Name: Echinococcus granulosustan Küçük Hücre Dışı Veziküllerin İzolasyonu ve Dendritik Hücre Alımı (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-03-28T13:15:00.000+00:00
Duration: 9 min 4 s
Description: Keşfedin Echinococcus granulosus'tan izole edilen küçük hücre dışı veziküllerin dendritik hücreler tarafından alımını ve immünomodülatör etkilerini. Bu yöntem parazit-konak etkileşimlerini ve aşı geliştirme stratejilerini anlamaya yardımcı olur.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<table><tbody><tr><td>1,5 mL tüpler</td><td>Henso</td><td>N14059</td><td></td></tr><tr><td>24 oyuklu plaka&nbsp;</td><td>JetBiofil</td><td>CAP011024</td><td>Polistiren, düz tabanlı, Steril</td></tr><tr><td>6 oyuklu plaka&nbsp; &nbsp;</td><td>Henso Tıp Ltd. Şti.</td><td>N14221</td><td>Düz şekilli taban, PS malzeme, Steril</td></tr><tr><td>70 mm polipropilen hücre süzgeci</td><td>Biologix Group Limited</td><td>15-1070</td><td>Steril</td></tr><tr><td>Alcian mavisi 8 GX boya&nbsp;</td><td>Santa Cruz</td><td>sc-214517B</td><td></td></tr><tr><td>Otomatik CO2 inkübatörü</td><td>Nuarire</td><td>UN-5100E/G DH Sığır</td><td></td></tr><tr><td>Serumu Albümin</td><td>Wiener lab</td><td>1443151</td><td></td></tr><tr><td>CD11c Monoklonal antikor-PECy5&nbsp; &nbsp; 100 ve mikro; g</td><td>eBioscience</td><td>15-0114-82</td><td>klonu (N418)</td></tr> <tr><td>CD40 Monoklonal antikor-FITC 100 ve mikro; g</td><td>eBioscience</td><td>11-0402-82</td><td>klonu (HM40-3)</td></tr> <tr><td>CD80 Monoklonal antikor-APC 100 ve mikro; g</td><td>eBioscience</td><td>17-0801-82</td><td>klon (16-10A-1)</td></tr> <tr><td>CD86 Monoklonal antikor-FITC ve nbsp; 100 &mikro; g</td><td>eBioscience</td><td>11-0862-82</td><td>klon (GL-1)</td></tr> <tr><td>Santrifüj</td><td>Termo Bilimsel</td><td>IEC CL31R Çok</td><td></td>Hızlı</tr><tr><td>Konfokal Mikroskop</td><td>Nikon</td><td>Nikon Konfokal Mikroskop C1</td><td></td></tr><tr><td>Konik tüpler 15 mL çap.17 x 120 mm</td><td>Citotest</td><td>4610-1865</td><td></td></tr><tr><td>DAPI</td><td>Sigma</td><td>107K4034</td><td></td></tr><tr><td>D-Glikoz</td><td>Merk</td><td>1.78343</td><td></td></tr><tr><td>Dimetil Sülfoksit&nbsp;</td><td>Anedra</td><td>6646</td><td></td></tr><tr><td>Fetal Sığır Serumu 500 mL</td><td>Sigma-Aldrich&nbsp; &nbsp;</td><td></td><td></td>12352207</tr><tr><td>Akış Sitometri Sistemi</td><td>BD Biosciences</td><td>BD FACSKanto ve ticaret; II</td><td></td></tr><tr><td>Katlanmış Kılcal Zeta Hücresi&nbsp;</td><td>Malvern Panalitik</td><td>DTS1070</td><td></td></tr><tr><td>Gentamisin sülfat tuzu</td><td>Sigma</td><td>G1264</td><td></td></tr><tr><td>Glutaraldehit çözeltisi</td><td>Fluka</td><td>49630</td><td></td></tr><tr><td>Hepes</td><td>Gibco</td><td>11344041</td><td></td></tr><tr><td>Hipodermik ve nbsp; iğne 21 G x 1 "25/8</td><td>Weigao</td><td></td><td>Steril</td></tr><tr><td>Hipodermik ve nbsp; iğne 25 G x 5/8"</td> <td>Weigao</td><td></td><td>steril</td></tr><tr><td>Ters mikroskop&nbsp;</td><td>Leica</td><td>DMIL LED Baca&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Ketamin</td><td>Holliday</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Lipopolisakkarit&nbsp; Gram-negatif</td> bakteri E. coli K12'den 5 mg <td>Invitrogen</td><td>tlrl-rslps</td><td>LPS. TLR2 / 4 Agonistler</td></tr><tr><td>Loperamid hidroklorür</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>5.08162</td><td></td></tr><tr><td>Orta 199&nbsp;</td><td>Gibco</td><td>11150059</td><td></td></tr><tr><td>Metilen Mavisi</td><td>Anedra</td><td>6337</td><td></td></tr><tr><td>MHC sınıf I (H2kb) Monoklonal antikor-PE 100 ve mikro; g</td><td>eBioscience</td><td>12-5958-82</td><td>klonu (AF6-88.5.5.3)</td></tr> <tr><td>MHC sınıf II (IA / IE) Monoklonal antikor-FITC ve nbsp; 100 &mikro; g</td><td>eBioscience</td><td>11-5321-82</td><td>klonu (M5/114.15.2)</td></tr><tr><td>Mikroskop</td><td>Olympus</td><td>CX31</td><td></td></tr><tr><td>Fare rekombinant murin Flt3L.</td><td>PrepoTech</td><td>250-31L-10UG</td><td></td></tr><tr><td>Nanodrop</td><td>Thermo Scientific</td><td>ND-One</td><td></td></tr><tr><td>Paraformaldehit</td><td>Agar Scientific</td><td>R1018</td><td></td></tr><tr><td>Penisilin G sodyum tuzu</td><td>Sigma</td><td>P3032-10MU</td><td></td></tr><tr><td>PKH26</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>MINI26</td><td></td></tr><tr><td>Potasyum Fosfat Monobazik</td><td>Timper</td><td></td><td>Fosfat Tamponlu Tuzlu (PBS)</td></tr> <tr><td>RBC lizis tamponu 100 mL</td><td>Roche</td><td>11814389001</td><td></td></tr><tr><td>RPMI ortamı&nbsp; 1640 1x 500 mL</td><td>Sigma-Aldrich (Gibco)</td><td>11875093</td><td></td></tr><tr><td>Sodyum Kakodilat&nbsp; &nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C0250</td><td></td></tr><tr><td>Sodyum Klorür</td><td>Anedra</td><td>7647-14-5</td><td>Fosfat Tamponlu Tuzlu Su (PBS) için</td></tr> <tr><td>Sodyum Fosfat Dibazik (Susuz) pa</td><td>Biopack</td><td>1639.07</td><td>Fosfat Tamponlu Tuzlu Su (PBS)</td></tr> <tr><td>için Streptomisin sülfat tuzu</td><td>Sigma</td><td>S9137</td><td></td></tr><tr><td>Şırınga 10 mL</td><td>Bremen</td><td></td><td>Steril</td></tr><tr><td>Kalın Duvar polikarbonat tüpler</td><td>Beckman Coulter</td><td></td><td>13 x 55 mm, nominal kapasite 4 mL</td></tr><tr><td>Transmisyon Elektron Mikroskobu</td><td>Jeol</td><td>JEOL JSM 100CX II</td><td></td></tr><tr><td>Ultrasantrifüj</td><td>Beckman</td><td>Optima LE-80k&nbsp;</td><td>90 Ti rotor</td></tr><tr><td>Ksilazin</td><td>Richmond</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Zetasizer Nano&nbsp;</td><td>Malvern&nbsp;</td><td>Nano ZSizer-ZEN3600</td><td>Dinamik Işık saçılımı ve zeta potansiyeli ölçümleri yapmak için</td></tr></tbody></table>

echinococcus granulosus'tan küçük hücre dışı veziküllerin İzolasyonu ve dendritik hücre alımı

Isolation And Dendritic Cell-Uptake of Small Extracellular Vesicles from Echinococcus granulosus

E. granulosus larva evresinin saf kültürlerinin korunması, sEV'lerin izolasyonu ve karakterizasyonu ve bunların murin dendritik hücreler tarafından alımının ana adımlarını özetleyen bir akış şeması Şekil 1'de gösterilmektedir. E. granulosus protoscoleces ve metacestodes'ten yüksek sEV üretimi elde etmek için, incelenen parazitin sağkalımını ve metabolik homeostazını en üst düzeye çıkarmak için daha önce laboratuvarda geliştirilen bir in vitro kültür yöntemi kullanı...

Echinococcus granulosus'tan Küçük Hücre Dışı Veziküllerin İzolasyonu ve Dendritik Hücre Alımı

The secretion of extracellular vesicles by cestodes is crucial for enabling cellular communication not only among parasites but also with host tissues. In ...

isolation-dendritic-cell-uptake-small-extracellular-vesicles-from

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

İmmünoloji ve Enfeksiyon

Kaynak: Watson, DC, et.al. Escherichia coli ve Diğer Bakterilerden Hücre Dışı Veziküllerin Ölçeklenebilir İzolasyonu ve Saflaştırılması. J. Vis. Uzm. (2021)Bu video, genetiği değiştirilmiş bakterilerin dış zarından türetilen hücre dışı veziküllerin (EV'ler) izolasyonunu ve konsantrasyonunu göstermektedir. İşlem, EV'leri serbest bırakmak için bakterilerin kültürlenmesini, ardından hücreleri ve kalıntıları uzaklaştırmak için sıralı santrifüjleme ve filtreleme adımlarını içerir. Son olarak,...

Dış Zar Kaynaklı Hücre Dışı Veziküllerin Bakterilerden İzolasyonu ve Zenginleştirilmesi

Bu videoda, beyin bağışıklık hücrelerinden (mikroglia) türetilen hücre dışı vezikülleri veya EV'leri izole etmek için boyut dışlama kromatografisine (SEC) dayalı bir yöntem açıklanmaktadır. EV'ler, bir bağışıklık tepkisini düzenleyen aracıları iletmek için moleküler kargo görevi görür. Bu nedenle, izole edilmiş EV'ler, bir nöronal bağışıklık tepkisi sırasında mikroglia-nöron karışmasını incelemek için in vitro bir model olarak kullanılabilir.

Mikroglia Kaynaklı Hücre Dışı Veziküllerin SEC Tabanlı İzolasyonu: Mikroglia Şartlandırılmış Kültür Ortamından Hücre Dışı Vezikülleri İzole Etme Tekniği

Peyer plaklarında hücrelerin belirli altgrupları (PPs), gut-ilişkili lenfoid dokuların primer endüktif sitelerin immünolojik işlevlerini anlamak giderek artan bir ilgi var. Burada akım sitometri analizi ve immun için PP cryosections için tek hücre hazırlıkları PP hazırlamak için paralel protokolleri anahat.

Lenfositler ve mürin Peyer en Yamalar itibaren Dendritik Hücreler İzolasyon Ve immün

Bu protokol, antijen yoğunluğuna tek bir hücre süspansiyonu santrifüj ve ilgi hücre popülasyonlarının son olarak manyetik ve / veya FACS ayıklama, ardından doku enzimatik sindirimi farklı adımları ile insan timus hücreleri sunan izole etmek için bir yöntem göstermektedir.

İnsan Thymus ile myeloid dendritik hücreleri ve epitel hücreleri İzolasyonu

Biz burada yalıtmak ve phenotypical ve fonksiyonel özellikleri değerlendirilmesi için insan kadın üreme sistemi içinde farklı anatomik bölmeleri dendritik hücrelerden arındırmak için bir yöntem açıklanmaktadır. Bu yöntem diğer bağışıklık hücreleri veya diğer Mukozal doku dendritik hücrelerden yalıtmak için adapte edilebilir.

İnsan dişi üreme yolu dendritik hücreler yalıtım Phenotypical ve fonksiyonel çalışmaları için

Burada, Yetişkin Schistosoma japonicum vitro kültür ortamından izolasyonda ekstraselüler veziküller (EVs) açıklamak için bir iletişim kuralı mevcut.

Yalıtım ve yetişkin Schistosoma japonicum üzerinden ekstraselüler veziküller karakterizasyonu

Bu rapor, mikroglia veya kan makrofajlarından ekstrasellüler vezikül (EV) izolasyonu için kronolojik gereksinimleri vurgulamaktadır. Mikroglia kaynaklı EV'ler nötral büyümenin düzenleyicisi olarak değerlendirilirken, c6 glioma hücre invazyonunun kontrolünde in vitro tahlillerde kan makrofajlı eV'ler incelendi. Amaç, belirli mikroortamlarda bağışıklık arabulucusu olarak bu EV fonksiyonlarını daha iyi anlamaktır.

İmmün Hücre Kaynaklı Hücre Dışı Veziküllerin Karakterizasyonu ve Hücre Çevresi Üzerindeki Fonksiyonel Etkisinin İncelenmesi

Üçüncü nesil lentiviral vektörler kullanılarak Echinococcus granulosus'un farklı gelişim evrelerinde hızlı geçici transdüksiyon tekniğini tanımladık.

Echinococcus granulosus'un Strobilated Formlarının Geçici Transdüksiyonu

Bakteriler, biyoaktif biyolojik moleküller taşıyan nanometre boyutunda hücre dışı veziküller (EV'ler) salgılarlar. EV araştırması, biyogenezlerini, mikrop-mikrop ve konakçı-mikrop etkileşimlerindeki rollerini ve bunların potansiyel terapötik uygulamalarını anlamaya odaklanmaktadır. EV araştırmalarının standardizasyonunu kolaylaştırmak için EV'lerin çeşitli bakterilerden ölçeklenebilir izolasyonu için bir iş akışı sunulmaktadır.

Ölçeklenebilir İzolasyon ve Escherichia coli ve Diğer Bakterilerden Hücre Dışı Veziküllerin Saflaştırılması

Önerilen protokol, hücre dışı veziküllerin hücre kültürü süpernatantlarından izolasyonu sırasında endotoksin ile kontaminasyonun nasıl önleneceği ve bunların nasıl uygun şekilde değerlendirileceği konusunda kılavuzlar içermektedir.

Kanser Hücre Hatlarından Elde Edilen Düşük Endotoksin İçeriği Hücre Dışı Veziküllerin İzolasyonu

Keşfedin Echinococcus granulosus'tan izole edilen küçük hücre dışı veziküllerin dendritik hücreler tarafından alımını ve immünomodülatör etkilerini. Bu yöntem parazit-konak etkileşimlerini ve aşı geliştirme stratejilerini anlamaya yardımcı olur.

Echinococcus granulosus'tan Küçük Hücre Dışı Veziküllerin İzolasyonu ve Dendritik Hücre Alımı

Daha fazla video keşfet