Oral β-Aminopropionitril ve Subkütan Anjiyotensin II İnfüzyonu ile İndüklenen Torasik Aort Diseksiyonunun Murin Modeli

Bu çalışma, BAPN ve anjiyotensin II indüksiyonu yoluyla torasik aort diseksiyonunun (TAD) bir fare modelini oluşturarak, TAD patogenezini veya terapötik yaklaşımları araştırmak için değerli bir araç sunan ayrıntılı bir prosedür sağlar. BAPN-anjiyotensin II kombinasyonu, yüksek bir TAD insidans oranı elde eden ve insan TAD'sinde gözlemlenenlere benzeyen patofizyoloji özelliklerini kopyalayan murin TAD modellerinin oluşturulması için bir yöntem sağlar. Gelecekte araştırma ekibimiz, kardiyovasküler patogenezi göstermek için klinik ve temel araştırmaları entegre edecek ve mekanik anlayışlar ve translasyonel yenilikler yoluyla yeni terapötik stratejilerin keşfedilmesine öncelik verecektir.

[Sunucu] Her fareyi tartın ve deney için gerekli anjiyotensin II kütlesini hesaplamak için maksimum vücut ağırlığını kaydedin. Maksimum vücut ağırlığına göre her fare için anjiyotensin II kütlesini belirlemek için hesaplama şablonunu kullanın. Ardından, fare başına 130 mikrolitre anjiyotensin II çözeltisi hazırlamak için gereken toplam anjiyotensin II kütlesini hesaplayın. Deney için gereken anjiyotensin II çözeltisi ve salinin dolum hacmini belirlemek için verilen şablonu kullanın. Hesaplanan anjiyotensin II miktarını analitik bir terazi kullanarak steril bir mikrotüpte tartın. Hesaplanan normal salin hacmini mikrotüpe ekleyin. Bir vorteks karıştırıcı kullanarak, görünür parçacık kalmayana kadar tozu iyice çözün. Pompa gövdesi ve akış moderatörü de dahil olmak üzere her bir ozmotik pompayı analitik bir terazi kullanarak tartın. Yeni açılmış 1 mililitrelik steril bir şırıngaya bir doldurma tüpü takın ve hazırlanan anjiyotensin II çözeltisini dikkatlice aspire edin. Doldurma tüpünü yukarı konumda tutun ve şırıngadaki hava kabarcıklarını çıkarın. Doldurma tüpünün ucunu, tüp daha fazla sokulamayacak duruma gelene kadar yavaşça ozmotik pompanın üst açıklığına sokun. Pompayı dik tutun ve çıkışta anjiyotensin II çözeltisi görünene kadar şırınga pistonuna yavaşça basın. Ardından durun ve doldurma tüpünü dikkatlice çıkarın. Ardından, akış moderatörünü, moderatör ile pompanın üst kısmı arasında boşluk kalmayana kadar dikkatlice ve yavaşça pompa açıklığına yerleştirin. Yüklü pompayı analitik teraziyi kullanarak tartın ve değeri kaydedin. Doldurulmuş pompaları, implantasyondan en az altı saat önce, moderatör başı yukarı bakacak şekilde 37 santigrat derecede steril salin içine yerleştirin. Fareyi cerrahi yüzeye yüzüstü pozisyonda yerleştirin. Deride dikkatlice 1 santimetrelik enine bir kesi yapmak için bir neşter kullanın. İnsizal kenarı kavramak için bir çift kavisli forseps ve deri altı dokuyu künt bir şekilde incelemek için başka bir çift forseps kullanın ve ozmotik pompa için bir cep oluşturun. Dolu pompayı, akış moderatörü kafası farenin kuyruk ucuna bakacak şekilde cebe yerleştirin. İnsizal kenarları düzgün bir şekilde hizalayın ve 6-0 emilmeyen dikiş kullanarak cildi kapatın. Bu şekil, tüm deney gruplarında aort diseksiyonu ve rüptürü insidansını göstermektedir. BAPN artı anjiyotensin II grubundaki farelerin %100'ünde aort diseksiyonu meydana geldi, %35'inde rüptür yaşandı ve BAPN veya BAPN artı salin grubunda gözlenen %55 veya %60 insidansı aştı, kontrollerde ise diseksiyon veya rüptür meydana gelmedi. Gros aort morfolojisi, kontrollerdeki aortlara kıyasla BAPN, BAPN artı salin ve BAPN artı anjiyotensin II gruplarında ilerleyici deformasyon gösterdi. Maksimum torasik aort çapları, BAPN ile tedavi edilen tüm gruplarda kontrollere kıyasla önemli ölçüde daha yüksekti ve tedavi edilen gruplar arasında anlamlı bir fark yoktu. Hematoksilen ve Eozin boyaması kontrollerde ince, düzgün aort duvarları ortaya çıkarırken, BAPN ile tedavi edilen tüm gruplarda kalınlaşma ve inflamatuar infiltrasyon görüldü. Elastin Van Gieson boyaması, kontrollerde sağlam elastik lifler ve BAPN ile tedavi edilen tüm gruplarda yanlış lümen oluşumu ile ilerleyici lif parçalanması gösterdi.