Cinsiyeti Onaylayan Hormon Tedavilerini Taklit Eden Sıçan Modellerinin Kurulması

Araştırmamız, transseksüel erkekler için testosteron ve transseksüel kadınlar için anti-androjen ile östrojen kullanan transseksüel bireyler için cinsiyeti onaylayan hormon tedavilerini çoğaltmak için hayvan modelleri geliştirdi. Bu tedavileri görenlerin genel popülasyon kadar çevresel kimyasallara karşı savunmasız olup olmadığını ve hormon tedavisinin uzun süreli yan etkileri olup olmadığını inceliyoruz. Bu model kendi alanında benzersizdir, çünkü şu anda hormon tedavisi gören trans bireylerin kimyasallara ve yan etkilerine karşı potansiyel olarak farklı duyarlılıklarını değerlendirmek için veriler ve araçlar mevcuttur.

Çalışmamızdan elde edilen önemli bir bulgu, hormon tedavilerinin başarısını değerlendirmek için cinsiyete özgü hepatik CPS'nin bir belirteç olarak kullanılmasıdır. Çalışmamızda ilk kez geliştirilen bu yaklaşım, modelin doğruluğunu ve etkinliğini doğrulamak için değerli bir araç sunmaktadır.

Protokolümüz, hormon tedavilerinin uzun vadeli etkilerini anlamadaki boşluğu ele almaktadır. Ayrıca, gıda ve çevresel kimyasallara günlük maruz kalmanın zaman içinde hormon tedavilerinin etkileriyle etkileşime girip giremeyeceğini veya etkilerini değiştirip değiştiremeyeceğini araştırır.

Gelecekte, modelin uzun süreli testler için uygun olup olmadığını araştıracağız ve tedavi etkilerini daha iyi değerlendirmek için dar davranış testleri gibi ek biyobelirteçleri araştıracağız.

[Öğretim Görevlisi] Susam yağında çözünmüş testosteron ve estradiol artı siproteron asetat uygulamak için enjeksiyon bölgesinde cildi sıkıştırarak ve kaldırarak başlayın. Bir mililitrelik şırınganın iğnesini hayvanın sırtına paralel olarak yerleştirin. İğne içeri girdikten sonra, modele bağlı olarak yavaşça 100 mikrolitre testosteron veya 200 mikrolitre estradiol artı siproteron asetat enjekte edin. İki haftalık tedaviden sonra, anestezi uygulanmış her sıçanı bir ısıtma yastığı üzerine sırtüstü pozisyonda yerleştirin. Ardından, vakumun çıkarıldığından emin olmak için 21 gauge iğne ile beş mililitrelik bir şırınga hazırlayın. Kalbi bulmak için parmaklarınızı kullanın. Göğüs duvarını nazikçe temizleyin ve iğneyi, bükülmüş dirseklerle aynı hizada, beş ve altı kaburgalar arasında, vücuda dik olan lateral göğüs duvarına dikkatlice sokun. İğne kalp ventrikülüne ulaştığında, kan kılcallık yoluyla şırıngaya girecektir. Kan çekilene kadar şırınga pistonunu yavaşça ve sürekli olarak geri çekin. Kurban kesiminden sonra, her bir hayvanı ön bacakları yukarı ve arka ayakları aşağı bakacak şekilde sırtüstü diseksiyon masasına yerleştirin. Uzuvları pimlerle sabitleyin, ardından diseksiyona hazırlanmak için hayvanın ventral yüzeyine dezenfektan bir solüsyon serpin. Makas kullanarak, kasıklardan üst karın bölgesine kadar orta hat boyunca kesin. Orta hat ventral abdominal insizyonundan her bir arka ekstremitenin medial yüzeyleri boyunca iki lateral kesim yapın ve abdominal iç organları ortaya çıkarın. Erkek sıçanlarda, karın içi skrotal kese içinde bulunan testisleri eksize edin. Testislerin çıkıntı yapmasını sağlamak için skrotal keseye bastırın ve nazikçe kavrayın. Viseral yağı tutmak için pense kullanın, ardından testisleri iç organlardan dikkatlice kesin. Testisleri histopatolojik analiz için Bois solüsyonunda saklamadan önce tartın. Dişi sıçanlarda, uterusu nazikçe tutun. Her iki uterus boynuzunun uçlarındaki yumurtalıkları tanımlayın ve onları çevredeki viseral yağ dokusundan kesin. Eksizyondan sonra yumurtalıkları tartın. Daha sonra, karaciğeri forseps ile tutun ve kırılmadığından emin olun. Ksifoid işlemini kavramak için pense kullanın ve diyaframı makasla tamamen kesin. Karaciğeri diyaframdan ayırmak için makas kullanın. Ksifoid işlemini forseps ile kaldırın ve karaciğeri karın boşluğundan çıkarın. Eksizyondan sonra karaciğeri tartın ve uygun şekilde saklayın. Makas kullanarak, hayvanın boynu boyunca dik olarak kesin. Tiroid bezinin bulunduğu trakeayı ortaya çıkarmak için cildi ve kas sistemini çıkarın. Tiroid bezini çıkarmak için trakeanın uçlarını nazikçe kesin. Testis çıkarıldıktan sonra, testisin arka kenarına bağlı olan ve skrotum içinde bulunan epididimis tutulmalıdır. Meni toplamak için, makas kullanarak yağ ve bağ dokusunu çıkararak sağ epididimin kuyruğunu temizleyin. Kuyruğu kalan kısımdan ayırın ve bir mililitre DMEM içeren bir Petri kabına yerleştirin. Kuyruğu makasla kesin ve içindekileri nazikçe akıtmak ve serbest bırakmayı kolaylaştırmak için eski bir pipet kullanın. Şimdi, toplanan sıvıyı 15 mililitrelik bir tüpe aktarın ve bir ila 10 arasında bir seyreltme faktörü elde etmek için hacmi DMEM ile 10 mililitreye ayarlayın. Homojen hale getirmek ve bir süspansiyon oluşturmak için içindekileri pipetleyin. Hafifçe salladıktan sonra, Neubauer haznesini doldurmak için süspansiyondan 10 mikrolitre alın.