Sıçanlarda Subretinal Enjeksiyon ve Retina Dekolmanı İntraoperatif Görselleştirmesi

Retina dekolmanlarında hücre ölümü mekanizmalarını araştırıyorum ve amacım in vitro verilerin in vivo deneylere izlenebilirliğini sağlamak. Ekibimizde, fotoreseptör dejenerasyonu sırasında farklı hücre ölüm mekanizmalarının katılımını gösterdik. Kemirgenlerde retina dekolmanı indüklemek için tanımlanmış birçok yol vardır.

Bu protokol, tekrarlanabilirlik ve güvenlik olmak üzere iki zorluğa cevap vermek üzere tasarlanmıştır. Retina dekolmanı tedavisinde tekrarlanabilir ve güvenli bir protokolün sağlanması bu tür araştırmalarda verimliliği sağlayacaktır. Başlamak için, 25 mikrolitrelik bir şırınga üzerine yapıştırılmış, eğimsiz 10 milimetre 30 gauge kanül metal ucunu bir mikro enjektöre monte edin.

Uzun süreli retina dekolmanı indüklemek için %2 hidroksipropil metilselüloz veya %1 ila %5 sodyum hiyalüronat kullanın. Hazırlanan çözeltiyi şırıngaya yükleyin. Daha sonra, midriyazis elde etmek için anestezi uygulanmış bir sıçanın bir gözüne bir damla% 0.5 tropikalamid uygulayın.

Ameliyat edilecek göze bir damla oksibuprokain uygulayın. Ameliyatı gerçekleştirmek için ayak pedalına bağlı bir oftalmik mikroskop kullanın. Sklerayı ortaya çıkarmak için, üst ve alt göz kapaklarındaki palpebral kenarın dış çeyreğine iki göz kapağı çekme dikişi sabitleyin.

Gözün hafifçe şişmesini sağlamak için dikişleri çekin. 30 gauge bir iğne ile, kornea limpusundan yaklaşık bir ila iki milimetre uzakta temporal bulbar konjonktiva boyunca bir skleral kanal oluşturun. İşlem boyunca lens göz arayüzü olarak gözyaşı jeli uygulayın.

Retina plakasını görselleştirmek için, göz yüzeyine sekiz milimetre çapında düz bir kontakt lens yerleştirin. Retina düzlemine odaklanmak için mikroskobun ayak pedalını kullanın. Şimdi, kanülü önceden oluşturulmuş skleral kanaldan dikey olarak yerleştirin.

Yavaşça retinaya yaklaşın ve retina beyazlaması gözlenene kadar hafifçe bastırın. Enjeksiyon akışı ile oluşan retinotomi yoluyla enjekte ederken uç stabilitesini koruyun Enjeksiyondan sonra ucu retinotomiden çıkarın. Ardından, lense dokunulmadığından emin olarak tüm kanülü vitreus boşluğundan nazikçe çekin.

Vitreus boşluğu içindeki kan akışını gözlemlemeden pupiller kırmızı refleksin retina dekolmanı tarafından değiştirildiğinden emin olun. Göz kapağı dikişlerini çıkarın, ardından kanamayı dikkatlice temizleyin. Göz içi basıncını kısaca manuel olarak değerlendirin.

Ameliyat sonrası bakım için, ameliyat edilen göze kloramfenikol retinol göz merhemi sürün. Daha sonra intraperitoneal olarak bir mililitre% 5 glikoz monohidrat uygulayın. Deri altına kilogram atipamezol başına 0.9 miligram enjekte edin.

Son olarak, hayvanı sıcaklık kontrollü bir odaya aktarın ve uyanana kadar izleyin. Başarılı subretinal enjeksiyon, optik koherens tomografide berrak subretinal sıvı ve fundus fotoğrafında subretinal kanama olmaması ile doğrulandı. Her iki modalitede de belirgin bir retina dekolmanı gözlendi.

Minör intravitreal kanamalar bazen, özellikle enjeksiyon bölgesinin yakınında gözlendi, ancak subretinal boşluğa yayılmadı.