Name: Fare Akciğerinden Canlı Miyeloid ve Epitel Hücre Popülasyonlarının İzolasyonu (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-01-31T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 2 s
Description: Öğrenin, fare akciğerinden canlı miyeloid ve epitel hücre popülasyonlarını izole etme yöntemini. Bu protokol, viral enfeksiyon sonrası akciğer onarım mekanizmalarını ve immün-hücre etkileşimlerini incelemek için değerli araçlar sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<meta charset="utf8"></head><body>Akış Sitometrisi için Fare Akciğerlerinden İmmün ve İmmün Olmayan Hücrelerin İzolasyonu

<ol><li>Wanner, A., Salathé, M., O'Riordan, T. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mucociliary+clearance+in+the+airways%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Respir+Crit+Care+Med%22%5BJournal%5D)">Mucociliary clearance in the airways.</a> Am J Respir Crit Care Med. 154 (6), 1868-1902 (1996).</li>
<li>Mason, R. J., Williams, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Type+II+alveolar+cell.+Defender+of+the+alveolus%5BTitle%5D)+AND+%22Am+Rev+Respir+Dis%22%5BJournal%5D)">Type II alveolar cell. Defender of the alveolus.</a> Am Rev Respir Dis. 115 (1), 81-91 (1977).</li>
<li>Fehrenbach, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alveolar+epithelial+type+II+cell%3A+defender+of+the+alveolus+revisited%5BTitle%5D)+AND+%22Respir+Res%22%5BJournal%5D)">Alveolar epithelial type II cell: defender of the alveolus revisited.</a> Respir Res. 2 (1), 33-46 (2001).</li>
<li>Basil, M. C., Alysandratos, K. -D., Kotton, D. N., Morrisey, E. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lung+repair+and+regeneration%3A+Advanced+models+and+insights+into+human+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Stem+Cell%22%5BJournal%5D)">Lung repair and regeneration: Advanced models and insights into human disease.</a> Cell Stem Cell. 31 (4), 439-454 (2024).</li>
<li>Hussell, T., Bell, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alveolar+macrophages%3A+plasticity+in+a+tissue-specific+context%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Immunol%22%5BJournal%5D)">Alveolar macrophages: plasticity in a tissue-specific context.</a> Nat Rev Immunol. 14 (2), 81-93 (2014).</li>
<li>Gschwend, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alveolar+macrophages+rely+on+GM-CSF+from+alveolar+epithelial+type+2+cells+before+and+after+birth%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Med%22%5BJournal%5D)">Alveolar macrophages rely on GM-CSF from alveolar epithelial type 2 cells before and after birth.</a> J Exp Med. 218 (1), e20210745(2021).</li>
<li>Gillich, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Capillary+cell-type+specialization+in+the+alveolus%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Capillary cell-type specialization in the alveolus.</a> Nature. 586 (7831), 785-789 (2020).</li>
<li>Schyns, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Non-classical+tissue+monocytes+and+two+functionally+distinct+populations+of+interstitial+macrophages+populate+the+mouse+lung%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Non-classical tissue monocytes and two functionally distinct populations of interstitial macrophages populate the mouse lung.</a> Nat Commun. 10 (1), 3964(2019).</li>
<li>Chakarov, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Two+distinct+interstitial+macrophage+populations+coexist+across+tissues+in+specific+subtissular+niches%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Two distinct interstitial macrophage populations coexist across tissues in specific subtissular niches.</a> Science. 363 (6432), eaat3773(2019).</li>
<li>Tsukui, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Collagen-producing+lung+cell+atlas+identifies+multiple+subsets+with+distinct+localization+and+relevance+to+fibrosis%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Collagen-producing lung cell atlas identifies multiple subsets with distinct localization and relevance to fibrosis.</a> Nat Commun. 11 (1), 1920(1920).</li>
<li>Aegerter, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influenza-induced+monocyte-derived+alveolar+macrophages+confer+prolonged+antibacterial+protection%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Immunol%22%5BJournal%5D)">Influenza-induced monocyte-derived alveolar macrophages confer prolonged antibacterial protection.</a> Nat Immunol. 21 (2), 145-157 (2020).</li>
<li>Johansson, C., Kirsebom, F. C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neutrophils+in+respiratory+viral+infections%5BTitle%5D)+AND+%22Mucosal+Immunol%22%5BJournal%5D)">Neutrophils in respiratory viral infections.</a> Mucosal Immunol. 14 (4), 815-827 (2021).</li>
<li>Li, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Monocyte-derived+alveolar+macrophages+autonomously+determine+severe+outcome+of+respiratory+viral+infection%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Immunol%22%5BJournal%5D)">Monocyte-derived alveolar macrophages autonomously determine severe outcome of respiratory viral infection.</a> Sci Immunol. 7 (71), eabj5761(2022).</li>
<li>Moll, H. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Orthotopic+transplantation+of+syngeneic+lung+adenocarcinoma+cells+to+study+PD-L1+expression%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Orthotopic transplantation of syngeneic lung adenocarcinoma cells to study PD-L1 expression.</a> J Vis Exp. (143), e58101(2019).</li>
<li>Warshamana, G. S., Corti, M., Brody, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((TNF-%CE%B1%2C+PDGF%2C+TGF-%CE%B21+expression+by+primary+mouse+bronchiolar-alveolar+epithelial+and+mesenchymal+cells%3A+TNF-%CE%B1+induces+TGF-%CE%B21%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Mol+Pathol%22%5BJournal%5D)">TNF-α, PDGF, TGF-β1 expression by primary mouse bronchiolar-alveolar epithelial and mesenchymal cells: TNF-α induces TGF-β1.</a> Exp Mol Pathol. 71 (1), 13-33 (2001).</li>
<li>Corti, M., Brody, A. R., Harrison, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+and+primary+culture+of+murine+alveolar+type+II+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Respir+Cell+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Isolation and primary culture of murine alveolar type II cells.</a> Am J Respir Cell Mol Biol. 14 (3), 309-315 (1996).</li>
<li>Quantius, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influenza+virus+infects+epithelial+stem%2Fprogenitor+cells+of+the+distal+lung%3A+Impact+on+Fgfr2b-driven+epithelial+repair%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Pathog%22%5BJournal%5D)">Influenza virus infects epithelial stem/progenitor cells of the distal lung: Impact on Fgfr2b-driven epithelial repair.</a> PLoS Pathog. 12 (5), e1005544(2016).</li>
<li>Wu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transcardiac+perfusion+of+the+mouse+for+brain+tissue+dissection+and+fixation%5BTitle%5D)+AND+%22BIO+Protoc%22%5BJournal%5D)">Transcardiac perfusion of the mouse for brain tissue dissection and fixation.</a> BIO Protoc. 11 (8), e3988(2021).</li>
<li>Morton, J., Snider, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Guidelines+for+collection+and+processing+of+lungs+from+aged+mice+for+histological+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Pathobiol+Aging+Age+Relat+Dis%22%5BJournal%5D)">Guidelines for collection and processing of lungs from aged mice for histological studies.</a> Pathobiol Aging Age Relat Dis. 7 (1), 1313676(2017).</li>
<li>Bijgaart, R. J. E., van den Kong, N., Maynard, C., Plaks, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ex+vivo+live+imaging+of+lung+metastasis+and+their+microenvironment%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Ex vivo live imaging of lung metastasis and their microenvironment.</a> J Vis Exp. (108), e53741(2016).</li>
<li>Shi, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+and+purification+of+immune+cells+from+the+liver%5BTitle%5D)+AND+%22Int+Immunopharmacol%22%5BJournal%5D)">Isolation and purification of immune cells from the liver.</a> Int Immunopharmacol. 85, 106632(2020).</li>
<li>Short, K. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influenza+virus+damages+the+alveolar+barrier+by+disrupting+epithelial+cell+tight+junctions%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Respir+J%22%5BJournal%5D)">Influenza virus damages the alveolar barrier by disrupting epithelial cell tight junctions.</a> Eur Respir J. 47 (3), 954-966 (2016).</li>
<li>Laidlaw, B. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CD4%2B+T+cell+help+guides+formation+of+CD103%2B+lung-resident+memory+CD8%2B+T+cells+during+influenza+viral+infection%5BTitle%5D)+AND+%22Immunity%22%5BJournal%5D)">CD4+ T cell help guides formation of CD103+ lung-resident memory CD8+ T cells during influenza viral infection.</a> Immunity. 41 (4), 633-645 (2014).</li>
<li>D'Agostino, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protocol+for+isolation+and+characterization+of+lung+tissue-resident+memory+T+cells+and+airway-trained+innate+immunity+after+intranasal+vaccination+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22STAR+Protoc%22%5BJournal%5D)">Protocol for isolation and characterization of lung tissue-resident memory T cells and airway-trained innate immunity after intranasal vaccination in mice.</a> STAR Protoc. 3 (2), 101652(2022).</li>
<li>Waal, A. M., de Hiemstra, P. S., Ottenhoff, T. H., Joosten, S. A., vander Does, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lung+epithelial+cells+interact+with+immune+cells+and+bacteria+to+shape+the+microenvironment+in+tuberculosis%5BTitle%5D)+AND+%22Thorax%22%5BJournal%5D)">Lung epithelial cells interact with immune cells and bacteria to shape the microenvironment in tuberculosis.</a> Thorax. 77 (4), 408-416 (2022).</li>
<li>Bhattacharya, J., Westphalen, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Macrophage-epithelial+interactions+in+pulmonary+alveoli%5BTitle%5D)+AND+%22Semin+Immunopathol%22%5BJournal%5D)">Macrophage-epithelial interactions in pulmonary alveoli.</a> Semin Immunopathol. 38 (4), 461-469 (2016).</li>
</ol>

<table><tbody><tr>Kayma Uçlu <td>VWR</td> ile <td>1 mL şırınga</td><td>BD309659</td><td></td></tr><tr><td>1.7 mL mikrosantrifüj tüpü</td><td>DOT Scientific</td><td>RN1700-GMT</td><td></td></tr><tr><td>10 mL pipetler (tek kullanımlık)</td><td>Fisher Scientific</td><td>12-567-603</td><td></td></tr><tr><td>BD Luer-Lok Uçlu 10 mL Şırınga</td><td>VWR</td><td>75846-756</td><td></td></tr><tr><td>123 sayım eBeads Boncuk Sayma</td><td>Thermo Scientific</td><td>01-1234-42</td><td></td></tr><tr><td>12 kanallı pipet (30-300ul)</td><td>USA Scientific&nbsp;</td><td>7112-3300</td><td></td></tr><tr><td>%16 paraformaldehit</td><td>VWR</td><td>100503-917</td><td></td></tr><tr><td>Normal konik 23 G iğne</td><td>VWR</td><td>305194</td><td></td></tr><tr><td>27 G normal konik</td><td>iğne VWR</td><td>BD305109</td><td></td></tr><tr><td>5 mL pipet (tek kullanımlık)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>170373</td><td></td></tr><tr><td>50 mL santrifüj tüpleri</td><td>Olympus&nbsp;</td><td>28-108</td><td></td></tr><tr><td>96 kuyulu yuvarlak alt plaka</td><td>Corning</td><td>3797</td><td></td></tr><tr><td>ACK parçalama tamponu</td><td>Gibco</td><td>A100492-01</td><td></td></tr><tr><td>Alexa Fluor 488 anti-fare CD11c</td><td>BioLegend</td><td>117311</td><td></td></tr><tr><td>Anti-F4/80 Sıçan Monoklonal Antikoru (PE (Phycoerythrin)/Cy7)</td><td>BioLegend</td><td>123114</td><td></td></tr><tr><td>APC anti-fare CD64 (Fc & gama; RI)</td><td>BioLegend</td><td>139306</td><td></td></tr><tr><td>APC/Cyanine7 anti-fare CD45</td><td>BioLegend</td><td>103115</td><td></td></tr><tr><td>BD Insyte Autoguard Korumalı IV Kateterler</td><td>VWR</td><td>381423</td><td></td></tr><tr><td>Brilliant Violet 421 anti-fare I-A/I-E (MHC-II)BioLegend</td><td></td> <td>107632</td><td></td></tr><tr><td>Brilliant Violet 421 anti-fare/insan CD11b</td><td>BioLegend</td><td>101235</td><td></td></tr><tr><td>Brilliant Violet 605 anti-fare Ly-6C</td><td>BioLegend</td><td>128036</td><td></td></tr><tr><td>Brilliant Violet 711 anti-fare CD45</td><td>BioLegend</td><td>103147</td><td></td></tr><tr><td>C57BL / 6J fareler&nbsp;</td><td>Jackson Laboratuvarları</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Cd140a (PDGFRA) Monoklonal Antikor (APA5), PE-Siyanin7, eBioscience</td><td>Yaşam Teknolojileri</td><td>25-1401-82</td><td></td></tr><tr><td>CD170 (Siglec F) Monoklonal Antikor (1RNM44N), PE</td><td>Yaşam Teknolojileri</td><td>12170280</td><td></td></tr><tr><td>Hücre süzgeçleri</td><td>Corning</td><td>352350</td><td></td></tr><tr><td>Santrifüj</td><td>Eppenodorf</td><td>Santrifüj 5910R</td><td></td></tr><tr><td>Sığır pankreasından Deoksiribonükleaz I (DNaz)</td> <td>Millipore Sigma</td><td>DN25-100MG</td><td>-20 ° C'de saklanan stok çözeltisi olarak DPBS'de 20 mg / mL'de sulandırılmıştır; C</td></tr><tr><td>Dispase</td><td>VWR</td><td>76176-668</td><td>Bir kez çözülür ve -20 &°C'de 1 mL alikot olarak saklanır; C</td></tr><tr><td>Diseksiyon forseps (Dumont #7)</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>11297-00</td><td></td></tr><tr><td>Diseksiyon makası</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>14060-09</td><td></td></tr><tr><td>DPBS</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>14190250</td><td></td></tr><tr><td>eBioscience fiksasyon kiti</td><td>Yaşam Teknolojileri</td><td>00-5523-00</td><td></td></tr><tr><td>EDTA</td><td>Yaşam Teknolojileri</td><td>AM9260G</td><td></td></tr><tr><td>Etanol</td><td>VWR</td><td>TX89125170HU</td><td></td></tr><tr><td>FBS</td><td>GeminiBio</td><td>100-106</td><td>Bir kez çözülür ve -20 ° C'de alikotlar olarak uzun süreli depolamadan önce ısıyla inaktive edilir; C</td></tr><tr><td>FITC anti-fare CD31 Antikor</td><td>BioLegend</td><td>102406</td><td></td></tr><tr><td>Gibco RPMI 1640 Orta</td><td>Fisher Scientific</td><td>11-875-093</td><td></td></tr><tr><td>Cam slaytlar</td><td>Fisher Scientific</td><td>12-552-3</td><td></td></tr><tr><td>dereceli rezervuar</td><td>USA Scientific&nbsp;</td><td>1930-2235</td><td></td></tr><tr><td>Buz kovası</td><td>Corning</td><td>432128</td><td></td></tr><tr><td>Ketamin hidrokolorid enjeksiyonu (100 mg / mL)</td> <td>Dechra</td><td></td>: <td>Ketamin ve ksyalazin ötenazi karışımı, steril DPBS'de bir aya kadar 30 mg / mL ketamin hidroklorür ve 4.5 mg / mL ksilazin altında tutulabilir.</td></tr><tr><td>Liferaz</td><td>Millipore Sigma</td><td>5401119001</td><td>-20 ° C'de depolanan stok çözeltisi olarak DPBS'de 5 mg / mL'de sulandırılır; </td></tr><tr><td>96 kuyulu plakalar için C Kapakları</td><td>Fisher Scientific</td><td>07-201-731</td><td></td></tr><tr><td>Orbital İnkübatör Çalkalayıcı</td><td>Barnstead Lab-Line</td><td>SHKE4000</td><td></td></tr><tr><td>p1000 pipet</td><td>Eppenodorf</td><td>3123000063</td><td></td></tr><tr><td>p1000 uç</td><td>USA Scientific&nbsp;</td><td>1122-1830</td><td></td></tr><tr><td>p200 pipet</td><td>Eppenodorf</td><td>3123000055</td><td></td></tr><tr><td>p200 uçları</td><td>USA Scientific&nbsp;</td><td>1110-1700</td><td></td></tr><tr><td>PE anti-fare CD326 (Ep-CAM)</td><td>BioLegend</td><td>118206</td><td></td></tr><tr><td>PerCP/Cyanine5.5 anti-fare CD104 Antikoru</td><td>BioLegend</td><td>123614</td><td></td></tr><tr><td>PerCP/Cyanine5.5 anti-fare Ly-6G</td><td>BioLegend</td><td>127616</td><td></td></tr><tr><td>Pipet Yardımı&nbsp;</td><td>Drummond</td><td>4-000-101</td><td></td></tr><tr><td>Saflaştırılmış anti-fare CD16/32 </td><td>BioLegend</td><td>101302</td><td>Metinde "Fc bloğu" olarak anılır </td></tr><tr><td>Sprey şişesi</td><td>VWR</td><td>23609-182</td><td></td></tr><tr><td>Sütür (Boyut 2-0)</td><td>VWR</td><td>100190-026</td><td></td></tr><tr><td>Alt Pedler</td><td>VWR</td><td>56617-014</td><td></td></tr><tr><td>Xysed (ksilazin 100mg/mL)</td><td>Pivetal</td><td></td><td>Yukarıdaki ketamin hidrokolorid notlarına bakınız.</td></tr><tr><td>Zombie Aqua Tamir Edilebilir Canlılık Kiti</td><td>BioLegend</td><td>423102</td><td></td></tr></tbody></table>

fare akciğerinden canlı miyeloid ve epitel hücre popülasyonlarının İzolasyonu

Isolation of Live Myeloid and Epithelial Cell Populations from the Mouse Lung

<p class=...

Fare Akciğerinden Canlı Miyeloid ve Epitel Hücre Popülasyonlarının İzolasyonu

The lung is continuously exposed to pathogens and other noxious environmental stimuli, rendering it vulnerable to damage, dysfunction, and the development ...

isolation-live-myeloid-epithelial-cell-populations-from-mouse

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

İmmünoloji ve Enfeksiyon

Burada, fare pulmoner endotel hücrelerin izolasyonu ve kültürü için bir protokol açıklar. Bu yöntem, mekanik ve enzimatik akciğer dokusunda ayrılma yanı sıra anti-PECAM-1 ve çoğunlukla mikrovasküler kökenli saf bir endotel hücre popülasyonu üreten manyetik boncuk, konjuge anti-ICAM-2 antikorları kullanarak 2-aşamalı bir arınma süreci kapsar.

Yenidoğan Fareler Pulmoner Endotel Hücreleri İzolasyon ve Kültür

Bu yazıda, fare ikamet akciğer mezenkimal kök hücreler (akciğer MSC), genişleme, karakterizasyonu ve immünomodülatör özellikleri analiz izolasyonu göstermektedir.

Hoechst İzolasyonu ve Karakterizasyonu Düşük CD45 Negatif Fare Akciğer Mezenkimal Kök Hücre

Fare akciğer dendritik hücreler yüksek oranda saflaştırılmış açıklanmıştır. Özgül ağırlık, geleneksel dendritik hücre alt izolasyon verilir.

Fare Akciğer Dendritik Hücrelerinin İzolasyonu

Biz flow sitometrik negatif seçimin birincil fare tip II alveol epitel hücrelerinde (AECII) hızlı izolasyonu tarif. Bu AECII yüksek canlılığı ve saflık göstermektedir ve bu gibi otoimmün veya bulaşıcı hastalıklar gibi solunum koşullar altında rolü ile ilgili işlevsel ve klinik çalışmalar, geniş bir aralığı için uygundur.

Fonksiyonel ve Moleküler Çalışmalar Birincil murin Tip II alveol epitel hücrelerinde akım sitometri İzolasyonu

Bu video, murin akciğerlerinde bulunan bağışıklık hücrelerini tanımlamak için bir in vitro tekniği göstermektedir. Hedef bağışıklık hücrelerini murin akciğer dokusundan izole ettikten sonra, doğuştan gelen ve adaptif bağışıklık hücreleri üzerindeki spesifik belirteçlere karşı florofor etiketli antikorlardan oluşan bir kokteyl kullanılarak yüzey olarak etiketlenirler. Ek olarak, monositler, makrofajlar ve dendritik hücreler, hücre içi bir işaretleyici kullanılarak etiketlenir. Çeşitli bağışıklık...

Murin Akciğerlerinde Bulunan Doğuştan Gelen ve Adaptif Bağışıklık Hücrelerini Tanımlamak için İn Vitro Bir Yöntem

Bu protokol, enzimatik sindirim, yoğunluk gradyanlı ayırma plastik uyumu ve CD146 + manyetik boncuk seçimi aracılığıyla, sıçanlardan primer akciğer yerleşik mezenkimal stromal hücreler elde etmek için bir izolasyon tekniği tarif etmektedir.

CD146 İzolasyonu<sup&gt; +</supSıçan Akcigerlerinden&gt; Resident Akciğer Mezenkimal Stromal hücreler

Bu protokol, iskemik inmenin bir murin modeli olan geçici orta serebral arter tıkanıklığını takiben pulmoner ortamda immün hücre kompozisyonu, sitokin profili ve kemokin profilindeki değişiklikleri tanımlamak için flow sitometrinin kullanımını açıklamaktadır.

Pulmoner Ortamda İmmün Hücrelerin ve Proinflamatuar Mediatörlerin Karakterizasyonu

Bu makalede, insan akciğerinin proksimal ve distal bölgelerinden canlı epitel hücrelerinin zenginleştirilmesine izin veren doku dissosiyasyonu ve hücresel fraksiyonasyon yaklaşımları için ayrıntılı bir metodoloji sunulmaktadır. Bu yaklaşımlar, akciğer epitel progenitör hücrelerinin fonksiyonel analizi için 3D organoid kültür modelleri kullanılarak uygulanmaktadır.

Organoid Kültür için İnsan Akciğer Epitel Progenitör Hücrelerinin İzolasyonu ve Zenginleştirilmesi

Bu makalede, primer akciğer endotel hücreleri yenidoğan farelerden izole edilmiş ve kültürlenmiştir.

Primer Fare Akciğer Endotel Hücrelerinin İzolasyonu

Aşağıda açıklanan protokol, spesifik retinoid otofloresan kullanarak ve floresanla aktive edilen hücre sınıflandırması kullanarak retinoid içeren hücreleri oldukça heterojen akciğer hücresi popülasyonlarından izole etmenin basit ve etkili bir yoludur.

Akciğer Retinoid İçeren Hücrelerin Hücre Ayıklama ile İzolasyonu

Bu protokol, yenidoğan, genç veya yetişkin fare akciğerlerinden (enfekte veya enfekte olmayan) canlı alveolar tip II epitel hücrelerini (AECII) izole etmek için akış sitometrisine dayalı bir yöntem sunar. Bu yaklaşım, AECII'nin akciğer iltihabı ve enfeksiyon sırasında rollerini belirlemeye yönelik moleküler ve/veya fonksiyonel çalışmaların ilerlemesini sağlar.

Yenidoğnan, genç ve yetişkin fare akciğerlerinden alveolar tip II epitel hücrelerinin enfeksîyonel deneysel ortamlara uyarlanabilir izolyasyonu

Öğrenin, fare akciğerinden canlı miyeloid ve epitel hücre popülasyonlarını izole etme yöntemini. Bu protokol, viral enfeksiyon sonrası akciğer onarım mekanizmalarını ve immün-hücre etkileşimlerini incelemek için değerli araçlar sunar.

Fare Akciğerinden Canlı Miyeloid ve Epitel Hücre Popülasyonlarının İzolasyonu

Daha fazla video keşfet