Patch-Clamp Techniques for Single Endolysosomal Vesicle Analysis

Hsuan-Ti Wang; Cheng-Chang Chen

doi:10.3791/67519

Tek Endolisozomal Vezikül Analizi için Yama-Klemp Teknikleri

JoVE Journal
Biology

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

JoVE Journal Biology

Patch-Clamp Techniques for Single Endolysosomal Vesicle Analysis

Tek Endolisozomal Vezikül Analizi için Yama-Klemp Teknikleri

Full Text

1,205 Views

05:47 min

April 4, 2025

DOI: 10.3791/67519-v

Hsuan-Ti Wang¹, Cheng-Chang Chen^1,2

¹Clinical Laboratory Sciences and Medical Biotechnology, College of Medicine,National Taiwan University, ²Department of Laboratory Medicine,National Taiwan University Hospital

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Bu protokol, manuel bir endolizozomal yama-kelepçe sistemi kullanarak hücre içi veziküller üzerindeki iyon kanalı aktivitesini doğrudan ölçmek için bir yöntemi detaylandırır. Endolizozomların büyütülmesini ve bu veziküllerin manuel olarak izole edilmesini içeren yöntemi gösteriyoruz. Bu yaklaşım, araştırmacıların prosedürü doğru bir şekilde tekrarlayabilmelerini ve uygulayabilmelerini sağlar.

Endolizozomal bölmeler, hücrelerdeki en küçük organellerdir. Geleneksel elektrofizyolojik teknikler, voltaj ve akım değişimlerini doğrudan ölçemezler. Endolizozom yama-klemp tekniği, doğrudan kayıtlara olanak tanıyarak iyon kanallarında daha önceden çalışma yapmamızı sağlar.

En büyük deneysel zorluk, tüm bileşiklerin lizozomları etkili bir şekilde büyütmemesidir. Uygun hücrelerin tanımlanması zordur ve ideal lizozomlarla bile başarılı iyon kanalı kaydı garanti edilmez. Endolizozomal membranlardan direkt elektrofizyolojik kayıtların yapılabilmesi için endolizozom-yama klemp tekniğini geliştirdik.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos