Name: Drosophila melanogasterde Nöral Devrelerin Optogenetik Manipülasyonu için Davranışsal Testler (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-02-07T14:50:00.000+00:00
Duration: 7 min 39 s
Description: Öğrenin Drosophila melanogaster'de optogenetik manipülasyon yöntemleriyle termotaksi ve tat alma davranışlarını incelemeyi. Bu protokol sinir devrelerinin karar verme mekanizmalarını anlamak için yeniden üretilebilir bir çerçeve sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

1. Suşlar, sinek yetiştirme ve sinek aspiratörü
<ol>
	<li>Suşlar ve bakım<ol>
		<li>Deneylerde kullanılan suşlar arasında HC-Gal410, Gr5a-Gal420 (Bloomington Drosophila Stok Merkezi (BDSC): 57592), Gr66a-Gal421 (BDSC: 57670), UAS-GtACR23, UAS-CsChrimson2 (BDSC: 55136) bulunur. Arka, 12 saatlik ışık: 12 saatlik karanlık döngü altında standart bir mısır unu ortamında 25 ° C'de uçar. NOT: 1 L mısır unu ortamı 1 L dH2O, 79 g dekstroz, 7.5 g agar, 24 g pul maya, 57 g mısır unu, 2.1 g metil-4-hidroksibenzoat (11.1 mL etanol içinde çözülmüş), 6 g sodyum potasyum tartrat tetrahidrat ve 0.9 g kalsiyum klorür içerir.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Sinek yetiştirme ve deneysel hazırlık<ol>
		<li>0 ila 3 günlük sinekleri sıralayın. Deney sırasında, sinekler 3 ila 6 günlük olacak ve yaşa bağlı tutarlılığı sağlayacaktır (Şekil 1A).</li>
		<li>Deney yapmadan 3 gün önce her genotipi dört gruba ayırın: oda ışığı ATR -, oda ışığı ATR +, kırmızı veya mavi ışık ATR - ve kırmızı veya mavi ışık ATR +.</li>
		<li>ATR'yi 0 etanol içinde çözerek 80 mM ATR stok çözeltisi hazırlayın. Yiyecekleri ATR + gruplarına 400 μM ATR ile destekleyin.</li>
		<li>Yiyecekleri aynı konsantrasyonda etanol ile ancak ATR olmadan ATR gruplarına takviye edin.</li>
		<li>Karanlıkta tüm grupları geride bırakın22.</li>
		<li>Starve Gr5a&gt;CsChrimson , sadece nemli doku içeren şişelerde 16-24 saat boyunca uçar. ATR + şişeleri, su ile karıştırılmış 400 μM ATR içerirken, ATR şişeleri, aynı konsantrasyonda etanol ile karıştırılmışdH2O içerir.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Sinek aspiratörü<ol>
		<li>Sinek aspiratörünü (Şekil 1B) plastik boru, böcek ağı ve iki adet 3 mL transfer pipeti kullanarak monte edin.</li>
		<li>Transfer pipetlerinin uçlarını ve ampullerini kesin, sinek emme ucunun bir sineğin rahat geçişine izin verdiğinden emin olun. Bu tasarım, sineklerin soluma yoluyla nazikçe aspire edilmesini sağlar, zararı en aza indirir ve tek tek sineklerin verimli bir şekilde toplanmasını ve aktarılmasını kolaylaştırır.</li>
		<li>Plastik borunun üzerine böcek ağı örtün ve pipetin ampul uçlarını Parafilm kullanarak boruya sabitleyin.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
2. Tek sinek mavi ışık optogenetik termotaktik konumsal tercih testi
<ol>
	<li>Drosophila suşları ve sinek yetiştirme<ol>
		<li>HC-Gal410 sürücü hattını UAS-GtACR23'e çaprazlayın, böylece deneysel genotip HC&gt;GtACR2 elde edilir. HC&gt;GtACR2 sinekleri, ısıtma hücrelerinde GtACR2'yi eksprese eder. NOT: Her koşul için eşit sayıda erkek ve dişi sinek kullanıldığından emin olun.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Deneysel tahlil kurulumu ve yürütülmesi<ol>
		<li>İki çelik plakayı, kenarları birleşecek şekilde ayrı sıcak plakalar üzerine hizalayın. Hareketi en aza indirmek için üstüne plastik bir tabaka koruyucu yerleştirin ve bantla sabitleyin. Arka plan gürültüsü sinyallerini azaltmak için sayfa koruyucunun üzerine bir parça beyaz kağıt yerleştirin (Şekil 1C). NOT: Teknik incelemeyi her deneyin başında veya kirlendiğinde değiştirin.</li>
		<li>Beyaz kağıdın üzerine şeffaf bir plastik kapak (2 mm yükseklik × 58 mm genişlik × 83 mm uzunluk) yerleştirin. Bu örtü sineğin özgürce yürümesini sağlarken uçmasını da engeller.</li>
		<li>Deney yüzeyinin yaklaşık 12 cm yukarısında kameraya ve mavi ışığa (1.000 mA) yapışması için polistiren köpük kutunun (27 cm yükseklik × 22 cm genişlik × 16 cm uzunluk) altında bir delik açın.</li>
		<li>Etkinleştirmeyi etkinleştirirken parlamayı en aza indirmek için kamerayı ve mavi ışığı konumlandırın. NOT: Mavi ışığın aktivasyon aralığını belirlemek için bir ön test gerekebilir.</li>
		<li>Fotoğraf makinesini aşağıdaki ayarlarla kayıt yapacak şekilde ayarlayın: 1 sn timelapse, dar alan, 4000 × 3000 piksel.</li>
		<li>İlgili çelik plakalarda 25 ± 1 °C ve 31 ± 1 °C yüzey sıcaklığını korumak için sıcak plaka ayarlarını yapın. NOT: 25 °C'nin altındaki sıcaklıkları gerektiren koşullar için Peltier cihazları veya buz gibi alternatif soğutma yöntemleri gereklidir. Çelik levhaların sıcaklıkları istenen seviyeleri aşarsa, gerekli koşulları elde etmek ve korumak için yüzeye damıtılmış su püskürtün. Ardından, plastik tabaka koruyucudaki fazla nemi emmek için bir peçete kullanın.</li>
		<li>Her denemeden önce ve sonra, bir yüzey sıcaklığı probu kullanarak sıcaklıkları izleyin. NOT: Dalgalanmalar sonuçları etkileyebileceğinden hassas sıcaklık kontrolü çok önemlidir.</li>
		<li>Plastik kapağı 25 °C tarafına yerleştirin. Bir sinek aspiratörü kullanarak, kapağın altına tek bir sineği yavaşça bırakın. Loş ışık (&lt;10 lüks) oluşturmak için kutuyu deney alanının üzerine yerleştirin ve sineğin 1 dakika boyunca alışmasına izin verin.</li>
		<li>Alışma süresinden sonra, kutuyu kaldırın ve 25 °C ve 31 °C kenarların eşit şekilde kaplanmasını sağlamak için kapağın merkezi çelik levha sınırıyla aynı hizada olacak şekilde konumlandırarak plastik kapağı hızlı bir şekilde ayarlayın. NOT: Bu işlem sırasında, 31 °C tarafındaki hava sıcaklığı ve kapağın içindeki sıcaklık, 27 saniye içinde yaklaşık 5 °C'ye yükselir (Ek Şekil 1), bu da ısıtma hücrelerini11 etkinleştirmek için yeterlidir.</li>
		<li>Kamerayı ve mavi ışığı (20 kLux) açarak denemeyi başlatın. NOT: Oda ışığı koşullarında mavi ışığı açmayın. Hareket durumunda mavi ışığı açmadan önce kamerayı açın ve birkaç kare kaydedin.</li>
		<li>2 dakikadan fazla bir süre sonra kamerayı ve ışığı kapatarak denemeyi sonlandırın. Sinekleri aspiratörü kullanarak atın. NOT: Kamerayı kapatırken hareket olması durumunda fazladan birkaç kare kaydedin.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Davranışsal ve istatistiksel analiz<ol>
		<li>Yalnızca denemenin başlangıcında 25 °C tarafında kalan sineklerden elde edilen verileri analiz edin. NOT: 31 °C tarafında denemelere başlayan ve genellikle değişen tercihler sergileyen sineklerden gelen verileri atın23. 31 °C kenarının kenarına yaklaşmayan sinekleri içeren denemeleri atın ve sıcaklıklar arasında bir seçim yaptıklarından emin olun. 30 saniyeden fazla sabit kalan sineklerden gelen verileri atın.</li>
		<li>Daha önce açıklanan prosedürleri kullanarak sonuçları analiz edin23. Aşağıdaki formülde gösterildiği gibi, sineğin her bir sıcaklık bölgesinde geçirdiği zaman farkının toplam süreye oranı olarak tercih indeksini (PI) hesaplayın: 
		<img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/67964/67964eq01.jpg" style="margin: auto;"> NOT: Deneyler için istatistiksel detaylar şekil açıklamalarında verilmiştir. Veri analizi, uygun veri analiz yazılımı kullanılarak gerçekleştirilir.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
3. Tek sinek kırmızı ışık optogenetik pozisyonel tercih testi
<ol>
	<li>Drosophila suşları ve sinek yetiştirme<ol>
		<li>Gr66a-Gal421 sürücü hattını UAS-CsChrimson2'ye geçin, bu da deneysel genotip Gr66a&gt;CsChrimson ile sonuçlanır. Gr66a&gt;CsChrimson sinekleri, acı tat nöronlarında CsChrimson'u eksprese eder. NOT: Her koşul için eşit sayıda erkek ve dişi sinek kullanıldığından emin olun.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Deneysel tahlil kurulumu ve yürütülmesi<ol>
		<li>CsChrimson'un kontrollü aktivasyonunu sağlamak için testi karanlık bir odada veya karanlık bir ortamda gerçekleştirin (Şekil 1D).</li>
		<li>Bir video kamerayı deney yüzeyinin yaklaşık 45 cm yukarısına yerleştirin.<ol>
			<li>Kızılötesi filtresi olmayan bir video kamera kullanın. Video kamerada 700 nm'den uzun dalga boylarını engelleyen dahili bir kısa geçiren kızılötesi filtre varsa bu filtreyi çıkarın.</li>
			<li>Kızılötesi dalga boylarını yakalamak için süper yapıştırıcı kullanarak lensin üzerine 830 nm uzun geçiren bir filtre yapıştırın. Bu ayar, kızılötesi ışık koşulları altında sinek hareketini kaydetmek için gereklidir.</li>
		</ol>
		</li>
		<li>Yaklaşık 24 kLux (45 mA) ışık yoğunluğu sağlayacak şekilde deney yüzeyinin yaklaşık 2.5 cm yukarısına bir kırmızı ışık kaynağı 1,000 yerleştirin. NOT: Kırmızı lazeri/ışığı filtreleyebilen uygun göz koruması önerilir. Lazer koruyucu gözlükler, yoğun kırmızı ışığa doğrudan maruz kalmaktan kaynaklanan olası göz hasarını önlemeye yardımcı olur.</li>
		<li>Kurulum içindeki sinekleri görselleştirmek için kızılötesi ışık kullanın. Deney boyunca açık tutun. NOT: Deney alanında kızılötesi ışığın neden olduğu parlamayı önleyin; Parlama, veri analizini karmaşık hale getirebilir.</li>
		<li>Plastik kapağın yarısına 780 nm kızılötesi uzun geçiren filtre takmak için yapıştırıcı kullanın. NOT: 780 nm'nin altındaki dalga boylarını engelleyen herhangi bir uzun geçiren filtre kullanın. Filtrelenmemiş taraf kırmızı ışığın ve kızılötesinin geçmesine izin verirken, filtrelenmiş taraf yalnızca kızılötesi ışığın geçmesine izin verir.</li>
		<li>Arka plan gürültüsünü en aza indirmek için deney alanının altına siyah mat bir malzeme yerleştirin.</li>
		<li>Bir sinek aspiratörü kullanarak şeffaf plastik bir örtünün (2 mm yükseklik × 58 mm genişlik × 83 mm uzunluk) altına tek bir sinek yerleştirin ve 1 dakika boyunca alışmasını bekleyin.</li>
		<li>Sinek filtrelenmemiş tarafta görünene kadar bekleyin. Video kamerayı ve kırmızı ışığı açarak denemeyi başlatın. NOT: Video kamera, başlatıldıktan hemen sonra harekete karşı hassastır. Kayıt sırasında kamerayı iyice sabitleyin ve analizi zorlaştırabilecek anormal hareketlerden kaçınmak için kayıttan birkaç saniye önce kamerayı açın. Deneme süresi başlayana kadar kırmızı ışığı açmayın.</li>
		<li>Sineğin hareketini 1 dakika boyunca kaydedin. NOT: Sineğin orta hatta yaklaşmadığı veya 15 saniyeden fazla hareket etmediği denemeleri atın.</li>
		<li>1 dakika sonra kamerayı ve ışığı kapatarak denemeyi sonlandırın. Sinekleri aspiratörü kullanarak atın. NOT: Kamerayı kapatırken hareketin etkilerinden kaçınmak için fazladan birkaç kare kaydedin.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Davranışsal ve istatistiksel analiz<ol>
		<li>Daha önce açıklanan prosedürleri kullanarak sonuçları analiz edin23. Aşağıdaki formülde gösterildiği gibi, sineğin filtresiz alanda ve filtreli alanda geçirdiği süre arasındaki farkın toplam süreye oranı olarak tercih indeksini (PI) hesaplayın: 
		<img alt="Equation 2" src="/files/ftp_upload/67964/67964eq02.jpg" style="margin: auto;"> NOT: Deneyler için istatistiksel detaylar şekil açıklamalarında verilmiştir. Veri analizi, uygun veri analiz yazılımı kullanılarak gerçekleştirilir.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
4. Kırmızı ışık optogenetik hortum uzatma yanıtı
<ol>
	<li>Drosophila suşları ve sinek yetiştirme<ol>
		<li>Gr5a-Gal420 sürücü hattını UAS-CsChrimson2'ye geçin, bu da Gr5a&gt;CsChrimson olarak adlandırılan deneysel genotiple sonuçlanır. Gr5a&gt;CsChrimson sinekleri, tatlı tat reseptör nöronlarında CsChrimson'u eksprese eder. NOT: Her koşul için eşit sayıda erkek ve dişi sinek kullanıldığından emin olun.</li>
		<li>Starve, testten önce ATR (ATR +) veya ATR -) olmadan 16-24 saat uçar. NOT: Güçlü bir yanıt ortaya çıkarmak için daha uzun açlık süreleri gerekebilir.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Deneysel tahlil kurulumu ve yürütülmesi<ol>
		<li>Anestezi yapan sinekler buz üzerinde soğuyarak hareket eder (Şekil 1E). NOT: Sinekler ve buz arasındaki doğrudan temastan kaçının. Soğutma süresini yaklaşık 1 dakika ile sınırlayın; Uzun süreli soğutma, kurtarma sorunlarına ve ölüme neden olabilir.</li>
		<li>Cam slaytların üzerine 7-10 küçük nokta yapıştırıcı uygulamak için 1000 μL'lik bir pipet ucunun ucunu kullanın. NOT: Sürgü üzerindeki küçük tutkal damlaları, sineğin suya batmamasını sağlar ve yapıştırıcının hortumuna veya bacaklarına yapışmasını önlemeye yardımcı olur.</li>
		<li>Her bir tutkal noktasına bir sineği ventral tarafı yukarı gelecek şekilde yerleştirin. Hareketi en aza indirmek için göğüs kafesi ve kanatların yapıştırıcıya temas ettiğinden emin olun. Yapışkan yüzey alanını artırmak için kanatları her iki tarafa doğru havalandırın. NOT: Sinekleri birbirine çok yakın yerleştirmekten kaçının, bu ışığa maruz kalma sırasında yanlışlıkla birden fazla sineği harekete geçirebilir.</li>
		<li>Tutkalın yaklaşık 10 dakika kurumasını bekleyin.</li>
		<li>Slaytları bir nem kutusuna (ıslak kağıt havlulu plastik bir kutu) aktarın ve sineklerin 2 saat iyileşmesine izin verin.</li>
		<li>Slaytı mikroskobun altına yerleştirin. Sinekleri doyurmak için bir damla su vermek için bir şırınga kullanın ve susuzluğa bağlı hortum uzantılarını önleyin.</li>
		<li>Mikroskopta PER yanıtını gözlemlerken tek bir sineğin hortumuna/kafasına (700 lüks) kırmızı ışık yakmak için kırmızı bir lazer işaretçiyi manuel olarak tutun. NOT: Mikroskopta kırmızı ışığı gözlemlerken kırmızı lazeri/ışığı filtreleyebilen göz koruması çok önemlidir.</li>
		<li>30 sn'lik bir pencere içinde hortum uzantısını gözlemleyin ve kaydedin. Aşağıdaki kayıt sistemini kullanarak her sineği puanlayın: 0 uzatma olmadığını, 0.5 1-2 s uzatmayı, 1 uzatmanın 3 s'den fazla sürdüğünü gösterir.</li>
		<li>Işık kaynaklı hortum uzantısını test ettikten sonra, bir şırınga kullanarak% 4 sakaroza yanıtı inceleyin. İğnenin ucuna bir damla sakaroz atın ve sinek hortumuna yaklaştırın. NOT: Sükroz damlacığına yanıt vermeyen sineklerden gelen verileri atın.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Davranışsal ve istatistiksel analiz<ol>
		<li>Uygun veri analizi yazılımını kullanarak istatistiksel analiz yapın. NOT: Deneyler için istatistiksel detaylar şekil açıklamalarında verilmiştir.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
5. Kırmızı ışık optogenetik sinek labirent testi
<ol>
	<li>Drosophila suşları ve sinek yetiştirme<ol>
		<li>Gr66a-Gal421 sürücü hattını UAS-CsChrimson2'ye geçin, bu da deneysel genotip Gr66a&gt;CsChrimson ile sonuçlanır. Gr66a&gt;CsChrimson sinekleri, acı tat nöronlarında CsChrimson'u eksprese eder. NOT: Her grubun eşit sayıda erkek ve dişi sinek içerdiğinden emin olun.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Sinek labirenti montajı<ol>
		<li>Sinek labirentini Şekil 1F'de gösterildiği gibi yapın. NOT: Alternatif olarak, daha önce detaylandırıldığı gibi monte edilen sinek labirent bileşenlerini3D yazdırın 25.</li>
		<li>Bir yükleme tüpü, üstü açık şeffaf bir test tüpü ve folyo kaplı bir test tüpü yapmak için üç adet 5 mL plastik kültür tüpünü uygun uzunluklarda kesin. Tüpleri Şekil 1F'de gösterildiği gibi sinek labirentine takın.<ol>
			<li>Labirent malzemesine bağlı olarak, her test koşulu için eşit mesafe sağlamak için test tüplerini kesin. Tutma odasının uzunluğuna bağlı olarak, açık bir labirentte üstü açık test tüpünü kısaltın, labirent opaksa folyo kaplı test tüpünü kısaltın.</li>
		</ol>
		</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Deneysel tahlil kurulumu ve yürütülmesi<ol>
		<li>Karanlık veya düşük ışık koşullarında, yükleme borusuna 10 erkek ve 10 dişi yerleştirin. Yükleme borusunu tutma odasına bağlayın. Asansörü eğin ve sinekleri tutma odasına taşımak için tüpe hafifçe vurun. NOT: Asansörü, tutma odasının sadece yarısı açık olacak şekilde indirin. Bu manipülasyon, sineklerin yükleme borusundan tutma odasına aktarılmasını kolaylaştırır.</li>
		<li>Sinekler tutma odasına aktarıldıktan sonra, yükleme borusu ile test borusu delikleri arasındaki sinekleri indirmek için asansörü kullanın. Ardından yükleme borusunu çıkarın.</li>
		<li>Işığı açmadan sinek labirentini kırmızı ışık kaynağından (1000 mA) yaklaşık 13 cm uzağa yerleştirin.</li>
		<li>Tutma haznesi test tüpü delikleriyle aynı hizaya gelene kadar asansörü indirin, böylece sineklerin folyo ile sarılmış ve üstü açık test tüpleri arasında serbestçe hareket etmesine izin verin. Aynı anda, CsChrimson'ı etkinleştirmek için kırmızı ışığı açın. Açıkta kalan test tüpünün yüzeyindeki kırmızı ışık yoğunluğunun yaklaşık 40 kLux olduğundan emin olun. NOT: Tutma haznesi alçaltılana ve test tüpü delikleriyle hizalanana kadar kırmızı ışığı açmayın. Kırmızı ışığın yoğun parlaklığı nedeniyle kırmızı lazeri/ışığı filtreleyebilen uygun göz koruması önerilir.</li>
		<li>Sinekler, bir dakika boyunca kırmızı ışığa maruz kalan tüp ile gölgeli tüp arasında seçim yapar.</li>
		<li>1 dakika sonra, yükleme borusu ile test borusu delikleri arasındaki asansörü kaldırın. Her tüpteki sinekleri sayın. NOT: Sadece aktif ve yaralanmamış sinekler sayılır.</li>
		<li>Her denemeden sonra sinek asansörünü ve sinek labirentini dH2O kullanarak temizleyin.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Veri analizi ve istatistik<ol>
		<li>Aşağıdaki formülde gösterildiği gibi, üstü açık ve üstü kapalı tüpler arasındaki sinek sayısı farkının toplam sinek sayısına oranı olarak tercih indeksini (PI) hesaplayın: 
		<img alt="Equation 3" src="/files/ftp_upload/67964/67964eq03.jpg" style="margin: auto;"> NOT: Deneyler için istatistiksel detaylar şekil açıklamalarında verilmiştir. Veri analizi, uygun veri analiz yazılımı kullanılarak gerçekleştirilir</li>
	</ol>
	</li>
</ol>

<ol><li>Yizhar, O., Fenno, L. E., Davidson, T. J., Mogri, M., Deisseroth, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optogenetics+in+neural+systems%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Optogenetics in neural systems.</a> Neuron. 71 (1), 9-34 (2011).</li>
<li>Klapoetke, N. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Independent+optical+excitation+of+distinct+neural+populations%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Independent optical excitation of distinct neural populations.</a> Nat Methods. 11 (3), 338-346 (2014).</li>
<li>Mauss, A. S., Busch, C., Borst, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optogenetic+neuronal+silencing+in+drosophila+during+visual+processing%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Optogenetic neuronal silencing in drosophila during visual processing.</a> Sci Rep. 7 (1), 13823(2017).</li>
<li>Govorunova, E. G., Sineshchekov, O. A., Janz, R., Liu, X., Spudich, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuroscience.+Natural+light-gated+anion+channels%3A+A+family+of+microbial+rhodopsins+for+advanced+optogenetics%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Neuroscience. Natural light-gated anion channels: A family of microbial rhodopsins for advanced optogenetics.</a> Science. 349 (6248), 647-650 (2015).</li>
<li>Castaneda, A. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+labeling+of+individualized+postsynaptic+neurons+using+optogenetics+and+trans-tango+in+drosophila+%28flipsot%29%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Genet%22%5BJournal%5D)">Functional labeling of individualized postsynaptic neurons using optogenetics and trans-tango in drosophila (flipsot).</a> PLoS Genet. 20 (3), e1011190(2024).</li>
<li>Fischer, F. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Drosophila+melanogaster+as+a+versatile+model+organism+to+study+genetic+epilepsies%3A+An+overview%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Mol+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Drosophila melanogaster as a versatile model organism to study genetic epilepsies: An overview.</a> Front Mol Neurosci. 16, 1116000(2023).</li>
<li>Aragon, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiphoton+imaging+of+neural+structure+and+activity+in+drosophila+through+the+intact+cuticle%5BTitle%5D)+AND+%22Elife%22%5BJournal%5D)">Multiphoton imaging of neural structure and activity in drosophila through the intact cuticle.</a> Elife. 11, e69094(2022).</li>
<li>Zhang, W., Ge, W., Wang, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+toolbox+for+light+control+of+drosophila+behaviors+through+channelrhodopsin+2-mediated+photoactivation+of+targeted+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">A toolbox for light control of drosophila behaviors through channelrhodopsin 2-mediated photoactivation of targeted neurons.</a> Eur J Neurosci. 26 (9), 2405-2416 (2007).</li>
<li>Kono, M., Goletz, P. W., Crouch, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((11-cis-+and+all-trans-retinols+can+activate+rod+opsin%3A+Rational+design+of+the+visual+cycle%5BTitle%5D)+AND+%22Biochemistry%22%5BJournal%5D)">11-cis- and all-trans-retinols can activate rod opsin: Rational design of the visual cycle.</a> Biochemistry. 47 (28), 7567-7571 (2008).</li>
<li>Gallio, M., Ofstad, T. A., Macpherson, L. J., Wang, J. W., Zuker, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+coding+of+temperature+in+the+drosophila+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">The coding of temperature in the drosophila brain.</a> Cell. 144 (4), 614-624 (2011).</li>
<li>Ni, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+gustatory+receptor+paralogue+controls+rapid+warmth+avoidance+in+drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">A gustatory receptor paralogue controls rapid warmth avoidance in drosophila.</a> Nature. 500 (7464), 580-584 (2013).</li>
<li>Weiss, L. A., Dahanukar, A., Kwon, J. Y., Banerjee, D., Carlson, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+molecular+and+cellular+basis+of+bitter+taste+in+drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">The molecular and cellular basis of bitter taste in drosophila.</a> Neuron. 69 (2), 258-272 (2011).</li>
<li>Ling, F., Dahanukar, A., Weiss, L. A., Kwon, J. Y., Carlson, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+molecular+and+cellular+basis+of+taste+coding+in+the+legs+of+drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">The molecular and cellular basis of taste coding in the legs of drosophila.</a> J Neurosci. 34 (21), 7148-7164 (2014).</li>
<li>Dethier, V. G. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aDethier%2C+VG+%22The+Hungry+Fly%3A+A+Physiological+Study+of+the+Behavior+Associated+with+Feeding%22">The Hungry Fly: A Physiological Study of the Behavior Associated with Feeding</a>. , Harvard University Press. Cambridge, MA. (1976).</li>
<li>Shiu, P. K., Sterne, G. R., Engert, S., Dickson, B. J., Scott, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Taste+quality+and+hunger+interactions+in+a+feeding+sensorimotor+circuit%5BTitle%5D)+AND+%22Elife%22%5BJournal%5D)">Taste quality and hunger interactions in a feeding sensorimotor circuit.</a> Elife. 11, e79887(2022).</li>
<li>Kim, H., Kirkhart, C., Scott, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-range+projection+neurons+in+the+taste+circuit+of+drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Elife%22%5BJournal%5D)">Long-range projection neurons in the taste circuit of drosophila.</a> Elife. 6, e23386(2017).</li>
<li>Sayeed, O., Benzer, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavioral+genetics+of+thermosensation+and+hygrosensation+in+drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Behavioral genetics of thermosensation and hygrosensation in drosophila.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 93 (12), 6079-6084 (1996).</li>
<li>Coya, R., Martin, F., Calvin-Cejudo, L., Gomez-Diaz, C., Alcorta, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Validation+of+an+optogenetic+approach+to+the+study+of+olfactory+behavior+in+the+t-maze+of+drosophila+melanogaster+adults%5BTitle%5D)+AND+%22Insects%22%5BJournal%5D)">Validation of an optogenetic approach to the study of olfactory behavior in the t-maze of drosophila melanogaster adults.</a> Insects. 13 (8), 662(2022).</li>
<li>Chu, L. A., Tai, C. Y., Chiang, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Thirst-driven+hygrosensory+suppression+promotes+water+seeking+in+drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Thirst-driven hygrosensory suppression promotes water seeking in drosophila.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 121 (34), e2404454121(2024).</li>
<li>Chyb, S., Dahanukar, A., Wickens, A., Carlson, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Drosophila+gr5a+encodes+a+taste+receptor+tuned+to+trehalose%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Drosophila gr5a encodes a taste receptor tuned to trehalose.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 100 (Suppl 2), 14526-14530 (2003).</li>
<li>Dunipace, L., Meister, S., Mcnealy, C., Amrein, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatially+restricted+expression+of+candidate+taste+receptors+in+the+drosophila+gustatory+system%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Biol%22%5BJournal%5D)">Spatially restricted expression of candidate taste receptors in the drosophila gustatory system.</a> Curr Biol. 11 (11), 822-835 (2001).</li>
<li>Ratnayake, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blue+light+excited+retinal+intercepts+cellular+signaling%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Blue light excited retinal intercepts cellular signaling.</a> Sci Rep. 8 (1), 10207(2018).</li>
<li>Huda, A., Omelchenko, A. A., Vaden, T. J., Castaneda, A. N., Ni, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Responses+of+different+drosophila+species+to+temperature+changes%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Biol%22%5BJournal%5D)">Responses of different drosophila species to temperature changes.</a> J Exp Biol. 225 (11), jeb243708(2022).</li>
<li>Tyrrell, J. J., Wilbourne, J. T., Omelchenko, A. A., Yoon, J., Ni, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ionotropic+receptor-dependent+cool+cells+control+the+transition+of+temperature+preference+in+drosophila+larvae%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Genet%22%5BJournal%5D)">Ionotropic receptor-dependent cool cells control the transition of temperature preference in drosophila larvae.</a> PLoS Genet. 17 (4), e1009499(2021).</li>
<li>Fu, Z., Huda, A., Kimbrough, I. F., Ni, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Using+drosophila+two-choice+assay+to+study+optogenetics+in+hands-on+neurobiology+laboratory+activities%5BTitle%5D)+AND+%22J+Undergrad+Neurosci+Educ%22%5BJournal%5D)">Using drosophila two-choice assay to study optogenetics in hands-on neurobiology laboratory activities.</a> J Undergrad Neurosci Educ. 22 (1), A45-A50 (2023).</li>
<li>Joseph, R. M., Heberlein, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue-specific+activation+of+a+single+gustatory+receptor+produces+opposing+behavioral+responses+in+drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Genetics%22%5BJournal%5D)">Tissue-specific activation of a single gustatory receptor produces opposing behavioral responses in drosophila.</a> Genetics. 192 (2), 521-532 (2012).</li>
<li>Riemensperger, T., Kittel, R. J., Fiala, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optogenetics+in+drosophila+neuroscience%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Optogenetics in drosophila neuroscience.</a> Methods Mol Biol. 1408, 167-175 (2016).</li>
<li>Dorkenwald, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuronal+wiring+diagram+of+an+adult+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Neuronal wiring diagram of an adult brain.</a> Nature. 634 (8032), 124-138 (2024).</li>
<li>Schlegel, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Whole-brain+annotation+and+multi-connectome+cell+typing+of+drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Whole-brain annotation and multi-connectome cell typing of drosophila.</a> Nature. 634 (8032), 139-152 (2024).</li>
<li>Talay, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transsynaptic+mapping+of+second-order+taste+neurons+in+flies+by+trans-tango%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Transsynaptic mapping of second-order taste neurons in flies by trans-tango.</a> Neuron. 96 (4), 783-795.e4 (2017).</li>
<li>Shiraiwa, T., Carlson, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Proboscis+extension+response+%28per%29+assay+in+drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Proboscis extension response (per) assay in drosophila.</a> J Vis Exp. (3), e193(2007).</li>
<li>Pulver, S. R., Hornstein, N. J., Land, B. L., Johnson, B. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optogenetics+in+the+teaching+laboratory%3A+Using+channelrhodopsin-2+to+study+the+neural+basis+of+behavior+and+synaptic+physiology+in+drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Physiol+Educ%22%5BJournal%5D)">Optogenetics in the teaching laboratory: Using channelrhodopsin-2 to study the neural basis of behavior and synaptic physiology in drosophila.</a> Adv Physiol Educ. 35 (1), 82-91 (2011).</li>
<li>Titlow, J. S., Johnson, B. R., Pulver, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Light+activated+escape+circuits%3A+A+behavior+and+neurophysiology+lab+module+using+drosophila+optogenetics%5BTitle%5D)+AND+%22J+Undergrad+Neurosci+Educ%22%5BJournal%5D)">Light activated escape circuits: A behavior and neurophysiology lab module using drosophila optogenetics.</a> J Undergrad Neurosci Educ. 13 (3), A166-A173 (2015).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>1000 mA LED sürücü</td><td>Luxeon Star</td><td>3021-D-E-1000</td><td></td></tr><tr><td>5 mL VWR Kültür Tüpleri, Plastik, Çift Konumlu Kapaklı</td><td>VWR</td><td>60818-664</td><td></td></tr><tr><td>780 Uzun Geçiren Filtre / IR 780 nm 100 mm x 100 mm</td><td>Lee Filtreler</td><td>BH #LE8744</td><td>Yaklaşık 47 x 100'e kadar kesin, plastik kapağa sığdırın</td></tr><tr><td>Agfabric, 6,5 ft x 15 ft. Bitkileri, Sebzeleri, Çiçekleri, Meyveleri</td> <td>Korumak için Böcek Böcek Ağı Bahçe AğıThe Home Depot</td><td>EIBNW6515</td><td></td></tr><tr><td>Tüm trans retinal</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>116-31-4</td><td></td></tr><tr><td>Alüminyum Plaka (30,5 cm x 30,5 cm x 0,6 cm)</td><td>Amazon'dan</td><td></td><td>satın alındı</td></tr><tr><td>Siyah Plastik Kutu</td><td>LI-COR</td><td>929-97101</td><td></td></tr><tr><td>KALSİYUM KLORÜR ANHYDRO 25GR</td><td>Thermo Fisher Scientific&nbsp;</td><td></td><td></td>AC297150250</tr><tr><td>CX405 Exmor R CMOS sensörlü Handycam</td><td>SONY</td><td>HDR-CX405</td><td></td></tr><tr><td>Elmer' s &ldquo; Okul Tutkalı"</td><td>Elmer</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Etil alkol, Saf (200 Kanıt)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>E7023</td><td></td></tr><tr><td>Fisherbrand Isotemp Sıcak Plaka Karıştırıcı</td><td>Fisher Scientific</td><td>SP88850200</td><td></td></tr><tr><td>Sinek hattı: Gr5a-Gal4</td><td>Bloomington Drosophila Stok Merkezi</td><td>57592</td><td></td></tr><tr><td>Sinek hattı: Gr66a-Gal4</td><td>Bloomington Drosophila Stok Merkezi</td><td>57670</td><td></td></tr><tr><td>Sinek hattı: HC-Gal4 (II)</td><td>Dr. Marco Gallio Lab</td><td></td><td>Nazik bir hediye</td></tr><tr><td>Uçuş hattı: UAS-CsChrimson</td><td>Bloomington Drosophila Stok Merkezi</td><td>55136</td><td></td></tr><tr><td>Sinek hattı: UAS-GtACR2/TM6B</td><td>Dr. Quentin Gaudry Lab</td><td></td><td>Nazik bir hediye</td></tr><tr><td>Flystuff 62-101 Sarı mısır unu (11,3 kg), sarı, 11,3 kg/birim</td><td>Genesee Scientific</td><td>62-101</td><td></td></tr><tr><td>Flystuff 62-107 Aktif Olmayan Kuru Maya, 10 Kg, Besleyici Pul, 10 Kg/Birim</td><td>Genesee Scientific</td><td>62-107</td><td></td></tr><tr><td>Flystuff 66-103 Nutri-Fly Drosophila Agar, Gelidium, 100 Mesh, 5 Kg (11.02 lbs)/Birim</td><td>Genesee Scientific</td><td>66-103</td><td></td></tr><tr><td>FreeMascot OD 8+ 190 nm&ndash; 420 nm / 600 nm / ndash; 1100 nm Dalga Boyu Menekşe / Kırmızı / Kızılötesi Lazer Güvenlik Gözlükleri&nbsp;</td><td>ÜcretsizMaskot&nbsp;</td><td>B08LGMQ65S</td><td>Amazon</td></tr><tr><td>GoPro Hero8 Black</td><td>GoPro'dan</td> satın <td>alındı 6365359</td><td></td></tr><tr><td>LEE Filtreleri 100 kez; 100 mm Kızılötesi #87 Kızılötesi Polyester Filtre</td><td>B & H Fotoğraf</td><td>LE8744</td><td></td></tr><tr><td>Uzun Geçiren Filtre, Renkli Cam, 50,8 x 50,8 mm, 830 nm Cut-on, RG830</td><td>Newport</td><td>FSQ-RG830</td><td></td></tr><tr><td>Metil 4-hidroksibenzoat, %99, Thermo Scientific Chemicals</td><td>Thermo Fisher Scientific&nbsp;</td><td></td><td></td>126960025</tr><tr><td>MicroWell Mini Tepsi 60 Kuyulu, Düşük Profilli NS PS</td><td>Thermal Scientific&nbsp;</td><td>NUNC 439225</td><td>Kapaklar "plastik kapak" olarak</td></tr> <tr><td>kullanılırOlympus Plastics 24-160RS, 1000 & L Olympus Ergonomik Pipet Uçları Düşük Ciltli, Raflı, Steril, 8 Raf 96 Uç/Birim</td><td>Eppendorf</td><td>24-160RS</td><td></td></tr><tr><td>Parafilm M Sızdırmazlık</td><td>Filmi Heathrow Scientific</td><td>HS234526B</td><td>4 inç x 125 fit</td></tr><tr><td>Potasyum klorür, ACS, %99,0-100,5,&nbsp;</td><td>Thermo Fisher Bilimsel&nbsp;</td><td></td><td></td>AA1159530</tr><tr><td>Prism</td><td>GraphPad</td><td>Sürüm 9</td><td>veri analiz yazılımı</td></tr><tr><td>Samco Dereceli Transfer Pipetleri</td><td>Thermo Fisher Scientific&nbsp;</td><td>225</td><td>3 mL</td></tr><tr><td>Slaytlar</td><td>Fisher Scientific</td><td>12-544-2</td><td>&nbsp; 5 mm x 75 mm x 1.0 mm</td></tr><tr><td>Stereo mikroskop</td><td>OLYMPUS</td><td>CZ61</td><td></td></tr><tr><td>Strafor kutu (27 cm yükseklik ve süreler; 22 cm genişlik ve süreler; 16 cm uzunluk)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sucrose</td><td>Fisher Scientific</td><td>225911</td><td></td></tr><tr><td>Yüzey sıcaklık probu</td><td>Fluke</td><td>80PK-3A</td><td></td></tr><tr><td>Şırınga</td><td>BD Integra</td><td>305270</td><td></td></tr><tr><td>Tate & Lyle 457 Dekstroz, Tate & Lyle, Pow, Tate & Lyle 457 Dekstroz, Tate & Lyle, Toz, 50 lbs / Birim</td><td>Genesee Scientific</td><td>62-113</td><td></td></tr><tr><td>İzlenebilir Kalibre Edilmiş Büyük Haneli Termokupl Termometre</td><td>cple-parmer</td><td>&nbsp ile izlenebilir; UX-91210-07</td><td>Fisherbrand İzlenebilir BigDigit K Tipi Termometre</td></tr><tr><td>Üçlü mavi LED sancak</td><td>LED'leriEk</td><td>07007-PB000-D</td><td>470 nm</td></tr><tr><td>Üçlü kırmızı LED sancak</td><td>LED'leriEk</td><td>07007-PD000-F</td><td>627 nm</td></tr><tr><td>Tygon PVC Şeffaf Boru 1/4" ID, 3/8" OD, 5 ft. Uzunluk&nbsp;</td><td>McMaster Carr Tedarik Şirketi&nbsp;</td><td>6516T21&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Univivi IR Aydınlatıcı, 850nm 12 LED Gece Görüşü için Geniş Açılı IR Işık</td><td>Univivi</td><td>4331910725</td><td></td></tr><tr><td>Wakefield Termal 25.4 mm Yuvarlak Soğutucu Yıldız LED Kartı - 882-100AB</td><td>Wakefield-Vette</td><td>882-100AB</td><td></td></tr><tr><td>Kablosuz Sunucu</td><td>DinoFire Store</td><td>B01410YNAM</td><td>Amazon'dan satın alındı</td></tr></tbody></table>

drosophila melanogaster'de nöral devrelerin optogenetik manipülasyonu için davranışsal testler

Behavioral Assays for Optogenetic Manipulation of Neural Circuits in Drosophila melanogaster

Tek sinek mavi ışık optogenetik termotaktik pozisyonel tercih testi Dört koşul test edildi: ATR takviyesi olmayan oda lambası (oda lambası, ATR -), ATR takviyesi olan oda lambası (oda lambası, ATR +), ATR takviyesi olmayan mavi ışık (mavi, ATR -) ve ATR takviyesi olan mavi ışık (mavi, ATR +). İlk üç koşul kontrol görevi gördü. Kontrol deneylerinde, sinekler 31 °C tarafından kaçındı. ATR takviyesi ile mavi ışıkta, sinekler 25 ° C ile 31 ° C arasında bir tercih göstermedi, bu da HC nöronlarının GtACR2 a...

Drosophila melanogaster'de Nöral Devrelerin Optogenetik Manipülasyonu için Davranışsal Testler

Optogenetics has become a fundamental technique in neuroscience, enabling precise control of neuronal activity through light stimulation. This study ...

behavioral-assays-for-optogenetic-manipulation-neural-circuits

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Sinirbilim

Optogenetik, ışık aktivasyonu nöronun durumunda bir değişikliği tetikleyen ışığa duyarlı proteinler olan belirli opsinleri ifade etmek için genetik olarak tasarlanmış nöronları manipüle etmek için ışığın kullanılmasını sağlar. Burada, opsin Channelrhodopsin2 kullanarak Drosophila'da optogenetik bir yaklaşımı açıklıyoruz. Örnek protokol, sineğin kaçış davranışının arkasındaki nöronal devreyi incelemek için bir optogenetik test setine sahiptir.

Drosophila Optogenetik: Nöronal Devreleri Manipüle Etmek İçin Bir Yöntem

Bu video, koku alma duyu nöronlarının (ORN'ler) optogenetik uyarılmasına yanıt olarak Drosophila larvalarının navigasyon davranışı üzerine bir çalışmayı göstermektedir. ORN'lerde ışığa duyarlı iyon kanallarını eksprese eden transgenik Drosophila larvaları, bir davranış alanı içinde agaroz üzerine yerleştirilir. Işıkla optogenetik stimülasyon kanalları açarak sinyalin beyne iletimini tetikleyen bir katyon akışına neden olur ve navigasyon davranışı kaydedilir.

Koku Alma Duyu Nöronlarının Optogenetik Stimülasyonuna Yanıt Olarak Drosophila Larvalarının Seyir Davranışı

Genetik olarak kodlanmış optogenetic araçları belirli nöronların noninvaziv düzenlenmesini...

Yılında Escape Davranış Optogenetic Uyarım<em&gt; Drosophila melanogaster</em

Burada Drosophila larva için bir ışık-karanlık tercih testi açıklar. Bu testte ışık algılama ve işleme photobehavior doğuştan gelen ve sirkadiyen düzenleme hakkında bilgi sağlar.

Içinde Doğuştan gelen ve sirkadiyen Ayarlı Photobehavior Eğitim ışık tercih Testi<em&gt; Drosophila</em&gt; Larva

Yarı sağlam motor çıkış değişiklikleri (kas kasılması) izlerken Burada motoneuronal faaliyet optogenetic manipülasyon için bir protokol...

Yarı sağlam Lazer Aydınlatma ile Sinir Faaliyet optogenetic Pertürbasyon<em&gt; Drosophila</emMotion&gt; Larva

Bu video makalede, Drosophila melanogaster uçmak yetişkin meyve koku bağımlı gıda arama davranışı üzerine açlık veya tokluk etkisini ölçmek için otomatik bir deneyi açıklar.

Toplayıcılık Davranış için Tek-sinek Deneyi Drosophila

Burada, 100'e kadar sirke sineğinin (Drosophila melanogaster) koku alma tepkilerini test etmek için bir davranış kurulumu ve veri analizi yöntemini açıklıyoruz. Bu sistem, tek veya çoklu koku uyaranlarıyla kullanılabilir ve nöronal alt kümelerin optogenetik aktivasyonu veya susturulması için uyarlanabilir.

Of Bilgisayar İzleme tarafından Analiz Edilmiş Olfaktor Davranışlar<em&gt; Drosophila</em&gt; Dört kadranda olfactometer içinde

Bu iletişim kuralı Drosophila larva yanıt onun koku nöronlar eşzamanlı optogenetic uyarılması için gezinme davranışını analiz eder. 630 nm dalga boyunda ışık kırmızı kaymıştır kanal rhodopsin ifade bireysel koku nöronlar etkinleştirmek için kullanılır. Larva hareketi aynı anda izlenir, dijital olarak kaydedilmiş ve özel olarak yazılmış yazılım kullanılarak analiz.

Yanıt koku nöronlar Optogenetic uyarılması olarak Drosophila larva davranışını izlemek

Bu protokol, Drosophila larva fototaktik davranışını araştırmak için ışık noktası bir test sunar. Bu testte, ışık stimülasyonu olarak bir ışık noktası oluşturulur ve larva ışıktan kaçınma işlemi kızılötesi ışık tabanlı görüntüleme sistemi tarafından kaydedilir.

Drosophila Larva Fototaksisanalizi için Hafif Nokta Tabanlı Tahlil

Mevcut protokol, OCT görüntüleme ve optogenetik kalp pacing için kalpte eNpHR2.0 veya ReaChR opsinlerini eksprese eden Drosophila melanogaster'in oluşumunu tanımlamaktadır. Farklı gelişim aşamalarında canlı hayvanlarda restore edilebilir kalp durması, bradikardi ve taşikardi simülasyonu da dahil olmak üzere Drosophila OCT görüntüleme ve kalp atışı modülasyonu için ayrıntılı talimatlar bildirilmiştir.

Kardiyak Fonksiyonun Görüntülenmesi ve Optogenetik Kontrolü için Drosophila melanogaster Modellerinin Geliştirilmesi

Protokol, geleneksel memeli modellerine bir alternatif olarak lokomotor disfonksiyonun nicelleştirilmesi yoluyla meyve sineğindeki nörotoksisiteyi değerlendirmek için yüksek verimli, uygun maliyetli bir yöntem sunar. Farmasötik bileşiklerin, çevresel ajanların veya genetik modifikasyonların nörotoksik etkilerini hassas, tekrarlanabilir ve etik açıdan uygun bir model kullanarak değerlendirmeyi amaçlar.

Drosophila melanogaster'de Lokomotor Disfonksiyonun Nörotoksisite için Bir Okuma Olarak Davranışsal Analizi

Öğrenin Drosophila melanogaster'de optogenetik manipülasyon yöntemleriyle termotaksi ve tat alma davranışlarını incelemeyi. Bu protokol sinir devrelerinin karar verme mekanizmalarını anlamak için yeniden üretilebilir bir çerçeve sunar.

Drosophila melanogaster'de Nöral Devrelerin Optogenetik Manipülasyonu için Davranışsal Testler

Daha fazla video keşfet