Name: Nöral Kök Hücre Motilite değerlendirilmesi Agaroz Jel tabanlı mikroakışkan Cihaz Kullanımı (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2008-02-11T02:20:00.000+00:00
Duration: 12 min 55 s
Description: Öğrenin agaroz jel tabanlı mikroakışkan cihaz kullanarak nöral kök hücre motilite değerlendirmesini. Bu yöntem EGF'nin hücre hareketliliği üzerindeki etkisini inceleyerek rejeneratif tıpta yeni uygulamalar sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu çalışma, New York Eyaleti Office Bilim, Teknoloji ve Akademik Araştırma (NYSTAR) (form, İleri Teknoloji hibe Merkezi), ve Nanobiyoteknoloji Merkezi (NBTC) Ulusal bir STC Programı hibeleri ile desteklenen Anlaşması No ECS-9876771 altında Bilim Vakfı ve Amerikan Beyin Tümörü Derneği ve New York Tıp Akademisi (JAB).

Prosedür Fibronektin ile slaytları Kaplama Mikroakışkan cihaz montajı için, önce cam slaytlar fibronektin ile sterilize edin. Coat bir biohood slaytlar kısırlık korumak için. Steril bir PDMS ayırıcı slayt kenarları boyunca hizalayın ve kalıcı bir belirteç ile karşı karşıya yan işareti. Pipet cam slayt bütünlüğü üzerinde PDMS ayırıcı içinde fibronektin bir 5 mg / ml solüsyon (Sigma) 1 ml. Bir saat boyunca rahatsız slaytlar bırakın, daha sonra tamamen bir N 2 tabancası kullanarak kurutun. Slaytlar, daha sonraki deneyler için 4 o C&#39;de saklanabilir. Cihazın montajı Tüm cihaz montaj protokolü aşağıdaki yordamları kullanarak, steril koşullar altında biohood yapılır: <ol><li> % 70 etanol ile aşağı silme ve N 2 tabanca ile kurutma desenli mikro silikon ana temizleyin. Steril bir PDMS ayırıcı ana kabartma özellikleri çevresinde forseps kullanılarak 1 mm yüksekliğe yerleştirin. </li><li> Agaroz toz 0.3 g (Fisher Scientific) ve 10 ml CO ağırlığındaki cihaz kullanılan agaroz jel hazırlayın 2 50 ml beher bağımsız medya (Invitrogen). YÜKSEK 20 saniyelik bir mikrodalga ısı ve spatula ile karışımı karıştırınız. Çözünmemiş granül varsa, başka bir 10 saniye ve girdap kalan son granül kurtulmak için sıcak karışım karışım ısı. 8 saniyelik bir ısıtma süresi ile bu işlemi tekrarlayın ve sonra 5 saniye. </li><li> Agaroz çözümü hızla PDMS ayırıcı çevrili silikon ana üzerine dökün ve hemen steril bir cam slayt agaroz karışımı kapsayacak. Sağlamak için yaklaşık 2 dakika için slayt bir sabit, hafif basınç uygulayın agaroz jel PDMS ayırıcı olarak aynı sabit 1 mm yükseklik. </li><li> Agaroz jeller sonra, desenli agaroz jel silikon master ve slayt karşı karşıya agaroz jel mikro fibronektin kaplı cam slayt transfer PDMS ayırıcı ile soyulabilir. Rezervuar bölgeye giriş ve çıkış kere mikro delikler 16 gauge enjektör ucu kullanın. 500 ul CO 2 bağımsız medya, mikro kuruma önlemek için slayt desenli agaroz jel ekleyin . </li><li> Cihazda kullanılan akrilik manifoldu% 70 etanol ile yıkayın ve DI su ile durulayın. Agaroz jel içine mikro delikli delikli manifoldu deliklerini. Daha sonra, jel, PDMS ayırıcı ve cihazın metal çerçeve ile fibronektin slayt manifoldu hizalayın. Cihazın içine, vidalarını yerleştirin ve bir tornavida ile direnç noktasına sıkın. Bu cihaz, deforme agaroz mikro ölçüde fazla sıkılmazsa olduğunu sağlamak için yapılır. Cihazın içinde jel kayma olmadığından emin olmak için bir saat sipariş vidalarını sıkın. 1ml bir şırınga yardımıyla mikro sızıntı ve tıkanıklıkları için cihaz test edin. CO 2-bağımsız medya mikro enjekte etmek için şırınga, boru sonunda bir jel yükleme pipet ile Tygon boru ile donatılmıştır . Bir Mikrokanallı medya, medya ilgili girişine enjekte edildiğinde sadece Mikrokanallı çıkış çıkmak için görülmektedir başarıyla oluşmuş sayılır. Şimdi, cihaz kullanıma hazırdır. </li></ol> Cihaz hücrelerin hazırlanması ve Yayımlamak Hücreleri (hücre yoğunluğu yaklaşık 100.000 hücre / ml)% 70 confluency ulaştığında, cihazın içine numaralı seribaşı olarak hazırlanır. Hücrelerin iki DPBS Konu (Invitrogen) yıkar. Hücreleri ayırmak için tripsin-EDTA (Invitrogen) 200 ul ekleyin. Hücreler, tripsin inaktive içeren serum M2 medya 5ml içeren 15 ml santrifüj tüpüne aktarın. 5 dakika için 1000 RPM hücrelerin büyüme ortamı Santrifüj. Süpernatantı kapalı aspire ve hücre pelet DPBS 5 ml tekrar süspansiyon haline getirin. Aynı koşullar altında tekrar DPBS hücreleri santrifüjleyin. Süpernatant tekrar kapalı aspire ve 500 ul CO 2 bağımsız medya hücre pelletini tekrar süspansiyon haline getirin. Yerçekimine bağlı akış ile cihazın Mikrokanallı merkezi haline Tohum hücrelerinin süspansiyon. Sırasıyla, hücre süspansiyonu 60 ul ve CO 2 bağımsız orta 20 ul Mikrokanallı merkezinin giriş ve çıkış ekleyin. Hücre adezyon bakmak için bir aydınlık alan mikroskobu altında Mikrokanallı merkezi uyun. Hücreler genellikle 10 dakika sonra yapışır. Hücreleri, uygun bir yoğunlukta kanal alt bağlı kalan hücre süspansiyonu giriş ve çıkışında medya pipeted. Merkezi kanal giriş ve çıkış hem de CO Yeri 60 ul 2-bağımsız medya. Yeri PDMS th üzerinde kapsare merkezine giriş ve çıkış medya merkezi kanal buharlaşmasını en aza indirmek için. Görüntüleme cihaz hücreleri Önce cihazın montajı, mikroskop (Olympus X81) üzerinden hava istasyonu, steril peristaltik boru iplik ve peristaltik pompa (Watson-Marlow 205U/CA) ile bağlanmak. PBS 4 RPM hızında boru ile yıkayın. Cihazın montajı sonra, 15 ml santrifüj tüplerine CO 2 bağımsız medya epidermal büyüme faktörü (EGF) (Sigma) çözümleri, uygun konsantrasyonda hazırlar . Vortex EGF çözümleri ve 5 saniye boyunca tüp bağlanabilir. Cihaza karşılık gelen EGF konsantrasyonları ile işaretlenmiş borulama bağlayın. EGF kanal sırt çapında yaygın ve istikrarlı bir kimyasal degrade kurmak için yaklaşık bir saat sürer. Bir görüntüleme yazılımı, Slidebook, deneysel bir dönemde yaklaşık 5 saat boyunca her 10 dakikada bir dizi görüntü almak için kullanılır. Xy otomatik sahne programlanmış Aynı merkez kanal ve üç merkezi kanallarının toplam iki alt-alanlar (400μm x400μm bir alana sahip her) belirli bir zaman noktasında görüntülü böyle. Farklı merkezi kanalları (genellikle 3 bir vadede) hücreler, tüp üzerinde işaretli farklı EGF konsantrasyonları var. Malzemeleri ve Ekipmanları Postnatal fare beyincik 6, 7 dış germinal tabakadan elde edilen hücre hatları: C17.2 hücreleri NSC&#39;lerde . Bu hücre hattı kullanarak, retrovirüs transfeksiyon yöntemi kullanarak diğer iki fare kök hücre hatları geliştirdik. Bu iki stably transfekte hücre hatları (1) wtEGFR - insan vahşi tip EGFR aşırı ifade ettiğini ve (2) ΔEGFR - yapısal olarak aktif EGFR mutant. Algılama kolaylığı için, retrovirüsler ribozomal bağlanma (IRES) ve Yeşil floresan proteini (GFP) için dahili bir site tarafından takip çıkarlarını gen ile bir omurga taşır. Hücre kültürü: fare C17.2 NSC&#39;lerde ve bunların varyantları M2 medyada 6 plaka (% 10 fetal sığır serumu (FBS) (Invitrogen),% 5 at serumu (HS) (Invitrogen DMEM (Invitrogen) yetiştirilen ) ve% 1 penisilin / streptomisin (Invitrogen).) Hücreler% 80 hava ve% 5 CO 2, 37 ° C&#39;de tutuldu . Mikroakışkan cihaz: Bir plastik manifoldu, PDMS ayırıcı, ve paslanmaz cihazı yerinde tutmak için bir çerçeve. Görüntüleme Ters bir floresan mikroskobu (Olympus IX-81) yoğun bir CCD kamera (Orca, Hamamatsu) ile bağlantılı olarak kullanılır. Mikroakışkan cihaz otomatik bir xyz sahne üzerine monte edilmiştir ve sahne 37 o C lik bir sıcaklık koruyan bir çevre odası tarafından içine Genellikle otomatik xyz sahne kullanarak aynı zamanda noktada filme olacak aynı çip üzerinde 3-4 cihazlar vardır. Korumak Akış 8 paralel çizgiler (Watson-Marlow 205U/CA) otomatik bir peristaltik pompa, lavabo ve kaynak kanallarının tüm akışını korumak için kullanılır. <img src="/files/ftp_upload/old/674_2008_9_29_6/674_Figure-01.jpg" alt="Şekil 1" width="573" height="414" /> Şekil Üç MGK suşlarının çeşitli EGF konsantrasyonlarda 1 Motilite (ebeveyn, wtEGFR ve D EGFR) yörüngeleri 5 saat film izleme (wtEGF 100ng/ml, 4hour hariç) alınan ve tüm parçaları kökeni. karşılaştırma amacı için (0,0) repositioned. <img src="/files/ftp_upload/old/674_2008_9_29_7/674_Figure-02.jpg" alt="Şekil 2" width="576" height="546" /> Şekil EGFR ekspresyon seviyesi ve motilite (a) iki görüntü wtEGF NSC&#39;lerde 100ng/ml EGF ile mikroakışkan kanal yüzeyinde 2 Korelasyon. Sol görüntü floresan görüntü ve doğru iletilen bir aydınlık alana görüntü. Ölçekleme çubuğu 100μm ve Kanal genişliği 400 mm. Hücreler ifade GFP parlaklık iki popülasyonun ayrılır. Hücreler mavi daireler sönük, böylece daha az EGFR ekspresyon seviyesi var ve kırmızı daireler hücrelerin brigher, böylece daha yüksek EGFR ekspresyon seviyesi var. (B) düşük ve yüksek EGFR ekspresyon seviyesi ile hücreler Yörüngeler. Bu yörüngeleri dört saat süren bir film alınmıştır .

<ol><li>Blow, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microfluidics%3A+in+search+of+a+killer+application%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Methods%22%5BJournal%5D)">Microfluidics: in search of a killer application.</a> Nature Methods. 4, 665-670 (2007).</li>
<li>Shing-Yi Cheng, S. H., Wassweman, M. ax, Archer, S. hivaun, Shuler, M. ichael L., Wu, M. ingming <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+hydrogel-based+microfluidic+device+for+the+studies+of+directed+cell+migration%5BTitle%5D)+AND+%22Lab-on-a-chip%22%5BJournal%5D)">A hydrogel-based microfluidic device for the studies of directed cell migration.</a> Lab-on-a-chip. 7, 763-769 (2007).</li>
<li>Pedersen, M. W., Tkach, V., Pedersen, N., Berezin, V., Poulsen, H. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expression+of+a+naturally+occurring+constitutively+active+variant+of+the+epidermal+growth+factor+receptor+in+mouse+fibroblasts+increases+motility%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Cancer%22%5BJournal%5D)">Expression of a naturally occurring constitutively active variant of the epidermal growth factor receptor in mouse fibroblasts increases motility.</a> Int J Cancer. 108, 643-653 (2004).</li>
<li>Ayuso-Sacido, A., Graham, C., Greenfield, J. P., Boockvar, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+duality+of+EGFR+signaling+and+neural+stem+cell+phenotype%3A+Cell+enhancer+or+cell+transformer%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Stem+Cell+Research+and+Therapy%22%5BJournal%5D)">The duality of EGFR signaling and neural stem cell phenotype: Cell enhancer or cell transformer.</a> Current Stem Cell Research and Therapy. 1, 231-238 (2006).</li>
<li>Eisenbach, M., Constantinou, C., Aloni, H., Shinitzky, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Repellents+for+Escherichia+coli+operate+neither+by+changing+membrane+fluidity+nor+by+being+sensed+by+periplasmic+receptors+during+chemotaxis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Bacteriol%22%5BJournal%5D)">Repellents for Escherichia coli operate neither by changing membrane fluidity nor by being sensed by periplasmic receptors during chemotaxis.</a> J Bacteriol. 172, 5218-5224 (1990).</li>
<li>Snyder, E. Y., Deitcher, D. L., Walsh, C., Arnold-Aldea, S., Hartwieg, E. A., Cepko, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multipotent+neural+cell+lines+can+engraft+and+participate+in+development+of+mouse+cerebellum%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Multipotent neural cell lines can engraft and participate in development of mouse cerebellum.</a> Cell. 68, 33-51 (1992).</li>
<li>Snyder, E. Y., Yoon, C., Flax, J. D., Macklis, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multipotent+neural+precursors+can+differentiate+toward+replacement+of+neurons+undergoing+targeted+apoptotic+degeneration+in+adult+mouse+neocortex%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Multipotent neural precursors can differentiate toward replacement of neurons undergoing targeted apoptotic degeneration in adult mouse neocortex.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 94, 11663-11668 (1997).</li>
</ol>

Şekil 1 üç MGK suşları, ebeveyn hücreler, wtEGFR ve ΔEGFR (kontrol) yörüngeleri gösterir. Yörüngeleri Her set 5 saat uzunluğunda bir film elde edildi. EGF konsantrasyonu ~ 10 ng ebeveyn hücreler için, hücre motilitesi doruğa ulaştı; wtEGFR hücrelerin, hücre motilite zirve 100ng/ml veya üzeri kaymıştır; beklendiği gibi ΔEGFR hücrelerin, hücre motilite EGF konsantrasyon bağımsız oldu. 100ng/ml wtEGF hücreleri en hareketli hücreler, yaklaşık 1,5 kat, 10 ng ile ebeveyn hücrelerden daha hızlı taşındı. (1) EGFR ekspresyonu üzerinde hücre ...

<table><tbody><tr><td>Dulbecco&amp;rsquo;s Modifiye Eagle Besiyeri (DMEM) (1X)</td><td>Reaktif</td><td>Invitrogen</td><td>11971-025</td><td></td></tr><tr><td>CO2-bağımsız besiyeri</td><td>Reaktif</td><td>Invitrogen</td><td>18045-088</td><td>Atmosferik koşullarda çeşitli epitel, fibroblast ve lenfoid hücre hatlarının büyümesini desteklemek için uygun, HEPES içermeyen tescilli bir besiyeri, L-glutamin içermez</td></tr><tr><td>Trypsin-EDTA</td><td>Reaktif</td><td>Invitrogen</td><td>25200-072</td><td></td></tr><tr><td>PBS</td><td>Reaktif</td><td>Invitrogen</td><td>14190-144</td><td>Fosfat tamponlu salin, kalsiyum veya magnezyum içermez</td></tr><tr><td>Pen/Strep</td><td>Reaktif</td><td>Invitrogen</td><td>15140-122</td><td>%0,85'lik salin içinde penisilin G (sodyum tuzu) ve streptomisin sülfat kullanılarak hazırlanan, ml başına 10.000 ünite penisilin (baz) ve 10.000 g streptomisin (baz) içerir</td></tr><tr><td>FBS</td><td>Reaktif</td><td>Invitrogen</td><td>10437-028</td><td>Fetal Bovine Serum (FBS), Kalifiye</td></tr><tr><td>At Serumu</td><td>Reaktif</td><td>Invitrogen</td><td>16050-130</td><td>At Serumu, EIA testli (negatif) serum</td></tr><tr><td>Fibronektin</td><td>Reaktif</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>F0895</td><td>İnsan plazmasından elde edilen fibronektin, soğuk çözünmez globulin olarak da adlandırılır</td></tr><tr><td>EGF</td><td>Reaktif</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>E4127</td><td>Fare submaxiller bezinden elde edilmiş Epidermal Büyüme Faktörü, liyofilize</td></tr><tr><td>Agaroz</td><td>Reaktif</td><td>Fisher Scientific</td><td>BP1356-500</td><td></td></tr></tbody></table>

nöral kök hücre motilite değerlendirilmesi agaroz jel tabanlı mikroakışkan cihaz kullanımı

Assessing Neural Stem Cell Motility Using an Agarose Gel-based Microfluidic Device

Mikroakışkan teknolojisi makromoleküler deneyleri için yeni bir olgunluk seviyesine ulaşırken, hücre tabanlı deneyleri, hala bir bebek evre 1 . Bu bir hücre uyumlu ve istikrarlı bir mikroçevresinin geleneksel imalat teknikleri ve malzemeleri kullanarak oluşturabilirsiniz zorluk büyük ölçüde. Mikroakışkan cihaz için temel malzemesi olarak, bir roman mikroimalat malzeme, agaroz jel giriş ile bu sorunu çözmek. Agaroz jel, hücre tabanlı deneyleri için ideal bir malzemedir bu nedenle son derece uysal ve gaz geçirgen ve hücrenin hayatta kalabilmesi için gerekli besin ve. Agaroz jel tabanlı cihazlar bakteriyel ve nötrofil hücre göçü 2 okuyan başarılı olduğunu daha önce göstermiştir. Bu raporda, üç paralel mikroakışkan kanalları hakkında 1mm kalınlığında bir agaroz jel membran desenli. Medya / tampon Sabit akımları peristaltik bir pompa kullanarak her iki yan kanallar tutulur. Hücreler için gözlem merkezi kanal tutulur. Yan kanallar besin ve kimyasal madde yandan merkezi kanal, merkezi kanal kimyasal ortamı sürekli difüzyon olduğundan, yan kanallar boyunca akışını kolayca üzerinden kontrol edilir. Bu cihazı kullanırken, biz nöral kök hücre hareketi ile optik çeşitli kimyasal şartlar altında kolay takip edilebilir göstermek ve deney sonuçları, epidermal büyüme faktörü reseptörleri (EGFR) aşırı ifade, sinir kök hücrelerin motilite artırdığını göstermektedir. Nöral kök hücrelerin Motilite, böylece tümörojenik faktörü 3 hücreleri saldırganlık değerlendirmek için önemli bir biyomarker. MGK motilite altında yatan mekanizma Deşifre her iki nöral gelişim bozuklukları ve beyin kanseri kök hücre invazyonu içine içine fikir verecektir.

Biz yeni bir agaroz jel tabanlı mikroakışkan cihaz kullanarak nöral kök hücreler (NSC&#39;lerde) motilite epidermal büyüme faktörü reseptörleri (EGFR) aşırı ifade artırdığını göstermektedir. Bu teknoloji, insan sinir kök hücreleri gibi hücre kaynakları kıt olan diğer memeli hücre sistemleri, kolayca adapte olabilir ve zaman etrafında dönüş kritik öneme sahiptir.

Nöral Kök Hücre Motilite değerlendirilmesi Agaroz Jel tabanlı mikroakışkan Cihaz Kullanımı

Mikroakışkan teknoloji makromoleküler analizler için yeni bir olgunluk seviyesine ulaşırken, hücre tabanlı analizler henüz başlangıç aşamasındadır1. Bu durum...

Merhaba, ben Kevin Won. Cornell Üniversitesi Biofluids Laboratuvarı'nda mühendislik yüksek lisans öğrencisiyim. Bugün, EGF epidermal büyüme faktörünün murine nöral kök hücreler üzerindeki etkisini incelemek için agaroz tabanlı bir mikroakışkan cihazın kullanımı hakkında konuşacağım.Cihaz temel olarak, her biri 150 mikron genişliğinde olan üç mikroakışkan kanaldan oluşmaktadır. EGF yan kanallardan birine, tampon çözelti ise diğer yan kanala pompalanır. Bu düzenek, temel olarak merkez kanal boyunca statik lineer bir kimyasal gradyan oluşturur.EGF agro jel içerisinde kolayca difüze olduğu için, nöron kök hücreleri merkez kanala ekilir ve göçlerinin ilerleyişi bir mikroskop aracılığıyla izlenir. Böylece cihazlar temel olarak, tübülere bağlanmak için tüm giriş ve çıkışların bulunduğu pleksiglas bir üst katmandan oluşur. Bunun altında ise içinde dört desenli cihaz bulunan bir agro jel membran yer alır.Bu alan, tüm cihaz boyunca sabit bir kalınlık elde etmemizi garanti eden bir PDMS ara parçası ile çevrelenmiştir. PDMS ve jel, ect ile kaplanmış bir lam üzerine monte edilir. Bu işlem, hücrelerin lam yüzeyine tutunmasına yardımcı olur.Ek olarak, tüm düzeneği monte etmek için paslanmaz çelik

assessing-neural-stem-cell-motility-using-an-agarose-gel-based

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Kanser kök hücre göçü araştırılması için bir bölme oluşturan mikroakışkan cihaz tarif edilmektedir. Bu yeni platform canlı hücresel mikroçevrede oluşturur ve canlı hücre lokomosyon mikroskobik görselleştirme sağlar. Son derece hareketli kanser hücrelerinin potansiyel olarak daha etkin gelecekteki tedaviler neden agresif infiltrasyon moleküler mekanizmaları, çalışma izole edilmiştir.

Bölümlere Mikroakışkan Cihazlar ve Canlı Hücre Görüntüleme kullanma Kanser Kök Hücre Göç Değerlendirilmesi

Bu protokolü biz galvanotaksis sırasında nöral prekürsör hücre translokasyon edilen erişkin beyninin time-lapse görüntüleme sağlamak için bir doğru akım elektrik alanın uygulanmasına izin özel odaları oluşturmak nasıl gösterilmektedir.

Dıştan Uygulanan Doğru Akım Elektrik Alanında Nöral Prekürsör Hücre Göç Kinetik Analizi için galvanotaksis Assay

Kaynak: Scheidweiler, D. ve diğerleri. Akışkan Cihazların Mikroskopi ve Akış Sitometrisi ile Birleştirilerek Gözenekli Ortamlarda Mikrobiyal Taşınımı Mekansal Ölçeklerde İncelemek. J. Vis. Exp. (2020).Bu video, rastgele düzenlenmiş sütunlardan oluşan gözenekli bir matriks aracılığıyla bakteri hareketliliğini ölçmek için mikrofluidik bir cihazın kullanıldığını gösteriyor. Fluoresan etiketli bakteriler cihaza dahil edilir, gözenekli matriksin içinden gözlem kanalına ilerlerken mikroskopi ile...

Mikrofluidik Cihaz Kullanarak Bakteriyel Hareketliliğin Değerlendirilmesi

Bu video, mikroskobik analiz yoluyla nöral öncü hücre nörosfer göç testini (nörosferden nöral öncü hücrelerin göç tepkisini incelemek için bir in vitro test) göstermektedir.

NPC Nörosfer Testi: Nörosferden Nöral Öncü Hücrelerin Göç Tepkisini Değerlendirmek İçin Bir İn Vitro Test

Çeşitli büyüme faktörlerinin varlığında enterik nöral tepe hücre göçü potansiyelinin hassas miktar tayinine izin veren bir ex vivo hücre göçü deneyi mevcut.

Kemirgen Enterik Sinir progenitörlerin için Kantitatif Hücre Göç Tahlili

Burada, kantitatif geçiş ve zamanla ve birden fazla tedavi koşullar altında işgal glioblastoma Beyin tümör kök hücrelerin ölçmek için canlı hücre görüntüleme teknikleri açıklar.

Canlı hücre görüntüleme deneyleri için çalışma Glioblastoma Beyin tümör kök hücre göç ve işgali

Mekanik kuvvetler hücre göçlerini kontrol etmek için önemlidir. Bu protokol, hücre yapısı ve göç değişiklikleri ortaya çıkarmak için yerel bir sertlik gradyan ile hücreleri uyarmak için bir cam mikropipette ve bir mikromanipülatör kullanılarak deforme edilebilir elastik hidrojellerin kullanımını göstermektedir.

Hücresel Hareketin Mekanik Kontrolünün Ve İlgili Sinyal Olaylarının Değerlendirilmesi için Tek Hücreli Durotaksis Tsay

Biz üç basit in vitro tahliller-uzun mesafe göç tahlil, co-kültür göç tahlil ve kemo-attraction tahlil-topluca insan kök hücre perisiyitli endotel hücreleri ve bunların işlevlerini değerlendirmek GABAerjik internöronlar ile etkileşim.

Göç, Kemo-Attraction, ve Co-Kültür Tahliller İnsan Kök Hücre Kaynaklı Endotel Hücreleri ve GABAerjik Nöronlar için

fonksiyonel olarak aktif nöromüsküler kavşakların oluşumuyla sonuçlanan insan primer mezoangioblast türevli miyotüplerle birlikte insan kaynaklı pluripotent kök hücre türevi motor nöronları birlikte kült haline getirmekle ticari olarak mevcut mikroakışkan cihazlarda insan motor üniteleri üretmek için bir yöntem açıklıyoruz.

Mikroakışkan Cihazlarda Fonksiyonel Nöromüsküler Kavşaklara Sahip İnsan Motor Ünitelerinin Üretimi

Bu çalışma, iki boyutlu (2D) çizik yara migrasyon testini ve üç boyutlu (3D) küresel filizlenme testini, RNA ekstraksiyonu ve immünositokimya dahil olmak üzere ilgili aşağı akış analiz yöntemleriyle birlikte, in vitro anjiyogenezi incelemek için uygun testler olarak sunmaktadır.

Çizik Yara Migrasyon Testi ve Sferoid Filizlenme Testinden Yararlanarak Anjiyogenezin Fonksiyonel ve Moleküler Düzeyde İncelenmesi

Granül hidrojellerin arayüzü içinde ve içine 3D hücre göçünün kantitatif değerlendirmesi için bir protokol burada sunulmaktadır.

Granül Hidrojel Biyomalzemeler İçinde ve İçine Üç Boyutlu Hücre Migrasyonunun Ölçülmesi

Öğrenin agaroz jel tabanlı mikroakışkan cihaz kullanarak nöral kök hücre motilite değerlendirmesini. Bu yöntem EGF'nin hücre hareketliliği üzerindeki etkisini inceleyerek rejeneratif tıpta yeni uygulamalar sunar.

Nöral Kök Hücre Motilite değerlendirilmesi Agaroz Jel tabanlı mikroakışkan Cihaz Kullanımı

Daha fazla video keşfet