Name: İnsan BAMBIyüksekMFGE8yüksek Göbek Kordonu Kaynaklı Mezenkimal Stromal Hücrelerin İzolasyonu (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-01-10T14:20:00.000+00:00
Duration: 6 min 5 s
Description: Öğrenin, BAMBI yüksek MFGE8 yüksek insan göbek kordonu kaynaklı mezenkimal stromal hücrelerin izolasyonunu ve transkriptomik analizini. Bu yöntem, spesifik hastalıkların tedavisinde optimal hücre alt gruplarının seçilmesini destekler.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<meta charset="utf8"></head><body>BAMBIyüksekMFGE8yüksek UC-MSC Alt Popülasyonlarının Fonksiyonel Analizi

<ol><li>Liechty, K. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+mesenchymal+stem+cells+engraft+and+demonstrate+site-specific+differentiation+after+in+utero+transplantation+in+sheep%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Med%22%5BJournal%5D)">Human mesenchymal stem cells engraft and demonstrate site-specific differentiation after in utero transplantation in sheep.</a> Nat Med. 6 (11), 1282-1286 (2000).</li>
<li>Zhou, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Challenges+and+advances+in+clinical+applications+of+mesenchymal+stromal+cells%5BTitle%5D)+AND+%22J+Hematol+Oncol%22%5BJournal%5D)">Challenges and advances in clinical applications of mesenchymal stromal cells.</a> J Hematol Oncol. 14 (1), 24(2021).</li>
<li>Xie, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tnf-alpha-mediated+m%286%29a+modification+of+elmo1+triggers+directional+migration+of+mesenchymal+stem+cell+in+ankylosing+spondylitis%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Tnf-alpha-mediated m(6)a modification of elmo1 triggers directional migration of mesenchymal stem cell in ankylosing spondylitis.</a> Nat Commun. 12 (1), 5373(2021).</li>
<li>Mcguire, J. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mesenchymal+stem+cell-derived+interleukin-28+drives+the+selection+of+apoptosis+resistant+bone+metastatic+prostate+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Mesenchymal stem cell-derived interleukin-28 drives the selection of apoptosis resistant bone metastatic prostate cancer.</a> Nat Commun. 12 (1), 723(2021).</li>
<li>Yuan, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mesenchymal+stem+cell+therapy+induces+flt3l+and+cd1c%28%2B%29+dendritic+cells+in+systemic+lupus+erythematosus+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Mesenchymal stem cell therapy induces flt3l and cd1c(+) dendritic cells in systemic lupus erythematosus patients.</a> Nat Commun. 10 (1), 2498(2019).</li>
<li>Wang, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Umbilical+cord+mesenchymal+stem+cell+transplantation+in+active+and+refractory+systemic+lupus+erythematosus%3A+A+multicenter+clinical+study%5BTitle%5D)+AND+%22Arthritis+Res+Ther%22%5BJournal%5D)">Umbilical cord mesenchymal stem cell transplantation in active and refractory systemic lupus erythematosus: A multicenter clinical study.</a> Arthritis Res Ther. 16 (2), R79(2014).</li>
<li>Ortiz, L. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mesenchymal+stem+cell+engraftment+in+lung+is+enhanced+in+response+to+bleomycin+exposure+and+ameliorates+its+fibrotic+effects%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Mesenchymal stem cell engraftment in lung is enhanced in response to bleomycin exposure and ameliorates its fibrotic effects.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 100 (14), 8407-8411 (2003).</li>
<li>Phinney, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+heterogeneity+of+mesenchymal+stem+cells%3A+Implications+for+cell+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Biochem%22%5BJournal%5D)">Functional heterogeneity of mesenchymal stem cells: Implications for cell therapy.</a> J Cell Biochem. 113 (9), 2806-2812 (2012).</li>
<li>Wang, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-cell+transcriptome+atlas+of+human+mesenchymal+stem+cells+exploring+cellular+heterogeneity%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">Single-cell transcriptome atlas of human mesenchymal stem cells exploring cellular heterogeneity.</a> Clin Transl Med. 11 (12), e650(2021).</li>
<li>Chen, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-cell+and+spatial+transcriptomics+decodes+wharton%27s+jelly-derived+mesenchymal+stem+cells+heterogeneity+and+a+subpopulation+with+wound+repair+signatures%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Sci+%28Weinh%29%22%5BJournal%5D)">Single-cell and spatial transcriptomics decodes wharton's jelly-derived mesenchymal stem cells heterogeneity and a subpopulation with wound repair signatures.</a> Adv Sci (Weinh). 10 (4), e2204786(2023).</li>
<li>Chen, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dissecting+heterogeneity+reveals+a+unique+bambi%28high%29+mfge8%28high%29+subpopulation+of+human+uc-mscs%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Sci+%28Weinh%29%22%5BJournal%5D)">Dissecting heterogeneity reveals a unique bambi(high) mfge8(high) subpopulation of human uc-mscs.</a> Adv Sci (Weinh). 10 (1), e2202510(2022).</li>
<li>Tsuji, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+different+cell-detaching+methods+on+the+viability+and+cell+surface+antigen+expression+of+synovial+mesenchymal+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Transplant%22%5BJournal%5D)">Effects of different cell-detaching methods on the viability and cell surface antigen expression of synovial mesenchymal stem cells.</a> Cell Transplant. 26 (6), 1089-1102 (2017).</li>
<li>Lai, T. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Different+methods+of+detaching+adherent+cells+and+their+effects+on+the+cell+surface+expression+of+fas+receptor+and+fas+ligand%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Different methods of detaching adherent cells and their effects on the cell surface expression of fas receptor and fas ligand.</a> Sci Rep. 12 (1), 5713(2022).</li>
<li>Avinash, K., Malaippan, S., Dooraiswamy, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methods+of+isolation+and+characterization+of+stem+cells+from+different+regions+of+oral+cavity+using+markers%3A+A+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Stem+Cells%22%5BJournal%5D)">Methods of isolation and characterization of stem cells from different regions of oral cavity using markers: A systematic review.</a> Int J Stem Cells. 10 (1), 12-20 (2017).</li>
<li>Galvao, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rock+inhibition+drives+resolution+of+acute+inflammation+by+enhancing+neutrophil+apoptosis%5BTitle%5D)+AND+%22Cells%22%5BJournal%5D)">Rock inhibition drives resolution of acute inflammation by enhancing neutrophil apoptosis.</a> Cells. 8 (9), 964(2019).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>0.6 mL mikrosantrifüj tüpü</td><td>Corning&nbsp;</td><td>Axygen MCT-060-A</td><td></td></tr><tr><td>1.5 mL mikrosantrifüj tüpleri</td><td>Beijing Labgic Technology</td><td>MCT-001-150</td><td></td></tr><tr><td>100 mm hücre kültürü kabı&nbsp;</td><td>Pekin Labgic Teknolojisi</td><td>12311</td><td></td></tr><tr><td>12 oyuklu plaka</td><td>Pekin Labgic Teknolojisi</td><td>11210</td><td></td></tr><tr><td>15 mL santrifüj tüpü</td><td>Nanjing Vazyme Malzeme Teknolojisi</td><td>TCF00115</td><td></td></tr><tr><td>24 kuyulu plaka</td><td>Pekin Labgic Technology</td><td>11310</td><td></td></tr><tr><td>50 mL santrifüj tüpü</td><td>Nanjing Vazyme Malzeme Teknolojisi</td><td>TCF00150</td><td></td></tr><tr><td>5 mL Yuvarlak Tabanlı Borular</td><td>Corning</td><td>FALCON 352003</td><td></td></tr><tr><td>70 & mu; m hücre süzgeci</td><td>Falcon</td><td>352350</td><td>Seyreltme: 1:1000</td></tr><tr><td>APC anti-insan CD79a (Ig&alpha;) Antikor</td><td>BioLegend</td><td>333505</td><td>581 Seyreltme: 1:200</td></tr><tr><td>APC/Siyanin7 anti-insan CD73 (Ekto-5'-nükleotidaz)</td><td>Antikor BioLegend</td><td>344022</td><td>G46-6 Seyreltme: 1:200</td></tr><tr><td>APC-CY7 Fare IgG1, &kappa; İzotip Kontrolü</td><td>BD Bioscience</td><td>557873</td><td>MOPC-31C (İzotip Kontrolü) Seyreltme: 1:200</td></tr><tr><td>BAMBI antikoru</td><td>Bioss</td><td>bs-12418R</td><td></td></tr><tr><td>Brilliant Violet 510 anti-fare/insan CD44 Antikoru</td><td>BioLegend</td><td>103044</td><td>5E10 Seyreltme: 1:200</td></tr><tr><td>Parlak Menekşe 510 Sıçan IgG2b, &kappa; İzotip Ctrl Antikoru</td><td>BioLegend</td><td>400646</td><td>MOPC-21 (İzotip Kontrolü) Seyreltme: 1:200</td></tr><tr><td>CD105 (Endoglin) Monoklonal Antikor&nbsp; APC</td><td>eBioscience</td><td>17-1057-42</td><td>HM47 Seyreltme: 1:200</td></tr><tr><td>Hücre Sayma Odası Slaytları</td><td>Şangay QIUJING</td><td>XB-K-25</td><td></td></tr><tr><td>Santrifüj</td><td>Pekin BAIYANG</td><td>BY-320C</td><td></td></tr><tr><td>ChamQ Evrensel SYBR qPCR Master Mix</td><td>Vazyme</td><td>Q711-02</td><td></td></tr><tr><td>Kloroform</td><td>XILONG Bilimsel</td><td>13700908</td><td></td></tr><tr><td>DMEM/F-12 (1:1) bazik (1x)</td><td>Gibco</td><td>C11330500BT</td><td></td></tr><tr><td>EDTA (0.5 M), pH 8.0, Rnase içermeyen</td><td>Invitrogen</td><td>AM9260G</td><td>Seyreltme: 1:1000</td></tr><tr><td>Etanol & &nbsp;</td><td>XILONG Bilimsel</td><td>12803405</td><td></td></tr><tr><td>Fetal Sığır Serumu (FBS)</td><td>Gibco</td><td>10099-141C&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>FITC Fare Anti-İnsan CD34</td><td>BD Bioscience</td><td>555821</td><td>IM7 Seyreltme: 1:200</td></tr><tr><td>FITC Fare Anti-İnsan CD45</td><td>BD Bioscience</td><td>555482</td><td>AD2 Seyreltme: 1:200</td></tr><tr><td>FITC Fare Anti-İnsan HLA-DR</td><td>BD Bioscience</td><td>555811</td><td>SN6 Seyreltme: 1:200</td></tr><tr><td>Akış Sitometresi</td><td>BD Bioscience</td><td>FACSAria&trade; III Hücre SıralayıcıAria</td><td></td></tr><tr><td>Flowjo</td><td>BD Bioscience</td><td>V10</td><td></td></tr><tr><td>Nazik Hücre Ayrışma Reaktifi</td><td>KÖK HÜCRE Teknolojileri</td><td>100-0485</td><td></td></tr><tr><td>Keçi Anti-Fare IgG H & L (Alexa Fluor 488)</td><td>abcam</td><td>ab150113</td><td>HI30 Seyreltme: 1:200</td></tr><tr><td>Keçi Anti-Tavşan IgG H & L (AlexaFluor 594)</td><td>abcam</td><td>ab150080</td><td>Seyreltme: 1:1000</td></tr><tr><td>HiScript II Q RT SuperMix qPCR için (+gDNA sileceği)</td><td>Vazyme</td><td>R223-01</td><td></td></tr><tr><td>Ters Mikroskoplar</td><td>Nikon</td><td>ECLIPSE Ts2</td><td></td></tr><tr><td>İzopropil Alkol</td><td>XILONG Scientific</td><td>12802505</td><td></td></tr><tr><td>MFGE8 antikoru</td><td>Biorbyt</td><td>orb388429</td><td>Seyreltme: 1:100</td></tr><tr><td>Mikrosantrifüj</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>FRESCO 21</td><td></td></tr><tr><td>Fare IgG1 kappa İzotip Kontrolü APC</td><td>eBioscience</td><td>17-4714-42</td><td>P3.6.2.8.1 (İzotip Kontrolü) Seyreltme: 1:200</td></tr><tr><td>Fare IgG1 kappa İzotip Kontrolü FITC</td><td>eBioscience</td><td>11-4714-42</td><td>eBMG2b (İzotip Kontrolü) Seyreltme: 1:200</td></tr><tr><td>Fare IgG2b kappa İzotip Kontrolü FITC</td><td>eBioscience</td><td>11-4732-42</td><td>RTK4530 (İzotip Kontrolü) Seyreltme: 1:200</td></tr><tr><td>PBS (10x)</td> <td>Sangon Biotech (Şangay)</td> <td>E607016-0500</td><td></td></tr><tr><td>PE-CY5 Fare Anti-İnsan CD90 &nbsp;</td><td>BD Bioscience</td><td>555597</td><td>P3.6.2.8.1 (İzotip Kontrolü) Seyreltme: 1:200</td></tr><tr><td>PE-CY5 Fare IgG1 & kappa; İzotip Kontrolü</td><td>BD Bioscience</td><td>550618</td><td></td></tr><tr><td>Penisilin-Streptomisin 100x</td><td>Cytiva</td><td>SV30010</td><td>Seyreltme: 1:100</td></tr><tr><td>Gerçek Zamanlı PCR Sistemi</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>Q6</td><td></td></tr><tr><td>RNaz içermeyen su</td><td>tarafından uygulanan Biyosistemler QIAGEN</td><td>129112</td><td></td></tr><tr><td>Spektrofotometre</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>NanoDrop One(840-317400)</td><td></td></tr><tr><td>Steril mikropipet uçları</td><td>Pekin Labgic Teknolojisi</td><td></td><td>Seyreltme: 1:100</td></tr><tr><td>T75 hücre kültürü şişesi</td><td>Beijing Labgic Technology</td><td>13212A</td><td></td></tr><tr><td>Termal Döngüleyici</td><td>Uygulamalı Biyosistemler byThermo Fisher Scientific</td><td>Veriti</td><td></td></tr><tr><td>Tri reaktif</td><td>Sigma Aldrich</td><td>T9424</td><td></td></tr><tr><td>Typsin-EDTA Çözeltisi</td><td>Biyo-Kanal Biyoteknolojisi</td><td>BC-CE-005</td><td></td></tr><tr><td>Su Ceketli CO2&nbsp; Kuluçka Makinesi</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>3111</td><td></td></tr></tbody></table>

İnsan bambiyüksekmfge8yüksek göbek kordonu kaynaklı mezenkimal stromal hücrelerin İzolasyonu

Isolation of Human BAMBIhighMFGE8high Umbilical Cord-Derived Mesenchymal Stromal Cells

Şekil 1, insan UC-MSC'lerinin hücre yüzeyi işaretleyici ifade profillerini göstermektedir. Kültürlenmiş MSC'ler CD44, CD73, CD90 ve CD105 ekspresyonu için güçlü pozitif, CD14, CD34, CD45, CD79 ve HLA-DR ekspresyonu için negatifti. BAMBIyüksekMFGE8yüksek MSC'leri, ekili insan UC-MSC'lerinden ayrıldı ve BAMBI ve MFGE8 ekspresyonu, 3-4 geçiş için genişlemeden sonra akış sitometrisi ile yeniden analiz edildi (Şekil 2). Bu süreçte, BAMBIyük...

İnsan BAMBIyüksekMFGE8yüksek Göbek Kordonu Kaynaklı Mezenkimal Stromal Hücrelerin İzolasyonu

Umbilical cord-derived mesenchymal stromal/stem cells (UC-MSCs) present low immunogenicity and potent immunomodulatory effects for treating various ...

isolation-human-bambihighmfge8high-umbilical-cord-derived-mesenchymal

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Bu protokol deneysel nakli amaçlı otolog yaratmanız serum hayvan kullanmadan mezenkimal stromal hücreleri ve endotel koloni oluşturan hücrelerin izolasyonu ve sonraki genişleme açıklamaktadır.

İnsan Göbek kordonu İzolasyon ve Hayvan Serum Genişleme Mezenkimal stromal hücreler (MKH) ve endotel Koloni Oluşturan Progenitör Hücreler (ECFCs) Türetilmiş

Mezenkimal kök hücreler (MSC'ler), çözünür faktörler veya spesifik biyomateryaller ile uyarıldıklarında osteoblastik soya doğru farklılaşma potansiyeline sahiptir. Bu çalışma, sığır kemik matrisi Nukbone'u (NKB) bir iskele olarak kullanan insan amniyotik membranından (-hMSC'ler) MSC'lerin verilmesi için yeni bir seçenek sunmaktadır.

İnsan Mezenkimal Kök Hücre İzolasyonu ve Gözenekli Kemik Matrix kendi Yetiştirme

Burada, insan göbek kordonu (UC) ve kord fetal plasenta örnek izolasyonu için (CL) Wharton jöle (WJ), kordon plasenta bileşke (CPJ) ve fetal plasenta (FP) astar diseksiyon için bir protokol mevcut ve eksplant kültürü tekniği kullanılarak mezenkimal stromal hücreler (MSC) karakterizasyonu.

İnsan göbek bağı ve fetal plasentadan Mezenkimal Stromal Hücre İzolasyonu ve Vasıflandırılması

İnsan göbek kordonu (UC) sonucu olarak preterm, terim perinatal dönemde elde edilebilir ve teslimat postterm. Bu protokol için biz yalıtım ve UC kaynaklı mezenkimal kök hücre (UC-MSCs) karakterizasyonu fetusa/bebeklerde 19-40 hafta gebelik açıklar.

Yalıtım ve insan göbek kordonu kaynaklı mezenkimal kök hücre erken Doğum ve terim bebekler karakterizasyonu

Bu çalışma, Wharton jölesinin (WJ) bütünlüğünü korumak için benzersiz bir künt diseksiyon prosedürü sunar, bu da daha az hasarlı WJ ve hasat edilen mezenkimal kök hücrelerin (MSC'ler) daha fazla miktarda ve canlılığı ile sonuçlanır. Yöntem, konvansiyonel keskin diseksiyon yöntemlerine kıyasla üstün verim ve proliferatif yetenek göstermektedir.

Umbilikal Kordon Kaynaklı Mezenkimal Kök Hücrelerin Yüksek Verim ve Düşük Hasarla İzolasyonu

Bu raporda, izole etmek için bir sistem ve fare meme bezi kültür donör hücreleri göstermek ve bu hücrelerin orthotopically nakli stromal analiz etmek için alıcı farelerde meme tümör gelişimi sırasında epitelyal etkileşimler.

C57BL/6J Fare Stromal Cells ve Karsinomu Hücreler Meme Nakli

Karsinom ile ilişkili fibroblastlar (CAFs) tümör stroma içinde mevcut miyofibroblastlar zengin, tümör progresyonu sürüş önemli bir rol oynamaktadır. Biz deneysel insan meme fibroblastlar CAFs üretmek için bir coimplantation tümör xengraft modeli geliştirdi. Protokolü tumourigenesis teşvik etmek için bir yeteneği kazandırmak CAF miyofibroblastlar kurmak anlatılmaktadır.

İnsan Meme Fibroblastlar Karsinom İlişkili Fibroblastlar Deneysel Nesil (CAFs)

Yöntemi kullanarak insan dental pulpa kök hücrelerinin (hDPSCs) izolasyonu ve karakterizasyonu...

İnsan Diş Pulp Kök Hücre İzolasyonu, Karakterizasyonu ve Karşılaştırmalı Farklılaşma İki Farklı Yöntemler Kullanılarak Daimi Dişler türetilen

Doğrudan insan dokularından kanser kök hücreler (rulmanları) izolasyonu biyolojik karakterizasyonu için bir koşuldur. Ayrıca zor sorun giderme adımları konusunda ipuçları sağlarken Bu makale, insan dokularından prostat CSCS izolasyonu için bir yöntem anlatılmaktadır.

İnsan Prostat Kanseri Örneklerinden Kanser Kök Hücreleri İzolasyon

Histerektomi örneklerden primer endometrial stromal hücre kültürü sistemlerinin kurulması, önceki araştırma amaçlayan geniş bir dizi takip için değerli bir biyolojik teknik ve çok önemli bir adımdır. Burada, insan hasta cerrahi olarak kesilmiş dokuları endometriyal stromal kültürleri oluşturmak için kullanılan iki yöntem tarif eder.

Histerektomi Örneklerden İlköğretim İnsan endometrial stroma hücrelerinde Kurulması İçin İki Yöntem

Öğrenin, BAMBI yüksek MFGE8 yüksek insan göbek kordonu kaynaklı mezenkimal stromal hücrelerin izolasyonunu ve transkriptomik analizini. Bu yöntem, spesifik hastalıkların tedavisinde optimal hücre alt gruplarının seçilmesini destekler.

İnsan BAMBI^yüksekMFGE8^yüksek Göbek Kordonu Kaynaklı Mezenkimal Stromal Hücrelerin İzolasyonu

Daha fazla video keşfet