Farelerin Ultraviyole B Radyasyonuna Kronik Maruziyetinin İncelenmesi

Protokol, farelerde Ultraviyole B maruziyetinin sistemik ve lokal cilt etkilerinin bir çalışmasını açıklar.

Cildin düşük doz UVB radyasyonuna maruz kalmasının sistemik etkilerini, özellikle de eriteme neden olan seviyenin altındaki seviyeleri araştırıyoruz. Protokolümüz, düşük doz UVB maruziyetinin cilt üzerindeki doğrudan veya lokal etkilerin ötesinde sistemik etkilerinin anlaşılmasına izin verecektir. Yöntemimiz, eritem seviyelerinin altında UVB'ye kronik düşük dereceli maruziyeti yakından taklit eder. Böylece UVB'nin endojen etkilerini inceleyebiliyoruz.

[Anlatıcı] Başlamak için, anestezi uygulanmış fareyi çalışan bir platforma yerleştirin ve sırt bölgesinin% 50 ila 60'ını tıraş edin. Tüy dökücü krem kullanarak kürkü çıkardıktan sonra, fareyi kafes yataklı temiz, kuru bir kurtarma kafesine yerleştirin. Farenin ad libitum yiyecek ve su ile ev kafesinde dinlenmesine izin verin. Başlamak için, kişisel güvenliği sağlamak için uzun kollu bir gömlek, pantolon, laboratuvar önlüğü, kapalı ayakkabılar, çift eldiven ve yüz siperi giyin. Ultraviyole B ışınlamasını, 10 milimetrelik pleksiglas kapak indirilmiş ve koruyucu bir ekran yerinde olacak şekilde biyolojik bir başlık içinde gerçekleştirin. Ultraviyole B lambasını şeffaf pleksiglas hazneye yerleştirin. Ultraviyole B lambasını açın ve yoğunluk sabitlenene kadar çalışmasına izin verin. Ardından, yoğunluğu izlemek için bir Ultraviyole B ölçüm kafası ile donatılmış Ultraviyole X radyometreyi açın. Temizlenmiş pozlama odasını, ilgili ultraviyole veya sahte pozlamalar için ultraviyole lamba açık veya kapalıyken iki odacıklı şeffaf pleksiglas odanın içine yerleştirin. Fareyi istenen Ultraviyole B yoğunluğuna maruz bırakmak için gereken süreyi belirlemek için bir hesap makinesi kullanın. İstenilen pozlama süresi için fareyi ev kafesinden pozlama odasına aktarın. Fareyi, alt eritemik bir doz olan santimetre kare başına 50 milijoule'lük bir Ultraviyole B dozuna maruz bırakın. Radyasyon verimliliğini doğrulamak için, bir dermal spektrofotometre kullanarak kulak ve kuyruk pigmentasyonunu ölçün. Taban çizgisini temiz, düz beyaz kağıtla ayarlayarak spektrofotometre cihazını kalibre edin. Kalibrasyon tamamlandıktan sonra, ölçüm sensörünü farenin kulağına veya kuyruğuna yerleştirin ve melanin yoğunluğu okumalarını kaydedin. Kontrollere kıyasla dört hafta boyunca Ultraviyole B radyasyonuna maruz kalan hem erkek hem de dişi farelerde melanin seviyelerinde kademeli ve önemli artışlar gözlendi ve bu da cilt pigmentasyonunun başarılı bir şekilde indüklendiğini doğruladı.