Name: Akciğer Retinoid İçeren Hücrelerin Hücre Ayıklama ile İzolasyonu (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-04-11T15:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 47 s
Description: Öğrenin, akciğerde retinoid içeren hücreleri FACS ile izole etme yöntemini. Bu teknik, retinoid metabolizmasının karmaşıklığını ve akciğer hastalıklarında beslenme stratejilerini anlamak için kritik öneme sahiptir.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<table><tbody><tr><td>10 mL serolojik pipet</td><td>Avantor / VWR</td><td>76452-284</td><td></td></tr><tr><td>100 & mikro; m süzgeç&nbsp;</td><td>Greiner Bio-One</td><td>542000</td><td></td></tr><tr><td>15 mL şahin tüpü</td><td>Corning</td><td>352099</td><td></td></tr><tr><td>40 & mikro; m süzgeç&nbsp;</td><td>Greiner Bio-One</td><td>542040</td><td></td></tr><tr><td>50 mL şahin tüpü</td><td>Corning</td><td>352070</td><td></td></tr><tr><td>Hücre kültürü kabı, 35 mm ve akut; 10 mm</td><td>Corning</td><td>430165</td><td></td></tr><tr><td>Hücre ayırma ortamı</td><td>Gibco</td><td>A59688DJ</td><td></td></tr><tr><td>Kollajenaz tip IV&nbsp;</td><td>Worthington Biyokimya Şirketi</td><td>LS004188&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Cytek Aurora Hücre Ayırıcı Sistemi&nbsp;</td><td>Cytek Biosciences</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Dispase II</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>D4693</td><td></td></tr><tr><td>DNase I</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>DN25</td><td></td></tr><tr><td>Falcon marka 5 ml polipropilen yuvarlak tabanlı boru, 12 mm ve akut; 75 mm</td><td>Corning</td><td>352063</td><td></td></tr><tr><td>Falcon marka 5 ml polistiren yuvarlak tabanlı tüp, hücre süzgeç kapaklı, 12 mm ve akut; 75 mm</td><td>Corning</td><td>352235</td><td></td></tr><tr><td>FlowJo yazılımı&nbsp;</td><td>Ca</td>2+/Mg2+Gibco 14925-092 <td></td>HBSS ile Becton Dickinson <td></td> akış sitometrisi</tr> <tr><td></td><td></td><td>yazılımı HBSS,</td> Ca2+ / Mg2+Gibco 14175-095 Nalgene Hızlı Akışlı Steril Tek Kullanımlık Şişe Üstü Filtreler ThermoFisher 595-3320 Kırmızı Hücre lizisi <td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> tampon</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>R7757</td><td></td></tr><tr><td>SpectroFlo CS yazılımı&nbsp;</td><td>Cytek Biosciences</td><td>Sürüm 1.3.0&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Cerrahi Tasarım Royaltek Paslanmaz Çelik Cerrahi Neşter Bıçakları</td><td>Fisher Scientific</td><td>22-079-683</td><td></td></tr><tr><td>SYTOX Yeşil ölü hücre lekesi</td><td>Invitrogen</td><td>S34860</td><td></td></tr><tr><td>Tamoksifen</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T2859</td><td></td></tr></tbody></table>

akciğer retinoid İçeren hücrelerin hücre ayıklama ile İzolasyonu

Isolation of Lung Retinoid-Containing Cells by Cell Sorting

Akciğer retinoid içeren hücrelerin izolasyonu Fare akciğerleri ( Lrat+/+ ve Lrat-/-'den) fareler enzimatik olarak sindirildi ve tek hücreli süspansiyonlar hazırlandı ve yukarıda belirtilen prosedüre göre FACS'ye tabi tutuldu. Hücre sıralama ve veri toplama, 100 μm nozul ve 15 psi basınç kullanılarak SpectroFlo CS yazılım sürümü 1.3.0 tarafından çalıştırılan bir Cytek Aurora™ Hücre Sıralayıcı Sisteminde gerçekleştirildi...

Akciğer Retinoid İçeren Hücrelerin Hücre Ayıklama ile İzolasyonu

Retinoids (vitamin A and its metabolites) are an essential lipid component of the alveolar microenvironment, and cell-type specific retinoid metabolism is ...

isolation-of-lung-retinoid-containing-cells-by-cell-sorting

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Fare akciğer dendritik hücreler yüksek oranda saflaştırılmış açıklanmıştır. Özgül ağırlık, geleneksel dendritik hücre alt izolasyon verilir.

Fare Akciğer Dendritik Hücrelerinin İzolasyonu

Bu video, akış sitometrisi kullanarak murin primer retinal ganglion hücrelerini (RGC'ler) izole etme prosedürünü gösterir. Bu yöntem, nörodejeneratif hastalıklarda fonksiyonel RGC'lerin kaybından kaynaklanan görme keskinliğindeki büyük düşüşü daha iyi anlamak amacıyla RGC'lerin gelecekteki çalışmalarına izin verir.

Floresanla Aktive Edilen Hücre Sıralaması Kullanılarak Murin Retinal Ganglion Hücrelerinin İzole Edilmesi

Burada, yakın zamanda gösterdiğimiz gibi, ekstratimik bir αβ T hücresi progenitörü olan periferik Vδ1+CD4+ T hücrelerinin kıt T hücresi varlığının izolasyonu ve klonlanması için optimize edilmiş bir protokol sunuyoruz. Bu teknik, bu hücrelerin ex vivo kültürde kantitatif olarak izole edilmesine, klonlanmasına ve verimli bir şekilde genişletilmesine izin verir.

İzolasyon ve<em&gt; Ex Vivo</emVδ1 of&gt; Kültür<sup&gt; +</sup&gt; CD4<sup&gt; +</sup&gt; γδ T hücrelerinin bir Extrathymic αβT hücre Progenitör

Bu protokol, enzimatik sindirim, yoğunluk gradyanlı ayırma plastik uyumu ve CD146 + manyetik boncuk seçimi aracılığıyla, sıçanlardan primer akciğer yerleşik mezenkimal stromal hücreler elde etmek için bir izolasyon tekniği tarif etmektedir.

CD146 İzolasyonu<sup&gt; +</supSıçan Akcigerlerinden&gt; Resident Akciğer Mezenkimal Stromal hücreler

Karaciğer yaralanmaları heterojen bir hücre popülasyonunu temsil progenitör hücre genişlemesi eşlik ediyor. Bu hücresel bölmenin yeni sınıflandırma birden altgruplarının ayırmada sağlar. Burada tarif edilen yöntem, analiz ve başka analizler için de kullanılabilen çeşitli alt-kümelerinin yüksek saflıkta izole sitometri akışı göstermektedir.

İzolasyon ve Roman Yüzey Etiket Kombinasyon ile tanımlanır Karaciğer progenitör Alt Grupları zenginleştirilmesi

Milyonlarca insan irreversibl körlüğe neden olan retinal dejeneratif hastalıklardan muzdarip. Bu hastalıkların birçoğunun ortak bir unsuru retinal gangliyon hücrelerinin kaybıdır (RGC'ler). Bu ayrıntılı protokol, primer murin RGC'lerin akış sitometrisi ile pozitif ve negatif seçilim yoluyla izole edilmesini açıklar.

Akış Sitometresi ile Primer Sıçan Retinalı Ganglion Hücrelerinin (RGC) İzolasyonu

Bu makalede, insan akciğerinin proksimal ve distal bölgelerinden canlı epitel hücrelerinin zenginleştirilmesine izin veren doku dissosiyasyonu ve hücresel fraksiyonasyon yaklaşımları için ayrıntılı bir metodoloji sunulmaktadır. Bu yaklaşımlar, akciğer epitel progenitör hücrelerinin fonksiyonel analizi için 3D organoid kültür modelleri kullanılarak uygulanmaktadır.

Organoid Kültür için İnsan Akciğer Epitel Progenitör Hücrelerinin İzolasyonu ve Zenginleştirilmesi

Bu protokol, hücre verimi, saflığı ve canlılığı için optimize edilmiş murin doğum sonrası retinal endotel hücrelerinin izolasyonu için bir yöntemi açıklar. Bu hücreler yeni nesil dizileme yaklaşımları için uygundur.

Yeni Nesil Dizileme için Murin Retinal Endotel Hücrelerinin İzolasyonu

Zor olmasına rağmen, pulmoner endotel hücrelerinin izolasyonu, akciğer iltihabı ile ilgili çalışmalar için gereklidir. Bu protokol, makrovasküler ve mikrovasküler endotel hücrelerinin yüksek verimli, yüksek saflıkta izolasyonu için bir prosedürü tanımlamaktadır.

Akciğer Kaynaklı Örneklerden Mikrovasküler ve Makrovasküler Endotel Hücre İzolasyonu ve Saflaştırma

Burada, uzun süreli biyobankacılık için primer bronşiyal epitel hücrelerinin izolasyonu ve genişletilmesi ve hava-sıvı arayüzünde kültür yoluyla farklılaşmış epitel hücrelerinin üretilmesi için tekrarlanabilir, uygun fiyatlı ve sağlam bir yöntem sunulmaktadır.

Bronşiyal Epitel Hücrelerinin Biyobankacılık için Rezeke Akciğer Dokusundan İzole Edilmesi ve İyi Diferansiye Hava-Sıvı Arayüz Kültürlerinin Oluşturulması

Bu protokol, canlı bağışıklık ve bağışıklık dışı popülasyonların fare akciğerinden kararlı bir durumda ve grip enfeksiyonunu takiben izolasyonunu detaylandırır. Ayrıca epitelyal ve miyeloid hücre alt kümelerini tanımlamak için geçit stratejileri sağlar.

Fare Akciğerinden Canlı Miyeloid ve Epitel Hücre Popülasyonlarının İzolasyonu

Öğrenin, akciğerde retinoid içeren hücreleri FACS ile izole etme yöntemini. Bu teknik, retinoid metabolizmasının karmaşıklığını ve akciğer hastalıklarında beslenme stratejilerini anlamak için kritik öneme sahiptir.

Akciğer Retinoid İçeren Hücrelerin Hücre Ayıklama ile İzolasyonu

Daha fazla video keşfet