Name: Akış Sitometrisi Kullanılarak Yaralı Omurilikteki Mikroglia ve Periferik İnfiltre Makrofajların Belirlenmesi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-06-24T13:40:00.000+00:00
Duration: 8 min 47 s
Description: Öğrenin, akış sitometrisi kullanarak yaralı omurilikte mikroglia ve periferik infiltre makrofajları belirleme yöntemini. Bu teknik, nöroinflamasyon ve merkezi sinir sistemi hastalıklarındaki immün hücre rollerini anlamak için güvenilir bir yaklaşım sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Rubiano, A. M., Carney, N., Chesnut, R., Puyana, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+neurotrauma+research+challenges+and+opportunities%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Global neurotrauma research challenges and opportunities.</a> Nature. 527 (7578), S193-S197 (2015).</li>
<li>Fehlings, M., Singh, A., Tetreault, L., Kalsi-Ryan, S., Nouri, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+prevalence+and+incidence+of+traumatic+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Epidemiol%22%5BJournal%5D)">Global prevalence and incidence of traumatic spinal cord injury.</a> Clin Epidemiol. 6, 309-331 (2014).</li>
<li>Sterner, R. C., Sterner, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immune+response+following+traumatic+spinal+cord+injury%3A+Pathophysiology+and+therapies%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Immunol%22%5BJournal%5D)">Immune response following traumatic spinal cord injury: Pathophysiology and therapies.</a> Front Immunol. 13, 1084101(2023).</li>
<li>Sun, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiple+organ+dysfunction+and+systemic+inflammation+after+spinal+cord+injury%3A+A+complex+relationship%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neuroinflammation%22%5BJournal%5D)">Multiple organ dysfunction and systemic inflammation after spinal cord injury: A complex relationship.</a> J Neuroinflammation. 13 (1), 260(2016).</li>
<li>Brockie, S., Zhou, C., Fehlings, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Resident+immune+responses+to+spinal+cord+injury%3A+Role+of+astrocytes+and+microglia%5BTitle%5D)+AND+%22Neural+Regen+Res%22%5BJournal%5D)">Resident immune responses to spinal cord injury: Role of astrocytes and microglia.</a> Neural Regen Res. 19 (8), 1678-1685 (2024).</li>
<li>Wang, Z., Zhou, W., Zhang, Z., Zhang, L., Li, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metformin+alleviates+spinal+cord+injury+by+inhibiting+nerve+cell+ferroptosis+through+upregulation+of+heme+oxygenase-1+expression%5BTitle%5D)+AND+%22Neural+Regen+Res%22%5BJournal%5D)">Metformin alleviates spinal cord injury by inhibiting nerve cell ferroptosis through upregulation of heme oxygenase-1 expression.</a> Neural Regen Res. 19 (9), 2041-2049 (2024).</li>
<li>Li, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lupenone+improves+motor+dysfunction+in+spinal+cord+injury+mice+through+inhibiting+the+inflammasome+activation+and+pyroptosis+in+microglia+via+the+nuclear+factor+kappa+B+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Neural+Regen+Res%22%5BJournal%5D)">Lupenone improves motor dysfunction in spinal cord injury mice through inhibiting the inflammasome activation and pyroptosis in microglia via the nuclear factor kappa B pathway.</a> Neural Regen Res. 19 (8), 1802-1811 (2024).</li>
<li>Zhou, H. -Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dynamic+development+of+microglia+and+macrophages+after+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Neural+Regen+Res%22%5BJournal%5D)">Dynamic development of microglia and macrophages after spinal cord injury.</a> Neural Regen Res. 20 (12), 3606-3619 (2024).</li>
<li>Hakim, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spinal+cord+injury+induces+permanent+reprogramming+of+microglia+into+a+disease-associated+state+which+contributes+to+functional+recovery%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Spinal cord injury induces permanent reprogramming of microglia into a disease-associated state which contributes to functional recovery.</a> J Neurosci. 41 (40), 8441-8459 (2021).</li>
<li>Brennan, F. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microglia+coordinate+cellular+interactions+during+spinal+cord+repair+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Microglia coordinate cellular interactions during spinal cord repair in mice.</a> Nat Commun. 13 (1), 4096(2022).</li>
<li>Zeng, F., et al. Microglia overexpressing brain-derived neurotrophic factor promote vascular repair and functional recovery in mice after spinal cord injury. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aZeng%2C+F+%22Neural+Regen+Res%22">Neural Regen Res</a>. , (2024).</li>
<li>Tang, Y., Le, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+roles+of+M1+and+M2+microglia+in+neurodegenerative+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Differential roles of M1 and M2 microglia in neurodegenerative diseases.</a> Mol Neurobiol. 53 (2), 1181-1194 (2015).</li>
<li>Butovsky, O., Weiner, H. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microglial+signatures+and+their+role+in+health+and+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Microglial signatures and their role in health and disease.</a> Nat Rev Neurosci. 19 (10), 622-635 (2018).</li>
<li>Wang, J., He, W., Zhang, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+richer+and+more+diverse+future+for+microglia+phenotypes%5BTitle%5D)+AND+%22Heliyon%22%5BJournal%5D)">A richer and more diverse future for microglia phenotypes.</a> Heliyon. 9 (4), e14713(2023).</li>
<li>Zeng, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Knockout+of+TNF-%CE%B1+in+microglia+decreases+ferroptosis+and+convert+microglia+phenotype+after+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Heliyon%22%5BJournal%5D)">Knockout of TNF-α in microglia decreases ferroptosis and convert microglia phenotype after spinal cord injury.</a> Heliyon. 10 (17), e36488(2024).</li>
<li>Prinz, M., Jung, S., Priller, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microglia+biology%3A+One+century+of+evolving+concepts%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Microglia biology: One century of evolving concepts.</a> Cell. 179 (2), 292-311 (2019).</li>
<li>Borst, K., Dumas, A. A., Prinz, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microglia%3A+Immune+and+non-immune+functions%5BTitle%5D)+AND+%22Immunity%22%5BJournal%5D)">Microglia: Immune and non-immune functions.</a> Immunity. 54 (10), 2194-2208 (2021).</li>
<li>Hao, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Trends+of+epidemiological+characteristics+of+traumatic+spinal+cord+injury+in+China%2C+2009-2018%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Spine+J%22%5BJournal%5D)">Trends of epidemiological characteristics of traumatic spinal cord injury in China, 2009-2018.</a> Eur Spine J. 30 (10), 3115-3127 (2021).</li>
<li>Sica, A., Erreni, M., Allavena, P., Porta, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Macrophage+polarization+in+pathology%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Mol+Life+Sci%22%5BJournal%5D)">Macrophage polarization in pathology.</a> Cell Mol Life Sci. 72 (21), 4111-4126 (2015).</li>
<li>Kong, X., Gao, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Macrophage+polarization%3A+A+key+event+in+the+secondary+phase+of+acute+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Mol+Med%22%5BJournal%5D)">Macrophage polarization: A key event in the secondary phase of acute spinal cord injury.</a> J Cell Mol Med. 21 (5), 941-954 (2016).</li>
<li>Lech, M., Anders, H. -J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Macrophages+and+fibrosis%3A+How+resident+and+infiltrating+mononuclear+phagocytes+orchestrate+all+phases+of+tissue+injury+and+repair%5BTitle%5D)+AND+%22Biochim+Biophys+Acta+Mol+Basis+Dis%22%5BJournal%5D)">Macrophages and fibrosis: How resident and infiltrating mononuclear phagocytes orchestrate all phases of tissue injury and repair.</a> Biochim Biophys Acta Mol Basis Dis. 1832 (7), 989-997 (2013).</li>
<li>Mosley, R. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+glial+scar-monocyte+interplay%3A+A+pivotal+resolution+phase+in+spinal+cord+repair%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">The glial scar-monocyte interplay: A pivotal resolution phase in spinal cord repair.</a> PLoS One. 6 (12), e27969(2011).</li>
<li>Zhu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hematogenous+macrophage+depletion+reduces+the+fibrotic+scar+and+increases+axonal+growth+after+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiol+Dis%22%5BJournal%5D)">Hematogenous macrophage depletion reduces the fibrotic scar and increases axonal growth after spinal cord injury.</a> Neurobiol Dis. 74, 114-125 (2015).</li>
<li>Hou, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mono-macrophage-derived+MANF+protects+against+lipopolysaccharide-induced+acute+kidney+injury+via+inhibiting+inflammation+and+renal+M1+macrophages%5BTitle%5D)+AND+%22Inflammation%22%5BJournal%5D)">Mono-macrophage-derived MANF protects against lipopolysaccharide-induced acute kidney injury via inhibiting inflammation and renal M1 macrophages.</a> Inflammation. 44 (2), 693-703 (2020).</li>
<li>Block, M. L., Zecca, L., Hong, J. -S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microglia-mediated+neurotoxicity%3A+Uncovering+the+molecular+mechanisms%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Microglia-mediated neurotoxicity: Uncovering the molecular mechanisms.</a> Nat Rev Neurosci. 8 (1), 57-69 (2007).</li>
<li>Zhang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effects+of+the+M2a+macrophage-induced+axonal+regeneration+of+neurons+by+arginase+1%5BTitle%5D)+AND+%22Biosci+Rep%22%5BJournal%5D)">The effects of the M2a macrophage-induced axonal regeneration of neurons by arginase 1.</a> Biosci Rep. 40 (2), BSR20193031(2020).</li>
<li>Li, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+polarization+of+microglia+and+infiltrated+macrophages+in+the+injured+mice+spinal+cords%3A+A+dynamic+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22PeerJ%22%5BJournal%5D)">The polarization of microglia and infiltrated macrophages in the injured mice spinal cords: A dynamic analysis.</a> PeerJ. 11, e14929(2023).</li>
<li>Gratama, J. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+variation+in+results+of+flow+cytometric+lymphocyte+immunophenotyping+in+a+multicenter+study%5BTitle%5D)+AND+%22Cytometry%22%5BJournal%5D)">Analysis of variation in results of flow cytometric lymphocyte immunophenotyping in a multicenter study.</a> Cytometry. 30 (4), 166-177 (1997).</li>
<li>Delarasse, C., Fontaine, B., El-Behi, M., Martin, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+microglia+and+monocyte-derived+macrophages+from+the+central+nervous+system+by+flow+cytometry%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Analysis of microglia and monocyte-derived macrophages from the central nervous system by flow cytometry.</a> J Vis Exp. (124), e55781(2017).</li>
<li>Chen, Y. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Temporal+kinetics+of+macrophage+polarization+in+the+injured+rat+spinal+cord%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Res%22%5BJournal%5D)">Temporal kinetics of macrophage polarization in the injured rat spinal cord.</a> J Neurosci Res. 93 (10), 1526-1533 (2015).</li>
<li>Chen, Y. -Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CRID3%2C+a+blocker+of+apoptosis-associated+speck-like+protein+containing+a+CARD%2C+ameliorates+murine+spinal+cord+injury+by+improving+local+immune+microenvironment%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neuroinflammation%22%5BJournal%5D)">CRID3, a blocker of apoptosis-associated speck-like protein containing a CARD, ameliorates murine spinal cord injury by improving local immune microenvironment.</a> J Neuroinflammation. 17 (1), 255(2020).</li>
<li>Vijay, S., Nair, R. R., Sharan, D., Jakkala, K., Ajitkumar, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Percoll+discontinuous+density+gradient+centrifugation+method+for+the+fractionation+of+the+subpopulations+of+Mycobacterium+smegmatis+and+Mycobacterium+tuberculosis+from+in+vitro+cultures%5BTitle%5D)+AND+%22MethodsX%22%5BJournal%5D)">Percoll discontinuous density gradient centrifugation method for the fractionation of the subpopulations of Mycobacterium smegmatis and Mycobacterium tuberculosis from in vitro cultures.</a> MethodsX. 11 (7), 102344(2023).</li>
<li>Sharma, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Successful+transplantation+of+transfected+enriched+buffalo+spermatogonial+stem+cells+to+homologous+recipients%5BTitle%5D)+AND+%22Theriogenology%22%5BJournal%5D)">Successful transplantation of transfected enriched buffalo spermatogonial stem cells to homologous recipients.</a> Theriogenology. 142, 441-449 (2020).</li>
<li>Sims, N. R., Anderson, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+of+mitochondria+from+rat+brain+using+Percoll+density+gradient+centrifugation%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Isolation of mitochondria from rat brain using Percoll density gradient centrifugation.</a> Nat Protoc. 3 (7), 1228-1239 (2008).</li>
<li>Maurer, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Continuous+Percoll+gradient+centrifugation+of+erythrocytes%3A+Explanation+of+cellular+bands+and+compromised+age+separation%5BTitle%5D)+AND+%22Cells%22%5BJournal%5D)">Continuous Percoll gradient centrifugation of erythrocytes: Explanation of cellular bands and compromised age separation.</a> Cells. 11 (8), 1296(2022).</li>
<li>Gamboa-Suárez, B. A., Lotta-Arévalo, I. A., Sarmiento-Salazar, F., Matta, N. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Finding+a+needle+in+a+haystack%3A+DNA+Haemoproteus+columbae+enrichment+using+percoll+density+gradient+and+flow+cytometry%5BTitle%5D)+AND+%22Vet+Parasitol%22%5BJournal%5D)">Finding a needle in a haystack: DNA Haemoproteus columbae enrichment using percoll density gradient and flow cytometry.</a> Vet Parasitol. 328, 110170(2024).</li>
<li>Cao, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Paeoniflorin+suppresses+kidney+inflammation+by+regulating+macrophage+polarization+via+KLF4-mediated+mitophagy%5BTitle%5D)+AND+%22Phytomedicine%22%5BJournal%5D)">Paeoniflorin suppresses kidney inflammation by regulating macrophage polarization via KLF4-mediated mitophagy.</a> Phytomedicine. 116, 154901(2023).</li>
<li>Nishihara, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+constriction+injury+of+the+sciatic+nerve+in+rats+causes+different+activation+modes+of+microglia+between+the+anterior+and+posterior+horns+of+the+spinal+cord%5BTitle%5D)+AND+%22Neurochem+Int%22%5BJournal%5D)">Chronic constriction injury of the sciatic nerve in rats causes different activation modes of microglia between the anterior and posterior horns of the spinal cord.</a> Neurochem Int. 134, 104672(2020).</li>
<li>Durafourt, B. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+polarization+properties+of+human+adult+microglia+and+blood-derived+macrophages%5BTitle%5D)+AND+%22Glia%22%5BJournal%5D)">Comparison of polarization properties of human adult microglia and blood-derived macrophages.</a> Glia. 60 (5), 717-727 (2012).</li>
<li>Wachholz, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microglia+activation+is+associated+with+IFN-alpha+induced+depressive-like+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Behav+Immun%22%5BJournal%5D)">Microglia activation is associated with IFN-alpha induced depressive-like behavior.</a> Brain Behav Immun. 55, 105-113 (2016).</li>
<li>Chen, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Correlations+between+macrophage+polarization+and+osteoinduction+of+porous+calcium+phosphate+ceramics%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Biomater%22%5BJournal%5D)">Correlations between macrophage polarization and osteoinduction of porous calcium phosphate ceramics.</a> Acta Biomater. 103, 318-332 (2020).</li>
<li>Guo, S. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nasal+delivery+of+Fasudil-modified+immune+cells+exhibits+therapeutic+potential+in+experimental+autoimmune+encephalomyelitis%5BTitle%5D)+AND+%22CNS+Neurosci+Ther%22%5BJournal%5D)">Nasal delivery of Fasudil-modified immune cells exhibits therapeutic potential in experimental autoimmune encephalomyelitis.</a> CNS Neurosci Ther. 25 (6), 783-795 (2019).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>1&kez; PBS</td><td>&nbsp; Güneş Enerjisi</td><td>P1020</td><td></td></tr><tr><td>10&kez; PBS</td><td>&nbsp; Güneş Enerjisi</td><td>P1022</td><td></td></tr><tr><td>18 sekiz haftalık dişi C57/BL6 fare&nbsp;</td><td>Cavens Laboratuvar Hayvanları Ltd., Chang Zhou, Çin</td><td></td><td></td></tr><tr><td>APC-eFluor 780 etiketli Sıçan anti-fare CCR7 (IgG2b kappa)</td><td>Davetli</td><td>47-1971-82</td><td>0.25&mu; g/test</td></tr><tr><td>APC-eFluor 780-etiketli Sıçan IgG2b kappa&nbsp; İzotip kontrolü</td><td>Davetli</td><td>47-4321-82</td><td>0.25&mu; g/test</td></tr><tr><td>APC etiketli Sıçan anti-fare CD45 (IgG2b kappa)</td><td>Davetli</td><td>17-0451-82</td><td>0.125&mu; g/test</td></tr><tr><td>APC-etiketli Sıçan IgG2b kappa&nbsp; İzotip kontrolü</td><td>Davetli</td><td>17-4031-82</td><td>0.125&mu; g/test</td></tr><tr><td>DMEM</td><td>Gibco</td><td>11965092</td><td></td></tr><tr><td>Fetal sığır serumu</td><td>Lonsera</td><td>S711-001 Serisi</td><td></td></tr><tr><td>FITC etiketli Sıçan anti-fare CD68 (IgG2b kappa)</td><td>Davetli</td><td>&nbsp; MA5-16676</td><td>0.25&mu; g/test</td></tr><tr><td>FITC-etiketli Sıçan IgG2b kappa&nbsp; İzotip kontrolü</td><td>Davetli</td><td>11-4031-82</td><td>0.25&mu; g/test</td></tr><tr><td>Paraformaldehit</td><td>Biyokeskin</td><td>23319084</td><td></td></tr><tr><td>PE etiketli Sıçan anti-fare CD11b (IgG2b kappa)</td><td>Davetli</td><td>12-0112-81</td><td>0.25&mu; g/test</td></tr><tr><td>PE-etiketli Sıçan IgG2b kappa&nbsp; İzotip kontrolü</td><td>Davetli</td><td>12-4031-82</td><td>0.25&mu; g/test</td></tr><tr><td>Percoll</td><td>&nbsp; Güneş Enerjisi</td><td>P8370 Serisi</td><td></td></tr><tr><td>Tripsin Çözeltisi</td><td>Biyokeskin</td><td>BL526A Serisi</td><td></td></tr></tbody></table>

akış sitometrisi kullanılarak yaralı omurilikteki mikroglia ve periferik İnfiltre makrofajların belirlenmesi

Identifying Microglia and Peripheral Infiltrating Macrophages in the Injured Spinal Cords Using Flow Cytometry

Omurilik dokusundan bağışıklık hücreleri, polivinilpirolidon yoğunluk gradyan santrifüjlemesi ile kaplanmış kolloidal silika kullanılarak ayrılır. Santrifüjleme işlemi sırasında hücreler yüzdürme yoğunluklarına göre farklı katmanlara dağıtılır ve böylece hücre ayrımı sağlanır (Şekil 1). Yukarıdan aşağıya dağılım şu şekildedir: hücresel kalıntı, mononükleer hücre açısından zengin tabaka, lenfosit açısından zengin tabaka ve altta eritrosit ve granülosit tabakası.
M1...

Akış Sitometrisi Kullanılarak Yaralı Omurilikteki Mikroglia ve Periferik İnfiltre Makrofajların Belirlenmesi

In a healthy spinal cord, peripheral infiltrating macrophages are almost undetectable, and microglia (MG) participate in maintaining the stability of the ...

identifying-microglia-peripheral-infiltrating-macrophages-injured

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Sinirbilim

Mevcut makalede, verimli, etkin bir şekilde akışını sitometrik analizler için kullanılabilir beyin ve omurilik dokularında mononükleer hücreleri izole etmek için hızlı bir protokol tanımlamaktadır.

Beyin ve Omurilik Mononükleer Hücreleri İzolasyon Percoll Degradeler

Flow sitometri yaralı / patolojik MSS hücresel inflamasyon Niceleme azalan hassasiyet / doğruluk, benzer boyutta ve granülasyon hücreleri olabilir lipid / miyelin enkaz karmaşıktır. Biz miyelin enkaz kaldırmak ve yaralanan omurilikte akım sitometri ile hücre algılama geliştirmek için bir hücre hazırlama yöntemi gelişmiş var.

Akış Sitometri Yaralı Omurilik Doku Bağışıklık Hücreleri Kantitatif Değerlendirilmesi: Hücre Arıtma Yöntemi Roman kullanın

Mikroglia merkezi sinir sisteminin savunma ve bağışıklık gözetim ilk satırı sağlamak makrofajlar ikamet ediyorsanız. MicroRNA aktivasyonu ve makrofaj farklılaşma da dahil olmak üzere bir çok fizyolojik süreçlerin önemli bir rol oynar düzenleyici moleküllerdir. Bu yazıda, mikroglia yılında microRNA ölçümü için bir yöntem sunduk.

Normal MSS Real-time PCR ve Nöro sırasında mikroglia içinde microRNA tespiti

Inme sonrası beyin miyeloid hücreler karakterizasyonu optik parçalama yöntemi kullanılarak stereolojinin tarafından gerçekleştirilen, ya da beynin bir akım sitometri ile süspansiyonları lökosit olabilir. Her ikisi de iskemik beyin bulundu ana miyeloid hücre alt doğru fenotipik ayrımı gerçekleştirmek için yararlı teknikler vardır.

Geçici veya kalıcı Serebral İskemi Modelinde lökosit alt popülasyonlarının Stereolojik ve Sitometrisi Karakterizasyonu

İki fotonlu intravital görüntüleme, dorsal kolon travmatik omurilik ezilme yaralanması olan kemik iliği kimerik bir hayvanda omurilikteki farklı hücre tipleri arasındaki etkileşimleri araştırmak için kullanılabilir.

Fare Sırt Sütun Crush Yaralanmalarında mikroglia ve Makrofagların ile aksonal İlişkilerin Intravital Görüntüleme

Bu protokol, akış sitometrisi ile yetişkin fare merkezi sinir sisteminde makrofaj alt popülasyonlarının bir analizini sağlar ve bu hücrelerin eksprese ettiği çoklu belirteçlerin çalışması için yararlıdır.

Akış Sitometresi ile Merkezi Sinir Sisteminden Mikroglia ve Monosit Türevi Makrofajların Analizi

Kantitatif analiz fare siyatik sinir içinde hücre içeriğinin doku kıtlığı nedeniyle zordur. Bu iletişim kuralı doku sindirim ve sinir bağışıklık hücre gruplarından bireysel farelerin Akış Sitometresi Analizi için yeterli hücre sağlar hazırlık için bir yöntemi açıklar.

Bağışıklık hücreleri tek siyatik sinirleri ve Dorsal kök gangliyon üzerinden tek bir fare kullanarak Akış Sitometresi Analizi

Burada, kolumnar manyetik aktive hücre sıralamayı kullanarak, demiyelinizan hastalıkların hayvan modellerinde birincil mikrogliayı izole etmek ve saflaştırmak için bir protokol sunuyoruz.

Fare Primer Mikroglia'sının Hayvan Demiyelinasyon Modellerinde Manyetik-Aktif Hücre Sıralama ile İzolasyonu

Burada, mini inme modelinde akış sitometrik analizi kullanarak iskemik inme sonrası immün hücre fonksiyonunu değerlendirmek için bir protokol sunuyoruz. Bu yöntem, nöroimmün etkileşimlerin ayrıntılı olarak incelenmesini sağlar ve diğer nörodejeneratif hastalıkları incelemek için uyarlanabilir ve inme patolojisindeki immün yanıtları anlamamızı geliştirir.

Mini İnme Murin Modelinde Nöroimmün Etkileşimlerin İzolasyonu ve Flow Sitometrik Değerlendirmesi

Bu protokol, erken doğum sonrası fare beyinlerinin beyinciklerindeki mikroglial hücre durumlarını izole etmek ve karakterize etmek için akış sitometrisi ve tek hücreli RNA dizilimini birleştirir. Mikroglia heterojenliğini ortaya çıkarmak ve serebellar gelişim ve hastalıktaki rollerinin anlaşılmasını geliştirmek için enzimatik ayrışma, Percoll santrifüjleme ve immün boyama kullanır.

Erken Doğum Sonrası Fare Beyin Gelişiminde Mikroglia Aktivasyonunu Karakterize Etmek için Akış Sitometrisi ve Tek Hücre Analizi

Öğrenin, akış sitometrisi kullanarak yaralı omurilikte mikroglia ve periferik infiltre makrofajları belirleme yöntemini. Bu teknik, nöroinflamasyon ve merkezi sinir sistemi hastalıklarındaki immün hücre rollerini anlamak için güvenilir bir yaklaşım sunar.

Akış Sitometrisi Kullanılarak Yaralı Omurilikteki Mikroglia ve Periferik İnfiltre Makrofajların Belirlenmesi

Daha fazla video keşfet