Name: Sıçanlarda Subretinal Enjeksiyon ve Retina Dekolmanı İntraoperatif Görselleştirmesi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-03-07T13:00:00.000+00:00
Duration: 4 min 16 s
Description: Öğrenin, sıçanlarda subretinal enjeksiyon ve retina dekolmanı için intraoperatif görselleştirme protokolü. Bu yöntem, retina dejenerasyonu araştırmalarında güvenliği ve tekrarlanabilirliği artırır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

<ol><li>Guymer, R. H., Campbell, T. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Age-related+macular+degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Age-related macular degeneration.</a> Lancet. 401 (10386), 1459-1472 (2023).</li>
<li>Hartong, D. T., Berson, E. L., Dryja, T. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Retinitis+pigmentosa%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Retinitis pigmentosa.</a> Lancet. 368 (9549), 1795-1809 (2006).</li>
<li>Cheung, N., Mitchell, P., Wong, T. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diabetic+retinopathy%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Diabetic retinopathy.</a> Lancet. 376 (9735), 124-136 (2010).</li>
<li>Murakami, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Photoreceptor+cell+death+and+rescue+in+retinal+detachment+and+degenerations%5BTitle%5D)+AND+%22Prog+Retin+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Photoreceptor cell death and rescue in retinal detachment and degenerations.</a> Prog Retin Eye Res. 37, 114-140 (2013).</li>
<li>Russell, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficacy+and+safety+of+voretigene+neparvovec+%28AAV2-hRPE65v2%29+in+patients+with+RPE65-mediated+inherited+retinal+dystrophy%3A+A+randomised%2C+controlled%2C+open-label%2C+phase+3+trial%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Efficacy and safety of voretigene neparvovec (AAV2-hRPE65v2) in patients with RPE65-mediated inherited retinal dystrophy: A randomised, controlled, open-label, phase 3 trial.</a> Lancet. 390, 849-860 (2017).</li>
<li>Gagliardi, G., Ben M'Barek, K., Goureau, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Photoreceptor+cell+replacement+in+macular+degeneration+and+retinitis+pigmentosa%3A+A+pluripotent+stem+cell-based+approach%5BTitle%5D)+AND+%22Prog+Retin+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Photoreceptor cell replacement in macular degeneration and retinitis pigmentosa: A pluripotent stem cell-based approach.</a> Prog Retin Eye Res. 71, 1-25 (2019).</li>
<li>Zeng, R., Zhang, Y., Shi, F., Kong, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+experimental+mouse+model+of+retinal+detachment%3A+Complete+functional+and+histologic+recovery+of+the+retina%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthalmol+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">A novel experimental mouse model of retinal detachment: Complete functional and histologic recovery of the retina.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 53, 1685-1695 (2012).</li>
<li>Matsumoto, H., Miller, J. W., Vavvas, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Retinal+detachment+model+in+rodents+by+subretinal+injection+of+sodium+hyaluronate%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Retinal detachment model in rodents by subretinal injection of sodium hyaluronate.</a> J Vis Exp. 79, e50660(2013).</li>
<li>Timmers, A. M., Zhang, H., Squitieri, A., Gonzalez-Pola, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Subretinal+injections+in+rodent+eyes%3A+Effects+on+electrophysiology+and+histology+of+rat+retina%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Vis%22%5BJournal%5D)">Subretinal injections in rodent eyes: Effects on electrophysiology and histology of rat retina.</a> Mol Vis. 7, 131-137 (2001).</li>
<li>Benner, J. D., Hay, A., Landers, M. B., Hjelmeland, L. M., Morse, L. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fibrinolytic-assisted+removal+of+experimental+subretinal+hemorrhage+within+7+days+reduces+outer+retinal+degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Fibrinolytic-assisted removal of experimental subretinal hemorrhage within 7 days reduces outer retinal degeneration.</a> Ophthalmology. 101, 672-681 (1994).</li>
<li>Secondi, R., Kong, J., Blonska, A. M., Staurenghi, G., Sparrow, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fundus+autofluorescence+findings+in+a+mouse+model+of+retinal+detachment%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthalmol+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">Fundus autofluorescence findings in a mouse model of retinal detachment.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 53, 5190-5197 (2012).</li>
<li>Becker, S., Wang, H., Stoddard, G. J., Hartnett, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+subretinal+injection+on+retinal+structure+and+function+in+a+rat+oxygen-induced+retinopathy+model%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Vis%22%5BJournal%5D)">Effect of subretinal injection on retinal structure and function in a rat oxygen-induced retinopathy model.</a> Mol Vis. 23, 832-843 (2017).</li>
<li>Sene, A., Apte, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inflammation-induced+photoreceptor+cell+death%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Exp+Med+Biol%22%5BJournal%5D)">Inflammation-induced photoreceptor cell death.</a> Adv Exp Med Biol. 1074, 203-208 (2018).</li>
<li>Zhang, Z. Y., Sun, Y. J., Song, J. Y., Fan, B., Li, G. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+models+and+examination+methods+of+retinal+detachment%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res+Bull%22%5BJournal%5D)">Experimental models and examination methods of retinal detachment.</a> Brain Res Bull. 169, 51-62 (2021).</li>
<li>Machemer, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+retinal+detachment+in+the+owl+monkey.+IV.+The+reattached+retina%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Experimental retinal detachment in the owl monkey. IV. The reattached retina.</a> Am J Ophthalmol. 66, 1075-1091 (1968).</li>
<li>Dentel, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adaptive+optics+flood+illumination+ophthalmoscopy+in+nonhuman+primates%3A+Findings+in+normal+and+short-term+induced+detached+retinae%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmol+Sci%22%5BJournal%5D)">Adaptive optics flood illumination ophthalmoscopy in nonhuman primates: Findings in normal and short-term induced detached retinae.</a> Ophthalmol Sci. 3 (4), 100316(2023).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Atipemazol (Antidorm 4.27mg / mL)</td> <td>Axience SAS, Pantin, Fransa</td> <td>/</td> <td>Uyanış</td></tr><tr><td>Kloramfenikol-retinol (Ophtalon 10mg / g)</td> <td>TVM, Lempdes, Fransa</td><td>FR / V / 3787889 6/1989</td><td>Ameliyat sonrası bakım</td></tr><tr><td>Kapak fişleri Mini 8mm</td><td>World Precision Instruments, Sarasota, FL</td> <td>/</td><td>https://www.wpiinc.com/var-1040-cover-slips-pkg-100.html?srsltid=AfmBOoraZfMhuUuY_7rQbM5YKfqM2VR1PT0L-UHQ5uQUdjaeZuogbKP1&utm_source=chatgpt.com</td></tr><tr><td>Hidroksipropil metilselüloz</td><td>FCI S.A.S., Paris, Fransa</td><td>/</td><td>Viskoz subretinal dağıtım</td></tr><tr><td>Ketamin (Ketamidor 100 mg/mL)</td><td>Axience SAS, Pantin, Fransa</td><td>/</td><td>Genel anestezi</td></tr><tr><td>Lumera 700</td><td>Carl Zeiss, Oberkochen, Almanya</td><td>https://www.zeiss.com/meditec/en/products/surgical-microscopes/ophthalmic-microscopes/opmi-lumera-700.html?utm_source=chatgpt.com</td><td>Oftalmik mikroskop</td></tr><tr><td>Medetomidin (Domitor 0.85 mg / mL)</td> <td>Vetoquinol SA, Paris, Fransa</td><td>https://www.vetoquinol.com/en</td><td>Genel anestezi</td></tr><tr><td>Mikroenjektör Micro 4</td><td>World Precision Instruments, Sarasota, FL</td><td>SYS-MICRO4</td><td>Enjeksiyonu</td></tr><tr><td>Oksibuprokain 1.6 mg / 0.4 mL</td><td>Th&eacute; a, Clermont-Ferrand, Fransa</td><td>https://www.laboratoires-thea.com/en/chlorhydrate-doxybuprocaine-thea?utm_source=chatgpt.com</td><td>Lokal anestezi</td></tr><tr><td>PBS</td><td>Life Technologies Europe B.V., Bleiswijk, Hollanda</td><td>14190-094</td><td>Sulu subretinal dağıtım</td></tr><tr><td>Şırıngası (10 veya 20 & mikro; L)</td> <td>Hamilton, Reno, NV</td><td>80300</td><td>Enjeksiyon</td></tr><tr><td>Gözyaşı jeli (Lubrithal)</td> <td>Dechron, Shrewsbury, Birleşik Krallık</td><td>https://www.dechra.ca/our-products/ca/companion-animal/dog/non-prescription/lubrithal?utm_source=chatgpt.com</td><td>Kornea koruması</td></tr><tr><td>Tropicamid (Mydriaticum 1 mg / mL)</td> <td>Th&eacute; a, Clermont-Ferrand, Fransa</td><td>/</td><td>Öğrenci genişlemesi</td></tr></tbody></table>

sıçanlarda subretinal enjeksiyon ve retina dekolmanı İntraoperatif görselleştirmesi

Intraoperative Visualization of Subretinal Injection and Retinal Detachment in Rats

Bir subretinal enjeksiyonun başarısı, kan fotoreseptörler ve RPE hücreleri için toksik olduğundan, subretinal kanamayı önleyerek, retinotomi yoluyla subretinal boşluğa (yani fotoreseptörler ve RPE katmanları arasında) kesin ve özel olarak verilmesine dayanır. Başarılı doğum, intraoperatif görselleştirme (Şekil 2L), hemen postoperatif fundus fotoğrafçılığı ve optik koherens tomografi (OCT) ile doğrulanır. Fundus fotoğrafçılığı subretinal kanamayı dışlarken, OCT B taramaları berrak subretinal sıvı ile retina dekolmanını (RD) doğrular (Şekil 1 ve Şekil 3). Ek olarak, fundus fotoğrafçılığı, işlem sırasında fark edilmeyebilecek lens dokunuşunu veya indüklenmiş kataraktları tanımlayabilir (Şekil 3C,D). Hem fotoğraf hem de OCT taramaları, ayrılmış alanın veya blebin boyutunu tahmin edebilir (Şekil 1B-E).
Blebun boyutunu etkileyen birkaç faktör vardır: (1) Enjeksiyon bölgesi konumu: Enjeksiyon bölgesi optik diskten ne kadar uzaksa, ayrılan alan o kadar küçük olur; (2) Enjekte edilen hacim: 20-25 μL'lik bir enjeksiyon hacmi, sıçanlarda retinanın yaklaşık yarısını ayırabilir; (3) Retina dekolmanı kalitesi: Retina dejenerasyon modellerinde (ör., P23H, RCS), gliozis ve subretinal materyal birikimi gibi dejeneratif süreçlerin neden olduğu fotoreseptörler ve RPE hücreleri arasındaki artan direnç nedeniyle dekolman zor olabilir. Bu gibi durumlarda, indüklenmiş retina dekolmanları tipik olarak düzdür ve OCT taramaları, deklooklu alanı net bir şekilde tanımlamak için çok önemlidir.
Retinal mikrodamarlar her zaman tamamen önlenemediği için enjeksiyon bölgesinde minör bir intravitreal kanama meydana gelebilir (Şekil 3E). Bununla birlikte, bu tür kanamalar tipik olarak subretinal boşluğa uzanmaz.
Yetersiz dekolman vakalarında, sorun intraoperatif olarak tanınmalı ve önceden oluşturulmuş retinotomi yoluyla derhal reenjeksiyon yapılmalıdır. 20 sıçanla yapılan deneysel bir seans sırasında, iki cerrah (biri deneyimli ve biri acemi) adım adım yöntemi uyguladı. Deneyimli cerrah 10 işlemden 9'unda başarı elde ederken, başlangıç seviyesindeki kişi 10 işlemden 6'sında başarılı oldu.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67483/67483fig1.jpg"> 
Şekil 1: Sürece ve sonuçlara genel bakış. (A) Bir sıçan gözünde subretinal enjeksiyon işleminin, lensin önemli hacmini gösteren şematik gösterimi. (B,C) Enjeksiyondan hemen sonra (B) ve enjeksiyondan 6 gün sonra (C) fundus fotoğrafçılığı. Ok uçları enjeksiyon bölgesini gösterir. Retina dekolmanı alanı kesikli bir çizgi ile özetlenmiştir. (D,E) Optik koherens tomografi B, enjeksiyondan hemen sonra (D) ve enjeksiyondan 6 gün sonra (E) tarar. AÇIK: optik sinir. Büyütme: 1x. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67483/67483fig1large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67483/67483fig2.jpg"> 
Şekil 2: Subretinal enjeksiyon protokolünün adımları. Protokol, genel anestezi altında 8 haftalık bir Long Evans sıçanında gösterilmiştir. Her adımın ayrıntılı bir açıklaması için videoya veya metindeki "Protokol" bölümüne bakın. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67483/67483fig2large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67483/67483fig3.jpg"> 
Şekil 3: Çeşitli postoperatif fundus fotoğrafçılığı sonuçlarına örnekler. (A) Enjeksiyon bölgesinde minör pigment dağılımı ile normal postoperatif görünüm (ok). (B) Enjeksiyon bölgesinde küçük bir intravitreal hava kabarcığı ile normal postoperatif görünüm. Bu küçük hava kabarcıkları şırıngadan kaynaklanır ve retina altı boşlukta bile zararsızdır. (C,D) Minör (C) veya önemli (D) lens opaklaşması (katarakt) ile sonuçlanan lens dokunuşu. (E,F) Minör (E) veya daha geniş (F) intravitreal kanama, enjeksiyon bölgesinin yakınında lokalize, subretinal boşluğa yayılmaz. (G) Enjeksiyon bölgesi kanaması ağırlıklı olarak subretinal boşluğa yayılıyor. Bu durumda, retinotomi bir retinal kan damarının yaralanmasına neden oldu. (H) Skleral penetrasyondan kaynaklanan geniş intravitreal kanama. Büyütme: 1x. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67483/67483fig3large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>

Sıçanlarda Subretinal Enjeksiyon ve Retina Dekolmanı İntraoperatif Görselleştirmesi

Subretinal injection, the delivery of a solution between the photoreceptors and the retinal pigment epithelium (RPE), creates a subretinal space where ...

intraoperative-visualization-subretinal-injection-retinal-detachment

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

, Dekolmanı bir tekrarlanabilir ve sürekli yüksekliği ile deneysel retina dekolmanı oluşturma ve subretinal kanama olmadan retina hastalığında fotoreseptör hücre kaybı patofizyolojisi okuyan ve potansiyel terapötik müdahalelerin değerlendirilmesi için önemlidir. Burada ayrıntılı olarak, böyle bir yöntem sunulmaktadır.

Sodyum Hyaluronat subretinal Enjeksiyon Kemirgenler Retina Dekolmanı Modeli

Burada, sıçanlarda ve farelerde bir RPE hücresi bolusunu subretinal olarak enjekte etmek için multimedya formatında topluluk tarafından kabul edilen bir protokol sunuyoruz. Bu yaklaşım, retinal dejenerasyonun hayvan modellerinde implantasyon üzerine aşılanmış RPE hücrelerinin kurtarma potansiyellerini, güvenlik profillerini ve hayatta kalma kapasitelerini belirlemek için kullanılabilir.

Süspansiyon Retina pigment epiteli Hücreleri sunun Kemirgenler Subretinal Enjeksiyonları Sahne

Sıçan optik sinirine doğrudan enjeksiyon, rejeneratif araştırmalar için yararlıdır. Kafatasının açılmasını içermeyen bir sıçan optik sinirine doğrudan enjeksiyon için minimal invaziv bir teknik gösteriyoruz. Bu yöntem kullanılarak cerrahi komplikasyonlar en aza indirilir ve iyileşme daha hızlı olur.

Sıçan Optik Sinir içine Enjeksiyon için minimal invaziv Tekniği

Subretinal enjeksiyonlar, proteinler ve viral vektörler gibi büyük terapötik ajanları fotoreseptörlere ve retina pigment epiteline iletmek için en yaygın tekniktir. Farelerde, minimum ikincil hasar ve hızlı iyileşme süreleri ile subretinal boşluğu başarılı bir şekilde hedefleyen alternatif bir yöntem burada açıklanmaktadır.

Subretinal Space erişim için bir alternatif ve Onaylı Enjeksiyon Yöntemi<i&gt; yoluyla</i&gt; Bir transkleral Posterior Yaklaşım

Subretinal enjeksiyon kök hücre replasman tedavisi için yaşa bağlı makula dejenerasyonu preklinik çalışmalarda yaygın olarak uygulanmıştır. Görüntülenmeyecektir bu makalede, biz daha az riskli, tekrarlanabilir ve tam olarak değiştirilmiş subretinal enjeksiyon tekniğini hücrelerin sıçan gözlerinin içine sunmak için trans-scleral yaklaşım yoluyla tanımlamak.

Sıçan gözlerinin içine insan retina Pigment epitel hücrelerinin Trans-scleral Subretinal nakli için rafine bir protokol geliştirilmesi

Burada biz kendi alansal kapsama değerlendirmek ve photoreceptor canlılık karakterize subretinal boşluğa gen terapisi ajanların teslim yardımcı olmak üzere yüksek çözünürlüklü spektral alanlı optik koherens tomografi (HR-SD-Ekim) kullanarak yeni bir yaklaşım göstermek.

Ultrahigh çözünürlük fare optik koherens tomografi göz içi enjeksiyon Retina gen terapisi araştırma yardımcı olmak için

Retina pigment epitel hücreleri hücre-replasman tedavisi için Kuru yaşa bağlı makula dejenerasyonu gelişmiş form olarak hizmet verebilir. Bu iletişim kuralı coğrafi Atrofi büyük gözlü modeli ve hastalık bu modeline insan embriyonik kök hücre kaynaklı retina pigment epitel hücrelerinin nakli subretinal nesil açıklar.

Büyük gözlü manken coğrafi Atrofi, içine insan embriyonik kök hücre elde edilen retina Pigment epitel hücrelerinin subretinal nakli

Bu protokol, merkezi bir kornea insizyonu ve ön kamaraya uzun bir tünel kullanılarak sıçanlarda intrakameral enjeksiyon için bir tekniği tanımlar. Bu enjeksiyon yöntemi, yanlışlıkla doku hasarına neden olma riskini en aza indirir ve böylece hassasiyeti ve tekrarlanabilirliği artırır.

Yan Etki Riski Düşük Olan Sıçanlarda İntrakameral Enjeksiyon

Bu protokol, enjeksiyonlar için sıçan optik sinirine erişmek için transkonjonktival bir yaklaşım kullanan benzersiz bir tekniği tanımlar.

Sıçan Optik Sinirine Enjeksiyon için Transkonjonktival Yaklaşım

Bu çalışma, terapötiklerin yetişkin sıçanın retina ve optik sinirlerine verilmesi için bir metodoloji sunmaktadır. Ek olarak, yetişkin bir sıçanda optik sinir ve retinanın yukarıdan aşağıya blok koleksiyonu için benzersiz bir doku elde etme yöntemi tanıtılmıştır.

Erişkin Sıçanlarda Oküler Terapötik Uygulama ve İleri Doku Alımı

Öğrenin, sıçanlarda subretinal enjeksiyon ve retina dekolmanı için intraoperatif görselleştirme protokolü. Bu yöntem, retina dejenerasyonu araştırmalarında güvenliği ve tekrarlanabilirliği artırır.

Sıçanlarda Subretinal Enjeksiyon ve Retina Dekolmanı İntraoperatif Görselleştirmesi

Daha fazla video keşfet