Name: 5xFAD Farelerin Beyinlerinde Demir Birikiminin Perls/DAB Boyama ile Değerlendirilmesi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-05-23T12:45:00.000+00:00
Duration: 7 min 32 s
Description: Öğrenin, Perls/DAB boyama yöntemiyle 5xFAD farelerinde beyin dokularındaki demir birikimini değerlendirmeyi. Bu hassas teknik, Alzheimer hastalığı modellerinde demir dağılımını görselleştirir ve nicel analiz sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Karlawish, J., Jack, C. R., Rocca, W. A., Snyder, H. M., Carrillo, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alzheimer%27s+disease%3A+The+next+frontier-special+report+2017%5BTitle%5D)+AND+%22Alzheimer%27s+Dement%22%5BJournal%5D)">Alzheimer's disease: The next frontier-special report 2017.</a> Alzheimer's Dement. 13 (4), 374-380 (2017).</li>
<li>Praticò, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oxidative+stress+hypothesis+in+Alzheimer%27s+disease%3A+A+reappraisal%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+in+Pharmacol+Sci%22%5BJournal%5D)">Oxidative stress hypothesis in Alzheimer's disease: A reappraisal.</a> Trends in Pharmacol Sci. 29 (12), 609-615 (2008).</li>
<li>Sayre, L. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+situ+oxidative+catalysis+by+neurofibrillary+tangles+and+senile+plaques+in+alzheimer%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurochem%22%5BJournal%5D)">In situ oxidative catalysis by neurofibrillary tangles and senile plaques in alzheimer's disease.</a> J. Neurochem. 74 (1), 270-279 (2001).</li>
<li>Urrutia, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inflammation+alters+the+expression+of+dmt1%2C+fpn1+and+hepcidin%2C+and+it+causes+iron+accumulation+in+central+nervous+system+cells%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurochem%22%5BJournal%5D)">Inflammation alters the expression of dmt1, fpn1 and hepcidin, and it causes iron accumulation in central nervous system cells.</a> J. Neurochem. 126 (4), 541-549 (2013).</li>
<li>Hardy, J., Selkoe, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+amyloid+hypothesis+of+Alzheimer%27s+disease%3A+Progress+and+problems+on+the+road+to+therapeutics%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">The amyloid hypothesis of Alzheimer's disease: Progress and problems on the road to therapeutics.</a> Science. 297 (5580), 353-356 (2002).</li>
<li>Scheltens, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alzheimer%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Alzheimer's disease.</a> Lancet. 397 (10284), 1577-1590 (2021).</li>
<li>Ficiarà, E., Munir, Z., Boschi, S., Caligiuri, M. E., Guiot, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alteration+of+iron+concentration+in+alzheimer%27s+disease+as+a+possible+diagnostic+biomarker+unveiling+ferroptosis%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Alteration of iron concentration in alzheimer's disease as a possible diagnostic biomarker unveiling ferroptosis.</a> Int J Mol Sci. 22 (9), 4479(2021).</li>
<li>Yang, W. S., Stockwell, B. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ferroptosis%3A+Death+by+lipid+peroxidation%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+in+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Ferroptosis: Death by lipid peroxidation.</a> Trends in Cell Biol. 26 (3), 165-176 (2016).</li>
<li>Lane, D. J. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Iron+and+Alzheimer%27s+disease%3A+An+update+on+emerging+mechanisms%5BTitle%5D)+AND+%22J+Alzheimers+Dis%22%5BJournal%5D)">Iron and Alzheimer's disease: An update on emerging mechanisms.</a> J Alzheimers Dis. 64 (s1), S379-S395 (2018).</li>
<li>Meadowcroft, M. D., Connor, J. R., Smith, M. B., Yang, Q. X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mri+and+histological+analysis+of+beta-amyloid+plaques+in+both+human+Alzheimer%27s+disease+and+app%2Fps1+transgenic+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Magn+Reson+Imaging%22%5BJournal%5D)">Mri and histological analysis of beta-amyloid plaques in both human Alzheimer's disease and app/ps1 transgenic mice.</a> J Magn Reson Imaging. 29 (5), 997-1007 (2009).</li>
<li>Winterbourn, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Toxicity+of+iron+and+hydrogen+peroxide%3A+The+Fenton+reaction%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicol+Lett%22%5BJournal%5D)">Toxicity of iron and hydrogen peroxide: The Fenton reaction.</a> Toxicol Lett. 82-83, 969-974 (1995).</li>
<li>Silvestri, L., Camaschella, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+potential+pathogenetic+role+of+iron+in+Alzheimer%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Mol+Med%22%5BJournal%5D)">A potential pathogenetic role of iron in Alzheimer's disease.</a> J Cell Mol Med. 12 (5a), 1548-1550 (2008).</li>
<li>Gamblin, T. C., King, M. E., Kuret, J., Berry, R. W., Binder, L. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oxidative+regulation+of+fatty+acid-induced+tau+polymerization%5BTitle%5D)+AND+%22Biochemistry%22%5BJournal%5D)">Oxidative regulation of fatty acid-induced tau polymerization.</a> Biochemistry. 39 (46), 14203-14210 (2000).</li>
<li>Meguro, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nonheme-iron+histochemistry+for+light+and+electron+microscopy%3A+A+historical%2C+theoretical+and+technical+review%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Histol+Cytol%22%5BJournal%5D)">Nonheme-iron histochemistry for light and electron microscopy: A historical, theoretical and technical review.</a> Arch Histol Cytol. 70 (1), 1-19 (2007).</li>
<li>Lehéricy, S., Roze, E., Goizet, C., Mochel, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mri+of+neurodegeneration+with+brain+iron+accumulation%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Neurol%22%5BJournal%5D)">Mri of neurodegeneration with brain iron accumulation.</a> Curr Opin Neurol. 33 (4), 462-473 (2020).</li>
<li>Nabuurs, R. J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-field+MRI+of+single+histological+slices+using+an+inductively+coupled%2C+self-resonant+microcoil%3A+Application+to+ex+vivo+samples+of+patients+with+Alzheimer%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22NMR+Biomed%22%5BJournal%5D)">High-field MRI of single histological slices using an inductively coupled, self-resonant microcoil: Application to ex vivo samples of patients with Alzheimer's disease.</a> NMR Biomed. 24 (4), 351-357 (2010).</li>
<li>Perl, D. P., Good, P. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+techniques+for+determining+cellular+iron+distribution+in+brain+tissues%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Neurol%22%5BJournal%5D)">Comparative techniques for determining cellular iron distribution in brain tissues.</a> Ann Neurol. 32 (S1), S76-S81 (1992).</li>
<li>Riemer, J., Hoepken, H. H., Czerwinska, H., Robinson, S. R., Dringen, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Colorimetric+ferrozine-based+assay+for+the+quantitation+of+iron+in+cultured+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Anal+Biochem%22%5BJournal%5D)">Colorimetric ferrozine-based assay for the quantitation of iron in cultured cells.</a> Anal Biochem. 331 (2), 370-375 (2004).</li>
<li>Luterotti, S., Kordić, T., Dodig, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simultaneous+determination+of+iron+and+copper+in+children%27s+sera+by+FAAS%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Pharm%22%5BJournal%5D)">Simultaneous determination of iron and copper in children's sera by FAAS.</a> Acta Pharm. 61 (1), 93-102 (2011).</li>
<li>Hill, J. M., Switzer, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+regional+distribution+and+cellular+localization+of+iron+in+the+rat+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">The regional distribution and cellular localization of iron in the rat brain.</a> Neuroscience. 11 (3), 595-603 (1984).</li>
<li>Meguro, R., Asano, Y., Iwatsuki, H., Shoumura, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Perfusion-perls+and+-turnbull+methods+supplemented+by+dab+intensification+for+nonheme+iron+histochemistry%3A+Demonstration+of+the+superior+sensitivity+of+the+methods+in+the+liver%2C+spleen%2C+and+stomach+of+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Histochem+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Perfusion-perls and -turnbull methods supplemented by dab intensification for nonheme iron histochemistry: Demonstration of the superior sensitivity of the methods in the liver, spleen, and stomach of the rat.</a> Histochem Cell Biol. 120 (1), 73-82 (2003).</li>
<li>Liu, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((S-nitrosylation+of+divalent+metal+transporter+1+enhances+iron+uptake+to+mediate+loss+of+dopaminergic+neurons+and+motoric+deficit%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">S-nitrosylation of divalent metal transporter 1 enhances iron uptake to mediate loss of dopaminergic neurons and motoric deficit.</a> J Neurosci. 38 (39), 8364-8377 (2018).</li>
<li>Guillemot, J., Canuel, M., Essalmani, R., Prat, A., Seidah, N. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Implication+of+the+proprotein+convertases+in+iron+homeostasis%3A+Proprotein+convertase+7+sheds+human+transferrin+receptor+1+and+furin+activates+hepcidin%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatology%22%5BJournal%5D)">Implication of the proprotein convertases in iron homeostasis: Proprotein convertase 7 sheds human transferrin receptor 1 and furin activates hepcidin.</a> Hepatology. 57 (6), 2514-2524 (2013).</li>
<li>Li, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ferritin+light+chain+interacts+with+pen-2+and+affects+%CE%B3-secretase+activity%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci+Lett%22%5BJournal%5D)">Ferritin light chain interacts with pen-2 and affects γ-secretase activity.</a> Neurosci Lett. 548, 90-94 (2013).</li>
<li>Jin Jung, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oxidative+stress+induces+inactivation+of+protein+phosphatase+2a%2C+promoting+proinflammatory+nf-%CE%BAb+in+aged+rat+kidney%5BTitle%5D)+AND+%22Free+Radic+Biol+Med%22%5BJournal%5D)">Oxidative stress induces inactivation of protein phosphatase 2a, promoting proinflammatory nf-κb in aged rat kidney.</a> Free Radic Biol Med. 61, 206-217 (2013).</li>
<li>Connor, J. R., Menzies, S. L., Martin, S. M. S., Mufson, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cellular+distribution+of+transferrin%2C+ferritin%2C+and+iron+in+normal+and+aged+human+brains%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Res%22%5BJournal%5D)">Cellular distribution of transferrin, ferritin, and iron in normal and aged human brains.</a> J Neurosci Res. 27 (4), 595-611 (2004).</li>
</ol>

Alzheimer hastalığı (AH) en sık görülen nörodejeneratif hastalıktır ve toplum için ciddi bir sorun haline gelmiştir. AD prevalansı 1,2,3,4 yaşla birlikte dramatik bir şekilde artmaktadır. Alzheimer hastalığının (AD) birincil patolojik özellikleri, tau proteinlerinin anormal fosforilasyonuna bağlı olarak β-amiloid (Aβ) plaklarının ve nörofibriler yumakların (NFT'ler) birikmesini içerir. Aβ, amiloid öncü proteininin (APP) β-sekretaz ve γ-sekretaz enzimleri tarafından sıralı bölünmesi yoluyla üretilir. Aβ üretimindeki veya klerensindeki düzensizlik, beyinde birikmesine yol açar ve AD'nin en erken patolojik belirteçlerinden biri olarak kabul edilen amiloid plaklarını oluşturur. Bu plaklar sadece doğrudan nöronal hasara neden olmakla kalmaz, aynı zamanda nöroinflamasyon, oksidatif stres ve sinaptik disfonksiyon dahil olmak üzere bir dizi zararlı etki başlatır. Toplu olarak, bu süreçler nöronal ölüme ve MS5'te gözlenen ilerleyici bilişsel gerilemeye katkıda bulunur. Amiloid β plak birikimi ve hiperfosforile tau proteini agregasyonu dahil olmak üzere ağırlıklı olarak Alzheimer hastalığının (AD) patolojik özelliklerini hedef alan onlarca yıllık araştırmalara rağmen, klinik olarak anlamlı terapötik atılımlar belirsizliğini korumaktadır ve mevcut müdahaleler hastalığın ilerlemesini değiştirmede sınırlı etkinlik göstermektedir6.
Demir, beyin fonksiyonunu sürdürmek için önemli bir metaldir ve oksijen taşınması, DNA sentezi, mitokondriyal solunum, miyelin sentezi, nörotransmitter sentezi ve metabolizmada rol oynar. Bununla birlikte, konsantrasyonlar hücresel sekestrasyon kapasitesiniaştığında demir zararlı hale gelir 6,7,8. AD9,10 olan hastalarda beynin hem kortikal hem de hipokampal bölgelerinde genellikle Aβ plakları ile birlikte lokalize olan artmış demir birikimi gözlenmiştir. Fenton reaksiyonu11 sayesinde, hücre içi serbest demir, reaktif oksijen türlerinin yanı sıra hidroksil radikalleri (•OH) üretebilir. Bu zararlı maddeler sadece glial hücreleri aktive ederek nöroinflamasyonu indüklemekle kalmaz, aynı zamanda oksidatif stres yoluyla hücrenin biyomoleküllerine saldırır, normal hücresel fonksiyonu bozar ve sinaptik disfonksiyona yol açar 8,12. Ayrıca, artan demir, AD'nin patolojik belirtilerinin gelişiminde doğrudan rol oynar: demir, Aβ üretimine12 katkıda bulunur ve ayrıca tau proteini disfonksiyonunu artırarak nörofibriler yumaklara(13) yol açar.
Beyindeki demir içeriğini değerlendirmek için manyetik rezonans görüntüleme (MRI) ile kimyasal ve histokimyasal yöntemler de dahil olmak üzere çeşitli teknikler geliştirilmiştir14. MRG kullanılarak intraserebral demir seviyelerinin in vivo olarak ölçülmesi, yaşlanma ve nörodejenerasyon hastaları için klinik olarak önemlidir15. MRG, non-invaziv ve son derece hassas olma avantajına sahiptir: hastalığın erken evrelerinde demir birikimini tespit edebilir. Özellikle, alana bağlı R2 artışı (FDRI) tekniği, ferritin demir ve heme-demir16 gibi farklı demir formlarını ayırt edebilir. Bununla birlikte, MRG hücresel düzeyde demir birikimini tespit edemez ve pahalıdır, bu nedenle esas olarak klinik araştırmalarda kullanılır17.
Kolorimetrik ölçüm, çözelti içindeki maddenin bir kromojenik ajan18 ile reaksiyonu sonucu üretilen rengin yoğunluğunu ölçerek bir maddenin (demir gibi) konsantrasyonunu belirleyen kimyasal bir yöntemdir. Bu yöntemin gerçekleştirilmesi kolaydır ve düşük maliyetli reaktifler ve enstrümantasyon kullanır, bu da onu sınırlı bütçeli laboratuvarlar için uygun hale getirir18. Bununla birlikte, bu yöntemin doğruluğu ve hassasiyeti çok sınırlıdır, çünkü sonuçlar çevresel faktörler, renk geliştirme süresi ve operatörün öznel yargısı tarafından etkilenmektedir. Alev atomik absorpsiyon spektrometresi (FAAS), demir seviyelerini19 değerlendirmek için kullanılabilecek başka bir yöntemdir. Bu yöntemde, ilgilenilen dokunun yüksek sıcaklıktaki bir fırında yakılmasıyla berraklaştırılmış bir numune çözeltisi elde edilir. Numune daha sonra hidroklorik asit kullanılarak çözülür ve çözeltideki demir konsantrasyonu atomik absorpsiyon spektrometrisi ile belirlenir. Bu yöntem son derece hassastır ve her türlü biyolojik numune için uygundur19. Bununla birlikte, süreç zaman alıcıdır ve pahalı ekipman gerektirir, bu nedenle kullanımı sınırlıdır.
Hem olmayan ferrik demiri tespit etmek için Perls/DAB boyama, diğer histokimyasal yöntemlerle karşılaştırıldığında yüksek özgüllüğü ve uygulama kolaylığı nedeniyle en yaygın kullanılan demir tespit yöntemidir14. Kolorimetrik analizden farklı olarak, Perls'in boyaması, mavi bir çökelti oluşturmak için demir iyonları ve potasyum ferrosiyanür arasındaki reaksiyona dayanan kalitatif bir histokimyasal boyama yöntemidir. Dokulardaki demirin varlığını ve dağılımını mikroskobik olarak görselleştirmek için kullanılır. Ayrıca, bu yöntem, farklı hücre tiplerinde demir birikimini ayırt etmemize ve demir birikiminin hücre altı dağılımını gözlemlememize olanak tanıyarak AD20'nin incelenmesi için bir yöntem sağlar. Perls'in boyası öncelikle hem olmayan ferrik demiri tespit eder ve Prusya mavisi kompleksinin oluşumuna bağlıdır:
<img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/67501/67501eq01.jpg" style="margin: auto;">
(Prusya mavisi)
Bununla birlikte, geleneksel Perls boyası, düşük demir seviyelerinde demir lokalizasyonunu tespit etmek için etkisizdir. Diaminobenzidin (DAB) eklendiğinde, kahverengi bir bileşik oluşturmak için ferrik hekzasiyanoferrat ile reaksiyona girerek testinözgüllüğünü arttırır 21.
Bu protokolün amacı, bir AD fare modelinin beyinlerindeki demir birikiminin miktarının ve dağılımının nasıl değerlendirileceğini açıklamaktır. Bu protokolde, 8 aylık 5×FAD (C57BL / 6J) transgenik fareler AD fare modeli olarak kullanıldı ve aynı yaştaki vahşi tip farelerle karşılaştırıldı. Kimyasal reaktifin hazırlanması, beynin kesitlendirilmesi, Perls/DAB boyasının gerçekleştirilmesi ve boyamadan sonra alınan görüntülerin analiz edilmesi ile ilgili prosedürlerin ayrıntıları burada sunulmaktadır.

<table><tbody><tr><td>0.1 M PBS</td><td>biosharp</td><td>BL601A Çözelti</td>% 4 PFA&nbsp <td>yapmak için deiyonize su ekleyin</td></tr><tr><td>;</td><td>Beyotime</td><td>P0099</td><td>4 &� C'de Geri Yükle; Kullanım için C</td></tr><tr><td>20X DAB çözeltisi</td><td>Bioss</td><td>C-0003</td><td>Mix 10 & mu; l çözelti A, 10 & mu; l çözelti B ve 180 &mu; l PBS</td></tr><tr><td>Alkol</td><td>Supelco</td><td>107017</td><td></td></tr><tr><td>HCL</td><td>Sigma</td><td>7647-01-0</td><td>50 ml ketamine damıtılmış su ekleyin</td></tr><tr><td>&nbsp;</td><td>Çin Ulusal İlaçlar</td><td>H20193336</td><td>Anestezi Mikroskobu için 100 mg / kg</td></tr><tr><td></td><td>Olympus</td><td>CX43</td><td></td></tr><tr><td>Optimum kesme sıcaklığı bileşiği (OCT)</td> <td>Sakura Finetek</td><td>4583</td><td></td></tr><tr><td>potasyum ferrosinid çözeltisi</td><td>Sigma</td><td>14038-43-8</td> 50 ml Sucrose Sigma 57-50-1 <td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr>ksilazine damıtılmış su ekleyin<td>ve nbsp;</td><td>YS Biyoteknoloji</td><td>YS-(BC)-2842</td><td>Anestezizasyon için 15 mg / kg</td></tr><tr><td>Ksilenler</td><td>Sigma</td><td>1330-20-7</td><td></td></tr></tbody></table>

5xfad farelerin beyinlerinde demir birikiminin perls/dab boyama ile değerlendirilmesi

Assessing Iron Deposition in the Brains of 5xFAD Mice by Perls'/DAB Staining

AD'nin bir fare modelinde demir dağılımını ve birikimini araştırmak için, 8 aylık 5xFAD farelerin sagital dilimlerinde Perls / DAB boyaması gerçekleştirdik. Şekil 3'te gösterildiği gibi, 8 aylık 5xFAD ve vahşi tip farelerde ve 2 aylık vahşi tip farelerde Perls/DAB boyama sinyalleri gözlenmiştir. 5xFAD farelerinde, hipokampus ve kortekste, özellikle hipokampusun subikulumunda yüksek Perls' / DAB boyama sinyalleri gözlendi. Yabani tip fareler, doğrulanmış negatif kontroller olarak görev yaptı;...

5xFAD Farelerin Beyinlerinde Demir Birikiminin Perls/DAB Boyama ile Değerlendirilmesi

Alzheimer's disease (AD), a common neurodegenerative disease, is the leading cause of dementia in the elderly. Iron deposition is closely linked to the ...

assessing-iron-deposition-brains-5xfad-mice-perls-dab

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Sinirbilim

AD patolojik özelliklerinden biri Amiloid β proteini pozitif nöritik plakların oluşumu. Immünohistokimyasal algılama thioflavin G boyama yöntemi kullanılarak ABC ve DAB yöntem ve floresan tespiti: Bu protokolde, transgenik AD modeli fareler nöritik plaklar tespit etmek için iki yöntem açıklanmaktadır.

Nöritik plaklar Alzheimer Hastalığı Fare Modeli Algılama

Kaynak: Mukherjee, K., et. al. Beyin Mitokondrilerinin Seri Blok Yüz Taramalı Elektron Mikroskobu Kullanılarak Analizi. J. Vis. Uzm.  (2016)Bu video hazırlığı göstermektedir,  Mitokondriyal üst yapıyı görselleştirmek için bir seri blok yüz taramalı elektron mikroskobu (SBFSEM) kullanarak fare beyin dokusunun görüntülenmesi ve analizi, aksonal ve dendritik nöronal bölmelerdeki morfolojilerinin ve uzamsal dağılımlarının hassas bir şekilde haritalanmasını sağlar.

 Nöronal Mitokondrinin Seri Blok Yüz Taramalı Elektron Mikroskobu Kullanılarak Görüntülenmesi

Bu yazının uzunlamasına iki foton mikroskopi kullanılarak in vivo amiloid plak birikimi sırasında cerebrovasculature bir biçimlenme izlemek için bir yordam açıklanır. Incelmiş kafatası preparat, Alzheimer hastalığının bir fare modelinde serebrovasküler hasara ilerlemesini değerlendirmek için floresan boyalar görselleştirme sağlar.

uzunlamasına<em&gt; İn Vivo</em&gt; Cerebrovasculature Görüntüleme: MSS Hastalıkları uygunluk

Kantitatif lazer ablasyon ile dokuda metallerin haritalama - indüktif eşleşmiş plazma - kütle spektrometresi (LA-ICP-MS) metaller, normal fonksiyon ve hastalık sürecine katılmaları nasıl yeni bir fikir verebilir hassas bir analitik tekniktir. Burada, kantitatif fare nörolojik doku ince kesitlerde metal görüntüleme için bir protokol açıklar.

İndaktif Plazma - - Lazer Ablasyon Beyin Dokusu Görüntüleme Metaller Kütle Spektrometresi (LA-ICP-MS)

Bu çalışmada, biz kan - beyin bariyerini nörodejeneratif koşullar altında çalışmasının değerlendirilmesi için kolay ve etkin bir yordam mevcut. Bizim hedefe ulaşmak için biz yüksek molekül ağırlıklı floresein isothiocyanate (FITC) etiketli infüzyon-albümin içine fare juguler ven ve onun kaçak beyin parankimi Floresans mikroskobu tarafından değerlendirilir.

Kan - beyin bariyerini geçirgenliği FITC etiketli albümin nörodejeneratif hastalık, bir fare modeli intravenöz infüzyonu tarafından değerlendirilmesi

Bu protokol, perfüzyon, beyin kesiti, serbest yüzen immünostaining, doku montajı ve görüntüleme dahil olmak üzere fare beyni histolojik çalışmaları için verimli ve tekrarlanabilir bir yaklaşımı açıklar.

Fare Beyinlerinin Serbest Yüzen İmmünasyon

Bu makalede, fare gebeliğinde demir taşıma çalışmaları için transferrine bağlı radyoaktif olmayan izotopik demirin nasıl hazırlanacağı ve uygulanacağı gösterilmektedir. Fetoplasental bölmelerde izotopik demirin miktarının belirlenmesi yaklaşımı da açıklanmaktadır.

Radyoaktif Olmayan Demir İzotopları Kullanarak Fare Plasentası In Vivo Boyunca Demir Taşımacılığının Ölçülmesi

Burada, hayvan dokularındaki heme olmayan demir içeriğinin ölçümü için, çoğu laboratuvarda kolayca uygulanabilen basit, köklü bir kolorimetrik test kullanılarak bir protokol sağlanmaktadır.

Batofenantropin Bazlı Kolorimetrik Tahlil Kullanılarak Doku Non-Heme Demir İçeriğinin Ölçülmesi

Mevcut protokol, Alzheimer hastalığının APP / PS1 transgenik fare modelinde amiloid-beta yükünü ölçmek için sagital fare beyin bölümlerinin tam bölge veya alt bölge analizini gerçekleştirme prosedürünü açıklar ve karşılaştırır.

Fare Beyin Bölümlerinde Amiloid-Beta Yükünün Tam ve Alt Bölgesel Nicelleştirilmesi

Erken doğum (37 haftadan &lt; doğum), optimal olmayan önleme ve tedavi seçenekleriyle acil bir küresel sağlık sorunudur. Artan vajinal bakteriyel enfeksiyon kaynaklı erken doğumun bir fare modelini sunuyoruz ve ortaya çıkan yenidoğan morbidite ve mortalitesinin nasıl analiz edileceğini özetliyoruz.

Farelerde Yükselen Vajinal Enfeksiyon, Erken Doğum ve Yenidoğan Morbiditesinin Modellenmesi

Öğrenin, Perls/DAB boyama yöntemiyle 5xFAD farelerinde beyin dokularındaki demir birikimini değerlendirmeyi. Bu hassas teknik, Alzheimer hastalığı modellerinde demir dağılımını görselleştirir ve nicel analiz sağlar.

5xFAD Farelerin Beyinlerinde Demir Birikiminin Perls/DAB Boyama ile Değerlendirilmesi

Daha fazla video keşfet