Name: Döngü Yöntemini Kullanarak Klinik Araştırmalar için Karbon-11 Radyoligandlarının Verimliliğini ve Radyoetiketleme Verimlerini Artırma (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-12-20T14:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 8 s
Description: Keşfedin, döngü yöntemiyle karbon-11 radyoligand sentezini optimize ederek PET görüntüleme için radyokimyasal verimliliği artırma. Bu yöntem, üretim süresini kısaltır ve molar aktiviteyi yükseltir.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<meta charset="utf8"></head><body>Döngü Yöntemi Metilasyonu Kullanılarak Karbon-11 Radyoizleyicilerin Verimli Sentezi

<ol><li>Bailey, D. L., Townsend, D. W., Valk, P. E., Maisey, M. N. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBailey%2C+DL+%22Positron+emission+tomography%3A+Basic+sciences%22">Positron emission tomography: Basic sciences</a>. , Springer. 223-231 (2005).</li>
<li>Berger, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((How+does+it+work%3F+Positron+emission+tomography%5BTitle%5D)+AND+%22BMJ%22%5BJournal%5D)">How does it work? Positron emission tomography.</a> BMJ. 326 (7404), 1449(2003).</li>
<li>Seeram, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Computed+tomography%3A+A+technical+review%5BTitle%5D)+AND+%22Radiol+Technol%22%5BJournal%5D)">Computed tomography: A technical review.</a> Radiol Technol. 89 (3), 279CT-302CT (2018).</li>
<li>Grover, V. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Magnetic+resonance+imaging%3A+Principles+and+techniques%3A+Lessons+for+clinicians%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Exp+Hepatol%22%5BJournal%5D)">Magnetic resonance imaging: Principles and techniques: Lessons for clinicians.</a> J Clin Exp Hepatol. 5 (3), 246-255 (2015).</li>
<li>Rowe, S. P. P., Martin, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+imaging+in+oncology%3A+Current+impact+and+future+directions%5BTitle%5D)+AND+%22CA+Cancer+J+Clin%22%5BJournal%5D)">Molecular imaging in oncology: Current impact and future directions.</a> CA Cancer J Clin. 72 (4), 333-352 (2022).</li>
<li>Ziessman, H. A., O'Malley, J. P., Thrall, J. H. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aZiessman%2C+HA+%22Nuclear+medicine%3A+The+requisites%22">Nuclear medicine: The requisites</a>. , Fourth edn, Saunders. (2014).</li>
<li>Cochran, B. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Determining+glucose+metabolism+kinetics+using+18F-FDG+micro-PET%2FCT%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Determining glucose metabolism kinetics using 18F-FDG micro-PET/CT.</a> J Vis Exp. (123), e55184(2017).</li>
<li>Pantel, A. R., Bae, S. -W., Li, E. J., O′Brien, S. R., Manning, H. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PET+imaging+of+metabolism%2C+perfusion%2C+and+hypoxia%3A+FDG+and+beyond%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+J.+%28Philadelphia%2C+PA%2C+U.+S.%29%22%5BJournal%5D)">PET imaging of metabolism, perfusion, and hypoxia: FDG and beyond.</a> Cancer J. (Philadelphia, PA, U. S.). 30 (3), 159-169 (2024).</li>
<li>Hansen, J. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mapping+neurotransmitter+systems+to+the+structural+and+functional+organization+of+the+human+neocortex%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Mapping neurotransmitter systems to the structural and functional organization of the human neocortex.</a> Nat Neurosci. 25 (11), 1569-1581 (2022).</li>
<li>Valenta, I. S., Thomas, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PET-determined+myocardial+perfusion+and+flow+in+coronary+artery+disease+characterization%5BTitle%5D)+AND+%22J+Med+Imaging+Radiat+Sci%22%5BJournal%5D)">PET-determined myocardial perfusion and flow in coronary artery disease characterization.</a> J Med Imaging Radiat Sci. 55 (2S), S44-S50 (2024).</li>
<li>Nerella, S. G., Singh, P., Sanam, T., Digwal, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PET+Molecular+Imaging+in+Drug+Development%3A+The+Imaging+and+Chemistry+Perspective%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Med+%28Lausanne%29%22%5BJournal%5D)">PET Molecular Imaging in Drug Development: The Imaging and Chemistry Perspective.</a> Front Med (Lausanne). 9, 812270(2022).</li>
<li>Dolle, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Carbon-11+and+fluorine-18+chemistry+devoted+to+molecular+probes+for+imaging+the+brain+with+positron+emission+tomography%5BTitle%5D)+AND+%22J+Label+Compd+Radiopharm%22%5BJournal%5D)">Carbon-11 and fluorine-18 chemistry devoted to molecular probes for imaging the brain with positron emission tomography.</a> J Label Compd Radiopharm. 56 (3-4), 65-67 (2013).</li>
<li>Wilson, A. A., Garcia, A., Jin, L., Houle, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Radiotracer+synthesis+from+%5B11C%5D-iodomethane%3A+A+remarkably+simple+captive+solvent+method%5BTitle%5D)+AND+%22Nucl+Med+Biol%22%5BJournal%5D)">Radiotracer synthesis from [11C]-iodomethane: A remarkably simple captive solvent method.</a> Nucl Med Biol. 27 (6), 529-532 (2000).</li>
<li>Bruton, L., Scott, P. J., Kilbourn, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated+synthesis+modules+for+PET+radiochemistry%5BTitle%5D)+AND+%22Handb+Radiopharm.+%282nd+Ed.%29%22%5BJournal%5D)">Automated synthesis modules for PET radiochemistry.</a> Handb Radiopharm. (2nd Ed.). , 437-456 (2021).</li>
<li>Studenov, A. R., Jivan, S., Adam, M. J., Ruth, T. J., Buckley, K. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Studies+of+the+mechanism+of+the+in-loop+synthesis+of+radiopharmaceuticals%5BTitle%5D)+AND+%22Appl+Radiat+Isot%22%5BJournal%5D)">Studies of the mechanism of the in-loop synthesis of radiopharmaceuticals.</a> Appl Radiat Isot. 61 (6), 1195-1201 (2004).</li>
<li>Jewett, D. M., Ehrenkaufer, R. L., Ram, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+captive+solvent+method+for+rapid+radiosynthesis%3A+application+to+the+synthesis+of+%5B1-11C%5Dpalmitic+acid%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Appl+Radiat+Isot%22%5BJournal%5D)">A captive solvent method for rapid radiosynthesis: application to the synthesis of [1-11C]palmitic acid.</a> Int J Appl Radiat Isot. 36 (8), 672-674 (1985).</li>
<li>Watkins, G. L., Jewett, D. M., Mulholland, G. K., Kilbourn, M. R., Toorongian, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+captive+solvent+method+for+rapid+N-%5B11C%5Dmethylation+of+secondary+amides%3A+application+to+the+benzodiazepine%2C+4%27-chlorodiazepam+%28RO5-4864%29%5BTitle%5D)+AND+%22Appl+Radiat+Isot%22%5BJournal%5D)">A captive solvent method for rapid N-[11C]methylation of secondary amides: application to the benzodiazepine, 4'-chlorodiazepam (RO5-4864).</a> Appl Radiat Isot. 39 (5), 441-444 (1988).</li>
<li>Iwata, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+simple+loop+method+for+the+automated+preparation+of+%5B11C%5Draclopride+from+%5B11C%5Dmethyl+triflate%5BTitle%5D)+AND+%22Appl+Radiat+Isot%22%5BJournal%5D)">A simple loop method for the automated preparation of [11C]raclopride from [11C]methyl triflate.</a> Appl Radiat Isot. 55 (1), 17-22 (2001).</li>
<li>Iwata, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((On-line+%5B11C%5Dmethylation+using+%5B11C%5Dmethyl+iodide+for+the+automated+preparation+of+11C-radiopharmaceuticals%5BTitle%5D)+AND+%22Appl+Radiat+Isot%22%5BJournal%5D)">On-line [11C]methylation using [11C]methyl iodide for the automated preparation of 11C-radiopharmaceuticals.</a> Appl Radiat Isot. 43 (9), 1083-1088 (1992).</li>
<li>Mccarron, J. A., Turton, D. R., Pike, V. W., Poole, K. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Remotely-controlled+production+of+the+5-HT1A+receptor+radioligand+%5Bcarbonyl-11C%5DWAY-100635%5BTitle%5D)+AND+%22J+Labelled+Compd+Radiopharm%22%5BJournal%5D)">Remotely-controlled production of the 5-HT1A receptor radioligand [carbonyl-11C]WAY-100635.</a> J Labelled Compd Radiopharm. 38 (10), 941-953 (1996).</li>
<li>Shao, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Highlighting+the+versatility+of+the+Tracerlab+synthesis+modules.+Part+2%3A+fully+automated+production+of+%5B11C%5D-labeled+radiopharmaceuticals+using+a+Tracerlab+FXC-Pro%5BTitle%5D)+AND+%22J+Labelled+Compd+Radiopharm%22%5BJournal%5D)">Highlighting the versatility of the Tracerlab synthesis modules. Part 2: fully automated production of [11C]-labeled radiopharmaceuticals using a Tracerlab FXC-Pro.</a> J Labelled Compd Radiopharm. 54 (14), 819-838 (2011).</li>
<li>Dahl, K., Halldin, C., Schou, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+methodologies+for+the+preparation+of+carbon-11+labeled+radiopharmaceuticals%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Transl+Imaging%22%5BJournal%5D)">New methodologies for the preparation of carbon-11 labeled radiopharmaceuticals.</a> Clin Transl Imaging. 5 (3), 275-289 (2017).</li>
<li>Shao, X., Schnau, P. L., Fawaz, M. V., Scott, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhanced+radiosyntheses+of+%5BC%5Draclopride+and+%5BC%5DDASB+using+ethanolic+loop+chemistry%5BTitle%5D)+AND+%22Nucl+Med+Biol%22%5BJournal%5D)">Enhanced radiosyntheses of [C]raclopride and [C]DASB using ethanolic loop chemistry.</a> Nucl Med Biol. 40 (1), 109-116 (2013).</li>
<li>Milicevic Sephton, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated+radiosynthesis+of+%5B11C%5DUCB-J+for+imaging+synaptic+density+by+positron+emission+tomography%5BTitle%5D)+AND+%22J+Label+Compd+Radiopharm%22%5BJournal%5D)">Automated radiosynthesis of [11C]UCB-J for imaging synaptic density by positron emission tomography.</a> J Label Compd Radiopharm. 63 (3), 151-158 (2020).</li>
</ol>

Moleküler görüntüleme modaliteleri arasında, pozitron emisyon tomografisi (PET), belirli fizyolojik hedefler veya ilgi alanları ile ilişkili biyokimyasal süreçlerin çözülme şekli açısından farklıdır 1,2. PET'in karakteristik duyarlılığı ve non-invaziv doğası, hastalık patofizyolojisinin in vivo görselleştirilmesi ve nicelleştirilmesi için kullanılır ve genellikle bilgisayarlı tomografi (BT)3 veya manyetik rezonans görüntüleme (MRI)4 gibi daha anatomik görüntüleme teknikleriyle görülemeyen hedefleri ortaya çıkarır. Çağdaş moleküler görüntüleme, PET'in yüksek kontrastlı çözünürlüğü ve ölçülebilir görüntüleme parametrelerinden yararlanarak son derece hassas zayıflama düzeltme haritaları (PET/CT) ve gelişmiş uzamsal çözünürlük (PET/MR)5 sağlamak için PET'in CT veya MR (sırasıyla PET/CT veya PET/MR) ile kombinasyonunu görür ve galyum-68 ve rubidyum-82 gibi radyonüklidlerden gelen pozitronların daha yüksek kinetik enerjilerindeki değişkenliğin sunduğu bazı engellerin üstesinden gelir6. Bu çift modaliteli görüntüleme teknikleri, klinisyenlere veya araştırmacılara çalışma konusu5 hakkında ortak kayıtlı anatomik ve biyokimyasal bilgiler sağlayarak her bir modalitenin ayırt edici özelliklerini kanalize eder.
Bu görüntüleme tekniğinin klinik uygulanabilirliği çok geniştir ve glikoz metabolizması 7,8, nörotransmitter reseptör bağlanması9, miyokard perfüzyonu10 ve çeşitli nörolojik durumlar11 gibi çeşitli moleküler düzeyde fizyolojik süreçlerin görselleştirilmesini ve ölçülmesini sağlar. Klinik kullanımın dışında, PET'in doğal özellikleri, tanısal ve terapötik ilaç geliştirmede ayrılmaz bir rol oynayacak şekilde hizalanır ve farmakoloji, farmakokinetik ve farmakodinamik etkileşiminin doğrudan gözlemlenmesiyle bağlanma potansiyeli (BP), biyodağılım, dağılım hacmi (VT) ve ilaç-reseptör doluluğu (RO%) gibi parametrelerin nicelleştirilmesine olanak tanır. Bu da, bir bileşiğin etkili bir doz (ED50) konsantrasyonunda bir hedefe ulaşıp ulaşmadığı, kan-beyin bariyerinin etkili penetrasyon derecesi, bileşiğin metabolik bütünlüğü ve uygun doz ve doz aralığı11 dahil olmak üzere belirlemelere katkıda bulunur.
PET görüntüleme için yararlı bir prob geliştirirken, uygun bir biyobelirteçin tanımlanması ve ilişkili bir ligandın seçilmesi üzerine, biyomolekülün uygun bir PET radyonüklid ile radyo-etiketlemesi, PET çalışması için radyoizleyici probu verir. Biyolojik, farmakolojik veya tıbbi soruları araştırmak için PET radyonüklidleri arasında, karbon-11, çeşitli biyomoleküller ve uygun ligandlar arasında yaygın olarak kullanılmasını sağlayan sentetik çok yönlülük ve uygun fiziksel özelliklerin bir kombinasyonunu sunar6. % 99.8 pozitron emisyonu ve 20.4 dakikalık yarılanma ömrü12 ile karbon-11, çok aşamalı sentezlere izin verirken deneklere kısa aralıklarla tekrarlanan uygulamaya izin verir. Bununla birlikte, bu avantajlar, yerinde siklotron ve radyokimya yeteneklerine sahip bir tesis gerektirir5.
Bu tür tesisler, genellikle elektrofilik [11C]iyodometan ([11C]CH3I) veya [11C]metil triflat ([11C]CH3OTf) substratı13 ile öncü moleküllerin radyo-etiketlenmesini sağlayan güvenilir, güçlü ve tekrarlanabilir metilasyon yöntemleri gerektirir. Üreticiden sağlanan bir radyosentez modülü, tipik olarak [11C] metilasyon reaksiyonlarına14 bir reaksiyon kabı yaklaşımı için yapılandırılır. Bu, teslimat sırasında etkili [11C] iyodometan veya [11C] metil triflate tutma için kabın soğutulmasını, reaksiyonu gerçekleştirmek için kabın kapatılmasını ve ısıtılmasını, söndürülmesini ve ardından reaksiyona giren içeriklerin yarı hazırlayıcı saflaştırma için yüksek performanslı bir sıvı kromatografisine (HPLC) aktarılmasınıiçerir 13. Etkili 15 olmakla birlikte, bu teknik, flakon septa, iğneler ve ilgili transfer hatlarını içeren çok sayıda potansiyel yapısal başarısızlık noktası sunar.
Daha güvenilir ve tekrarlanabilir bir metilasyon yöntemine duyulan ihtiyaç, karbon-11 radyoligand sentez protokollerimizin çoğunda sabit bir çözücü modifikasyonunun araştırılmasına ve araştırılmasına rehberlik etti. Bu yaklaşım, radyoetiketleme verimliliğini korurken veya geliştirirken geleneksel reaksiyon kabı yönteminin sınırlamalarını ele almayı amaçlar.
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67406/67406fig2.jpg"> 
Şekil 2: Reaksiyon kabı sentezinin tasarımı ve akışı ve döngü yöntemi. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67406/67406fig1large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
Tutsak çözücü kimyası, öncü çözeltinin bir destekleyici malzeme veya yapının geniş bir alanına yayılması ve ardından gaz halindeki etiketleme reaktifinin kaplanmış malzeme16,17 ile temas etmesi yoluyla radyo-etiketleme reaktifinin verimli bir şekilde yakalanması ve reaksiyona sokulması vaadini sunar. Bu, iki reaktan fazı16,18 arasındaki temasın kapsamını ve kalitesini arttırır. Bu tekniğin çok sayıda uygulaması ve varyasyonu 1985 16,17,18,19,20 gibi erken bir tarihte belgelenmiştir ve [11C]metil iyodür, [11C]metil triflat, ayrıca Grignard reaktifi [11C]karbondioksit radyoetiketleme reaksiyonları 20. Daha fazla arıtma, orijinal olarak Wilson ve diğerleri tarafından tanımlanan, HPLC saflaştırma döngüsü tarafından halihazırda sunulanlara herhangi bir ek destek veya reaksiyon ortamının ısıtılması veya soğutulmasıgerektirmeyen tutsak çözücü "döngü yöntemi" kimyasının tartışılmasıyla sunuldu 13. Esir Çözücü "döngü yöntemi" radyo etiketlemenin, minimum transfer kaybı, yüksek radyokimyasal verim, yüksek molar aktivite, azaltılmış reaksiyon süresi ve basitlik 7,21,22,23 ile iyodometan ve metil triflat [11 C] metilasyon reaksiyonları verdiği bulundu.
Burada, grubumuzun orijinal olarak Wilson13 tarafından tanımlanan "döngü yöntemi" [11C] metilasyon tekniğini ve daha sonradiğerleri 14,15,18,21,22,23'ü (bkz. Şekil 2) sentez modülümüze (bundan böyle Modül olarak anılacaktır) mekanik modifikasyon (bkz. Şekil 3) yoluyla uygulamasını açıklıyoruz). Mümkün olduğunca ilham verici basitlik anlayışına yakın bir şekilde, bu mekanik modifikasyonlar minimal ve erişilebilirdi, bu da mühendislik karmaşıklığının genel olarak azalmasına ve yalnızca modülün üreticisi tarafından varsayılan bir reaksiyon kabı radyoetiketleme düzenlemesiyle ilişkili olarak halihazırda kurulmuş olanlara temel bileşenlerin eklenmesine neden oldu. Bu, aşağıda açıklandığı gibi, modül üreticisi tarafından halihazırda sağlanan ve önceden kurulmuş olan ve incelenen sentezlerle uyumlu ve etkili olduğu kanıtlanan paslanmaz çelik HPLC saflaştırma döngüsünü kullanma kararında yansıtılmaktadır. Karbon-11 iyodometan kullanılarak radyoizleyici [11C] - (R) -N-sec-butil-4- (2-klorofenil) -N-metilkinazolin-2-karboksamid, [11C] ER-176 (1) sentezi için klinik araştırma üretiminde kullanılan eksiksiz ve doğrulanmış döngü yöntemi radyoetiketleme protokolünü tüm ayrıntılarıyla tartışıyoruz. Ayrıca, (S,S)-[11C]metilreboksetin ([11C]MRB (2)),[11C]-meta-hidroksiefedrin ([11C]mHED (3)) ve 2-[4-[(11C)metilamino]fenil]-1,3-benzotiyazol-6-ol ([11C]PiB (4)) sentezlenen partilerin analizi ile belirlendiği gibi tesisimizde geliştirilmiştir (bakınız Tablo 1 veŞekil 1 ). Bu karşılaştırma, radyokimya laboratuvarı için minimum maliyetle erişilebilir ve basit modül modifikasyonları ile sağlanan "döngü yöntemi" radyoetiketlemesinin uygulanmasıyla ilişkili radyokimyasal verim ve molar aktivite gibi parametrelere yönelik açık nimeti göstermektedir.

<table><tbody><tr><td>2- (4'-Aminofenil) -6-hidroksibenzotiyazol</td><td>ABX</td><td>5101</td><td>PiB sentezi için öncü (6-OH-BTA-0)</td></tr> <tr><td>(2S, 3S) -Desetilreboksetin</td><td>ABX</td><td>4407</td><td>MRB sentezi için öncü</td></tr><tr><td>Asetik asit</td><td>Sigma Aldrich</td><td>695092</td><td>[11C] PiB</td></tr><tr><td>Aseton-d<>sub6 sentezi</td> için kullanılan reaktif <td>Sigma Aldrich</td><td>444863</td><td>[11C]PiB</td></tr><tr><td>Asetonitril, HPLC dereceli</td><td>Sigma Aldrich</td><td>34998</td><td>sentezi için kullanılan çeşitli konsantrasyonlar Radyoizleyici üretimleri için mobil fazda kullanılan çeşitli konsantrasyonlar</td></tr><tr><td>Asetonitril-d3</td><td>Sigma Aldrich</td><td>151807</td><td>[11C]mHED sentezi için kullanılan</td></tr> çözücü <tr><td>Amonyum format</td><td>Sigma Aldrich</td><td>798568</td><td>[11C]MRB sentezi için kullanılan reaktif</td></tr><tr><td>Amonyum hidroksit</td><td>Ricca Chemical</td><td>642-16</td><td>[11C]ER-176 sentezi için kullanılan reaktif</td></tr>, <tr><td>Analitik terazi</td>, <td>Mettler Toledo&nbsp;</td><td>M-XS104</td><td>Üretimler için malzemeleri tartmak için kullanılan terazi</td></tr><tr><td>Ascarite II</td><td>Thermo Fisher</td><td>CN-C049U90</td><td>FxC Pro Modülü için kurutma kolonlarında kullanılır</td></tr><tr><td>Biyogüvenlik kabini</td><td>Comecer&nbsp;</td><td>FPV montajı için kullanılan</td> <td>M-BH4</td></tr> <tr><td>(R) -N-sec-Butil-4- (2-klorofenil) -kinazolin-2-karboksamid</td><td>ABX</td><td>1665.0001</td><td>ER-176 öncüsü</td></tr><tr><td>C18 Hafif Sep-Pak kartuşu</td><td>WATERS</td><td>WAT023501</td><td>Karbon-11 radyoizleyicilerin sentezinde kullanılan katı faz ekstraksiyon kartuşu</td></tr><tr><td>Karboksen, 60 &; 80 mesh</td><td>Supelco</td><td>CN-10478-U</td><td>FxC Pro</td></tr> <tr><td>modülünde kullanılırSıkıştırılmış &ndash; NOS (%99 azot/%1 oksijen)</td><td>Airgas&nbsp;</td><td>CN-X02NI99C3003091</td><td>Siklotron bombardımanında kullanılan hedef gaz</td></tr><tr><td>Sıcak hücre (DHC) dağıtımı</td><td>&nbsp;</td><td>M-MIP1-1390</td><td>Dağıtım radyoizleyicileri</td></tr><tr><td>Doz kalibratörü ve nbsp;</td><td>Capintec</td><td>M-CRC-55t</td><td>Radyoizleyicilerin ölçüm aktivitesi</td></tr><tr><td>Endosafe nexgen-PTS</td><td>Charles River&nbsp;</td><td>PTS150</td><td>Endosafe PTS, taşınabilir test sistemi</td></tr><tr><td>Endotoksin PTS - Limulus Amebosit Lizat (LAL) Test Kartuşu</td><td>Charles River&nbsp;</td><td>Radyoizleyicilerde endotin seviyelerini test etmek için kullanılan</td> <td>PTS20F</td> LAL kartuşları</tr><tr><td>Etanol, 200 geçirmez, HPLC sınıfı</td><td>Sigma Aldrich</td><td>459828</td><td>ER, MRB, mHED ve PiB Gaz Kromatogramı 2030'un nihai ürün ve&nbsp; mobil fazı için kullanılır</td></tr><tr><td></td><td>Shimadzu</td><td>M-GC-2030</td><td>Radyoizleyici yapımlarından yardımcı maddeleri ölçün</td></tr><tr><td>Graphpac</td><td>Supelco, Millipore Sigma</td><td>10258</td><td>FxC Pro Modülünde [11C]ER-176, [11C]MRB, [11C]mHED ve [11C]PiB</td></tr><tr><td>Helyum, araştırma sınıfı</td><td>Airgas&nbsp;</td><td>CN-HER-300</td><td>Helyum tankı, %99,9999 (araştırma sınıfı tank)</td></tr><tr><td>Shimadzu LC-20 Serisi&nbsp;</td><td>Shimadzu</td><td>Çeşitli&nbsp;</td><td>Analitik HPLC sistemi</td></tr><tr><td>Hidrojen, ultra yüksek saflık derecesi&nbsp; &nbsp;</td><td>Hava gazı&nbsp;</td><td>FxC Pro Modülünde Kullanılan</td> <td>CN-HYUHP-300</td> Hidrojen tankı</tr><tr><td>FxC</td> Pro Modülünde Kullanılan İyot <td>Thermo Fisher</td><td>I35</td><td>, [11C] CH4 [11C]CH3I</td></tr><tr><td>Luna 10 mm C18 (2) 100 & 250 x 10 mm sütun</td><td>Phenomenex</td><td>00G-4253-N0</td><td>MRB sentezi</td></tr> <tr><td>için yarı hazırlık sütunuLuna 5 mm C18 (2) 100 & 250 x 10 mm kolon</td><td>Phenomenex</td><td>00G-4252-N0</td><td>PiB sentezi için yarı hazırlık kolonu</td></tr><tr><td>Macherey-Nagel MN VP 250/10 Nükleosil 100-5 C18 Nautilus sütunu</td><td>Macherey-Nagel</td><td>715412.1</td><td>mHED sentezi için yarı hazırlık sütunu</td></tr><tr><td>Metaraminol (serbest baz)</td><td>ABX</td><td>3380.0001</td><td>[11C]mHED üretiminde kullanılan öncü</td></tr><tr><td>Milli-Q Direct 8 DI sistemi</td><td>Millipore</td><td>M-ZROQ00800</td><td>Deiyonize su sistemi</td></tr><tr><td>N, N-Dimetilformamid-d7</td> <td>Sigma Aldrich</td><td>189979</td><td>[11C] MRB</td></tr><tr><td>İğnesi, 18 G x 1</td><td>Becton Dickinson</td><td>BD 305195</td><td>Üretim kurulumunun çeşitli aşamalarında kullanılan iğneler</td></tr><tr><td>İğne, 20 G x 1-1 / 2 "</td><td>Becton Dickinson</td><td>BD 305176</td><td>Üretim kurulumunun çeşitli aşamalarında kullanılan iğneler</td></tr><tr><td>İğne, 22 G x 4", Spinal&nbsp;</td><td>Air-Tite Ürünleri</td><td>N224</td><td>Üretim kurulumunun çeşitli aşamalarında kullanılan iğneler</td></tr><tr><td>Onyx Monolitik C18 100 x 10 mm sütun</td><td>Phenomenex</td><td>CH0-7878</td><td>ER-176 sentezi için yarı hazırlık sütunu</td></tr><tr><td>Sicapent göstergeli Fosfor Pentoksit</td><td>Sigma Aldrich</td><td>79610</td><td>Sentezde kullanılır Karbon-11 radyoizleyici üretimleri için modüller</td></tr><tr><td>Porapak N</td><td>Waters</td><td>WAT027047</td><td>FxC Pro Modülünde MeI sütununu paketlemek için kullanılan malzeme</td></tr><tr><td>Basınç göstergesi</td><td>Omega</td><td>M-DPG1100B-100G</td><td>Filtre bütünlüğü testi için kullanılır</td></tr><tr><td>Shimalite-Ni</td><td>Shimadzu Corporation</td><td>221-66062</td><td>[>11C]CO2> için FxCPro Modülünün CH4< fırınında paketlenmiş malzeme [<sup11C]CH4</td></tr>Siemens <tr><td> Eclipse 11-MeV siklotron</td><td>Siemens</td><td>RDS 111</td><td>Karbon-11 üretimleri için [11C]CO2 gazı üretmek için kullanılan parçacık hızlandırıcı</td></tr><tr><td>Gümüş Triflate</td><td>Sigma Aldrich</td><td>483346</td><td>[11C]mHED ve [11C]PiB</td></tr><tr><td>Sodyum klorür enjeksiyonu (tuzlu su, % 0.9), 50 mL</td><td>Hospira</td><td>0409-4888-50</td><td>Radyoizleyicilerin formülasyon sürecinde kullanılan tuzlu</td></tr> su <tr><td>Sodyum klorür enjeksiyonu (salin,% 0.9), 500 mL</td><td>Braun</td><td>L8001</td><td>[11C] mHED sentezinde kullanılan reaktif ve mobil faz.</td></tr><tr><td>Sodyum hidroksit</td><td>Sigma Aldrich</td><td>221465</td><td>[11C]ER-176 ve farklı konsantrasyonlardaki diğer bileşenlerin sentezinde kullanılan reaktif.</td></tr><tr><td>Sodyum iyodür dedektörü</td><td>Eckert & HPLC</td><td>ünitesi ile in-line olarak kullanılan</td>Ziegler <td>PMT/Na-BFC3200</td> Gama dedektörü</tr><tr><td>Steril şişe, 50 mL</td><td>ALK Alerji</td><td>SEV50</td><td>50 mL steril şişe olarak kullanılır&nbsp;</td></tr><tr><td>Paslanmaz çelik döngü</td><td>GE</td><td>980314/IEG-005118</td><td>HPLC enjeksiyon döngüsü 1.5 mL'de OD 1/16", ID: 1 mm.</td></tr><tr><td>Şırınga, 1 mL</td><td>Braun</td><td>NJ-9166017-02</td><td>Üretim kurulumunun çeşitli aşamalarında kullanılan şırınga</td></tr><tr><td>Şırınga, 10 mL</td><td>Henke Sass Wolf</td><td>4100-X00V0</td><td>Üretim kurulumunun çeşitli aşamalarında kullanılan şırınga</td></tr><tr><td>Şırınga, 20 mL</td><td>Henke Sass Wolf</td><td>4200-X00V0</td><td>Üretim kurulumunun çeşitli aşamalarında kullanılan şırınga</td></tr><tr><td>Şırınga, 5 mL</td><td>Becton Dickinson</td><td>309632</td><td>Üretim kurulumunun çeşitli aşamalarında kullanılan şırınga</td></tr><tr><td>TracerLab FX2C Modülü&nbsp;</td><td>GE</td><td>M-P5360QB</td><td>Karbon-11 radyoizleyicilerin otomatik üretim modülü</td></tr><tr><td>Trietilamin</td><td>Sigma Aldrich</td><td>471283</td><td>[11C]PiB</td></tr><tr><td>Tüberkülin Şırıngasının sentezi için kullanılan Reaktif, 21 G x 1 İğneli, Tek Kullanımlık, Steril (1 mL)</td><td>Becton Dickinson</td><td>BD 309624</td><td>Şırınga önceden monte edilmiş nihai ürün şişelerinde kullanılır</td></tr></tbody></table>

döngü yöntemini kullanarak klinik araştırmalar için karbon-11 radyoligandlarının verimliliğini ve radyoetiketleme verimlerini artırma

Enhancing Efficiency and Radiolabeling Yields of Carbon-11 Radioligands for Clinical Research Using the Loop Method

New York Üniversitesi Langone Health (NYULH) Radyokimya grubu, hem insan araştırmaları hem de klinik öncesi uygulamalar için kullanılan çeşitli karbon-11, flor-18 ve galyum-68 radyoizleyicileri sağlar. PET radyoizleyicilerin üretimi için çeşitli yöntemler kullanılmaktadır. Ekibimiz (1), (2), (3) ve (4)' ün sentezi için döngü yöntemini kullanır (bkz. Şekil 1 ve Şekil 8). Üretim tamamlandıktan sonra, steril nihai ürün şişesinden bir alikot çıkarılır. Bu numune, hem nihai ürün çözeltisinin aşılanması (hem triptik soya suyu (TSB) hem de sterilite numunesi olarak sıvı tiyoglikolat ortamı (FTM) ortamında) hem de kalite kontrol testleri için toplu çözeltinin temsili bir numunesi için kullanılır. Her bir radyoizleyici, ürün uygulama için serbest bırakılmadan önce QC testlerine tabi tutulur (bkz. Tablo 2).
Kalite kontrol testi, ürün görünümünün görselleştirilmesini, filtre bütünlüğünün doğrulanmasını, radyonüklidik kimliğin, pH'ın, radyokimyasal kimliğin (radyo-HPLC), radyokimyasal saflığın (radyo-HPLC), kimyasal saflığın (HPLC), molar aktivitenin, mukavemetin, artık çözücünün, endotoksinlerin ve sterilitenin belirlenmesini içerir (bkz. Tablo 2). Yukarıda belirtilen her bir radyoizleyicinin klinik üretiminden aşağıdaki sonuçlar elde edilmiştir (bakınız Tablo 1).
Temsili bir analitik HPLC kromatogramı için Şekil 7'ye ve Ek Dosya 1'e bakın. Her radyoizleyicinin, bir deneğe serbest bırakılmadan ve uygulanmadan önce tüm kalite kontrol spesifikasyonlarını (bakınız Tablo 2) geçmesi gerekir.
[11C]MRB (2) (Ek Şekil 1), [11C]m HED (3) (Ek Şekil 2) ve [11C]PiB (4) (Ek Şekil 3).
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Bileşik</td>
			<td>Parametre</td>
			<td>Döngü Yöntemi (ort. ± standart)</td>
			<td>Reaktör Yöntemi (ort. ± standart)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td rowspan="7">[11C]ER-176 Serisi</td>
			<td>Prodüksiyon sayısı</td>
			<td>25</td>
			<td>6</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sentezin başlangıcı</td>
			<td>86 ± 5.0 GBq</td>
			<td>52 ± 25,7 GBq</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sentezin Sonu</td>
			<td>5,4 ± 2,2 GBq</td>
			<td>1,6 ± 0,5 GBq</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Radyokimyasal Saflık</td>
			<td>99,6 ± 0,6%</td>
			<td>99.9 ± %0.1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ER-176 konsantrasyonu</td>
			<td>1,1 ± 0,5 μg/mL</td>
			<td>0,63 ± 0,37 μg/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>molar aktivite</td>
			<td>194 ± 66 GBq/μmol</td>
			<td>132 ± 78 GBq/μmol</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Toplam Sentez Süresi</td>
			<td>36 ± 3 dk</td>
			<td>44 ± 6 dk</td>
		</tr>
		<tr>
			<td rowspan="7">[11C]MRB (Türkçe)</td>
			<td>Prodüksiyon sayısı</td>
			<td>70</td>
			<td>6</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sentezin başlangıcı</td>
			<td>84 ± 5,4 GBq</td>
			<td>39 ± 11,9 GBq</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sentezin Sonu</td>
			<td>3.0 ± 1.2 GBq</td>
			<td>1,9 ± 0,7 GBq</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Radyokimyasal Saflık</td>
			<td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td rowspan="7"></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td rowspan="7"></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td></tr></tbody></table><img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67406/67406fig1.jpg"> <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67406/67406fig1large.jpg" target="_blank"></a><img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67406/67406fig3.jpg"> <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67406/67406fig3large.jpg" target="_blank"></a><img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67406/67406fig4.jpg"> <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67406/67406fig4large.jpg" target="_blank"></a><img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67406/67406fig5.jpg"> <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67406/67406fig5large.jpg" target="_blank"></a><img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67406/67406fig6.jpg"> <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67406/67406fig6large.jpg" target="_blank"></a><img alt="Figure 7" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67406/67406fig7.jpg"> <img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/67406/67406eq1.jpg" style="font-size: 14px;"><a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67406/67406fig7large.jpg" target="_blank"></a><img alt="Figure 8" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67406/67406fig8.jpg"> <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67406/67406fig8large.jpg" target="_blank"></a><table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td></tr></tbody></table><a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67406/67406_JoVe_Supplementary%20File_Final_CarberryEdit.zip" target="_blank"></a>

Döngü Yöntemini Kullanarak Klinik Araştırmalar için Karbon-11 Radyoligandlarının Verimliliğini ve Radyoetiketleme Verimlerini Artırma

A successful positron emission tomography imaging program involving carbon-11 radiotracers demands fast, efficient, and reliable synthesis methods, ...

enhancing-efficiency-radiolabeling-yields-carbon-11-radioligands-for

Research

JoVE Journal

Chemistry

Kimya

Bu video, tümörleri tedavi etmek için immünokonjugatların ve ardından radyoligandların uygulandığı önceden hedeflenmiş radyoimmünoterapi veya PRIT tekniğini açıklar. Bu radyoimmünoterapi, sağlıklı dokulara radyasyon dozlarını azaltır ve antikor bazlı vektörlerle uyumlu olmayan çok düşük yarı ömre sahip radyonüklidleri kullanır.

Önceden Hedeflenmiş Radyoimmünoterapi: Terapötik Radyonüklidlerin Tümörlere Hedefe Yönelik Verilmesi İçin Bir Yöntem

Çok günlük radyoaktif yarılanma ömrü ve uygun bozunma özellikleri nedeniyle, pozitron yayan radyometal 89Zr, PET görüntüleme için antikor bazlı radyofarmasötiklerde kullanım için son derece uygundur. Bu protokolde, 89Zr işaretli antikorun biyokonjugasyonu, radyosentezi ve klinik öncesi uygulaması anlatılacaktır.

Bioconjugation ve radiosynthesis<sup&gt; 89</sup&gt;, Zr-DFO-etiketli antikorlar

125-etiketli azid sentezi ve bir bakır içermeyen tıklama reaksiyonu kullanılarak dibenzocyclooctyne (DBCO) -grubu ile konjüge edilmiş 13-mil ölçekli altın nanopartiküllerinin radyo-etiketlenmesi için ayrıntılı bir işlem tarif edilmektedir.

Bir Kullanarak Altın Nanopartiküller Verimli Radyoaktif bir Optimize Protokolü<sup&gt; 125</sup&gt; I-etiketli Azid Protez Grubu

Burada, ön hedefleme ve biyoortogonal kimya için tridentat 99mTc(I) şelat-tetrazin türevlerinin radyoetiketleme ve in vivo testi için bir protokol açıklıyoruz.

Hazırlama ve Değerlendirilmesi<sup&gt; 99m</sup&gt; Bioorthogonal Kimya Kullanarak Öncesi hedeflemek için üç dişli Şelatlar Tc-etiketli

Bir transgenik fare, T hücresi reseptörüne bağlanan bir 64Cu-modifiye edilmiş monoklonal antikorun hazırlanmasını takiben, T hücreleri, canlılık, fonksiyonellik, etiketleme stabilitesi ve apoptoz için analiz, in vivo olarak radyoaktif işaretli olan ve adoptif bir nefes yolu gecikmeli tipte aşırı duyarlılık ile farelere aktarıldı pozitron emisyon tomografisi / bilgisayarlı tomografi (PET / BT) ile invazif olmayan görüntüleme için reaksiyon.

tarafından Kemirgen Lenfosit Etiketleme<sup&gt; 64</sup&gt; Cu-Antikor Reseptör için hedefleme<em&gt; In Vivo</em&gt; PET / CT ile hücre Trafik

Burada, [11C] SNAP-7941 tam otomatik radiolabelling ve P-GP ifade ve non-ifade HÜCRELERI Bu Pet-Tracer gerçek zamanlı kinetiği analizi için bir protokol temsil eder.

Otomatik sentez ve gerçek zamanlı kinetik değerlendirmesinin teknik yönü [11C] SNAP-7941

Pozitron Emisyon Tomografisi (PET) için katı faz ekstraksiyon kartuşları kullanarak klinik olarak alakalı izleyiciler üretmek için etkili bir karbon-11 radyoetiketleme tekniği rapor ediyoruz. 11.11.20 C-metilasyon maddesi, yüksek radyokimyasal verimlerde kimyasal ve radyokimyasal olarak saf PET izleyicileri sağlar, öncül ve art arda elüsyon ile önceden yüklenmiş bir kartuştan geçirilir.

Pet İzleyicilerin Üretimi için Katı Faz 11C-Metilasyon, Arıtma ve Formülasyon

Bu yöntem, nanomole miktarlarda reaktif kullanarak radyofarmasötiklerin hızlı ve ekonomik optimizasyonu için damlacık kimyasal reaksiyonlarına dayanan yeni bir yüksek verimli metodolojinin kullanımını açıklar.

Damlacık Dizileri Kullanılarak Radyokimyasal Reaksiyonların Optimizasyonu

Burada sunulan, kullanıma hazır bir radyoetiketleme synthonu, [89 Zr]Zr-p-izotiyosiyatobenzil-desferrioksamin ([89Zr]Zr-p-izotiyosiyatobenzil-desferrioksamin ([89 Zr]Zr-DBN) kullanılarak bir pozitron emisyon tomografisi (PET) radyoizotopu, 89Zr (t1/2 78.4 h) ile radyoetiket hücrelerine yönelik bir protokoldür. [89Zr] Zr-DBN ile radyo-etiketleme hücreleri, uygulamadan sonra 7 güne kadar PET ile vücutta uygulanan radyoaktif işaretli hücrelerin invaziv olmayan izlenmesine ve görüntülenmesine izin...

Hücre Kaçakçılığının Pozitron Emisyon Tomografisi Görüntülemesi: Bir Hücre Radyo-Etiketleme Yöntemi

Bu makale, yeni bir radyoaktif işaretli probun (yani, 68Ga etiketli nanobody NM-02) radyosentezini, formülasyonunu, kalite kontrolünü ve bir ksenogreft modelinde küçük hayvan PET/BT görüntülemesi için kullanımını açıklamaktadır.

68Ga Etiketli Nano Molekülün Radyosentezi, Kalite Kontrolü ve Küçük Hayvan Pozitron Emisyon Tomografisi Görüntülemesi

Keşfedin, döngü yöntemiyle karbon-11 radyoligand sentezini optimize ederek PET görüntüleme için radyokimyasal verimliliği artırma. Bu yöntem, üretim süresini kısaltır ve molar aktiviteyi yükseltir.

Döngü Yöntemini Kullanarak Klinik Araştırmalar için Karbon-11 Radyoligandlarının Verimliliğini ve Radyoetiketleme Verimlerini Artırma (Video) | JoVE Journal

Döngü Yöntemini Kullanarak Klinik Araştırmalar için Karbon-11 Radyoligandlarının Verimliliğini ve Radyoetiketleme Verimlerini Artırma

Daha fazla video keşfet