Pentilentetrazol ile İndüklenen Nöbetlerin Davranışsal Karakterizasyonu: Racine Ölçeğinin Ötesine Geçmek

Araştırmamız, pentilentetrazol uygulandıktan sonra spazm ve miyoklonus olmak üzere iki tür iktal davranışı karakterize etmeye ve ölçmeye odaklanmaktadır. Bu davranışların limbik nöbetlerin başlamasına nasıl katkıda bulunduğunu ve kalıpların zaman içinde nasıl geliştiğini ortaya çıkarmaya çalışıyoruz. Son zamanlarda, fokal nöbetlerin sinir ağları aracılığıyla nasıl yayıldığını ve sonunda genelleştiğini anlamada çok ilerleme kaydedildi.

Bilgisayar destekli video analizinin yardımıyla artık nöbetlerin nasıl geliştiğine dair çok daha ince ayrıntıları yakalayabiliyoruz. Çoğu nöbet çalışması Racine ölçeğine dayanır, ancak bu yaklaşım genellikle PTZ tarafından tetiklenen önemli davranışları gözden kaçırır. Protokolümüz, limbik nöbetin gerçekten ortaya çıkmasından önce ve sonra genellikle gözden kaçan olayları tanımlayarak ve ölçerek bu boşluğu doldurmaya yardımcı olur.

Protokolümüz, davranışın çok daha ayrıntılı bir analizine izin verir. Racine ölçeği gibi tek bir puana güvenmek yerine, her iktal olay başına birden fazla parametreyi ölçebiliriz, bu da bize nöbetler sırasında gerçekte neler olduğuna dair daha derin bir anlayış sağlar. Şu anda laboratuvarımız, alternatif nöbet önleyici ilaçların spazmları ve miyoklonusu önleyip önleyemeyeceğini, geciktirip geciktiremeyeceğini veya azaltıp azaltamayacağını ve bunun limbik nöbetlerin gelişimini nasıl etkileyebileceğini araştırmaya odaklanmıştır.

Başlamak için, hayvanın vücut ağırlığını ölçmek için bir tartı kullanın. Her hayvan için gereken pentilentetrazol çözeltisinin hacmini vücut ağırlığına göre hesaplayın. Pentilentetrazol enjeksiyonundan en az bir saat önce hayvanın arenadaki davranışını kaydedin.

Bu alışma dönemi, yeniliğe bağlı ambulasyonu ve kaygıyı azaltır ve temel aktivitenin çıkarılmasına izin verir. Pentilentetrazol enjeksiyonunu hazırlayın. Deri altı uygulama için, hayvanı sabitlemek için bir elinizi kullanın ve cildi kürek kemikleri arasında nazikçe sıkıştırın.

26-1 / 2 gauge iğneye bağlı 1 mililitrelik bir şırınga kullanarak, iğneyi vücut yönüne paralel olarak deri altı boşluğa sokun ve solüsyonu yavaşça enjekte edin. Enjeksiyon tamamlandıktan sonra, iç boşluk basıncından kaynaklanan sızıntıyı önlemek için cildi çıkış noktasında tutarken iğneyi nazikçe çıkarın. Enjeksiyon bölgesinden herhangi bir çözelti sızıntısını gözlemleyin ve not edin.

Sızıntı varsa, aynı pentilentetrazol çözeltisinden 50 mikrolitre daha uygulamayı düşünün. Şimdi hayvanı arenaya geri yerleştirin ve bir saat boyunca sürekli kayıt yapın. Pentilentetrazol enjeksiyonundan bir saat veya daha uzun bir süre sonra kaydı durdurun ve son işlem için video dosyasını kopyalayın.

Bunu video izleme ve davranışsal kodlama için kullanın. Solomon Coder yazılımını açın. Bir yapılandırma dosyası varsa, Dosya'yı seçin ve önceden tanımlanmış ayarları yüklemek için Yapılandırmayı Yükle'yi tıklatın.

Bir videoyu açmak için Dosya'yı seçin ve Videoyu Aç'a tıklayın. Video oynatmayı başlatmak için oynat düğmesine basın. Oynatma sırasında gözlemlenen davranışları işaretlemek için farenin sol düğmesine tıklayın veya atanan klavye tuşuna basın.

Verileri kaydetmek için Çözümle'ye gidin ve Çıkışı Farklı Kaydet'i seçerek virgülle ayrılmış değerler dosyası oluşturun. Kodlama sayfası için Dosya'ya gidin ve Kodlama Sayfasını Kaydet'i seçin. Farenin gözlem alanına geri döndükten sonra video karesinde yeniden göründüğü anda pentilentetrazol uygulama zamanını etiketleyin.

Sonraki tüm davranışlar ve gecikme hesaplamaları için zamansal referans noktası olarak hizmet etmek için bu anı sıfır zamanı olarak kullanın. Pentilentetrazol enjeksiyonundan birkaç dakika sonra spazm ve miyoklonus olup olmadığını gözlemleyin. Spazmları, iki taraflı kulak fleksiyonu, sırt kası kasılması, kuyruk kaldırma ve nadiren irkilme sıçraması dahil olmak üzere eksenel kasların hızlı, geçici kasılmaları olarak tanımlayın.

Bu spazmları gizli, anlık olaylar olarak kodlayın ve bunları tek bir video karesiyle ilişkilendirin. Miyoklonusu kodlamak için, baş, boyun ve pençelerde güçlü, ani bir miyoklonik sarsıntı ile işaretlenen 200 milisaniyeden uzun olayları tanımlayın. Alt tipleri, ileri, sola veya sağa dahil olmak üzere ilişkili titremelere veya yönlü duruş kaybına göre sınıflandırın.

Süre genellikle bir ila iki saniye arasında değiştiğinden, olayı birden çok kareye kodlayın. Limbik nöbetler için, davranışsal tutuklama veya bakma ile başlayarak Racine ölçeğiyle uyumlu davranışları tanımlayın. Otomatizmler, orofasiyal hareketler, ön ayak veya baş miyoklonusu ve büyüme, atlama veya tonik nöbetlere yükselme ile takip edin.

10 ila 15 saniyeden uzun süren olaylara alt kategoriler atamak için değiştirilmiş Racine ölçeğini kullanın. Son olarak, pentilentetrazol enjeksiyonundan tam bir saat sonra kayıt oturumunun sonunu tek bir video karesinde işaretleyin. Şekil, her iktal davranışın gecikmesi, olay sayısı, olay süresi, olaylar arası aralık ve limbik nöbetlerin şiddeti dahil olmak üzere bu kodlama sisteminden çıkarılabilecek parametreleri detaylandırmaktadır.

Spazmlar tipik olarak olayların çoğunda gövdenin sertleşmesini içerirken, spazmların sadece %6'sı yalnızca kuyruğu aktive etti. Miyoklonus olguların %64'ünde ağırlıklı olarak titreme şeklinde ortaya çıktı. İleri, sağ ve sola doğru hareketler de kaydedildi.

Başlangıca kadar geçen gecikme spazmlar, miyoklonus ve limbik nöbetler arasında önemli ölçüde farklıydı ve spazmlar en erken meydana geldi. Toplam spazm sayısı, miyoklonus veya limbik nöbetlerden önemli ölçüde daha yüksekti. Medyan olaylar arası aralık, spazmlar ve miyoklonus arasında anlamlı bir farklılık göstermedi, ancak limbik nöbetler miyoklonustan önemli ölçüde daha uzun sürdü.

Günlük PTZ enjeksiyon protokolünde, spazm gecikmesi ve olaylar arası aralık sekizinci günde önemli ölçüde azalırken, genel spazm olayları arttı.