Name: Fare Kulağında Mycobacterium aviumun İntradermal Aşılanması (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-07-03T14:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 20 s
Description: Keşfedin fare kulağında Mycobacterium avium'un intradermal aşılanması yöntemini. Bu model, tüberküloz dışı mikobakterilere karşı bağışıklık yanıtlarını in vivo ortamda araştırmak için kullanılır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

<ol><li>Abdelaal, H. F. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mycobacterium+abscessus%3A+It%27s+Complex%5BTitle%5D)+AND+%22Microorganisms%22%5BJournal%5D)">Mycobacterium abscessus: It's Complex.</a> Microorganisms. 10 (7), (2022).</li>
<li>Baldwin, S. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+complexities+and+challenges+of+preventing+and+treating+nontuberculous+mycobacterial+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Negl+Trop+Dis%22%5BJournal%5D)">The complexities and challenges of preventing and treating nontuberculous mycobacterial diseases.</a> PLoS Negl Trop Dis. 13 (2), p. e0007083(2019).</li>
<li>Falkinham, J. O. 3rd <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Environmental+sources+of+nontuberculous+mycobacteria%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Chest+Med%22%5BJournal%5D)">Environmental sources of nontuberculous mycobacteria.</a> Clin Chest Med. 36 (1), 35-41 (2015).</li>
<li>Honda, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Environmental+sources+and+transmission+of+nontuberculous+mycobacteria%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Chest+Med%22%5BJournal%5D)">Environmental sources and transmission of nontuberculous mycobacteria.</a> Clin Chest Med. 44 (4), 661-674 (2023).</li>
<li>Pfaller, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Occurrence+revisited%3A+Mycobacterium+avium+and+Mycobacterium+intracellulare+in+potable+water+in+the+USA%5BTitle%5D)+AND+%22Appl+Microbiol+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Occurrence revisited: Mycobacterium avium and Mycobacterium intracellulare in potable water in the USA.</a> Appl Microbiol Biotechnol. 106 (7), 2715-2727 (2022).</li>
<li>Mercaldo, R. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Environmental+risk+of+nontuberculous+mycobacterial+infection%3A+Strategies+for+advancing+methodology%5BTitle%5D)+AND+%22Tuberculosis+%28Edinb%29%22%5BJournal%5D)">Environmental risk of nontuberculous mycobacterial infection: Strategies for advancing methodology.</a> Tuberculosis (Edinb). 139, 102305(2023).</li>
<li>Marshall, J. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nontuberculous+mycobacteria+testing+and+culture+positivity+in+the+United+States%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Infect+Dis%22%5BJournal%5D)">Nontuberculous mycobacteria testing and culture positivity in the United States.</a> BMC Infect Dis. 24 (1), 288(2024).</li>
<li>Ghasemi, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+non-tuberculous+mycobacteria+on+BCG+vaccine+efficacy%3A+A+narrative+review%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Tuberc+Other+Mycobact+Dis%22%5BJournal%5D)">Effects of non-tuberculous mycobacteria on BCG vaccine efficacy: A narrative review.</a> J Clin Tuberc Other Mycobact Dis. 36, 00451(2024).</li>
<li>Njagi, L. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Attenuated+tuberculin+skin+test+responses+associated+with+Mycobacterium+intracellulare+sputum+colonization+in+an+adolescent+TB+prevalence+survey+in+Western+Kenya%5BTitle%5D)+AND+%22Tuberculosis+%28Edinb%29%22%5BJournal%5D)">Attenuated tuberculin skin test responses associated with Mycobacterium intracellulare sputum colonization in an adolescent TB prevalence survey in Western Kenya.</a> Tuberculosis (Edinb). 147, 102514(2024).</li>
<li>Larsen, S. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Subunit+vaccine+protects+against+a+clinical+isolate+of+Mycobacterium+avium+in+wild+type+and+immunocompromised+mouse+models%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Subunit vaccine protects against a clinical isolate of Mycobacterium avium in wild type and immunocompromised mouse models.</a> Scientific Reports. 11 (1), 9040-9040 (2021).</li>
<li>Dutt, T. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mucosal+exposure+to+non-tuberculous+mycobacteria+elicits+B+cell-mediated+immunity+against+pulmonary+tuberculosis%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Rep%22%5BJournal%5D)">Mucosal exposure to non-tuberculous mycobacteria elicits B cell-mediated immunity against pulmonary tuberculosis.</a> Cell Rep. 41 (11), 111783(2022).</li>
<li>Kupz, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Mouse+Model+of+Latent+Tuberculosis+Infection+to+Study+Intervention+Strategies+to+Prevent+Reactivation%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">A Mouse Model of Latent Tuberculosis Infection to Study Intervention Strategies to Prevent Reactivation.</a> PLoS One. 11 (7), e0158849(2016).</li>
<li>Reece, S. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Serine+protease+activity+contributes+to+control+of+Mycobacterium+tuberculosis+in+hypoxic+lung+granulomas+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">Serine protease activity contributes to control of Mycobacterium tuberculosis in hypoxic lung granulomas in mice.</a> J Clin Invest. 120 (9), 3365-3376 (2010).</li>
<li>Nemeth, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contained+Mycobacterium+tuberculosis+infection+induces+concomitant+and+heterologous+protection%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Pathogens%22%5BJournal%5D)">Contained Mycobacterium tuberculosis infection induces concomitant and heterologous protection.</a> PLoS Pathogens. 16 (7), e1008655(2020).</li>
<li>Jarchow-MacDonald, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Changing+Incidence+and+Characteristics+of+Nontuberculous+Mycobacterial+Infections+in+Scotland+and+Comparison+With+Mycobacterium+tuberculosis+Complex+Incidence+%282011+to+2019%29%5BTitle%5D)+AND+%22Open+Forum+Infect+Dis%22%5BJournal%5D)">Changing Incidence and Characteristics of Nontuberculous Mycobacterial Infections in Scotland and Comparison With Mycobacterium tuberculosis Complex Incidence (2011 to 2019).</a> Open Forum Infect Dis. 10 (1), ofac665(2023).</li>
<li>Thomson, R. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+climate+variables+on+the+rising+incidence+of+nontuberculous+mycobacterial+%28NTM%29+infections+in+Queensland%2C+Australia+2001-2016%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Total+Environ%22%5BJournal%5D)">Influence of climate variables on the rising incidence of nontuberculous mycobacterial (NTM) infections in Queensland, Australia 2001-2016.</a> Sci Total Environ. 740, 139796(2020).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>% 0.05 Tween80</td><td>Sigma</td><td>P6224</td><td></td></tr><tr><td>1 mL şırınga</td><td>Fisher</td><td>15-823-434</td><td></td></tr><tr><td>7H10 agar triplate</td><td>Moltox</td><td>21-40S234</td><td></td></tr><tr><td>26G künt iğne</td><td>Fisher</td><td>NC0981254</td><td></td></tr><tr><td>Biyogüvenlik kabini</td><td>Nuaire</td><td>NU-543-400</td><td></td></tr><tr><td>CO2 inkübatör</td><td>Fisher Scientific</td><td>15-103-0513</td><td></td></tr><tr><td>Çift taraflı bant</td><td>Scotch</td><td>3136</td><td></td></tr><tr><td>Hamilton 701N mikrolitre şırınga</td><td>Fisher</td><td>14-824-16</td><td></td></tr><tr><td>Sert doku omni uçları</td><td>Fisher</td><td>15-340-102</td><td></td></tr><tr><td>Isıtma yastığı</td><td>Kent Scientific</td><td>HTP-1500</td><td></td></tr><tr><td>İnsülin iğnesi</td><td>Fisher</td><td>NC1551333</td><td></td></tr><tr><td>Ketamin</td><td>Patterson Veteriner</td><td>07-890-8598</td><td></td></tr><tr><td>Işıklı büyüteç</td><td>Brightech</td><td>B07MMZ27QK</td><td></td></tr><tr><td>PBS</td><td>ThermoFisher</td><td>10010072</td><td></td></tr><tr><td>Doku homojenizatörü</td><td>Omni</td><td>TH115</td><td></td></tr><tr><td>Doku homojenizatör standı</td><td>Omni</td><td>S1000</td><td></td></tr><tr><td>Ksilazin</td><td>Patterson Veteriner</td><td>07-808-1947</td><td></td></tr></tbody></table>

fare kulağında mycobacterium avium'un İntradermal aşılanması

Intradermal Inoculation of Mycobacterium avium in the Mouse Ear

Kulak dermisini bir enfeksiyon veya maruz kalma yolu olarak kullanan tekrarlanabilir bir NTM zorluk modelinin oluşturulup oluşturulamayacağını belirlemek için yukarıda ayrıntıları verilen protokolü kullandık. Kulaklar, meydan okuma sonrası 28 Günlük zaman noktasında iki hayvandan toplandı, homojenize edildi ve mikobakteri seçici 7H10 ortamında tarif edildiği gibi kaplandı. M. avium'un intradermal olarak zorlanan kulaklarda 28 güne kadar devam ettiğini ve itiraz edilmeyen kulakta M. avium yokluğu olduğunu gözlemledik (Şekil 2).
Enfeksiyondan 28 gün sonra rakipsiz kulağa yayılma gözlemlemezken, gizli TB modellemesi için bu kulak dermisi modelini kullanan diğerleri, diğer distal organ bölgelerine yayılmayı gözlemledi14. Daha düşük bir meydan okuma dozunun ve M. avium izolatının kullanılmasının, kronik enfeksiyona karşı maruziyeti daha iyi yansıtabilecek daha sonraki zaman noktalarına yayılmayı azaltabileceğini varsaydık. Bu nedenle, enfeksiyondan 28, 56, 90 ve 132 gün sonra n = 5 M. avium meydan okuyan farelerden oluşan kohortlarda ötenazi yapıldı. Aşağıdaki organlar, kulak dokuları için tarif edilenle aynı protokolle homojenize edildi: akciğer, dalak, drenaj lenf nodu (DLN) ve beyin. Bu zorluk yolu, zaman içinde sporadik bir yayılma ile sonuçlandı, burada hayvanların yarısından daha azı enfeksiyondan 56 veya 90 gün sonra test edilen organlarda sayılabilir CFU gösterdi (Tablo 1). Meydan okumadan 132 gün sonra, tüm farelerin dalaklarında tespit edilebilir M. avium vardı (n = 5/5 hayvan değerlendirildi), ancak bu zaman noktasına kadar diğer organlarda minimal (DLN'de n = 1/5) veya hiç (akciğerlerde veya beyinde n = 0/5) bakteri barındırıyor gibi görünüyordu (Tablo 1).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67675/67675fig1.jpg"> 
Şekil 1: Eğimli tarafı yukarı bakacak şekilde bir iğnenin yönü. İğnenin yerleştirilmesinden önce, aşılamayı düzgün bir şekilde uygulamak için eğim tarafı yukarı bakmalıdır. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67675/67675fig1large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67675/67675fig2.jpg"> 
Şekil 2: Meydan okumadan 28 gün sonra M. avium tarafından kulak dokusu kolonizasyonu. Dişi C57BL / 6 fareler, 102 CFU Mycobacterium avium ile kulakta zorlandı. Meydan okunan kulak (+), 28 günde, her hayvan farklı bir renk ve sembolde olmak üzere, gösterilen tek bir deneyden n = 2 bireysel hayvan, rakipsiz kulak (-) ile karşılaştırıldı. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67675/67675fig2large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td rowspan="2">Zaman (gün)</td>
			<td colspan="4">Organ Kütüğü10 CFU</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Akciğer</td>
			<td>Dalak</td>
			<td>DLN (İngilizce)</td>
			<td>Beyin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>28</td>
			<td>3.08, ND, ND, ND, ND</td>
			<td>2.81, ND, ND, ND, ND</td>
			<td>ND, ND, ND, ND, ND</td>
			<td>0.78, 0.90, ND, ND, ND</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>56</td>
			<td>2.30, ND, ND, ND, ND</td>
			<td>1.53, 3.43, ND, ND, ND</td>
			<td>2.78, ND, ND, ND, ND</td>
			<td>1.20, ND, ND, ND, ND</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>90</td>
			<td>ND, ND, ND, ND, ND</td>
			<td>0.60, 3.35, 3.26, ND, ND</td>
			<td>ND, ND, ND, ND, ND</td>
			<td>0.60, ND, ND, ND, ND</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>132</td>
			<td>ND, ND, ND, ND, ND</td>
			<td>4.03, 3.58, 3.58, 4.03, 3.69</td>
			<td>2.41, ND, ND, ND, ND</td>
			<td>ND, ND, ND, ND, ND</td>
		</tr>
		<tr>
			<td colspan="5">DLN = drenaj lenf nodu, ND = tespit edilmedi</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
Tablo 1: M. avium'un meydan okuma sonrası zamanla kulaktan yayılması. Akciğerler, dalak, drenaj lenf nodu (DLN) ve beyin, meydan okuma sonrası zaman noktası başına n = 5 fareden toplandı. Homojenize dokular kaplandı ve bakteri üremesi açısından değerlendirildi. Organ CFU, bakterilerin sayıldığı ve tespit edilmediği (ND) log10 dönüştürülmüş değerler olarak sunuldu, burada herhangi bir konsantrasyonda CFU gözlenmedi. Zaman seyri verileri bir deneyin temsilcisidir.

Fare Kulağında Mycobacterium avium'un İntradermal Aşılanması

In contrast to natural nontuberculous mycobacterial (NTM) exposures or infections whose pathology is founded on a slow-replicating organism, the aerosol ...

intradermal-inoculation-of-mycobacterium-avium-in-the-mouse-ear

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

İmmünoloji ve Enfeksiyon

Bu video, anestezi uygulanmış bir farede sistemik inflamasyonun indüksiyonunu göstermektedir. Mikobakteriyel antijen adjuvan depolarının enjeksiyonu sitokin salınımını ve lokalize inflamasyonu tetikler. Lenfatik damarlar açılarak bağışıklık hücresinin lenf düğümlerine girmesini ve proinflamatuar sitokinleri serbest bırakan T hücrelerinin aktivasyonunu sağlayarak yaygın iltihaplanmaya yol açar.

Bir Murin Modelinde Sistemik İnflamasyonu İndüklemek için Deri Altı Bakteriyel Antijen Enjeksiyonu

Bu video, bulaşıcı sonrası üveiti incelemek için hazırlanmış mikobakteriyel üveitin (PMU) bir fare modelini oluşturma yöntemini gösterir. Daha önce aynı immünojen ile aşılanmış bir farede ısıyla öldürülmüş Mycobacterium tuberculosis'in intravitreal enjeksiyonu ile PMU'nun indüksiyonu üzerine, gözdeki kronik inflamasyonun ilerlemesi görüntüleme ve histopatolojik inceleme kullanılarak analiz...

Post-enfeksiyöz üveiti incelemek için astarlanmış mikobakteriyel üveitin bir murin modeli

Video, miyelin oligodendrosit glikoproteinleri ve inaktive edilmiş Mycobacterium tuberculosis'in bir kombinasyonunu enjekte ederek bir fare modelinde deneysel otoimmün ensefalomiyelit indüksiyonunu göstermektedir. Model, araştırmacıların hastalık mekanizmalarını incelemelerine ve terapötik müdahaleleri test etmelerine olanak tanır.

Bir Fare Modelinde Deneysel Otoimmün Ensefalomiyelit İndüksiyonu

Bu video, bir fare modelini canlı zayıflatılmış sporozoitlerle bağışıklamak için bir testi göstermektedir. Radyasyonla zayıflatılmış Plasmodium sporozoitler, farenin kulağının sırt tarafına enjekte edilir. Her iki kulakta birden fazla yere enjeksiyonlardan sonra, farenin iyileşmesine izin verilir.

Bir Fare Modelinde Canlı Zayıflatılmış Sporozoitlerle İntradermal Bağışıklama

Bu videoda, deneysel otoimmün ensefalomiyelit (EAE) kullanılarak multipl sklerozun bir fare modeli oluşturulmuştur. Fareye, otoreaktif T hücrelerini aktive eden bir bağışıklık tepkisini tetikleyen bir nöronal peptit ve bir adjuvan içeren bir emülsiyon enjekte edilir. Bunu, otoreaktif T hücrelerinin beyne sızmasına izin vererek kan-beyin bariyeri geçirgenliğini artırmak için bir boğmaca toksini (PTX) enjeksiyonu takip eder. Bu infiltrasyon, multipl sklerozun demiyelinizan durumunu taklit ederek...

Hücre dışı matris yara iyileşmesi, iltihap ve kanser gelişimi sürecinde önemli bir yeniden şekil alır. Biz lifimsi dinamiklerinin yanı sıra Epifloresans veya iki-foton mikroskopi kullanılarak yüksek uzaysal ve zamansal çözünürlüğe sahip örgü benzeri matris bileşenleri görselleştirmek için yeni bir Intravital immunofloresan mikroskopi yaklaşım sunmak.

Epifluoresan ile Doku Matrix Bileşenler ve İki foton Mikroskopi uzun vadeli Intravital İmmünofloresan Görüntüleme

enflamasyon bölgelerinde CD4 efektör T hücrelerinin geçiş motilite yöneten mekanizma nispeten bilinmemektedir. Biz görselleştirmek ve yerinde bu hücrelerin dinamik davranışının çalışması için izin iltihaplı kulak dermiş in vitro -astarlı CD4 T hücrelerinde işlemek için non-invaziv bir yaklaşım sunuyoruz.

Iltihaplı Dermisinde içinde görüntüleme CD4 + T hücre Geçiş Göç

Farelerde, deriden boşaltılan lenf noduna hücre göçünü izlemek için yapılan ve Bacille Calmette-Guérin ile ayak pedi enfeksiyonundan sonra lenf noduna mobilize edilen cilt Dendritik hücrelerinin karakterizasyonunu sağlayan bir test tanımlanmıştır.

ile Enfeksiyon sırasında boşaltılması Lenf düğümleri içine Fare Cilt Dendritik Hücre Göç Eğitim Bir KAKE tabanlı Testi<em&gt; Mycobacterium bovis</em&gt; Basil Calmette-Guerin

Bu yazıda, araştırmacının göz içi üveitinin fare modelini oluşturmasını sağlayan bir protokol sunuyoruz. Daha yaygın olarak deneysel otoimmün üveit (EAU) olarak adlandırılan bu yerleşik model, insan hastalığının birçok yönünü yakalar. Burada, birkaç okuma kullanarak hastalığın ilerlemesinin nasıl indükleneceğini ve izleneceğini açıklayacağız.

Deneysel Otoimmün Üveit: Göz İçi İnflamatuar Bir Fare Modeli

Bu protokol, farelerde Astarlı Mikobakteriyel Üveit'i (PMU) indükleme adımlarını özetlemektedir. Bu yöntem, fare modeli sisteminde güvenilir ve sağlam oküler inflamasyon üretmeye yardımcı olacak adımları özetlemektedir. Bu protokolü kullanarak, immünolojik, transkriptomik ve proteomik tahlillerle daha ileri değerlendirme için tek hayvanlardan uveitik gözler ve iltihapsız diğer gözler ürettik.

Post-Enfeksiyöz Üveit için Bir Model Olarak Astarlanmış Mikobakteriyel Üveit (PMU)

Fareler genellikle Mycobacterium abscessus enfeksiyonlarına karşı dirençlidir, bu da akciğer enfeksiyonlarına karşı çok ihtiyaç duyulan antibiyotiklerin keşfedilmesini ve geliştirilmesini zorlaştırır. Burada, immünokompetan farelerde sürekli enfeksiyon sağladığı gösterilen bir aşı hazırlama ve intratrakeal enfeksiyon yöntemini açıklıyoruz.

İmmünkompetan Fareleri İntratrakeal Olarak Aşılamak için Agar Boncuğu Gömülü Mycobacterium abscessus'un Hazırlanması

Keşfedin fare kulağında Mycobacterium avium'un intradermal aşılanması yöntemini. Bu model, tüberküloz dışı mikobakterilere karşı bağışıklık yanıtlarını in vivo ortamda araştırmak için kullanılır.

Fare Kulağında Mycobacterium avium'un İntradermal Aşılanması

Daha fazla video keşfet