Tümör Mikroçevresinin PET Görüntülemesi için Bir Sentez Modülünde [⁶⁸Ga] Ga-3BP-3940'ın Otomatik Hazırlanması

Bu araştırma, fibroblast aktivasyon proteininin PET görüntülemesi için GAIA V2 sentezleyici ile [⁶⁸Ga] Ga-3BP-3940 üretimi için otomatik süreci açıklamaktadır. Üç test partisi üzerinde gerçekleştirilen kalite kontrol testlerinin sonuçları da sunulmaktadır.

Bu araştırma, Galyum 68 3BP3940'ın hazırlanması için otomatik bir radyo etiketleme protokolünün geliştirilmesine odaklanmaktadır. Bu bileşik, tümör mikroçevresinin petagörüntüleme için deneysel bir radyofarmasötiktir. Tümör mikroçevresini hedeflemek son yıllarda önemli bir ilgi kazanmıştır. Radyofarmasötikler alanında, bunların hazırlanması için verimli ve güvenli otomatik radyo etiketleme protokolleri geliştirmek önemli bir zorluktur. Galyum etiketli araştırma radyofarmasötiklerinin üretilmesindeki ana deneysel zorluk, nihayet hem radyo etiketli moleküle hem de kullanılan sentezleyiciye uyarlanmış bir radyo etiketleme protokolünün uygulanmasıdır. Galyum 68 etiketli deneysel radyofarmasötikler alanında. Otomatik reaksiyon koşullarının dikkatli bir şekilde optimizasyonunun, belirli bir bileşik için radyo etiketleme sürecini önemli ölçüde iyileştirebileceğini vurguladık. Bu protokol, üç BP 3940'ın otomatik Galyum 68 radyo etiketleme eksikliğini giderir ve belirli bir sentezleyici kullanılarak hazırlanması için anahtar teslimi bir yöntem sunarak sadece 20 dakikada sentez sağlar. GMP uyumluluğu, farmasötik sınıf üç BP3940'ın radyoyla etiketlenmesini sağlayarak bu yenilikçi radyoizleyicinin klinik uygulamalarını destekler.

[Ekran Okuyucusu] Başlamak için galyum 68 kaset zarfını açın. Herhangi bir hasar olup olmadığını kontrol ettikten sonra, 21 gauge iğne ile donatılmış beş mililitrelik bir lurer kilit şırıngası kullanarak kaset üzerindeki her bir lurer bağlantısını sıkın. Reaktif kitinden beş mililitre mutlak etanol çekin ve C18 kartuşunun üzerinden çok yavaş bir şekilde geçirin. Daha sonra aynı şırıngayı kullanarak, enjeksiyon için beş mililitre su çekin ve aynı kartuşun üzerinden çok yavaş bir şekilde geçirin. Boru setinin Ramp A'sını sentez modülüne yerleştirin ve yerinde tutmak için iki mandalı çevirin. Dikey A tek borunun serbest ucunu 19 gauge iğneye bağlayın ve atık şişesine yerleştirin. Atık şişesine bir havalandırma iğnesi yerleştirin ve tahliye şişesini alacak olan korumalı kabın arkasına geriye doğru yönlendirin: 0.22 mikrometre filtreyi dört konumuna yerleştirin. Yatay A tek hortumu, modülün ön panelinin sol alt kısmında bulunan basınç sensörüne bağlayın. Bir erkekten erkeğe adaptör kullanarak, 0,22 mikrometre terminal filtresi ve 80 milimetre 20 gauge iğne ile biten yatay A beş konumunda 30 santimetrelik bir uzatma hattı bağlayın. 20 gauge iğneyi kapalı bir steril tahliye şişesine yerleştirin. Ardından bir havalandırma iğnesi ekleyin ve şişeyi korumalı kabına yerleştirin. Dikey A'yı dikey C'ye bağlayan boru hattını, Rampa B'nin üzerindeki tutma kancalarının arkasına yerleştirin. Kısa bir uzatma hattı kullanarak yatay manifoldlar A, iki ve b'yi bağlayın. A iki konumuna monte edilmiş adaptörü çıkardıktan sonra, ramp B'yi sentez modülünün üzerine yerleştirin ve iki mandalı çevirerek sabitleyin. Ön koşul C 18 kartuşunu yatay C iki konumuna bağlayın ve yatay valf B beşi C ikisine bağlayan adaptörün sol tarafta tutulduğundan emin olun. Ramp C'yi sabitlemeden önce her iki mandalı da kilitleyerek sentez modülünün üzerine yerleştirin. Bir erkekten erkeğe adaptör kullanarak, yatay C beşten galyum 50 jeneratörüne 68 santimetrelik bir uzatma hattı bağlayın. Boru setinin vitray reaksiyon şişesini modül fırına yerleştirin. Ardından boruyu dikey A beşten dikey C beşe kadar peristaltik pompaya dikkatlice yerleştirin. Pompayı kapatın ve borunun doğru şekilde yerleştirildiğini doğruladıktan sonra, boruyu pompanın sol tarafındaki aktivite sensöründen geçirin. Enjeksiyon torbası için 250 mililitrelik suyu, sivri uçlu adaptörü kullanarak c dört boruya bağlayın ve torbayı modülün sağ tarafında bulunan belirtilen kancaya asın. 20 gauge iğneli üç mililitre, üç parçalı lurer kilit şırıngası kullanarak, mililitre L metiyonin çözeltisi başına 1.5 mililitre 10 miligram çekin. Şırıngayı yatay C bir boruya bağlayın ve modülün sağ tarafında belirtilen yuvaya asın. Tam aktarımı sağlamak için sıvı yüzeyi ile şırınga piston contası arasında yaklaşık iki mililitre hava bırakın. 20 gauge iğneli bir mililitrelik şırınga kullanarak, mililitre L metiyonin çözeltisi başına 10 miligramın 750 mikrolitresini çekin ve septumu dezenfekte ettikten sonra% 0.9 sodyum klorür şişesine enjekte edin. 20 gauge iğne ile 10 mililitrelik üç parçalı lurer kilit şırıngası kullanarak,% 0.9 sodyum klorür ve L metiyonin şişesinin içeriğini geri çekin. Sesi 8,6 mililitreye ayarlayın. B dört pozisyonundaki sivri ucu çıkarın ve bunun yerine şırıngayı B dördüncü pozisyonuna bağlayın. Septumu dezenfekte ettikten sonra, 20 gauge iğne ile üç mililitrelik üç parçalı lurer kilit şırıngası kullanarak% 60 etanol şişesinin içeriğini geri çekin. Hacmin en az 1,5 mililitre olduğunu onayladıktan sonra, sivri ucu B konumundan beş konumundan çıkarın ve şırıngayı yerine bağlayın. 20 gauge iğne ile donatılmış düşük ölü hacimli bir mililitre şırınga kullanarak, 0.25 mililitre 0.8 molar sodyum asetat tampon çözeltisini çekin ve 30 mikrogram üç BP3940 içeren şişeye enjekte edin. Ardışık enjeksiyon ve aspirasyon döngüleri ile çözündürün. 0.25 mililitrelik çözeltiyi aynı şırıngaya çekin. İğneyi çıkarın ve şırıngayı B üç konumuna yerleştirin. Tüm reaktifler rampalara yerleştirildiğinde ve gerekli tüm bilgiler yazılıma doğru bir şekilde kaydedildiğinde sentezi çalıştır'a tıklayın. Terminal şişesini uygun bir korumalı hücreye aktarın. Radyoaktivite ölçümü ve hasta dozu hazırlığı için hazırlamak. Uygun şekilde kalibre edilmiş bir doz kalibratörü kullanarak terminal şişesinin radyoaktivitesini ölçün ve hazırlığı bilgisayara kaydedin. Şişeyi doğru bir şekilde etiketledikten sonra, uygun bir korumalı kabın içine yerleştirin. Aseptik ve radyasyondan korunma tekniklerini kullanarak, kalite kontrol testi için terminal şişeden yaklaşık 0,5 mililitre numune çekin. Netliği ve rengi değerlendirmek için numuneyi görsel olarak inceleyin. Bir pH kağıt şeridi üzerine bir damla ürün uygulayarak pH'ı değerlendirin. Radyo TLC ile radyo kimyasal saflığını ölçmek için iki ITLCSG plakasının her birine bir damla ürün çözeltisi bırakın. Plakaların uygun mobil fazlarda gelişmesine izin verin ve bunları radyo kromatografı kullanarak okuyun. Ürün sinyalinin eğrisinin altındaki alanı ve safsızlık sinyalini ölçerek elde edilen radyo kromatogramını entegre edin. Ardından, radyo kimyasal saflığını ölçmek için ekranda gösterilen formüle göre radyo kimyasal saflığını hesaplayın. Radyo HPLC kullanarak, numunenin yaklaşık 50 mikrolitresini HPLC şişesine enjekte edin. Şişeyi HPLC otomatik örnekleyiciye doğru konumda yükleyin ve analiz sırasını başlatın. Numune enjekte edildikten sonra, maruziyeti en aza indirmek için korumalı kaba geri göndermeden önce şişeyi otomatik numune alma cihazından çıkarın. Çalışmanın sonunda, daha önce gösterildiği gibi ürün ve safsızlık sinyalleri için eğrinin altındaki alanı ölçerek radyo kromatogramını entegre edin ve verilen formülü kullanarak radyo kimyasal saflığını hesaplayın. Bu şekilde, ham galyum üç BP 3940 sentezi sırasında radyo kimyasal saflığının korunmasında farklı anti radyolog ajanlarının etkinliğinin bir karşılaştırması gösterilmektedir. Terminal saflaştırma olmadan, mililitre başına 10 miligramdaki Metionin, gentisik asit ve askorbik aside kıyasla% 94.7 ile en yüksek radyo kimyasal saflığına ulaştı. Terminal şişesinde toplanan nihai ürün, toplam radyoaktivitenin ortalamasının %75,1'inin üzerinde tutularak yüksek verim ve verimli toplamayı doğruladı. Sentezle ilgili toplam kayıplar, atık şişesi, SPE kartuşu ve reaksiyon şişesi arasında dağıtılan ortalama %24.9'dur ve bu da düşük atık üretimini gösterir. Radyo etiketli bileşiğin üç test partisi boyunca ortalama nihai aktivitesi, tutarlı sentez performansını gösteren 737 megabekerelin üzerindeydi.