Name: Monosit-Makrofaj Testi Kullanılarak Kırmızı Kan Hücresi Antikor Öneminin Tahmini (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-02-07T14:40:00.000+00:00
Duration: 11 min 27 s
Description: Öğrenin, monosit-makrofaj testi ile kırmızı kan hücresi antikor önemini nasıl tahmin edebilirsiniz. Bu yöntem, transfüzyon tıbbında antikorların klinik önemini değerlendirmek için geliştirilmiştir.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Tong, T. N., Branch, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+a+monocyte+monolayer+assay+to+evaluate+Fc%CE%B3+receptor-mediated+phagocytosis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Use of a monocyte monolayer assay to evaluate Fcγ receptor-mediated phagocytosis.</a> J Vis Exp. (119), e55039(2017).</li>
<li>Tong, T. N., Cen, S., Branch, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+monocyte+monolayer+assay%3A+Past%2C+present+and+future%5BTitle%5D)+AND+%22Transfus+Med+Rev%22%5BJournal%5D)">The monocyte monolayer assay: Past, present and future.</a> Transfus Med Rev. 33 (1), 24-28 (2019).</li>
<li>Frias Boligan, K., Sandhu, G., Branch, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methods+to+evaluate+the+potential+clinical+significance+of+antibodies+to+red+blood+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Protoc%22%5BJournal%5D)">Methods to evaluate the potential clinical significance of antibodies to red blood cells.</a> Curr Protoc. 2 (8), e504(2022).</li>
<li>Lemay, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+first+case+of+severe+acute+hemolytic+transfusion+reaction+caused+by+anti-Sc2%5BTitle%5D)+AND+%22Transfusion%22%5BJournal%5D)">The first case of severe acute hemolytic transfusion reaction caused by anti-Sc2.</a> Transfusion. 58 (11), 2506-2512 (2018).</li>
<li>Tong, T. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+utility+of+a+monocyte+monolayer+assay+in+the+assessment+of+intravenous+immunoglobulin-associated+hemolysis%5BTitle%5D)+AND+%22Transfusion%22%5BJournal%5D)">The utility of a monocyte monolayer assay in the assessment of intravenous immunoglobulin-associated hemolysis.</a> Transfusion. 60 (12), 3010-3018 (2020).</li>
<li>Srivastava, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((SCAR%3A+the+high-prevalence+antigen+013.008+in+the+Scianna+blood+group+system%5BTitle%5D)+AND+%22Transfusion%22%5BJournal%5D)">SCAR: the high-prevalence antigen 013.008 in the Scianna blood group system.</a> Transfusion. 61 (1), 246-254 (2021).</li>
<li>Branch, D. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Potentially+clinically+significant+anti-Dib+identified+by+monocyte+monolayer+assay+before+transfusion%5BTitle%5D)+AND+%22Transfusion%22%5BJournal%5D)">Potentially clinically significant anti-Dib identified by monocyte monolayer assay before transfusion.</a> Transfusion. 61 (1), 331-332 (2021).</li>
<li>Italiani, P., Boraschi, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((From+monocytes+to+M1%2FM2+macrophages%3A+Phenotypical+vs.+functional+differentiation%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Immunol%22%5BJournal%5D)">From monocytes to M1/M2 macrophages: Phenotypical vs. functional differentiation.</a> Front Immunol. 5, 514(2014).</li>
<li>Mills, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((M1+and+M2+macrophages%3A+Oracles+of+health+and+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Crit+Rev+Immunol%22%5BJournal%5D)">M1 and M2 macrophages: Oracles of health and disease.</a> Crit Rev Immunol. 32 (6), 463-488 (2012).</li>
<li>Atri, C., Guerfali, F. Z., Laouini, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+human+macrophage+polarization+in+inflammation+during+infectious+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Role of human macrophage polarization in inflammation during infectious diseases.</a> Int J Mol Sci. 19 (6), 1801(2018).</li>
<li>Bertani, F. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Classification+of+M1%2FM2-polarized+human+macrophages+by+label-free+hyperspectral+reflectance+confocal+microscopy+and+multivariate+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Classification of M1/M2-polarized human macrophages by label-free hyperspectral reflectance confocal microscopy and multivariate analysis.</a> Sci Rep. 7, 8965(2017).</li>
<li>Murray, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Macrophage+polarization%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Physiol%22%5BJournal%5D)">Macrophage polarization.</a> Annu Rev Physiol. 79, 541-566 (2017).</li>
<li>Cohn, C., Delaney, M., Johnson, S. T., Katz, L. M., Schwartz, J. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aCohn%2C+C+%22Technical+Manual%22">Technical Manual</a>. , 21st Ed, American Association for the Advancement of Blood and Biotherapeutics. Maryland, USA. (2023).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>1X PBS, pH 7.4, Ca2 + / Mg2 + Wisent</td> <td>Bioproducts&nbsp;</td><td>311-425-CL</td><td>4 derecede veya oda sıcaklığında saklayın&nbsp;</td></tr><tr><td>AccutaseTM</td><td>STEMCELL Teknolojileri&nbsp;</td><td>7920</td><td>Hücre ayırma çözeltisi</td></tr><tr><td>ACK Lizis Tamponu&nbsp;</td><td>STEMCELL Teknolojileri&nbsp;</td><td>07850, 07800</td><td>4 derecede saklayın</td></tr><tr><td>Anti-İnsan Globulin</td><td>NOVACLONE, Immunocor.&nbsp;</td><td>IAT testi için N/A</td><td>NOVACLONE Anti-igG&nbsp;</td></tr><tr><td>Anti-Rh(D) (WinRho. SDF CDN)</td><td>Saol Therapeutics&nbsp;</td><td>1003092</td><td>Herhangi bir ticari Rh immün globin kaynağı yeterli olacaktır&nbsp;</td></tr><tr><td>Hücre Kazıyıcı</td><td>UofT Medstore</td><td>83.395</td><td>hücre ayrılması ve nbsp;</td></tr><tr><td>Hücre Süzgeci 70uM naylon</td><td>Falcon</td><td>352350</td><td>hücre filtresi&nbsp;</td></tr><tr><td>Oda sürgüsü Nunc. Lab-TekTM II Kapaklı, RS Cam Kaydıraklı Steril&nbsp;</td><td>Thermo Fisher Bilimsel&nbsp;</td><td></td><td>MMA için 154534 odacıklı slaytlar&nbsp;</td></tr><tr><td>Lameller&nbsp;</td><td>VWR</td><td>48393-081</td><td>24 x 50 mm</td></tr><tr><td>Cytiva Ficoll Paque Plus, yoğunluk 1.077 g/L</td><td>Thermo Fisher Scientific&nbsp;</td><td>17-1440-03</td><td>PBMCS'nin tam kandan ayrılması; yoğunluk gradyan ortamı</td></tr><tr><td>Elvanol Montaj Ortamı</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td>Dulbecco' Ca2+/Mg2+, %15 (a/h) polivinil reçine ve %30 (h/h) gliserin içermeyen s PBS (D-PBS).</td></tr><tr><td>Taze tam kan (ACD tüpü) veya Buffy coat</td><td>Kanada Kan Hizmetleri</td><td></td><td>Oda sıcaklığında 36 saate kadar dinlenebilir&nbsp;</td></tr><tr><td>İnsan Rekombinant GM-CSF</td><td>KÖK HÜCRE Teknolojileri&nbsp;</td><td>78015.1</td><td>M1 makrofajlarının polarizasyonu için sitokin</td></tr><tr><td>İnsan Rekombinant IFN-gama</td><td>KÖK HÜCRE Teknolojileri&nbsp;</td><td>78020</td><td>M1 makrofajlarının polarizasyonu için sitokin</td></tr><tr><td>İnsan Rekombinant IL-4</td><td>KÖK HÜCRE Teknolojileri&nbsp;</td><td>78045.1</td><td>M2 makrofajlarının polarizasyonu için sitokin</td></tr><tr><td>İnsan Rekombinant M-CSF</td><td>KÖK HÜCRE Teknolojileri&nbsp;</td><td>78057.1</td><td>M2 makrofajlarının polarizasyonu için sitokin</td></tr><tr><td>ID-CellStab</td><td>Bio-Rad</td><td>005650 05740</td><td>RBC hücre depolama/stabilizasyon çözeltisi&nbsp;</td></tr><tr><td>İzolasyon Ortamı&nbsp;</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td>PBS Ca2+ ve Mg2+ ücretsiz + FBS %2 + 1mM EDTA</td></tr><tr><td>Lipopolisaaracide (LPS)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>L3024-5MG</td><td>M1 makrofajlarının polarizasyonu için sitokin</td></tr><tr><td>Metanol (%100)</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td>Slaytların sabitlenmesi&nbsp;</td></tr><tr><td>Monosit İzolasyon Kiti KÖK hücreler EasySep CD16 Tükenmesi olmadan İnsan Monosit Zenginleştirme Kiti&nbsp;</td><td>STEMCELL Teknolojileri&nbsp;</td><td>19058</td><td>PBMC'lerden monositlerin izolasyonu</td></tr><tr><td>Poli-D-ysin&nbsp;</td><td>UofT İlaç Mağazası&nbsp;</td><td>P6407</td><td>Hücre bağlantı çözeltisi&nbsp;</td></tr><tr><td>Rh (D) pozitif R2R2 RBC'ler</td><td>Kanada Kan Hizmetleri</td><td>Yok</td><td>Ayrıca ticari olarak kullanılabilir</td></tr><tr><td>RPMI-1640</td><td>Wisent Bioproducts&nbsp;</td><td>%10</td><td>ısıyla inaktive edilmiş FBS, 1 mM GlutaMAX takviyesi, 1 mM HEPES ve %1 penisilin / streptomisin ile desteklenmiş 350-000-CL. 4 derecede saklayınız.</td></tr><tr><td>Tripan Mavisi çözeltisi&nbsp;</td><td>Thermo Fisher Bilimsel&nbsp;</td><td>15250061</td><td>Hücre sayma solüsyonu&nbsp;</td></tr></tbody></table>

monosit-makrofaj testi kullanılarak kırmızı kan hücresi antikor Öneminin tahmini

Prediction of Red Blood Cell Antibody Significance Using the Monocyte-Macrophage Assay

Şekil 1'deki sonuçlar literatür ile tutarlıdır ve makrofajların M0 durumlarından sonraki M1 / M2 durumlarına başarılı bir polarizasyonunu göstermektedir. M1 ve M2 makrofajları 8 gün boyunca (6 gün büyüme faktörleri ve 2 gün polarizasyon) kültüre edildi ve anti-D veya anti-k opsonize eritrositler test edildi (Şekil 2). M2 makrofajları, M1'lere kıyasla yüksek bir fagositik indeks gösterir ve RBC'ler anti-D (kontrol) veya anti-k tarafından opsonize...

Monosit-Makrofaj Testi Kullanılarak Kırmızı Kan Hücresi Antikor Öneminin Tahmini

Derived from monocytes in the bone marrow, macrophages are large, innate immune cells that play a major role in clearing dead cells, debris, tumor cells, ...

prediction-red-blood-cell-antibody-significance-using-monocyte

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

İmmünoloji ve Enfeksiyon

Bu videoda, poli D antikoru opsonize edilmiş R2R2 kırmızı kan hücreleri ile Fcγ reseptör aracılı fagositozu değerlendirmek için periferik kandan birincil monositleri kullanan bir monosit tek katmanlı test gösterilmektedir.

Monosit Tek Tabakalarında Fcγ Reseptörü Güdümlü Fagositozun İncelenmesi İçin Bir Test

Monosit türevli histiositlerinden doğuştan gelen bağışıklık sisteminin önemli bir hücrelerdir. Burada, kullanımı kolay...

Bir<em&gt; In vitro</emİnsan Makrofaj Farklılaşma ve Polarizasyon heterojenliği Eğitim için&gt; Model

Bu protokol, ökaryotik hücrelerde tam hücre MALDI-TOF kütle spektrometresinin kullanımını açıklar. Burada, makrofajların mikro çevrelerine yanıt olarak çoklu aktivasyon durumlarını analiz ederek bu tekniğin doğruluğunu gösteriyoruz.

Tüm hücre MALDI-TOF Kütle Spektrometre Makrofaj Aktivasyon Farklı Modu analiz için Doğru ve Hızlı Yöntem

Burada, kırmızı kan hücrelerine karşı antikorlar tarafından neden olunan kompleman aktivasyon ölçmek için iki tahlil tarif eder. Mevcut deneylerde üzerinde en büyük avantajı, nicel ve kolay yorumlamak doğasıdır.

Kırmızı kan hücreleri üzerinde antikor kaynaklı kompleman aktivasyon sayısal tespiti için Yöntemler

İnsan makrofaj üretimi için basit ve etkin bir protokol sunuyoruz. İnce beyaz kat çifte yoğunluk gradyanlı santrifugasyon sureti ile işlenir ve izole edilmiş monositlerin, sonra Teflon kaplı bir hücre kültürü torbalarda makrofajlara ayrılır. Bu makrofaj verim maksimize ve daha sonraki deneyler için hücre hasat kolaylaştırır.

İnsan Çift Gradient Santrifüj ile Monositlerinde ve teflon kaplı Hücre Kültürü Çantalar Makrofagların Onların Farklılaşma İzolasyonu

Monosit tek tabakalı test (MMA), Fcγ reseptörü (FcγR) aracılı fagositozu değerlendirmek için memeli periferik tam kanından elde edilen izole primer monositleri kullanan bir in vitro testtir.

Bir Monosit Tek tabakalı Testi Kullanımı Fcy reseptör aracılı fagositoz değerlendirin

Bu protokol, akış sitometrisi ile yetişkin fare merkezi sinir sisteminde makrofaj alt popülasyonlarının bir analizini sağlar ve bu hücrelerin eksprese ettiği çoklu belirteçlerin çalışması için yararlıdır.

Akış Sitometresi ile Merkezi Sinir Sisteminden Mikroglia ve Monosit Türevi Makrofajların Analizi

Burada monosit alt kümeleri tam kan akış sitometresi tarafından karakterize için bir iletişim kuralı mevcut. Bu nasıl alt kümeleri kapı ve onların ifade yüzey işaretlerinin değerlendirmek özetleyen ve M1 (iltihabi) ve M2 işaretleri (anti-inflamatuar) ifadesi değerlendirme bir örnek vererek içerir.

İnsan monosit alt kümeleri tam kan tarafından karakterizasyonu Akış Sitometresi Analizi

Burada fare modellerinde kan monositlerinin kemotaktik aktivitesini ölçmek, beslenme, farmakolojik ve genetik müdahalelerin kan monositi üzerindeki etkilerini değerlendirmek ve kan monositlerinden elde edilen makrofajları karakterize etmek için bir protokol sıyoruz. monosit-kemoattractant protein-1 (MCP-1) yüklü bazal membran kaynaklı jel fişleri kullanarak fare modelleri.

İn Vivo Monosit Kemotaktik Aktivitenin Ölçülmesi ve Kan Monosit Türevi Makrofajların Karakterizasyonu

Sitokin salınım testi referans reaktiflerinin kullanılması, immünoterapötik monoklonal antikorların daha tekrarlanabilir ve standardize edilmiş in vitro güvenlik profillerine izin verir. Burada, bazı terapötik monoklonal antikorların güvenliğini tahmin etmek için sitokin salınım testlerinin bir referans reaktif paneliyle birlikte nasıl kullanılabileceğini açıklıyoruz.

Monoklonal Antikor Güvenliğinin Tahmini için Sitokin Salınım Testlerinin Sağlamlığını Doğrulamak için Referans Reaktiflerin Kullanılması

Monositler ve makrofajlar, sağlık ve hastalık için çok önemli olan çok plastik ve yeniden programlanabilir bağışıklık hücreleridir. Belirli farklılaşma programları ve fenotipleri benimseyerek çok çeşitli uyaranları algılar ve bunlara yanıt verirler. Makrofaj polarizasyonunu ve yeniden programlamayı incelemek için bir in-vitro modeli standartlaştırdık ve araştırma için değerli bir araç sağladık.

İnsan Monositinden Türetilmiş Makrofajların İn vitro Tahliller için Yeniden Programlanması

Öğrenin, monosit-makrofaj testi ile kırmızı kan hücresi antikor önemini nasıl tahmin edebilirsiniz. Bu yöntem, transfüzyon tıbbında antikorların klinik önemini değerlendirmek için geliştirilmiştir.

Monosit-Makrofaj Testi Kullanılarak Kırmızı Kan Hücresi Antikor Öneminin Tahmini

Daha fazla video keşfet