Name: Adeno ilişkili virüs vektörlerinin yavaş retrograd renal pelvis enjeksiyonu yoluyla fare böbreğine etkili ve güvenli gen iletimi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-08-01T13:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 24 s
Description: Öğrenin, fare böbreğine AAV vektörleriyle yavaş retrograd renal pelvis enjeksiyonu yöntemiyle güvenli ve etkili gen iletimi. Bu teknik, proksimal tübüllerde güçlü transdüksiyon sağlar ve böbrek araştırmaları için değerli bir araçtır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<table><tbody><tr><td>0.45 &mu;m PVDF şırınga filtresi</td><td>MilliporeSigma</td><td>SLHVR33RS</td><td></td></tr><tr><td>1.5 mL mikrosantrifüj tüpü&nbsp;</td><td>Fisher Scientific</td><td>05-408-129</td><td></td></tr><tr><td>15 mL polipropilen tüp</td><td>Corning</td><td>352097</td><td></td></tr><tr><td>16% paraformaldehit (PFA)</td><td>Electron Microscopy Sciences</td><td>15710</td><td></td></tr><tr><td>250 mL santrifüj şişesi</td><td>Fisher Scientific</td><td>055641S24</td><td></td></tr><tr><td>2F Silikon hortum</td><td>Sai Infusion Technologies</td><td>SIL-2-50&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>25G kelebek iğne</td><td>Medex Supply</td><td>26708</td><td></td></tr><tr><td>2-metilbütan</td><td>MilliporeSigma</td><td>MX0760</td><td></td></tr><tr><td>2x qPCR reaksiyon tamponu</td><td>Fisher Scientific</td><td>43-676-59</td><td>Power SYBR Green PCR Master Mix</td></tr><tr><td>30G iğne</td><td>Becton-Dickinson &amp; Co</td><td>305106</td><td></td></tr><tr><td>50 mL polipropilen tüp</td><td>Corning</td><td>430291</td><td></td></tr><tr><td>5-0 monofilament sütür</td><td>Ethicon</td><td>Y463G</td><td></td></tr><tr><td>5 M NaCl</td><td>Lonza</td><td>51202</td><td></td></tr><tr><td>6-0 absorbable sütür</td><td>Ethicon</td><td>J489G</td><td></td></tr><tr><td>7.5% Mini-PROTEAN TGX Precast Protein Jelleri, 10 kuyu, 30 &micro;L</td><td>Bio-Rad</td><td>4561023</td><td></td></tr><tr><td>Amersham ImageQuant 800 Western Blot Görüntüleme Sistemi (Cytiva)</td><td>Cytiva</td><td>29459405</td><td></td></tr><tr><td>Amicon 100 kDa MWCO, 15 mL tüp</td><td>Millipore Sigma</td><td>UFC910024</td><td></td></tr><tr><td>Anti-aquaporin 2 (AQP2) antikoru</td><td>Abcam</td><td>ab199975</td><td>Kollektör duktus hücreleri için bir belirteç</td></tr><tr><td>Anti-Na-K-2Cl taşıyıcısı 2 (NKCC2) antikoru</td><td>StressMarq Biosciences</td><td>SPC-401</td><td>Kalın yükselen bacak hücreleri için bir belirteç</td></tr><tr><td>Anti-tavşan IgG Alexa Fluor 647 antikoru</td><td>Jackson ImmunoResearch</td><td>111-605-144</td><td></td></tr><tr><td>Anti-Wilms Tümör 1 (WT1) antikoru</td><td>Abcam</td><td>ab89901</td><td>Podositleri için bir belirteç</td></tr><tr><td>Beckman Coulter OptiSeal Tüpü, Polipropilen, 29.9 mL</td><td>Fisher Scientific</td><td>NC9691210</td><td></td></tr><tr><td>Beckman Coulter OPTISEAL TÜPLERİ</td><td>Fisher Scientific</td><td>NC9611575</td><td></td></tr><tr><td>Benzonase</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>1016970001</td><td></td></tr><tr><td>Bovin serum albümini (BSA)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>5470</td><td></td></tr><tr><td>Santrifüjlü ultrafiltrasyon tüpü</td><td>MilliporeSigma</td><td>UFC9100</td><td>Amicon 100 kDa MWCO, 15 mL</td></tr><tr><td>Seramik boncuklu tüp</td><td>Fisher Scientific</td><td>15-340-154</td><td></td></tr><tr><td>Sezyum klorür</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C3032-1KG</td><td></td></tr><tr><td>Kıskaç uygulama forseps</td><td>Fine Science Tools</td><td>00071-14</td><td></td></tr><tr><td>Kapalı döngü ısı yastığı</td><td>Stryker Medical</td><td>8002-062-012</td><td></td></tr><tr><td>Pamuk uçlu aplikatör</td><td>Puritan</td><td>806-WC</td><td></td></tr><tr><td>Kapak camı</td><td>Fisher Scientific</td><td>12-541B</td><td></td></tr><tr><td>Kriostat mikrotom</td><td>Tanner Scientific</td><td>TN50</td><td></td></tr><tr><td>Eğik forseps</td><td>Fine Science Tools</td><td>11052-10</td><td></td></tr><tr><td>Eğik tip mikro damar klipsi</td><td>Kleinert-Kutz</td><td>65145</td><td>Renal arter ve renal ven için klipsi</td></tr><tr><td>Dializ kaseti</td><td>Fisher Scientific</td><td>PIA52976</td><td></td></tr><tr><td>DNA ekstraksiyon kiti</td><td>Qiagen</td><td>57704</td><td>QIAamp MinElute Virus Spin Kit</td></tr><tr><td>D-Sorbitol</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S6021-1KG</td><td></td></tr><tr><td>Dulbecco's Modifiye Edilmiş Kartal Ortamı- yüksek glikoz</td><td>Corning</td><td>15-013-CV</td><td>DMEM-yüksek glikoz (4.5 g/L)</td></tr><tr><td>EDTA</td><td>Fisher Scientific</td><td>15-575-020</td><td></td></tr><tr><td>Etanol</td><td>Decon Laboratories</td><td>2716GEA</td><td></td></tr><tr><td>Fetal boğa serumu (FBS)</td><td>VWR</td><td>89510-186</td><td></td></tr><tr><td>Gaz geçirmez cam şırınga</td><td>Hamilton</td><td>1710 TLL</td><td></td></tr><tr><td>Glutaraldehit çözeltisi</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>G6257</td><td></td></tr><tr><td>Isı terapi pompası</td><td>Kent Scientific</td><td>HTP-1500</td><td></td></tr><tr><td>HEPES</td><td>Sigma Aldrich</td><td>H4034-100G</td><td></td></tr><tr><td>Hoechst 33342</td><td>Invitrogen</td><td>H3570</td><td></td></tr><tr><td>Homojenizatör</td><td>Fisher Scientific</td><td>15-340-163</td><td></td></tr><tr><td>İnsan embriyonik böbrek (HEK) 293 hücreleri</td><td>Agilent</td><td>240073</td><td></td></tr><tr><td>Buz kovası</td><td>Fisher Scientific</td><td>07-210-104</td><td></td></tr><tr><td>İnfüzyon şırınga pompası</td><td>Harvard Apparatus</td><td>70-4507</td><td></td></tr><tr><td>Izofluran</td><td>Piramal Critical Care</td><td>NDC 66794-017-10</td><td></td></tr><tr><td>L-glutamin</td><td>Fisher Scientific</td><td>25030-081</td><td></td></tr><tr><td>Sıvı engelleyici kalem</td><td>Ted Pella</td><td>22309</td><td></td></tr><tr><td>Lotus tetragonolobus lektini (LTL)- Flororesin</td><td>Vector Laboratories</td><td>FL-1321-2</td><td>Proksimal tübülleri için bir belirteç</td></tr><tr><td>Magnezyum klorür (MgCl2)</td><td>MilliporeSigma</td><td>M1028</td><td></td></tr><tr><td>Meloksikam</td><td>VetOne</td><td>NDC 86136-012-10</td><td>Analgezic</td></tr><tr><td>Mikroskop cam slaytı</td><td>Fisher Scientific</td><td>12-550-15</td><td></td></tr><tr><td>Montaj ortamı</td><td>SouthernBiotech</td><td>0100-01</td><td></td></tr><tr><td>İğne tutucu</td><td>Fine Science Tools</td><td>12501

adeno ilişkili virüs vektörlerinin yavaş retrograd renal pelvis enjeksiyonu yoluyla fare böbreğine etkili ve güvenli gen iletimi

Effective and Safe Gene Delivery to the Mouse Kidney via Slow Retrograde Renal Pelvis Injection of Adeno-Associated Virus Vectors

Adeno ilişkili virüs vektörlerinin yavaş retrograd renal pelvis enjeksiyonu yoluyla fare böbreğine etkili ve güvenli gen iletimi

The development of effective in vivo tools and methods for gene delivery to the kidney is crucial for advancing basic kidney research and gene therapy for ...

effective-safe-gene-delivery-to-mouse-kidney-via-slow-retrograde

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Bu videoda, fare yavrusunda rekombinant adeno ilişkili virüs bazlı gen iletimini gösteriyoruz. Bu yöntem, hedeflenen hücrelerde gen ekspresyonunun incelenmesine yardımcı olur.

Rekombinant Adeno İlişkili Virüs Temelli Gen Dağıtımı: Kemirgen Modelinde Transgen Teslimi ve Kardiyak Spesifik İfade İçin Bir Teknik

Kaynak:Pourshafie, N., et al. Kemirgenlerde nöromüsküler hastalıkları tedavi etmek için rekombinant adeno ile ilişkili virüs serotip 9 kullanılarak mikroRNA'nın sistemik dağıtımı. J. Vis. Uzm. (2018).Bu videoda, spinal ve bulbar kas atrofisi veya SBMA'dan etkilenen bir fare, terapötik mikroRNA'yı kodlayan bir plazmid taşıyan rekombinant AAV (Adeno ilişkili vektörler) vektörlerinin kuyruk veni enjeksiyonuna tabi tutulur. Vektör, mutant AR (Androjen reseptörü)-mRNA'ya (haberci ribonükleik asit)...

Spinal ve Bulbar Kas Atrofisi Fare Modelinde Rekombinant Adeno İlişkili Vektörlerin Enjekte Edilmesi

Kaynaklı organ içine kanser hücrelerinin implantasyonu yeni tedaviler değerlendirmek için yararlı bir ön-klinik modeli olarak hizmet edebilir. MB49 mesane karsinom hücreleri intravezikal Damla damla akıtma sonrası mesane içinde yetiştirilebilir. Bu protokol, tümör implantasyonu ve adenoviral teslimat amacıyla fare mesane kateterizasyon gösterir.

Gene Teslim Çalışmaları Ortotopik Mesane Kanseri Modeli

Açıklanan kulak sonrası cerrahi yaklaşım, kan kaybını ve hayvan ölümlerini en aza indirirken fare koklear skala timpanisine hızlı ve doğrudan iletim sağlar. Bu yöntem, yuvarlak pencere zarından doğum sonrası farelere moleküler, farmakolojik ve viral iletim kullanılarak koklear tedavi için kullanılabilir.

Yuvarlak Pencere Membran aracılığıyla Fare İç Kulak için virally ve Gen Teslimat Cerrahi Yöntemi

Bu makalede, fare kalbindeki gen ekspresyonunu manipüle etmek için rekombinant adeno-ilişkili virüs 9 (rAAV9) vektörlerini hazırlamak için bir yöntem açıklanmaktadır.

Fare Kalpler eksprese rAAV9 hazırlanması veya demonte Genler

Burada bir rekombinant adeno ilişkili virüs serotip 9 nöromuskuler hastalık bir fare model kullanma mikroRNA teslimini açıklayın. Sürekli miRNA overexpression kas ve motor nöronlar, bir fırsat çalışma miRNA işlevi ve tedavi edici potansiyel içinde vivosağlayan bir tek çevresel yönetim farelerde sonuçlandı.

Kemirgen nöromusküler hastalıkları tedavi etmek için rekombinant Adeno ilişkili virüs serotip 9 kullanarak mikroRNA sistemik teslim

Bu çalışmanın amacı yetişkin farelerde yeni bir subpial gen dağıtım tekniği kullanarak spinal adeno-ilişkili virüs 9 (AAV9) aracılı gen dağıtımının potensi ve güvenliğini geliştirmek ve doğrulamaktı.

Yetişkin Farelerde Subpial Adeno-ilişkili Virüs 9 (AAV9) Vektör Teslimatı

Bu iletişim kuralı yoluyla renal pelvis transgene özellikle böbrek ifadede üretmek için fare böbrek içine plazmid DNA enjekte yöntemi açıklanır.

Hidrodinamik Renal Pelvis enjeksiyon böbrek proteinlerin Non-viral ifade

Biz'DNA plazmid dır fare mesane vivo içinde İdrar Kateterizasyon ve elektroporasyon ürotelyal hücre içine bir roman yöntemi açıklanmaktadır. Kesesi hastalıkları otokton fare modelleri oluşturmak için hızlı ve kolay bir yol sunar.

Plazmid DNA teslimat için fare mesane Urothelium elektroporasyon tarafından roman yöntemi

Burada, yetişkin farelerde adeno-ilişkili virüsü (AAV) sistemik olarak uygulamak için fare lateral kuyruk veni enjeksiyonu için optimize edilmiş bir protokolü detaylandırıyoruz. Ek olarak, AAV transdüksiyonunu değerlendirmek için yaygın olarak kullanılan tahlillerin protokollerini açıklıyoruz.

Yetişkin farelerde lateral kuyruk veni enjeksiyonu yoluyla adeno ilişkili virüsün tutarlı bir şekilde verilmesi

Bu protokol, AAV8 ile verilen küçük firkete RNA'sının intrasplenik enjeksiyonunun, karaciğerde portal ven enjeksiyonu ile aynı gen yıkım etkinliğini nasıl sağladığını açıklar ve çok daha düşük perioperatif ve postoperatif mortalite ve komplikasyonlar ile daha basit bir prosedürü temsil eder.

Adeno-ilişkili virüs serotip 8 (AAV8) ile verilen küçük firkete RNA'sının intrasplenik enjeksiyonu yoluyla karaciğerde etkili gen yıkımı

Öğrenin, fare böbreğine AAV vektörleriyle yavaş retrograd renal pelvis enjeksiyonu yöntemiyle güvenli ve etkili gen iletimi. Bu teknik, proksimal tübüllerde güçlü transdüksiyon sağlar ve böbrek araştırmaları için değerli bir araçtır.

Adeno ilişkili virüs vektörlerinin yavaş retrograd renal pelvis enjeksiyonu yoluyla fare böbreğine etkili ve güvenli gen iletimi (Video) | JoVE Journal

Adeno ilişkili virüs vektörlerinin yavaş retrograd renal pelvis enjeksiyonu yoluyla fare böbreğine etkili ve güvenli gen iletimi

Daha fazla video keşfet