Name: Primer İnsan Proksimal Tübül Epitel Hücrelerinin İzolasyonu ve Renal Proksimal Tübülün Mikrofizyolojik Modelinin Oluşturulmasında Kullanımı (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-05-09T14:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 6 s
Description: Keşfedin, primer insan böbrek proksimal tübül epitel hücrelerinin izolasyonu ve üç boyutlu mikroakışkan platformda kültürlenmesiyle nefrotoksisite değerlendirmesi için mikrofizyolojik model oluşturmayı.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Bertram, J. F., Douglas-Denton, R. N., Diouf, B., Hughson, M. D., Hoy, W. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+nephron+number%3A+implications+for+health+and+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatr+Nephrol%22%5BJournal%5D)">Human nephron number: implications for health and disease.</a> Pediatr Nephrol. 26 (9), 1529-1533 (2011).</li>
<li>Zhang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tubular+secretion+of+creatinine+and+kidney+function%3A+an+observational+study%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Nephrol%22%5BJournal%5D)">Tubular secretion of creatinine and kidney function: an observational study.</a> BMC Nephrol. 21, 108(2020).</li>
<li>Wang, K., Kestenbaum, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Proximal+tubular+secretory+clearance%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+J+Am+Soc+Nephrol%22%5BJournal%5D)">Proximal tubular secretory clearance.</a> Clin J Am Soc Nephrol. 13 (8), 1291-1296 (2018).</li>
<li>Yin, J., Wang, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Renal+drug+transporters+and+their+significance+in+drug-drug+interactions%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Pharm+Sin+B%22%5BJournal%5D)">Renal drug transporters and their significance in drug-drug interactions.</a> Acta Pharm Sin B. 6 (5), 363-373 (2016).</li>
<li>Connor, S., Roberts, R. A., Tong, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Drug-induced+kidney+injury%3A+challenges+and+opportunities%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicol+Res+%28Camb%29%22%5BJournal%5D)">Drug-induced kidney injury: challenges and opportunities.</a> Toxicol Res (Camb). 13 (4), tfae119(2024).</li>
<li>Meijer, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+organic+anion+and+cation+transport+in+three+human+renal+proximal+tubular+epithelial+models%5BTitle%5D)+AND+%22Cells%22%5BJournal%5D)">Characterization of organic anion and cation transport in three human renal proximal tubular epithelial models.</a> Cells. 13 (12), 1008(2024).</li>
<li>Theocharis, A. D., Skandalis, S. S., Gialeli, C., Karamanos, N. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extracellular+matrix+structure%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Drug+Deliv+Rev%22%5BJournal%5D)">Extracellular matrix structure.</a> Adv Drug Deliv Rev. 97, 4-27 (2016).</li>
<li>Miceli, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fluid+flow-induced+shear+stress+controls+the+metabolism+of+proximal+tubule+kidney+epithelial+cells+through+primary+cilium-dependent+lipophagy+and+mitochondria+biogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Autophagy%22%5BJournal%5D)">Fluid flow-induced shear stress controls the metabolism of proximal tubule kidney epithelial cells through primary cilium-dependent lipophagy and mitochondria biogenesis.</a> Autophagy. 16 (12), 2287-2288 (2020).</li>
<li>Tsang, Y. P., Hao, T., Mao, Q., Kelly, E. J., Unadkat, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dysregulation+of+the+mRNA+expression+of+human+renal+drug+transporters+by+proinflammatory+cytokines+in+primary+human+proximal+tubular+epithelial+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmaceutics%22%5BJournal%5D)">Dysregulation of the mRNA expression of human renal drug transporters by proinflammatory cytokines in primary human proximal tubular epithelial cells.</a> Pharmaceutics. 16 (2), 285(2024).</li>
<li>Bajaj, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Freshly+isolated+primary+human+proximal+tubule+cells+as+an+in+vitro+model+for+the+detection+of+renal+tubular+toxicity%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicology%22%5BJournal%5D)">Freshly isolated primary human proximal tubule cells as an in vitro model for the detection of renal tubular toxicity.</a> Toxicology. 442, 152535(2020).</li>
<li>Brown, C. D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterisation+of+human+tubular+cell+monolayers+as+a+model+of+proximal+tubular+xenobiotic+handling%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicol+Appl+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Characterisation of human tubular cell monolayers as a model of proximal tubular xenobiotic handling.</a> Toxicol Appl Pharmacol. 233 (3), 428-438 (2008).</li>
<li>Becker, G. J., Hewitson, T. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+chronic+kidney+disease%3A+useful+but+not+perfect%5BTitle%5D)+AND+%22Nephrol+Dial+Transplant%22%5BJournal%5D)">Animal models of chronic kidney disease: useful but not perfect.</a> Nephrol Dial Transplant. 28 (10), 2432-2438 (2013).</li>
<li>Morse, B. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pharmacokinetics+of+organic+cation+transporter+1+%28OCT1%29+substrates+in+Oct1%2F2+knockout+mice+and+species+difference+in+hepatic+OCT1-mediated+uptake%5BTitle%5D)+AND+%22Drug+Metab+Dispos%22%5BJournal%5D)">Pharmacokinetics of organic cation transporter 1 (OCT1) substrates in Oct1/2 knockout mice and species difference in hepatic OCT1-mediated uptake.</a> Drug Metab Dispos. 48 (2), 93-105 (2020).</li>
<li>Samodelov, S. L., Kullak-Ublick, G. A., Gai, Z., Visentin, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organic+cation+transporters+in+human+physiology%2C+pharmacology%2C+and+toxicology%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Organic cation transporters in human physiology, pharmacology, and toxicology.</a> Int J Mol Sci. 21 (21), 7890(2020).</li>
<li>Wikswo, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+relevance+and+potential+roles+of+microphysiological+systems+in+biology+and+medicine%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Biol+Med%22%5BJournal%5D)">The relevance and potential roles of microphysiological systems in biology and medicine.</a> Exp Biol Med. 239 (9), 1061-1072 (2014).</li>
<li>Weber, E. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+a+microphysiological+model+of+human+kidney+proximal+tubule+function%5BTitle%5D)+AND+%22Kidney+Int%22%5BJournal%5D)">Development of a microphysiological model of human kidney proximal tubule function.</a> Kidney Int. 90 (3), 627-637 (2016).</li>
<li>Chapron, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+improved+vascularized%2C+dual-channel+microphysiological+system+facilitates+modeling+of+proximal+tubular+solute+secretion%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Pharmacol+Transl+Sci%22%5BJournal%5D)">An improved vascularized, dual-channel microphysiological system facilitates modeling of proximal tubular solute secretion.</a> ACS Pharmacol Transl Sci. 3 (3), 496-508 (2020).</li>
<li>Adler, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+quantitative+approach+to+screen+for+nephrotoxic+compounds+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Soc+Nephrol%22%5BJournal%5D)">A quantitative approach to screen for nephrotoxic compounds in vitro.</a> J Am Soc Nephrol. 27 (4), 1015-1028 (2016).</li>
<li>Chang, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+liver-kidney+model+elucidates+the+mechanisms+of+aristolochic+acid+nephrotoxicity%5BTitle%5D)+AND+%22JCI+Insight%22%5BJournal%5D)">Human liver-kidney model elucidates the mechanisms of aristolochic acid nephrotoxicity.</a> JCI Insight. 2 (22), e95978(2017).</li>
<li>Weber, E. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+kidney+on+a+chip+assessment+of+polymyxin+antibiotic+nephrotoxicity%5BTitle%5D)+AND+%22JCI+Insight%22%5BJournal%5D)">Human kidney on a chip assessment of polymyxin antibiotic nephrotoxicity.</a> JCI Insight. 3 (24), e123673(2018).</li>
<li>Imaoka, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bridging+the+gap+between+in+silico+and+in+vivo+by+modeling+opioid+disposition+in+a+kidney+proximal+tubule+microphysiological+system%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Bridging the gap between in silico and in vivo by modeling opioid disposition in a kidney proximal tubule microphysiological system.</a> Sci Rep. 11 (1), 21356(2021).</li>
<li>Van Ness, K. P., Chang, S., Weber, E. J., Zumpano, D., Eaton, D. L., Kelly, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microphysiological+systems+to+assess+nonclinical+toxicity%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Protoc+Toxicol%22%5BJournal%5D)">Microphysiological systems to assess nonclinical toxicity.</a> Curr Protoc Toxicol. 73, 14.18.1-14.18.28 (2017).</li>
<li>Lidberg, K. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Serum+protein+exposure+activates+a+core+regulatory+program+driving+human+proximal+tubule+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Soc+Nephrol%22%5BJournal%5D)">Serum protein exposure activates a core regulatory program driving human proximal tubule injury.</a> J Am Soc Nephrol. 33 (5), 949-965 (2022).</li>
<li>Sakolish, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Technology+transfer+of+the+microphysiological+systems%3A+a+case+study+of+the+human+proximal+tubule+tissue+chip%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Technology transfer of the microphysiological systems: a case study of the human proximal tubule tissue chip.</a> Sci Rep. 8 (1), 14882(2018).</li>
<li>Hart, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+prognostic+biomarkers+for+antibiotic+associated+nephrotoxicity+in+cystic+fibrosis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cyst+Fibros%22%5BJournal%5D)">Identification of prognostic biomarkers for antibiotic associated nephrotoxicity in cystic fibrosis.</a> J Cyst Fibros. 23 (2), 293-299 (2024).</li>
<li>Lidberg, K. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antisense+oligonucleotide+development+for+the+selective+modulation+of+CYP3A5+in+renal+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Antisense oligonucleotide development for the selective modulation of CYP3A5 in renal disease.</a> Sci Rep. 11 (1), 4722(2021).</li>
<li>Imaoka, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microphysiological+system+modeling+of+ochratoxin+A-associated+nephrotoxicity%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicology%22%5BJournal%5D)">Microphysiological system modeling of ochratoxin A-associated nephrotoxicity.</a> Toxicology. 444, 152582(2020).</li>
<li>Chapron, B. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reevaluating+the+role+of+megalin+in+renal+vitamin+D+homeostasis+using+a+human+cellderived+microphysiological+system%5BTitle%5D)+AND+%22ALTEX%22%5BJournal%5D)">Reevaluating the role of megalin in renal vitamin D homeostasis using a human cellderived microphysiological system.</a> ALTEX. 35 (4), 504-515 (2018).</li>
<li>Adashi, E. Y., O'Mahony, D. P., Cohen, I. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+FDA+modernization+act+2.0%3A+drug+testing+in+animals+is+rendered+optional%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Med%22%5BJournal%5D)">The FDA modernization act 2.0: drug testing in animals is rendered optional.</a> Am J Med. 136 (9), 853-854 (2023).</li>
<li>Qi, W., Johnson, D. W., Vesey, D. A., Pollock, C. A., Chen, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation%2C+propagation+and+characterization+of+primary+tubule+cell+culture+from+human+kidney+%28methods+in+renal+research%29%5BTitle%5D)+AND+%22Nephrology%22%5BJournal%5D)">Isolation, propagation and characterization of primary tubule cell culture from human kidney (methods in renal research).</a> Nephrology. 12 (2), 155-159 (2007).</li>
<li>Mihevc, M., Petreski, T., Maver, U., Bevc, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Renal+proximal+tubular+epithelial+cells%3A+review+of+isolation%2C+characterization%2C+and+culturing+techniques%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Biol+Rep%22%5BJournal%5D)">Renal proximal tubular epithelial cells: review of isolation, characterization, and culturing techniques.</a> Mol Biol Rep. 47 (12), 9865-9882 (2020).</li>
<li>Shaver, C. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cellfree+hemoglobin+augments+acute+kidney+injury+during+experimental+sepsis%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Renal+Physiol%22%5BJournal%5D)">Cellfree hemoglobin augments acute kidney injury during experimental sepsis.</a> Am J Physiol Renal Physiol. 317 (4), F922-F929 (2019).</li>
<li>Sbarbati, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Separation+of+human+endothelial+cells+from+fibroblasts+by+centrifugation+in+Percoll+gradients%5BTitle%5D)+AND+%22Biosci+Rep%22%5BJournal%5D)">Separation of human endothelial cells from fibroblasts by centrifugation in Percoll gradients.</a> Biosci Rep. 5 (6), 469-472 (1985).</li>
<li>Horn, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+of+human+mesenchymal+stromal+cells+is+more+efficient+by+red+blood+cell+lysis%5BTitle%5D)+AND+%22Cytotherapy%22%5BJournal%5D)">Isolation of human mesenchymal stromal cells is more efficient by red blood cell lysis.</a> Cytotherapy. 10 (7), 676-685 (2008).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>1 mL Luer-Lok uçlu şırıngalar</td><td>Becton, Dickinson</td><td>309628</td><td></td></tr><tr><td>1,5 mL mikrosantrifüj tüpleri</td><td>CELLTREAT Bilimsel Ürünleri</td><td>229442</td><td></td></tr><tr><td>15 mL steril konik polipropilen tüp</td><td>Fisher Scientific</td><td>14-959-53A</td><td></td></tr><tr><td>3D mikrofizyolojik cihaz</td><td>Nortis</td><td>TCC-001</td><td></td></tr><tr><td>5 mL Luer-Lok uçlu şırıngalar</td><td>Becton, Dickinson</td><td>309646</td><td></td></tr><tr><td>50 mL steril konik polipropilen tüp</td><td>Fisher Scientific</td><td>12-565-271</td><td></td></tr><tr><td>Antibiyotik-Antimikotik (100x)</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>15240062</td><td></td></tr><tr><td>Kollagenaz, Tip IV, toz</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>17104019</td><td></td></tr><tr><td>D-(+)-Glikoz</td><td>MilliporeSigma</td><td>G8270</td><td></td></tr><tr><td>Tanımlanmış Tripsin İnhibitörü</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>R007100</td><td></td></tr><tr><td>Dimetil sülfoksit, Biyoreaktiv, Termobilimsel Kimyasallar</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>J66650-AK</td><td></td></tr><tr><td>Dispase II, barut</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>17105041</td><td></td></tr><tr><td>Dulbecco' s MEM (DMEM)/F-12 glukozsuz</td><td>ABD Biyolojik Yaşam Bilimleri</td><td>D9807-02</td><td></td></tr><tr><td>Dulbecco'nun Fosfat Tamponlu Tuzlu Suyu (DPBS), kalsiyum, magnezyum</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>14040117</td><td></td></tr><tr><td>Fetal Bovine Serum (FBS), Premium</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>A5670701</td><td></td></tr><tr><td>Finnpipette F2 İyi Laboratuvar Pipetleme (GLP) Kitleri</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>05-719-511</td><td>Mikropipetler</td></tr><tr><td>Fisherbrand SureOne Micropoint Pipet Uçları, Evrensel Uyum, Filtrelenmemiş</td><td>Fisher Scientific</td><td>02707407, 02707410, 02707438</td><td></td></tr><tr><td>Taze tüm insan böbreği</td><td>Novabioz</td><td>https://www.novabiosis.com/research-organ-allocation-services/</td><td>İnsan böbrekleri, UNOS tarafından onaylanan bir OPO olan Novabiosis ile elde edilmiştir</td></tr><tr><td>Nemlendirilmiş kuluçka makinesi (37 derece ve derece; C ve 5% CO2)</td><td>Fisher Scientific</td><td>51033556</td><td></td></tr><tr><td>Hidrokortizon</td><td>MilliporeSigma</td><td>H0888</td><td></td></tr><tr><td>Yörünge Sallacı Kuluçka Aşaması</td><td>Avantor</td><td>12620-946</td><td></td></tr><tr><td>İnsülin-Transferrin-Selenyum (100X) (ITS -G)</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>41400045</td><td></td></tr><tr><td>İç İplik Kriyojenik Şişeler</td><td>Corning</td><td>430487</td><td></td></tr><tr><td>Kimtech Bilim Kimwipe'leri</td><td>Kimberly-Clark Profesyonel</td><td>34120</td><td></td></tr><tr><td>Luer Stubs (Küt iğne), 22 G x 0.5 inç</td><td>Instech Laboratuvarları, Inc.</td><td>LS22</td><td></td></tr><tr><td>Orta 199, Earle's Salts (10x)</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>21180021</td><td></td></tr><tr><td>Megafuge 8 Küçük Tezgah Üstü Santrifüj</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>75007210</td><td></td></tr><tr><td>Metal Bağlantı (küt)</td><td>Instech Laboratuvarları, Inc.</td><td>SC 20/15</td><td></td></tr><tr><td>Bay Frosty Dondurma Kabı</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>5100-0036</td><td></td></tr><tr><td>Nikon Eclipse Ti-S Mikroskobu</td><td>Nikon Instruments</td><td>https://www.thelabworldgroup.com/product/nikon-eclipse-ti-fluorescent-microscope/</td><td>Orijinal model üretimi kaldırıldı&nbsp;</td></tr><tr><td>Nunc İşlenmemiş Şişeler, T-25</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>169900</td><td></td></tr><tr><td>Nunc İşlenmemiş Şişeler, T-75</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>156800</td><td></td></tr><tr><td>Pipet, 10 mL, Gradasyonlu, 1/10 mL, Steril</td><td>Greiner Bio-One</td><td>607180</td><td></td></tr><tr><td>Silikon borular, C-flex borular, (ID: 0.020", OD: 0.083")</td><td>Cole-Parmer</td><td>06422-00</td><td></td></tr><tr><td>Tek kenarlı jilet (steril)</td><td>Bioseal</td><td>KI-205/50</td><td></td></tr><tr><td>Sodyum Bikarbonat</td><td>MilliporeSigma</td><td>S6297</td><td></td></tr><tr><td>Sodyum Hidroksit</td><td>MilliporeSigma</td><td>S8045</td><td></td></tr><tr><td>PES Membranlı Steril Tek Kullanımlık Filtre Üniteleri</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>567-0020</td><td></td></tr><tr><td>Doku kültürü işlenmiş tabaklar, 150 mm&nbsp; x 20 mm Havalandırmalı</td><td>Genesee Scientific</td><td>25-203</td><td></td></tr><tr><td>Tripsin-EDTA (%0,05), fenol kırmızı</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>25300054</td><td></td></tr><tr><td>Tip I kolajen, fare kuyruğu</td><td>Corning</td><td>354236</td><td></td></tr><tr><td>Tip IV Kolajen, Fare</td><td>Corning</td><td>354233</td><td></td></tr></tbody></table>

primer İnsan proksimal tübül epitel hücrelerinin İzolasyonu ve renal proksimal tübülün mikrofizyolojik modelinin oluşturulmasında kullanımı

Isolation of Primary Human Proximal Tubule Epithelial Cells and Their Use in Creating a Microphysiological Model of the Renal Proximal Tubule

Primer İnsan Proksimal Tübül Epitel Hücrelerinin İzolasyonu ve Renal Proksimal Tübülün Mikrofizyolojik Modelinin Oluşturulmasında Kullanımı

Kidney disease affects over 850 million people globally, including 37 million Americans. Risk factors for&#160;chronic kidney disease include ...

isolation-primary-human-proximal-tubule-epithelial-cells-their-use

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Bu videoda, çok çeşitli moleküler biyoloji ve hücre kültürü çalışmaları için renal tübüler epitel hücrelerini izole etme ve saflaştırma adımlarını gösteriyoruz.

Murin Renal Hücre İzolasyonu: Renal Tübüler Epitel Hücrelerinin Primer Kültürünü İzole Etmek ve Oluşturmak İçin Bir Teknik

Renal tübüler epitel ifade iyon kanalları polikistik böbrek hastalığı patolojisinde önemli bir rol oynamaktadır. Burada taze kemirgen böbrekler izole kistik epitel patch-kelepçe analizi ve hücre içi kalsiyum seviyesi ölçümleri gerçekleştirmek için kullanılan deneysel protokolleri açıklayın.

Patch Kelepçe ve Canlı Floresan Mikroskobu uygulanması Taze İzole PKD Epitelinin Fonksiyonel Properties Monitör

Bu protokol, Sprague Dawley sıçan böbreklerinin, deterjanların vaskülatür yoluyla antegrad perfüzyonu yoluyla hücreden arındırılmasını tanımlar ve insan böbrek epitel hücreleri ile yeniden popülasyon için şablon görevi gören aselüler renal hücre dışı matrisler üretir. Büyümeyi izlemek için resazurin perfüzyon testinin yeniden hücreselleştirilmesi ve kullanımı, özel olarak tasarlanmış perfüzyon biyoreaktörleri içinde gerçekleştirilir.

Epitel Hücre Repopulation ve Böbrek Doku Kalkınma Kemirgen Ekstrasellüler Matriks iskelelerinin hazırlanması

Burada böbrek Perivasküler Stromal bütün organ perfüzyon sindirim enzimleri ve NG2 hücreli zenginleştirme dayalı hücreleri (kPSCs) için bir roman klinik sınıf izolasyon ve kültür yöntem mevcut. Bu yöntemle, hücresel tedavi için yeterli hücre sayıları elde etmek mümkündür.

İnsan böbrek Perivasküler Stromal hücreler için bir roman klinik sınıf izolasyon yöntemi

Böbrek yapıları doku Mühendisliği zararlı etkileri diyaliz ve organ sıkıntısı için bir çözüm sağlar. Burada, bir protokol mikro tarif yalıtım kortiko-medüller segmentleri için fare böbrekler incelemek. Bu segmentler oluşturan böbrek organoids iskele-Alerjik Hücresel yapıları implante edilir.

Mikrodiseksiyon birincil böbrek doku parçaları ve roman iskele-Alerjik yapı teknolojisi ile birleşme

Bu iletişim kuralı yalıtmak ve daha sonra böbrek biyolojik fonksiyonları ex vivomitokondriyal bioenergetics de dahil olmak üzere, değerlendirmek için alt kültürlü fare birincil renal tübüler hücreler karakterize için düşük maliyetli bir yaklaşım sağlar.

Yalıtım, karakterizasyonu ve yüksek işlem hacmi ekstraselüler akı analiz fare birincil Renal tübüler epitel hücresi

İnsan böbrek tübuloid kültürleri, böbrek fizyolojisi ve hastalığını incelemek için değerli bir in vitro modeli temsil eder. Tübuloidler böbrek dokusundan (sağlıklı ve hastalıklı) ve idrardan da kurulabilir, ikincisi kolayca elde edilebilir ve daha az invaziv bir araştırma malzemesi kaynağını temsil eder.

Doku ve İdrardan İnsan Böbrek Tubuloidlerinin Üretimi

Burada, mikrofizyolojik bir sistemde kollajen ve kollajen-agaroz matrisleri kullanarak 3D hücre kültürlerinin uygulanması için talimatları detaylandıran protokoller sunuyoruz. Bu protokoller, renal proksimal tübül ve renal hücreli karsinom sferoidlerinin ko-kültürünü destekleyerek in vivo koşulları simüle eder ve böbrek kanseri hücre etkileşimlerinin ileri düzeyde araştırılmasını sağlar.

Böbrek Kanseri İlerlemesini Modellemek için Renal Sağlıklı ve Tümör Epitelinin Mikroakışkan Ko-kültürü

Burada, hücre dışı bir matris (3D-HRTEC) üzerinde tek tabakalar ve üç boyutlu kültürler geliştirmek için böbrek korteksinden insan renal tübüler epitel hücrelerinin (HRTEC) birincil kültürlerini elde etmek için protokolleri açıklıyoruz.

İnsan Renal Tübüler Epitel Hücre Primer Kültürlerinin Tek Tabakalı ve Üç Boyutlu Koşullarda Geliştirilmesi

Burada, yüksek metabolik proksimal tübüler epitel hücrelerinde hipoksi/reoksijenasyon hasarını modellemek için in vitro bir protokolü tanımlıyoruz. Bu model, proksimal tübul hasar belirteçlerinin ekspresyonu ve mitokondriyal solunum fonksiyonunun değerlendirilmesi yoluyla ölçülebilen metabolik stres kaynaklı hasarı indüklemek için tasarlanmıştır.

Proksimal tübüler epitel hücrelerinde hipoksi/reoksijenlenme yaralanmasının modellenmesi

Keşfedin, primer insan böbrek proksimal tübül epitel hücrelerinin izolasyonu ve üç boyutlu mikroakışkan platformda kültürlenmesiyle nefrotoksisite değerlendirmesi için mikrofizyolojik model oluşturmayı.

Primer İnsan Proksimal Tübül Epitel Hücrelerinin İzolasyonu ve Renal Proksimal Tübülün Mikrofizyolojik Modelinin Oluşturulmasında Kullanımı (Video) | JoVE Journal

Primer İnsan Proksimal Tübül Epitel Hücrelerinin İzolasyonu ve Renal Proksimal Tübülün Mikrofizyolojik Modelinin Oluşturulmasında Kullanımı

Daha fazla video keşfet