İkinci Üst Azı Dişinde Naylon Ligatür ile İndüklenen İleri Periodontitisin Murin Modeli

Araştırmamızın kapsamı, ligatüre bağlı periodontitisin murin modelini kullandığımız periodontitisi destekleyen hücresel ve moleküler faktörleri incelemektir.

Son araştırmalar inflamasyonun önemini ortaya koymuştur. Disbiyozis ve sistemik hastalıklar periodontitis gelişiminde belirleyici faktörlerdir.

Son zamanlarda periodontolojide kullanılan teknoloji, hayvan modellerini, bazıları farklı molekülleri, proteomik dizilimi, akış sitometrisini ve histolojiyi içerir.

Mevcut deneysel zorluklar, sistemik hastalıklar ve periodontitis arasındaki etkileşimin anlaşılması ile ilgilidir.

Proinflamatuar sitokin A ve S'nin hamilelik sırasında periodontitis gelişiminde rol oynadığını göstermek için bir fare ligatür periodontitis modeli kullanıyoruz.

[Ekran Okuyucusu] Başlamak için, anestezi uygulanmış bir fareyi, başı operatöre doğru bakacak şekilde yukarı bakacak şekilde bir çalışma masasına yerleştirin. Ani istemsiz hareketleri önlemek için her bir bacağınızı gerginlik olmadan nazikçe çekin ve mikro gözenekli bantla sabitleyin. Vücut ısısını korumak için fareyi bir battaniye veya gazlı bezle örtün. Ortodontik elastikin bir ucunu üst kesici dişlerin etrafına yerleştirin ve diğer ucunu gerginlik uygulamadan bir üst tutucuya sabitleyin. Daha sonra alt kesici dişlerin etrafına ikinci bir ortodontik elastik yerleştirin ve bir lastik bant kullanarak alt tutucuya sabitleyin. Şimdi yanak ayırıcıları yerleştirin ve görünürlüğü artırmak için dili dikkatlice bir tarafa hareket ettirin. En düşük büyütme objektifini kullanarak üst azı dişlerini görselleştirmek için mikroskobu konumlandırın. Yerleştirildikten sonra, operatör için konforu ve odaklanmayı optimize etmek için artırılmış büyütme. Görüntü net olduğunda, en büyük ve proksimal molar M1'i, sonraki molar M2'yi ve en küçük ve distal molar M3'ü tanımlayın. Daha geniş sütürlere kıyasla daha az mekanik hasara neden olduğu için ligatür yerleştirme için 6-0 naylon sütür kullanın. Doku forsepsleri kullanarak, 6-0 naylon sütürün distal ucunu tutun ve M2'nin distalindeki palatin tarafından papillanın tabanına yerleştirin. Bukkal yüzeye doğru ilerlemek için interproksimal damak boşluğunun tabanından hafif basınç uygulayın. Sütür geçtiğinde, interproksimal boşluktan bukkal tarafa doğru çekin. Şimdi, sütürün ucunu bukkal taraftan M2'nin mezial yüzeyindeki interproksimal alanın tabanına yerleştirin. İnterproksimal boşluğu geçmek için hafifçe itin ve bukkal boşluktan palatine geri geçirin. 6-0 naylon dikişi nazikçe çekin. Ucu M2 civarında ayarlanmış doku forsepsleri ile tutun ve üç basit düğüm kullanarak dikişi sabitleyin. Sonra dikişi ince bir makasla kesin. Fareyi serbest bırakmak için önce alt kesici dişlerin etrafındaki lastiği ve ardından yanak ayırıcılarını çıkarın. Daha sonra üst kesici dişlerin etrafındaki elastikiyeti ve bacaklardaki mikro gözenekli bandı çıkarın. Şimdi fareyi çalışma masasından çıkarın ve açık bir hava yolunu korumak ve tıkanmayı önlemek için dili bir tarafta tutun. Fareyi gazlı bez veya beze sarın ve yüzü yukarı bakacak şekilde yerleştirin. Hayvanı sıcak, bez veya gazlı bezle örtün ve tamamen uyanana kadar gözlem altında tutun. Fare normal şekilde yanıp sönene kadar her göze bir damla hipromelloz uygulayın. Ardından, normal kafesine geri koyun. Ligatürün kalıcılığını kontrol etmek için fareyi alın. Başını ve vücudunu sıkıca tutun ve ağzı açmak için doku forseps kullanın. Lamba ışığı altında, M2 etrafındaki 6-0 naylon sütürü gözlemleyin. Histoloji kullanılarak biyofilm oluşumunun doğrulanması için, 30 gün sonra ötenazi yapılmış hayvanlardan maksillileri hasat edin. Dokuları% 0.9 sodyum klorür çözeltisinde yıkayın ve etiketli mikrosantrifüj tüplerine yerleştirin. Numuneleri çalkalama altında iki saat boyunca% 4 paraformaldehit çözeltisine sabitleyin. Ardından, sabit numuneleri iki saat boyunca musluk suyuyla yıkayın. Daha sonra, numuneleri 20 gün boyunca pH 7.3'te 20 hacim %4 EDTA'da kireçten arındırın ve EDTA'yı her dört günde bir değiştirin. Ardından, numuneleri parafine gömün. M2 alanından beş mikrometre kesiti kesin ve bunları hematoksilen ve eozin ile boyayın. Sulkus epiteli, dişeti ve periodontal lifler, yükseklik ve alveolar kret bütünlüğündeki değişiklikleri tanımlamak için lekeli bölümleri optik mikroskop altında gözlemleyin. Bir dijital düzenleme programı kullanarak semento emaye bağlantısı ile kemik tepesinin en yüksek noktası arasındaki mesafeyi belirleyerek ataşman kaybını ölçün. Histometrik analizden sonra, Mann-Whitney U testini kullanarak kontrol ve periodontal tedavi gruplarından gelen verileri analiz edin. Periodontitis, kontrol grubunun aksine farelerde doku kaybına, iltihaplanmaya, kanamaya ve dişeti kenarında periodontal cep oluşumuna neden olarak 30. güne kadar neden olur. Histolojik analiz, PT grubunda periodontal ceplerin varlığı, liflerin ayrılması ve epitelin apikal migrasyonu ile önemli yapısal hasarı doğruladı. Bukkal ve damak taraflarının dişeti ve kemiğinde hücre çekirdeği kaybı da görüldü. Buna karşılık, CTL grubu sağlıklı histoloji gösterdi. Kantitatif analiz, yaklaşık 209 mikrometrede bukkal yan kayıp ve yaklaşık 254 mikrometrede palatin tarafı ile PT grubunda önemli ölçüde artmış bağlanma kaybı olduğunu ortaya koydu.