNA ekspresyonunda önemli bir artış oldu. Özetle, bu deneysel model, inflamasyonun neden olduğu kornea epitel kök hücrelerinin anormal farklılaşmasını incelemek için çok uygundur.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67305/67305fig1v2.jpg"> 
Şekil 1: Enflamasyon modelinin kurulması. Şiddetli inflamasyonun kornea epitel kök hücreleri üzerindeki etkilerini incelemek için ciddi bir inflamasyon modeli oluşturulmuştur. (A) Model indüklendikten sonra, kornea yarık lamba fotoğrafçılığı kullanılarak gözlendi. Modellemeden üç gün sonra, sıçan kornea limbaus limbal kök hücre eksikliğinin tipik belirtileri olan belirgin neovaskülarizasyon ve lokalize hiperplazi ile ciddi ödemliydi. Yedinci günde, kornea ödemi giderek kötüleşti ve neovaskülarizasyon büyümeye devam etti. İnflamasyonun ilerlemesi ile birlikte (B) kornea neovaskülarizasyonu ve (C) inflamasyon indeksi sürekli artış göstermiştir. *P &lt; 0.05, ****P &lt; 0.0001. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67305/67305fig1v2large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67305/67305fig02.jpg"> 
Şekil 2: Modelleme sonrası inflamatuar yanıt. Modelin korneada indüklediği inflamatuar yanıt değerlendirildi. (A) Göz küresinin hematoksilen ve eozin boyaması, enflamatuar süreç sırasında hem limbal hem de merkezi kornea epitelinin kalınlaştığını ve kornea epitel düzenlemesinin normal morfolojisini kaybettiğini ve atipik hiperplazi belirtileri gösterdiğini gösterdi. (B) Makrofaj belirteci ED1 (yeşil) ve nötrofil belirteci PMN (kırmızı) önemli ölçüde artmıştır. RT-qPCR, kornea epitelyal inflamatuar faktörleri (C) IL-1β ve (D) MIP-1α'da önemli bir artış gösterdi. Mavi, DAPI ile nükleer lekelenmeyi temsil eder, ölçek çubuğu = 50 μm; p &lt; 0.001. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67305/67305fig02large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67305/67305fig03v2.jpg"> 
Şekil 3: Enflamatuar koşullar altında hücrelerin fenotipik değişiklikleri. Limbal epitelde (A, kırmızı) KRT12 ve (B) PAX6 için immün boyama. (C) KRT12 mRNA ekspresyon seviyeleri, inflamasyon ilerledikçe önemli bir azalma gösterir. (D) PAX6 mRNA ekspresyonu, enflamatuar koşullar altında limbal epitelde anormal bir dağılım ve belirgin bir azalma ortaya çıkarır. Tersine, (E) Krt10'un mRNA ekspresyonu ve anormal şekilde farklılaşmış kornea epitel belirteci (F) Sprr1b, inflamasyon sırasında önemli ölçüde artar. Mavi, DAPI ile nükleer lekelenmeyi temsil eder, ölçek çubuğu = 50 μm; **p &lt; 0.01, ***p &lt; 0.001, ****p &lt; 0.0001. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67305/67305fig03large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67305/67305fig04.jpg"> 
Şekil 4: Enflamatuar bir durum altında limbal kök hücrelerin değişiklikleri. (A, kırmızı) Ki67'nin immünofloresan görüntüleri, inflamasyonun indüksiyonunu takiben çoğalan hücrelerdeki değişiklikleri göstermektedir. Kök hücre markörü (B) ABCG2'nin mRNA ekspresyonu önemli ölçüde azalır. Progenitör hücre markörü (C) p63 de eksprese edilir. (D) Kristal viyole boyama görüntüleri ve (E) CFE, enflamatuar koşullar altında limbal kök hücrelerin sayısında bir azalma olduğunu göstermektedir. Mavi, DAPI ile boyanmış çekirdekleri gösterir; ölçek çubuğu 50 μm'dir; *p &lt; 0.05, **p &lt; 0.01, ***P &lt; 0.001, ****P &lt; 0.0001. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67305/67305fig04large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td colspan="2">Astar adı</td>
			<td colspan="3">Astar dizisi</td>
		</tr>
		<tr>
			<td rowspan="2">TNF-a</td>
			<td>İletmek</td>
			<td colspan="3">5'-TCAGTTCCATGGCCCAGAC-3'</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ters</td>
			<td colspan="3">5'-GTTGTCTTTGAGATCCATGCCATT-3'</td>
		</tr>
		<tr>
			<td rowspan="2">IL-1β</td>
			<td>İletmek</td>
			<td colspan="3">5'-CCTCGTCCTAAGTCACTCGC-3'</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ters</td>
			<td colspan="3">5'-GGCTGGTTCCACTAGGCTTT-3'</td>
		</tr>
		<tr>
			<td rowspan="2">Kişi 6</td>
			<td>İletmek</td>
			<td colspan="3">5'-GTGTTCAGTGCAGAGCCTTC-3'</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ters</td>
			<td colspan="3">5'-TTCACCGTTGCTGTTCACTG-3'</td>
		</tr>
		<tr>
			<td rowspan="2">Krt12 Serisi</td>
			<td>İletmek</td>
			<td colspan="3">5'-AGCTAACGGGAACTGGAAA-3'</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ters</td>
			<td colspan="3">5'-CTCTCCGCTCTTGGTGAGGT-3'</td>
		</tr>
		<tr>
			<td rowspan="2">Krt10</td>
			<td>İletmek</td>
			<td colspan="3">5'-TCCGGGATCTGGAAGAGTCAA-3'</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ters</td>
			<td colspan="3">5'-TTGGGTAAGCTTTGCTAAGTGGAA-3'</td>
		</tr>
		<tr>
			<td rowspan="2">Sprr1b</td>
			<td>İletmek</td>
			<td colspan="3">5'-CCATCCCAAGGCACCTGAG-3'</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ters</td>
			<td colspan="3">5'-TGCTGGTATGGTGATGGAGT-3'</td>
		</tr>
		<tr>
			<td rowspan="2">Aktin</td>
			<td>İletmek</td>
			<td colspan="3">5'-CACCCGCGAGTACAACCTTC-3'</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ters</td>
			<td colspan="3">5'-CCCATACCCACCATCACACC-3'</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
Tablo 1: Kantitatif RT-PCR için kullanılan primerlerin sırası.

Kornea Sütürleri ile Kombine Kornea Epitel Küretajına Dayalı Sıçanlarda Şiddetli Kornea İnflamasyonu Modelinin Oluşturulması

Corneal inflammation, especially severe corneal inflammation, plays a significant role in the development of corneal limbal stem cell dysfunction. ...

establishing-severe-corneal-inflammation-model-rats-based-on-corneal

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Bu videoda, domuz gözünden diseke edilen bir korneoskleral düğme kullanarak bakteriyel keratit için bir ex vivo model oluşturmak için bir protokol açıklanmaktadır. Aşılanmış bakteriler, altta yatan stromayı istila etmek ve in vivo enfeksiyonu taklit eden kornea dokuları içinde bir enfeksiyon oluşturmak için kornea epitel insizyonlarını geçer.

Domuz Ex vivo Kornea Bakteriyel Keratit Modeli: Kornea Epitel Hücrelerinde Bakteriyel Enfeksiyon Oluşturma Tekniği

sığır endotel hücrelerinin ana bir kültürü kornea endotelial-mezenkimal geçiş mekanizmasını araştırmak için kullanıldı. Ayrıca, bir fare endotel cryoinjury modeli in vivo olarak endotel-mezenkimal geçiş göstermek için kullanılmıştır.

Vitro ve in vivo Modelleri Kornea Endotel-mezenkimal Geçiş Çalışması için

Bu iletişim kuralı oküler yüzey için bir aşınma fare indirebilmek için ve yara iyileşme süreci bundan sonra izlenecek yöntemi açıklanır. Protokol kısmen göz yüzey epitel anaesthetized farelerde kaldırmak için oküler bir burr yararlanır.

Kornea epitel aşınma oküler Burr ile bir Model olarak kornea için yara iyileşme

Kronik oküler hipertansiyon circumlimbal dikiş sıçanlar ve fareler, Retina ganglion hücrelerinin glokom ile tutarlı fonksiyonel ve yapısal bozulma yol uygulayarak indüklenen.

Manken Circumlimbal dikiş sıçanlar ve fareler tarafından indüklenen glokom

Eski bir protokol vivo kornea organ kültür model çalışmaları şifa yara açıklanan için yararlı. Bu modeli sistem rejeneratif iyileşmesine katkıda bulunmak üzere ajanlar veya ilaç toksisitesi organize 3D çok hücreli ortamında etkilerini değerlendirmek için kullanılabilir.

Ex vivo kornea Organ kültür modeli için yaranın çalışmaları

Yeni bir yaklaşım cerrahi tüm orbital gözyaşı bezleri kaldırarak tavşan kronik kuru göz hastalığı neden sunulmuştur. Bu yöntem, daha önce bildirilenfarklı, iyi gözyaşı fizyolojisi ve patofizyolojisi ve oküler terapötik çalışma için uygun sulu eksik kuru göz istikrarlı, tekrarlanabilir bir model üretir.

Tavşanlarda Komple Dakriyoadenektomi Kullanarak Şiddetli Kuru Göz Modelinin Oluşturulması

Burada, bir trefin ve künt bir golf kulübü spud kullanarak farede merkezi bir kornea epitelyal aşınma yarası oluşturmak için bir protokol açıklanmaktadır. Bu kornea yara iyileşmesi modeli yüksek oranda tekrarlanabilir ve şimdi hastalıklar bağlamında tehlikeye atılmış kornea yara iyileşmesini değerlendirmek için kullanılmaktadır.

Kornea Yara İyileşmesini İncelemek İçin Epitelyal Aşınma Modeli

Burada, kornea epitelinin mekanik ve kimyasal hasarı için fare ve tavşana dayalı hayvan modelleri, yeni terapötikleri ve altta yatan mekanizmayı taramak için geliştirilmiştir.

Kornea Epitelinin Mekanik ve Kimyasal Yaralanmaları için Ex Vivo ve In Vivo Hayvan Modelleri

Bu protokol, bir fare modelinde doğru ve tekrarlanabilir bir kornea ve limbal alkali hasarını indüklemek için bir yöntemi açıklar. Protokol, oldukça kavisli fare korneası ve limbusunda eşit olarak dağılmış bir yaralanmaya izin verdiği için avantajlıdır.

Bir fare modelinde punch-trephine tekniği kullanılarak kornea ve limbal alkali yaralanma indüksiyonu

Burada, korneayı innerve eden duyu liflerine zarar vermek için üç farklı yöntem öneriyoruz. Bu yöntemler, farelerde akson rejenerasyonunun incelenmesini kolaylaştırır. Diğer hayvan modellerine uyarlanabilen bu üç yöntem, kornea innervasyon fizyolojisi ve rejenerasyonunun incelenmesi için idealdir.

Murin Korneasında Nörotrofik Keratit ve Sinir Rejenerasyonunu İndüklemek için Üç Strateji

Tavşanlarda kornea stromal yara onarımı için yerinde mavi ışık-çapraz bağlanabilir jelatin–riboflavin hidrojelinin hazırlanması, zenginleştirilmesi ve uygulanması için tekrarlanabilir bir protokol sunulur; bu süreç cerrahi müdahale, kısmi tarsorrafi ve ameliyat sonrası bakım için prosedürel adımlar içerir.

Tavşanlarda Korneal yara onarımı için zenginleştirilmiş foto-çapraz bağlı jelatin–riboflavin hidrojellerin üretimi ve cerrahi uygulaması

Öğrenin, sıçanlarda kornea epitel küretajı ve dikişle şiddetli kornea inflamasyonu modeli oluşturmayı. Bu yöntem, limbal kök hücreleri hasar vermeden inflamasyon mekanizmalarını incelemek için kullanılır.

Kornea Sütürleri ile Kombine Kornea Epitel Küretajına Dayalı Sıçanlarda Şiddetli Kornea İnflamasyonu Modelinin Oluşturulması

Daha fazla video keşfet