7 Mart 2025
Sporosarcina pasteurii , üreyi karbonat ve amonyuma parçalayan ürolitik bir bakteridir. Karbonat, kalsiyum karbonat oluşturmak için kalsiyum ile birleşir ve biyoçimento üretmek için çevredeki parçacıkları birbirine bağlayan bir kristal kafes oluşturur. Bu, sıkıştırma testine uygun biyoçimento tuğlaları oluşturmak için 3D baskılı kalıpları kullanmak için uygun bir protokoldür.
Araştırma, biyoçimento tuğlaları üretmek için S.pasteurii kullanarak mikrobiyal olarak indüklenen kalsit çökelmesini araştırıyor. Biyobeton üretimini ve mukavemet testini optimize etmede 3D baskılı kalıpların etkinliğini araştırıyor. Şu anda bu denemenin tamamlanması yaklaşık beş gün sürdüğü ve denemeyi başlattıktan sonra duraklatmak için ideal bir zaman olmadığı için önemli bir zaman taahhüdü gerekiyor.
Protokolümüz, MICP işleminden akış için yeniden kullanılabilir 3D baskılı kalıplar kullanır ve birden fazla değişkenin ve replikanın uygun paralel testine izin verirken, sınırlandırılmamış sıkıştırma testleri için standartlaştırılmış silindirik tuğlaları mümkün kılar. Başlamak için, 150 mililitre BHI üre ortamını filtreyle sterilize edin ve 250 mililitrelik bir şişeyi otoklavlayın. 250 mililitre çimentolama çözeltisi hazırlayın.
Bir kültür tüpüne 1.6 mililitre BHI üre ortamı ekleyin ve ortamı sıfır gün çizgi plakasından bir koloni ile aşılayın. Başlangıç kültürünü, gece boyunca 30 santigrat derecede dakikada 150 devirde bir çalkalayıcıda büyütün. Ertesi gün, artan bulanıklık ile onaylanan başlangıç kültürünü büyüme açısından inceleyin.
Şimdi, 250 mililitrelik otoklavlanmış şişeye 40 mililitre BHI üre ortamı ekleyin. 1.6 mililitrelik başlangıç kültürünü şişeye dökün ve yedi saat boyunca 30 santigrat derecede bir çalkalayıcıda inkübe edin. İnkübasyondan sonra, şişeye 40 mililitre daha BHI üre ortamı ekleyin ve şişeyi gece boyunca veya 16 saat boyunca 20 santigrat derecede bir çalkalayıcıya yerleştirin.
Şimdi, gece boyunca kültür şişesine 40 mililitre daha BHI üre ortamı ekleyin ve Sporosarcina pasteurii'yi 20 santigrat derecede inkübe etmeye devam edin. Lastik contaları kalıpların üzerindeki uygun boşluklara yerleştirin. Contaların sızdırmaz olduğundan ve tüm mıknatısların bağlı olduğundan emin olarak kalıpların iki yarısını bağlayın.
Kumun delikten düşmesini önlemek için silindirik tuğla kalıbın altına bir daire ince tel örgü ekleyin. Şimdi kalıbı iç çizgiye kadar kum veya başka bir malzeme ile doldurun ve sıkıca bastırın. Ardından, tüm yüzeyi kaplamak için kumun üstüne başka bir tel örgü çemberi yerleştirin ve tekrar sıkıştırın.
Şimdi, akışı yakalamak için kalıbı bir atık kabının üzerine yerleştirin. Kumun üzerine 40 mililitre kültür dökün ve 45 dakika bekletin. Daha sonra kumun üzerine 80 mililitre çimentolama çözeltisi dökün.
30 dakika sonra kumun üzerine 40 mililitre kültür dökün ve 30 dakika daha bekleyin. Yine kumun üzerine 80 mililitre çimentolama solüsyonu dökün ve 30 dakika sonra üstüne 40 mililitre kültür dökün. Yarım saatlik inkübasyondan sonra, kumun üzerine 80 mililitre çimentolama çözeltisi dökün ve tuğlayı en az 48 saat veya kum kuru görünene kadar rahatsız etmeyin.
Beşinci günde, kalıbı ikiye bölün ve tuğlayı kalıptan çıkarmak için mıknatıslardan gelen basıncı boşaltın. Ardından, sıkıştırma testi yapmadan önce üç hafta boyunca kurumaya devam etmek için tuğlayı bir kağıt havlu üzerine yerleştirin. Sıkıştırma testi için, tuğlayı sınırlandırılmamış sıkıştırma test makinesinin alt yükleme plakasına ve tuğlanın üzerine düz bir yükleme plakasına yerleştirin.
Sıkıştırma test makinesini kullanarak, tuğlaya yaklaşık bir pound basınç uygulayın, ardından basınç ölçümünü sıfırlamak için dijital okumayı kullanın. Son olarak, tuğla yapısal arızaya ulaşana kadar makine özelliklerine göre sürekli olarak artan yük uygulayın. Her tuğla için maksimum ağırlık taşıma yükünü kaydedin.
3D baskılı kalıp, tuğlanın şeklini başarıyla korudu ve üç haftalık kurumadan sonra sağlam görünen tuğlalar üretti ve kullanım sırasında minimum malzeme kaybıyla sonuçlandı. Dokunulduğunda ufalanan veya önemli malzeme kaybı gösteren tuğlalar, ortam veya kültür hazırlığında bir hata olduğunu gösterdi. Kaba ve ince kum alt tabakaları test etmek için kalıplar kullanıldı ve her tip için dört tuğla üretildi.
Kaba kum tuğlalar için ortalama maksimum yük, inç kare başına 95.125 pound iken, ince kum tuğlalar, inç kare başına ortalama maksimum 49.625 pound yüke dayanıyordu. Kalıpları gerektiği gibi 3D baskı yapabilme yeteneği, eşzamanlı değişken testlere izin vererek deneysel varyasyonu azalttı.
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin
Bu çalışma, üreolitik bakteri Sporosarcina pasteurii kullanılarak biyosement tuğlaların üretimini incelemektedir. Araştırma, 3D yazıcıyla basılmış kalıpların kullanımı yoluyla biyosement üretiminin optimize edilmesine odaklanmakta ve elde edilen tuğlaların dayanıklılığını değerlendirmektedir.
Sporosarcina pasteurii ve özel olarak 3D yazıcıyla üretilmiş kalıplar kullanılarak biyocement tuğlaların standartlaştırılmış üretimi ve kantitatif analizi, sürdürülebilir malzeme inovasyonu için sağlam hipotez testlerine olanak tanır. Protokolün paralelleştirilebilirliği ve tekrarlanabilirliği, erken aşamadaki mekanistik risk azaltma çalışmalarını destekler ve substrat ile proses değişkenlerinin güvenilir bir şekilde karşılaştırılmasını kolaylaştırır. Bu yaklaşım, mikrobiyal biyoteknoloji ve malzeme biliminin kesişim noktasında öngörüsel güveni artırarak, sürdürülebilir inşaat Ar-Ge'sindeki portföy kararlarına bilgi sağlar.
Bu protokol, mikrobiyal biyosemantasyon mekanizmalarının erken keşfinden tarama ve preklinik materyal validasyonuna kadar olan süreci entegre ederek, iteratif optimizasyonu ve karar verme süreçlerini desteklemektedir.