Name: Sulu Eksiklik Kuru Gözünün Bir Fare Modelinin Kurulması (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-11-01T14:40:00.000+00:00
Duration: 5 min 21 s
Description: Öğrenin, sulu eksiklik kuru göz sendromunun fare modelini oluşturmayı. Ekstraorbital ve infraorbital lakrimal bezlerin çıkarılmasıyla geliştirilen bu yöntem, Sjögren sendromu gibi şiddetli kuru göz hastalıklarını araştırmak için güvenilir bir temel sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Bu çalışma kısmen Guizhou İl Bilim ve Teknoloji Projeleri (QKHJC-ZK[2024]ZD043), Seçkin Genç Akademisyenler için Fujian İl Bilim Fonu (2023J06053 [SO]), Çin Doğa Bilimleri Vakfı (No.82101084 [SO'ya] ve Çin Burs Konseyi (CSC, 202306310049 [YW'ye]) tarafından desteklenmiştir.

Bu çalışmada yaşları 7-8 arasında değişen dişi C57BL/6 (C57) fareler kullanıldı. Tüm prosedürler, hayvanların oftalmik ve görme araştırmalarında kullanımına ilişkin ARVO yönergelerine uygun kalmıştır ve Guizhou Tıp Üniversitesi Hayvan Etik Komitesi tarafından onaylanmıştır (Onay No. 2305193). Yarık lamba muayenesinde oküler yüzey lezyonu gözlenmedi.
1. Ameliyat öncesi adımlar
<ol>
	<li>Aletleri hızlı bir sterilizatör kullanarak sterilize edin: iğne tutucular, iplikli 5-0 dikiş iğnesi, oftalmik cerrahi makas ve forseps.</li>
	<li>Fareyi 0.3 mL / 100 g'lık bir dozda intraperitoneal enjeksiyon yoluyla% 1.25 Avertin ile uyuşturun.</li>
	<li>Anestezi tamamlandıktan sonra, fareyi lateral dekübit pozisyonuna getirin ve kılları cerrahi alandan çıkarın. Ameliyat öncesi 30 dakika intraperitoneal olarak 20 mg / kg meloksikam uygulayın, sonraki dozlar ameliyat sonrası her 8 saatte bir.</li>
	<li>Cerrahi alanı üç alternatif iyodofor ve alkol uygulamasıyla dezenfekte edin.</li>
	<li>Kuru göz modelinin oluşturulması
	<ol>
		<li>Fareyi yanal dekübit konumuna getirin. Cerrahi alanı ameliyat mikroskobu altında ortaya çıkarın.</li>
		<li>Kesi yapmadan önce anestezi derinliğini bir ayak parmağı kıstırma ile onaylayın. Farenin yüzünün sağ tarafındaki cildi dişli forseps ile sıkıştırın ve dış kulak kepçesi ile mandibular çizgiyi gözün iç köşesine kesen çizginin orta noktasında bir kesi yapın. Kas dokusunu açığa çıkarın; kas üzerinde bulunan ELG'yi dikkatlice çıkarın.</li>
		<li>Cilt kesisini gözün iç köşesine kadar uzatın, kası künt bir şekilde ayırın ve kasın altındaki açık kırmızı bezi bulun. ILG'yi soyun ve çıkarın.</li>
		Bir <li>iğne tutucu, oftalmik cerrahi makas ve forseps yardımıyla ekli bir iğne ile önceden sterilize edilmiş 5-0 naylon sütür kullanarak insizyonu dikin.</li>
		<li>Enfeksiyonu önlemek için operasyonun sonunda loksasin merhem uygulayın.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Tek taraflı ELG ve ILG'yi çıkardıktan sonra, fareleri yiyecek ve suya serbest erişimi olan ritmik 12:12 saat aydınlık-karanlık döngüsüne sahip bir ortama yerleştirin. Bu, tek taraflı bir kuru göz modeli oluştururken, iç ve dış gözyaşı bezlerine sahip karşı göz normal kontrol grubu olarak görev yapar.</li>
</ol>
2. Gözyaşı üretiminin ölçülmesi
<ol>
	<li>Fareyi intraperitoneal olarak 0.3 mL / 100 g'lık bir dozda% 1.25 Avertin ile uyuşturun.</li>
	<li>Genel anestezi altında iyi paketlenmiş ve ticari olarak sterilize edilmiş fenol kırmızısı iplikler kullanarak gözyaşı sekresyonu ölçümü yapın.</li>
	<li>Ölçülecek alt göz kapağını yavaşça aşağı çekin. Fenol kırmızısı ipliğin üst kısmını alt göz kapağının iç ve dış üçte birlik kısmına yerleştirin ve zamanlayıcıyı hemen başlatın.</li>
	<li>Testi 15 saniye boyunca her seferinde bir göz üzerinde gerçekleştirin.</li>
	<li>Ayrılan süreden sonra, alt göz kapağını dikkatlice geri çekin ve fenol kırmızı ipliği dikkatli bir şekilde aşağı doğru çıkarın.</li>
	<li>İpliğin tepesinden kırmızı kısmın tamamına kadar ölçmek için fenol kırmızı ipliğin dış torbasında verilen ölçeği kullanın.</li>
	<li>Testin süresini doğru bir şekilde kaydetmek için elektronik bir kronometre kullanın.</li>
</ol>
3. Donma doku dilimlerinin hazırlanması
<ol>
	<li>CO2 ile boğulmayı takiben farelerde hızlı servikal çıkık gerçekleştirin.</li>
	<li>Göz kürelerini dikkatlice çıkarmak için makas ve forseps kullanın.</li>
	<li>Göz kürelerini optimum kesme sıcaklığı bileşiğine yerleştirin ve 5-7 μm kalınlığında donmuş doku dilimleri elde etmek için donmuş bir mikrotom kullanın28.</li>
	<li>Tüm slaytları oda sıcaklığında yaklaşık 30 dakika boyunca bir numune kutusunda saklayın. Ardından, bunları -80 °C'de ultra düşük sıcaklıklı bir dondurucuya aktarın.</li>
</ol>
4. Hematoksilen ve eozin (H&E) boyama
<ol>
	<li>Dondurulmuş doku dilimlerini ultra düşük sıcaklıktaki dondurucudan çıkarın, bir kağıt mendil kutusuna düz bir şekilde koyun ve bir çeker ocakta kurutun.</li>
	<li>Dilimleri 1x PBS ile yıkayın, 5 dakika örtün ve ardından PBS'yi çıkarın. Numuneyi %4 paraformaldehit ile kaplayın ve buharlaşmayı önlemek için kapağın kapalı olduğundan emin olun. Oda sıcaklığında 15 dakika sonra, numuneleri 1x PBS'de 3 x 5 dakika durulayın.</li>
	<li>Numuneyi bir rafa yerleştirin ve 5 dakika boyunca% 0.5 hematoksilen boyasına batırın.</li>
	<li>Fazla boyayı yıkamak için numuneyi musluk suyunda 5 dakika durulayın. Daha sonra, farklılaşmayı kolaylaştırmak için 1-2 saniye boyunca% 0.1 hidroklorik asit alkole batırın.</li>
	<li>Spesifik olmayan lekelenmeyi gidermek için numune tutucuyu 15 dakika musluk suyuna koyun.</li>
	<li>Fazla suyu boşaltın ve numuneyi 3 dakika boyunca% 0.05 eozin boyama çözeltisine batırın.</li>
	<li>Numuneyi musluk suyunda yıkayın ve sırayla %75, %80, %95 ve her biri 2 dakika boyunca iki tur %100 alkole batırın.</li>
	<li>Numune tutucuyu her biri 2 dakika boyunca iki tur ksilene daldırın.</li>
	<li>Hasarı ve kabarcıkları önleyerek numuneyi kurutmak ve montaj ortamıyla monte etmek için tutucuyu bir çeker ocak içine yerleştirin.</li>
	<li>Lekeli örnekleri oda sıcaklığında bir kutuda saklayın ve bir biyomikrografi sistemi kullanarak fotoğraflayın.</li>
</ol>
5. İmmünofloresan boyama
<ol>
	<li>Numuneyi dondurucudan alın, kutuya düz bir şekilde koyun ve kapüşonda kurutun.</li>
	<li>Numuneyi 1x PBS ile yıkayın, 5 dakika örtün ve fazla sıvıyı aspire edin. Numuneyi %4 paraformaldehit ile kaplayın, immünohistokimyasal ıslak kutuya su ekleyin ve buharlaşmayı önlemek için kapağı kapatın. 15 dakika oda sıcaklığında bekletin; daha sonra numuneyi 3 x 5 dakika 1x PBS. 
	NOT: Bu işlem sırasında numuneyi dikkatli bir şekilde kullanın.</li>
	<li>Numune yüzeyindeki fazla PBS'yi çıkarın ve doku bölümünün etrafındaki kalan sıvıyı filtre kağıdı ile nazikçe silin. Numune yüzeyini hücre geçirgenleştirme çözeltisi (% 0.2 Triton X-100) ile kaplayın ve zarı geçirgen hale getirmek için oda sıcaklığında 20 dakika inkübe edin.</li>
	<li>Geçirgenlik solüsyonunu çıkarın ve numuneyi 1x PBS ile 3 x 5 dakika durulayın.</li>
	<li>PBS'yi numune yüzeyinden boşaltın ve doku bölümünün etrafındaki kalan sıvıyı filtre kağıdı ile nazikçe silin. Numuneyi önceden ısıtılmış blokaj solüsyonu (%2 BSA) ile örtün. Buharlaşmayı önlemek için kapağı kapatın ve oda sıcaklığında 1 saat inkübe edin.</li>
	<li>Blokaj işlemi sırasında, deneysel ihtiyaçlara göre uygun antikoru seçin, primer antikoru önerilen orana göre immünofloresan antikor seyreltici (%1 BSA) ile hazırlayın ve hazırlanan primer antikoru 2.000 × g, 10 dk. sıcaklıkta 4 °C santrifüjde santrifüjleyin
	NOT: Yukarıdakilerin tümü buz üzerinde veya düşük sıcaklıklarda çalıştırılır. Örnek başına yaklaşık 120 μL primer antikor kullanılması önerilir.</li>
	<li>Birincil antikoru atın veya dökün. Numuneyi 3 x 10 dakika 1x PBS tamponu ile yıkayın. PBS'yi döktükten sonra, numuneyi taze 1x PBS ile durulayın. İlk durulama sırasında PBS'nin slaytı kapladığından emin olun.</li>
	<li>Primer antikor durulanırken, kategorisine göre uygun sekonder antikoru seçin. 1:300 oranında %1 BSA seyreltici ile seyreltin. Hazırlanan antikoru 4 ° C, 2 000 × g'da 10 dakika boyunca bir santrifüjde döndürün. Tüm işlemi buz üzerinde veya karanlıkta düşük bir sıcaklıkta gerçekleştirin.</li>
	<li>Slaytı PBS ile durulayın, numunenin etrafındaki sıvıyı filtre kağıdı ile nazikçe silin, kalan sıvıyı emmek için bir emme pompası kullanın ve hazırlanan ikincil antikoru numuneye hızlı bir şekilde ekleyin. Üzerini örtün ve oda sıcaklığında 1 saat inkübe edin. Tüm işlemlerin karanlıkta yürütüldüğünden emin olun.</li>
	<li>İkincil antikoru atın, 1x PBS tamponu ile durulayın ve 3 x 10 dakika yıkayın. PBS'nin slaytı tamamen kapladığından emin olun. Durulamayı önlemek için numuneyi nazikçe tutun.</li>
	<li>1x PBS'yi boşaltın, fazla sıvıyı filtre kağıdıyla silin, kalan sıvıyı çıkarmak için bir emme pompası kullanın ve numuneyi DAPI içeren bir montaj ortamıyla monte edin. Kapağı kayar plakaya yerleştirin ve kalay folyo ile ışıktan koruyarak 4°C'lik bir dondurucuda saklayın. Numuneye zarar vermemeye ve hava kabarcıkları oluşturmamaya dikkat edin.</li>
	<li>Lekeli numuneyi bir lazer konfokal veya dik floresan mikroskop sistemi kullanarak fotoğraflayın. Floresan söndürmeyi önlemek için görüntülemenin bir hafta içinde yapıldığından emin olun.</li>
</ol>
6. Kornea mRNA'sının ekstraksiyonu
<ol>
	<li>CO2 ile boğulmayı takiben farelerde hızlı servikal çıkık gerçekleştirin. Ardından, gözbebeklerini dikkatlice çıkarmak için makas ve forseps kullanın, 1x PBS'de 3 kez yıkayın ve göz küresini 1x PBS içeren bir Petri kabına yerleştirin.</li>
	<li>Mikroskop altında, lensi ayırmak için göz küresini göz küresinin arka kutbundan kesmek için makas ve forseps kullanın. Fazla sklera ve irisi temizleyin, ancak 0,5 mm beyaz sklerayı ve tüm korneayı bırakın. Talimatlara göre bir RNA ekstraksiyon kiti kullanarak mRNA'yı fare gözbebeklerinden çıkarın.</li>
</ol>
7. Ters transkripsiyon PCR
<ol>
	<li>Ters transkripsiyon yapmadan önce, bir UV spektrofotometresi ile RNA konsantrasyonunu belirleyin.</li>
	<li>Ölçülen RNA konsantrasyonuna göre 1 mg RNA alın. Bir ters transkripsiyon kiti kullanarak ters transkripsiyon reaksiyonunu gerçekleştirin.</li>
	<li>Reaksiyon bileşenlerini ekledikten sonra, karışımı 200 μL'lik bir santrifüj tüpüne ekleyin, hafifçe çalkalayarak karıştırın, hava kabarcıklarını önlemek için düşük hızda santrifüjleyin ve reaksiyon için hemen normal bir termal döngüleyiciye koyun.</li>
	<li>cDNA'yı ters transkripsiyon işleminden doğrudan gerçek zamanlı PCR ile analiz edin veya -20 °C'lik bir dondurucuda saklayın.</li>
</ol>
8. Gerçek zamanlı kantitatif PCR reaksiyonları (qRT-PCR)
<ol>
	<li>Gerçek zamanlı PCR kiti ile sağlanan talimatlara göre 10 μL'lik bir reaksiyon sistemi kurun29: 3,6 μL DEPC ile arıtılmış su, algılama astarı 0,2 μM, anti-sens Astar 0,2 μM, 1 μL cDNA, 5 μL Karışım. Primerlerle ilgili ayrıntılar için Tablo 1'e bakın.</li>
	<li>Deneylerin gruplandırılmasına bağlı olarak, reaksiyon sistemini qRT-PCR'ye ayrılmış 96 oyuklu bir plakaya veya sekiz şeritli bir tüpe ekleyin. qRT-PCR sistemi yapılandırıldıktan sonra, karışımın iyice karıştığından emin olun ve tüp duvarındaki sıvıyı silkelemek için kısa santrifüjleme için bir masa üstü santrifüj kullanın. qRT-PCR'den önce daima tüpte hava kabarcıkları olup olmadığını kontrol edin.</li>
	<li>Reaksiyonu üç nüsha halinde gerçekleştirin ve ortalama Ct'yi (döngü eşiği) hesaplayın.</li>
</ol>

<ol><li>Stapleton, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tfos+dews+ii+epidemiology+report%5BTitle%5D)+AND+%22Ocul+Surf%22%5BJournal%5D)">Tfos dews ii epidemiology report.</a> Ocul Surf. 15 (3), 334-365 (2017).</li>
<li>Galor, A., Levitt, R. C., Felix, E. R., Martin, E. R., Sarantopoulos, C. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuropathic+ocular+pain%3A+An+important+yet+underevaluated+feature+of+dry+eye%5BTitle%5D)+AND+%22Eye+%28Lond%29%22%5BJournal%5D)">Neuropathic ocular pain: An important yet underevaluated feature of dry eye.</a> Eye (Lond). 29 (3), 301-312 (2015).</li>
<li>Craig, J. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tfos+dews+ii+definition+and+classification+report%5BTitle%5D)+AND+%22Ocul+Surf%22%5BJournal%5D)">Tfos dews ii definition and classification report.</a> Ocul Surf. 15 (3), 276-283 (2017).</li>
<li>Hao, R., Ding, Y., Li, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alterations+in+corneal+epithelial+dendritic+cell+in+Sjogren%27s+syndrome+dry+eye+and+clinical+correlations%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Alterations in corneal epithelial dendritic cell in Sjogren's syndrome dry eye and clinical correlations.</a> Sci Rep. 12 (1), 11167(2022).</li>
<li>Wu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evolution+of+therapeutic+strategy+based+on+oxidant-antioxidant+balance+for+fuchs+endothelial+corneal+dystrophy%5BTitle%5D)+AND+%22Ocul+Surf%22%5BJournal%5D)">Evolution of therapeutic strategy based on oxidant-antioxidant balance for fuchs endothelial corneal dystrophy.</a> Ocul Surf. 34, 247-261 (2024).</li>
<li>Sekhon, A. S., He, B., Iovieno, A., Yeung, S. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathophysiology+of+corneal+endothelial+cell+loss+in+dry+eye+disease+and+other+inflammatory+ocular+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Ocul+Immunol+Inflamm%22%5BJournal%5D)">Pathophysiology of corneal endothelial cell loss in dry eye disease and other inflammatory ocular disorders.</a> Ocul Immunol Inflamm. 31 (1), 21-31 (2023).</li>
<li>Zuo, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Akr1c1+protects+corneal+epithelial+cells+against+oxidative+stress-mediated+ferroptosis+in+dry+eye%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthalmol+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">Akr1c1 protects corneal epithelial cells against oxidative stress-mediated ferroptosis in dry eye.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 63 (10), 3(2022).</li>
<li>Akdemir, M. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+pseudoexfoliation+and+pseudoexfoliation+induced+dry+eye+on+central+corneal+thickness%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">The effect of pseudoexfoliation and pseudoexfoliation induced dry eye on central corneal thickness.</a> Curr Eye Res. 41 (3), 305-310 (2016).</li>
<li>Delcroix, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lacrimal+gland+epithelial+cells+shape+immune+responses+through+the+modulation+of+inflammasomes+and+lipid+metabolism%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Lacrimal gland epithelial cells shape immune responses through the modulation of inflammasomes and lipid metabolism.</a> Int J Mol Sci. 24 (5), 4309(2023).</li>
<li>Portal, C., Gouyer, V., Gottrand, F., Desseyn, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ocular+mucins+in+dry+eye+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Ocular mucins in dry eye disease.</a> Exp Eye Res. 186, 107724(2019).</li>
<li>Doctor, M. B., Basu, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lacrimal+gland+insufficiency+in+aqueous+deficiency+dry+eye+disease%3A+Recent+advances+in+pathogenesis%2C+diagnosis%2C+and+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22Semin+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Lacrimal gland insufficiency in aqueous deficiency dry eye disease: Recent advances in pathogenesis, diagnosis, and treatment.</a> Semin Ophthalmol. 37 (7-8), 801-812 (2022).</li>
<li>Rocha, E. M., Alves, M., Rios, J. D., Dartt, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+aging+lacrimal+gland%3A+Changes+in+structure+and+function%5BTitle%5D)+AND+%22Ocul+Surf%22%5BJournal%5D)">The aging lacrimal gland: Changes in structure and function.</a> Ocul Surf. 6 (4), 162-174 (2008).</li>
<li>He, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lacrimal+gland+microenvironment+changes+after+obstruction+of+lacrimal+gland+ducts%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthalmol+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">Lacrimal gland microenvironment changes after obstruction of lacrimal gland ducts.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 63 (3), 15(2022).</li>
<li>Zoukhri, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms+involved+in+injury+and+repair+of+the+murine+lacrimal+gland%3A+Role+of+programmed+cell+death+and+mesenchymal+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Ocul+Surf%22%5BJournal%5D)">Mechanisms involved in injury and repair of the murine lacrimal gland: Role of programmed cell death and mesenchymal stem cells.</a> Ocul Surf. 8 (2), 60-69 (2010).</li>
<li>Li, W., Hayashida, Y., Chen, Y. T., Tseng, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Niche+regulation+of+corneal+epithelial+stem+cells+at+the+limbus%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Res%22%5BJournal%5D)">Niche regulation of corneal epithelial stem cells at the limbus.</a> Cell Res. 17 (1), 26-36 (2007).</li>
<li>Ou, S. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+ectodysplasin+a+on+the+ocular+surface+homeostasis%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">The role of ectodysplasin a on the ocular surface homeostasis.</a> Int J Mol Sci. 23 (24), 12(2022).</li>
<li>Rolando, M., Zierhut, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+ocular+surface+and+tear+film+and+their+dysfunction+in+dry+eye+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Surv+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">The ocular surface and tear film and their dysfunction in dry eye disease.</a> Surv Ophthalmol. 45 (Suppl 2), S203-S210 (2001).</li>
<li>Johnson, M. E., Murphy, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Changes+in+the+tear+film+and+ocular+surface+from+dry+eye+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Prog+Retin+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Changes in the tear film and ocular surface from dry eye syndrome.</a> Prog Retin Eye Res. 23 (4), 449-474 (2004).</li>
<li>Masoudi, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biochemistry+of+human+tear+film%3A+A+review%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Biochemistry of human tear film: A review.</a> Exp Eye Res. 220, 109101(2022).</li>
<li>Dartt, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neural+regulation+of+lacrimal+gland+secretory+processes%3A+Relevance+in+dry+eye+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Prog+Retin+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Neural regulation of lacrimal gland secretory processes: Relevance in dry eye diseases.</a> Prog Retin Eye Res. 28 (3), 155-177 (2009).</li>
<li>Garg, A., Zhang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lacrimal+gland+development%3A+From+signaling+interactions+to+regenerative+medicine%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Dyn%22%5BJournal%5D)">Lacrimal gland development: From signaling interactions to regenerative medicine.</a> Dev Dyn. 246 (12), 970-980 (2017).</li>
<li>Shinomiya, K., Ueta, M., Kinoshita, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+dry+eye+mouse+model+produced+by+exorbital+and+intraorbital+lacrimal+gland+excision%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">A new dry eye mouse model produced by exorbital and intraorbital lacrimal gland excision.</a> Sci Rep. 8 (1), 1483(2018).</li>
<li>Viau, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Time+course+of+ocular+surface+and+lacrimal+gland+changes+in+a+new+scopolamine-induced+dry+eye+model%5BTitle%5D)+AND+%22Graefes+Arch+Clin+Exp+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Time course of ocular surface and lacrimal gland changes in a new scopolamine-induced dry eye model.</a> Graefes Arch Clin Exp Ophthalmol. 246 (6), 857-867 (2008).</li>
<li>Burgalassi, S., Panichi, L., Chetoni, P., Saettone, M. F., Boldrini, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+a+simple+dry+eye+model+in+the+albino+rabbit+and+evaluation+of+some+tear+substitutes%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmic+Res%22%5BJournal%5D)">Development of a simple dry eye model in the albino rabbit and evaluation of some tear substitutes.</a> Ophthalmic Res. 31 (3), 229-235 (1999).</li>
<li>Lin, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+mouse+dry+eye+model+induced+by+topical+administration+of+benzalkonium+chloride%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Vis%22%5BJournal%5D)">A mouse dry eye model induced by topical administration of benzalkonium chloride.</a> Mol Vis. 17, 257-264 (2011).</li>
<li>Honkanen, R. A., Huang, L., Rigas, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+rabbit+model+of+aqueous-deficient+dry+eye+disease+induced+by+concanavalin+a+injection+into+the+lacrimal+glands%3A+Application+to+drug+efficacy+studies%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">A rabbit model of aqueous-deficient dry eye disease induced by concanavalin a injection into the lacrimal glands: Application to drug efficacy studies.</a> J Vis Exp. (155), e59631(2020).</li>
<li>Barabino, S., Dana, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+dry+eye%3A+A+critical+assessment+of+opportunities+and+limitations%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthalmol+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">Animal models of dry eye: A critical assessment of opportunities and limitations.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 45 (6), 1641-1646 (2004).</li>
<li>Wu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+su6668+pure+nanoparticle-based+eyedrops%3A+Toward+its+high+drug+accumulation+and+long-time+treatment+for+corneal+neovascularization%5BTitle%5D)+AND+%22J+Nanobiotechnol%22%5BJournal%5D)">A su6668 pure nanoparticle-based eyedrops: Toward its high drug accumulation and long-time treatment for corneal neovascularization.</a> J Nanobiotechnol. 22 (1), 14(2024).</li>
<li>Zhu, H. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+synergistic+therapy+with+antioxidant+and+anti-vegf%3A+Toward+its+safe+and+effective+elimination+for+corneal+neovascularization%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Healthc+Mater%22%5BJournal%5D)">A synergistic therapy with antioxidant and anti-vegf: Toward its safe and effective elimination for corneal neovascularization.</a> Adv Healthc Mater. 13 (5), 10(2024).</li>
<li>Mao, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Downregulation+of+p38+mapk+signaling+pathway+ameliorates+tissue-engineered+corneal+epithelium%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Eng+Part+A%22%5BJournal%5D)">Downregulation of p38 mapk signaling pathway ameliorates tissue-engineered corneal epithelium.</a> Tissue Eng Part A. 28 (23-24), 977-989 (2022).</li>
<li>Mcnamara, N. A., Gallup, M., Porco, T. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishing+pax6+as+a+biomarker+to+detect+early+loss+of+ocular+phenotype+in+human+patients+with+sjogren%27s+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthalmol+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">Establishing pax6 as a biomarker to detect early loss of ocular phenotype in human patients with sjogren's syndrome.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 55 (11), 7079-7084 (2014).</li>
<li>Thacker, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Benzalkonium+chloride-induced+dry+eye+disease+animal+models%3A+Current+understanding+and+potential+for+translational+research%5BTitle%5D)+AND+%22Indian+J+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Benzalkonium chloride-induced dry eye disease animal models: Current understanding and potential for translational research.</a> Indian J Ophthalmol. 71 (4), 1256-1262 (2023).</li>
<li>Singh, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developing+a+model+for+aqueous+deficient+dry+eye+secondary+to+periglandular+cicatrizing+conjunctivitis%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Developing a model for aqueous deficient dry eye secondary to periglandular cicatrizing conjunctivitis.</a> Exp Eye Res. 244, 109949(2024).</li>
<li>Singh, S., Sharma, S., Basu, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rabbit+models+of+dry+eye+disease%3A+Current+understanding+and+unmet+needs+for+translational+research%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Rabbit models of dry eye disease: Current understanding and unmet needs for translational research.</a> Exp Eye Res. 206, 108538(2021).</li>
</ol>

Yazarların açıklayacak herhangi bir çıkar çatışması yoktur.

Sulu yetmezlik kuru göz hastalığı koşulları altında oküler yüzeydeki değişiklikleri araştırmayı amaçlayan, hem ELG hem de ILG'yi cerrahi olarak eksize ederek aköz yetmezlik kuru göz hastalığının bir fare modelini başarıyla oluşturduk. ELG ve ILG'nin çift eksizyonundan kaynaklanan bu fare kuru göz modelinde gözlemlenen morfolojik ve fizyolojik değişiklikleri titizlikle belgeledik. Modellemeden iki hafta sonra, kuru gözün yerleşik fare modelini gözlemledik ve örnekledik. 
Sıcaklık, hava akış hız...

Göz kuruluğu, dünya çapında en yaygın oküler yüzey hastalığı haline gelmiştir ve nüfusun tahmini %5 ila %50'si hastalıktan muzdariptir1. Kuru gözün neden olduğu göz kuruluğu ve rahatsızlığı, devam ederse, görme bozukluklarına ve dengesiz gözyaşı filmlerine yol açarak oküler yüzey hasarına yol açabilir2. Göz kuruluğu olan bazı hastalarda kronik ağrı bile görülebilir2.
2017 TFOS DEWS II Kuru Göz Konsensüsü'ne göre göz kuruluğu, birden fazla faktörü içeren ve gözyaşı filminin doğal dengesinin bozulmasıyla karakterize edilen karmaşık bir durumdur. Bu duruma, hastalığın ilerlemesini anlamada çok önemli olan bir dizi oküler semptom, gözyaşı filminin instabilitesi, gözyaşı tabakasının artması, oküler yüzeyde iltihaplanma ve hasar ve nöropatik ağrı eşlik eder3. Bu geri besleme döngüsünde, kuru göz, kornea epitel hücrelerine zarar verebilir, kornea stromal kalınlığını ve endotel hücre yoğunluğunu azaltabilir, kornea yüzeyinde bağışıklık hücresi aktivasyonunu ve agregasyonunu tetikleyebilir, goblet hücreleri tarafından müsin salgılanmasını azaltabilir ve lakrimal bezde bağışıklık fonksiyon bozukluğuna neden olarak durumu daha da kötüleştirebilir4,5,6,7,8,9,10. Konsensüs, kuru göz sendromunun üç ana formunu tanımlar: sulu eksiklik kuru göz, evaporatif kuru göz ve karışık kuru göz3 olarak bilinen her ikisinin bir kombinasyonu. Sulu eksiklik kuru göz, lakrimal bezlerdeki yapısal ve fonksiyonel değişikliklerle ilişkilidir11. Bu değişiklikler arasında asiner atrofi, gözyaşı akışını engelleyen duktal oklüzyon, bir bağışıklık tepkisini gösteren lenfosit infiltrasyonu ve gözyaşı filminin sağlığını ve stabilitesini korumak için gerekli olan proteinlerin salgılanmasında azalma yer alır12,13.
Lakrimal bez, su, elektrolitler ve proteinler dahil olmak üzere gözyaşı filmi13,14'teki su bileşenlerinin üretiminden sorumlu olan ve oküler yüzey mikro ortamının stabilitesinin korunmasına katkıda bulunan boru şeklinde bir ekzokrin bezdir15,16. Gözün sağlığı ve görsel netliği, korneanın yüzeyinde kritik bir optik tabaka oluşturan ve korneanın ve konjonktivanın düzgün bir şekilde kayganlığını sağlayan gözyaşı filminin varlığına bağlıdır 17. Gözyaşı filmi, oküler yüzey hücrelerinin metabolik aktivitesini destekler ve göz yüzeyindeki kirleri ve potansiyel tahriş edici maddeleri etkili bir şekilde gidererek daha temiz bir işlev görür, böylece gözün fizyolojik dengesini ve rahatlığını korur18,19.
Sıçanlar ve fareler gibi kemirgenlerde, lakrimal bezler iki lobdan oluşur: iç ve dış orbital loblar. Dış orbital lob kulağın altında bulunur ve fonksiyonel kısmı göze uzatılmış bir kanal ile bağlanır. Bu kanal göze ulaşmadan önce yörüngede gözyaşı bezi lobu ile birleşir ve gözyaşı üretiminde görev alır20. İntraorbital lakrimal bez olarak da bilinen iç orbital lob, dış kantusun bulbar konjonktivasının altında bulunur. ILG, ELG'den daha küçüktür. Bozulmuş lakrimal bez fonksiyonu, tedavi edilmezse kornea ülserlerine ve görme kaybına ilerleyebilen sulu göz eksikliği kuru göz'e yol açabilir21.
Sulu eksiklik kuru gözünün hayvan modelleri üç müdahale yöntemine ayrılabilir: cerrahi indüksiyon modelleri, ilaca bağlı modeller ve transgenik modeller. Cerrahi indüksiyon modeli, ELG'nin çıkarılmasını içerir. Ancak, bu model ILG22'nin varlığı nedeniyle kararlı değildir. Kolinerjik reseptör bloker skopolaminin sistemik enjeksiyonu, ilaca bağlı model23'te yaygındır. Atropin24 ve benzalkonyum chloride25'in topikal uygulamaları da müsin ve gözyaşı salgısını azaltabilir. Concanavalin-A, immün lakrimal adenite neden olmak için tavşan lakrimal bezlerine lokal olarak enjekte edilebilir, böylece bir sulu eksiklik kuru göz26 modeli oluşturur. Ek olarak, NOD, Aly/aly, NFS/sld, IQI/Jic, Id3 KO ve diğer fare suşları gibi transgenik hayvanlar, sulu eksiklik kuru gözünü çoğaltmak için primer Sjögren sendromu27'nin semptomlarını ve fenotiplerini taklit edebilir.
Bu çalışmada, temel deney tasarımı, farenin ELG'sini ve ILG'sini ağrısız ve hassas bir şekilde çıkarmak için cerrahi bir prosedür içeriyordu. Bu gözyaşı bezleri, göz nemini ve yağlanmasını korumak için gereklidir; Bunların çıkarılması, farelerde sulu eksiklik kuru gözünü taklit ederek gözyaşı salgısında önemli bir azalmaya neden olur. Bu yaklaşım, kuru göz durumundaki fare davranışının, fizyolojik tepkilerin ve oküler doku değişikliklerinin gözlemlenmesine ve analizine olanak tanıyarak patoloji çalışmaları ve kuru göz hastalığı için tedavi seçeneklerinin değerlendirilmesi için önemli bir deneysel temel sağlar.

<table><tbody><tr><td>10 mL şırınga</td><td>Zhejiang KDL Medical Devices Co., Ltd. Çin</td><td></td><td></td></tr><tr><td>5-0 Sütür İğnesi</td><td>Suzhou 66 Vision Co., Ltd. Çin</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Mutlak etanol</td><td>Shanghai Sinopharm Chemical Reagent Co., Ltd., Çin</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Alexa Fluor 488, Eşek anti fare IgG</td><td>Invitrogen</td><td>811493</td><td></td></tr><tr><td>Alexa Fluor 594, Eşek anti tavşan IgG</td><td>Invitrojen</td><td>A21207</td><td></td></tr><tr><td>Anti-Keratin 12 antikoru EPR17882</td><td>Abcam</td><td>ab185627</td><td></td></tr><tr><td>Anti-PAX6 antikoru</td><td>Abcam</td><td>ab5790</td><td></td></tr><tr><td>Otoklav</td><td>Hirayama. Japonya</td><td></td><td></td></tr><tr><td>C57BL / 6 fare</td><td>Şangay Slack Laboratuvar Hayvan Co, Ltd</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Oda sıcaklığında santrifüj</td><td>Eppendorf. Almanya</td><td></td><td></td></tr><tr><td>ddH2O</td><td>Shanghai Bioengineering Co., Ltd. Çin</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Elektronik terazileri</td><td>Shanghai Auhaus Biotech Co., Ltd. Çin</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Floresan ters faz kontrast mikrografi sistemi</td><td>TE-2000U, Nikon. Japonya</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Kaseti dondurun</td><td>Jiangsu Shitai Experimental Equipment Co., Ltd. Çin</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Dilimleme bıçağını dondurun</td><td>Xiamen Taijing Biotechnology Co., Ltd. DAPI</td> montaj ortamı ile Çin <td></td><td></td></tr><tr><td>H-1200</td><td>Xiamen Juin Biotechnology Co., Ltd. DAPI</td> H-5000 Tablet Mountant Vector içeren Çin <td></td><td>montaj ortamı</td></tr><tr><td></td><td>. ABD</td><td></td><td>montaj ortamı</td></tr><tr><td>HCl</td><td>Shanghai Sinopharm Chemical Reagent Co., Ltd., Çin</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Hematoksilen-eozin leke kiti</td><td>Auragene. ABD</td><td></td><td></td></tr><tr><td>İyot</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Ki-67 antikoru</td><td>Abcam</td><td>ab16667</td><td></td></tr><tr><td>sıvı nitrojen</td><td>Xiamen Yidong Gas Co., Ltd. Çin</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Mikroskobik iğne tutucu</td><td>Suzhou 66 Vision Co., Ltd. Çin</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Mikroskobik dişli forseps</td><td>Suzhou 66 Vision Co., Ltd. Çin</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Mikroskobik dişsiz forseps</td><td>Suzhou 66 Vision Co., Ltd. Çin</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Model 3050 dondurulmuş dilimleyici</td><td>Leica, Deerfield, IL. ABD</td><td></td><td></td></tr><tr><td>EKIM</td><td>Şangay Maokang Biotechnology Co., Ltd. Çin</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Ofloksasin merhem</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Oftalmik sodyum floresein test şeritleri</td><td>Tianjin Jingming Yeni Teknoloji Geliştirme Co., Ltd. Çin</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Paraformaldehit tozu</td><td>Sigma. ABD</td><td></td><td></td></tr><tr><td>PBS</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Fenol kırmızı pamuk ipliği</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Hızlı sterilizatör sterilizatör</td><td>Suzhou 66 Vision Co., Ltd. Çin</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Rekombinant İnsan SPRR1b proteini & nbsp;</td><td>Abcam</td><td>ab167925</td><td></td></tr><tr><td>Soğutmalı masa üstü santrifüj</td><td>Eppendorf. Almanya</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sürgülü tutucular</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Yarık lamba</td><td>Topcon. Japonya</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Numune kutusu</td><td>Lambolide (Fuzhou) Biotechnology Co., Ltd. Çin</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Tert-Amil alkol</td><td>Şangay. Macklin Biochemical, Çin</td><td>A800283</td><td>500 mL</td></tr><tr><td>Tribromoetanol</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>Sigma. ABD</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Ultra düşük sıcaklık dondurucu</td><td>Thermo Fisher Scientific. ABD</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Dik floresan mikrografı</td><td>Leica DM2500. ABD</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Dik normal biyomikrografi sistemi</td><td>Eclipse 50i, Nikon. Japonya</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Ksilen</td><td>Shanghai Sinopharm Chemical Reagent Co., Ltd., Çin</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Zeiss Cerrahi Mikroskop</td><td>VISU150, Carl ZEISS. Almanya</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

sulu eksiklik kuru gözünün bir fare modelinin kurulması

Establishment of A Mouse Model of Aqueous Deficiency Dry Eye

Kuru göz hastalığı, küresel nüfusun %5-50'sini etkileyen yaygın bir durumdur. Hayvan modeli araştırmaları, altta yatan mekanizmaları anlamada çok önemli bir rol oynamaktadır. Bu nedenle, sulu eksiklik kuru göz bağlamında oküler yüzey patolojisini araştırmak için hem ekstraorbital lakrimal bezleri (ELG) hem de intraorbital lakrimal bezleri (ILG) cerrahi olarak çıkararak kuru göz hastalığının bir fare modelini geliştirdik. Ameliyattan iki hafta sonra, fareler azalmış gözyaşı salgısı, kornea epitel düzensizlikleri, pozitif floresein sodyum boyaması ve neovaskülarizasyon dahil olmak üzere ciddi kuru göz belirtileri sergiledi. Hematoksilen ve eozin boyama ile yapılan histolojik incelemede inflamatuar hücre infiltrasyonu ve kornea epitel displazisi saptandı. İmmünofloresan boyama ve kantitatif ters transkripsiyon polimeraz zincir reaksiyonu, normal kornea epitel biyobelirteçleri K12 ve Pax6'nın ekspresyonunun azaldığını ve kornea epitelinde Sprr1b'nin ekspresyonunun arttığını ortaya çıkardı. Bu oküler bulgular anormal kornea epitel farklılaşmasını gösterdi. Ayrıca, Ki67'nin immünofloresan boyaması, artan hücre proliferasyonunu ortaya çıkardı. Sonuç olarak, ELG ve ILG eksizyon modeli, oküler yüzeydeki değişiklikleri incelemek ve sulu eksiklik kuru gözünün altında yatan mekanizmaları aydınlatmak için uygun olduğunu kanıtladı.

Sulu eksikliği kaynaklı kuru gözün oküler yüzey üzerindeki etkilerini ve altında yatan mekanizmaları araştırmak amacıyla, hem ELG hem de ILG'nin cerrahi olarak çıkarılmasıyla bir sulu eksikliği kuru göz fare modeli oluşturduk (Şekil 1A). Gözyaşı bezi rezeksiyonundan sonraki 2 haftalık sürenin ardından, kuru göz (lakrimal bezlerin çıkarılmasından sonraki) farelerindeki gözyaşı salgısının normal gruba kıyasla belirgin şekilde azaldığı görüldü (Şekil 1B,C</...

Burada, ekstraorbital ve infraorbital lakrimal bezleri eksize ederek su eksikliği olan kuru gözün fare modelini oluşturmak ve su eksikliği olan kuru gözde oküler yüzeydeki değişiklikleri değerlendirmek için bir yöntem sunuyoruz.

Sulu Eksiklik Kuru Gözünün Bir Fare Modelinin Kurulması

Dry eye disease is a prevalent condition affecting 5%-50% of the global population. Animal model investigations play a crucial role in understanding its ...

establishment-of-a-mouse-model-of-aqueous-deficiency-dry-eye

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Bu video, sıçanlarda kronik deneysel otoimmün kuru göz hastalığını indüklemek için bir tekniği göstermektedir. Otoantijenler ve yabancı antijenler içeren bir antijen adjuvan emülsiyonun önceden tanımlanmış aralıklarla bir sıçana enjekte edilmesinin ardından, aynı antijenlerin oküler yüzey dokularına enjekte edilmesiyle bağışıklanmış sıçanda kronik göz iltihabı indüklenir.

Sıçanlarda Kronik Deneysel Otoimmün Kuru Gözü İndüklemek İçin Bir Teknik

Anestezi kullanmadan, emülsiyonu sıçan kuyruklarının tabanına deri altına enjekte edin. Daha sonra, 14. günde benzer şekilde, aynı antijenden 200 mikrolitre enjekte edin ve eksik Freund Adjuvanını enjekte edin. Aynı gün, intraperitoneal olarak 100 mikrolitre PBS'ye 300 nanogram boğmaca toksini enjekte edin.

Bu video, bir otoimmün sıçan modelinde kornea düzgünlüğünü ve gözyaşı filmi stabilitesini değerlendirmek için bir yöntem göstermektedir. Bez disfonksiyonunun, kuru göz hastalığını anlamak için çok önemli olan gözyaşı filmi stabilitesi üzerindeki etkisini vurgular.

Otoimmün Kuru Göz Sıçan Modelinde Kornea ve Gözyaşı Düzgünlüğünün Değerlendirilmesi

Bu rapor, sıçan lakrimal bez özütü, ovalbümin ve komple Freund adjuvantının bir emülsiyonu ile bağışıklaştırma yoluyla Lewis sıçanlarında kronik deneysel otoimmün göz kurumasına neden olan bir yöntem ve bunu takiben göz kapağı yumrusu ekstraktı ve ovalbümin forniceal subkonjonktiva ve lakrimal bezlere enjekte edilir. Altı hafta sonra.

Eyeball Dokusunda Efektif Hafıza T Hücrelerini Artıran Kronik Otoimmün Kuru Göz Fare Modeli

Bu makalede, orbital gözyaşı bezi sisteminin tüm bölümlerine konkain A enjekte ederek tavşanakut veya kronik kuru göz hastalığı neden bir yöntemin geliştirilmesi açıklanmaktadır. Bu yöntem, daha önce bildirilenlerden daha üstün, farmakolojik ajanların çalışması için uygun kuru göz tekrarlanabilir, istikrarlı bir model oluşturur.

Kıprimal Bezlere Concanavalin A Enjeksiyonu ile Indüklenen Sulu-Eksik Kuru Göz Hastalığının Tavşan Modeli: İlaç Etkinliği Çalışmalarına Uygulama

Yeni bir yaklaşım cerrahi tüm orbital gözyaşı bezleri kaldırarak tavşan kronik kuru göz hastalığı neden sunulmuştur. Bu yöntem, daha önce bildirilenfarklı, iyi gözyaşı fizyolojisi ve patofizyolojisi ve oküler terapötik çalışma için uygun sulu eksik kuru göz istikrarlı, tekrarlanabilir bir model üretir.

Tavşanlarda Komple Dakriyoadenektomi Kullanarak Şiddetli Kuru Göz Modelinin Oluşturulması

Burada, sulu eksikliği olan kuru göz çalışmasına bir temel sağlamak için bir sıçan lakrimal bez disfonksiyonu modeli oluşturuyoruz.

Skopolamin Kaynaklı Gözyaşı Bezi Disfonksiyonu Olan Bir Sıçan Kuru Göz Modeli

Kornea vasküler dokularda yoksun olduğunu eşsizdir. Ancak, güçlü bir anjiyojenik faktörler tarafından güçlü bir kan damarı büyümesi ve hayatta kalma kornea uyarılabilir. Bu nedenle, kornea bizimle anjiyogenik çalışmalar için değerli bir araç sağlayabilir. Bu protokol, kornea cep tahlil ve nasıl anjiyogenik faktörleri kullanarak bu model ile indüklenen anjiyogenez değerlendirmek için fare modeli gerçekleştirmek için nasıl kullanılacağını gösterir.

Anjiyogenez Çalışması Kornea Cep Testi Fare Modeli

Üriner sistem enfeksiyonlarını (İYE) modelleme yeteneği, bakteriyel patogenezi anlayabilmek ve yeni terapötiklerin geliştirilmesini sağlayabilmek için çok önemlidir. Bu çalışmanın amacı, insanlarda görülen bulguları özetleyen ve tahmin eden deneysel İYE ve kateterle ilişkili İYE'nin fare modellerini göstermektir.

Fare Modelinde Kuruluş ve İYE ve CAUTI Karakterizasyonu

Öğrenin, sulu eksiklik kuru göz sendromunun fare modelini oluşturmayı. Ekstraorbital ve infraorbital lakrimal bezlerin çıkarılmasıyla geliştirilen bu yöntem, Sjögren sendromu gibi şiddetli kuru göz hastalıklarını araştırmak için güvenilir bir temel sunar.

Sulu Eksiklik Kuru Gözünün Bir Fare Modelinin Kurulması

Daha fazla video keşfet