Depresyonun Fare Modellerinde Koku Hedonik Yanlılıklarını Ölçmek İçin Bir Koku Tercihi Testi

Duygusal işlemede olumsuz bir önyargı, depresif bozuklukların önemli bir özelliğidir. Bu önyargı, hastalığın fizyopatolojisini daha iyi anlamak için özellikle ilginçtir. Burada, hem erkek hem de dişi fare depresyon modellerinde çeşitli değerlerle ilişkili kokuları kullanarak doğuştan gelen koku değerlemesinin güvenilir bir şekilde değerlendirilmesi için bir protokol öneriyoruz.

Fare modellerinde hedonik yanlılığın değerlendirilmesi, hem indüklenmiş depresif benzeri fenotipi daha iyi değerlendirmek için hem de değerlik atamasındaki bu değişikliklerin arkasındaki nöral mekanizmaları araştırmak için bir araç olarak önemlidir. Genel olarak, bu protokol, depresyonun altında yatan mekanizmayı ve tedavi etkinliğini anlamak için translasyonel araştırmalar için yeni yollar sağlar. Gelecekte, bu bozulmuş duygusal işlemenin ve potansiyel cinsiyete özgü mekanizmaların arkasındaki beyin devrelerini ve antidepresanların bu yollar üzerindeki etkisini deşifre etmeye çalışacağız.

Başlamak için, gri pleksiglas duvarlara ve beyaz zemine sahip, 45 santimetreye 50 santimetreye 25 santimetre ölçülerinde iki bölmeli bir arena kullanarak deney düzeneğini hazırlayın. 37 santimetreye 25 santimetre ölçülerinde gri bir pleksiglas duvar kullanarak arenayı 25 santimetreye 45 santimetrelik iki eşit bölmeye bölün. Delikli Petri kabını yapıştırıcıyla sabitleyin ve her bölmede duvarın altına yerleştirin.

Ardından, her bir Petri kabını arenanın duvarına dikey olarak sabitlemek için çift taraflı yapıştırıcı veya Blu Tack kullanın. Daha sonra, hayvanların davranışlarını kaydetmek ve deney boyunca hareketlerinin otomatik olarak izlenmesini sağlamak için arenanın iki metre yukarısına bir kamera yerleştirin. Şimdi fareleri en az iki deney grubuna, kontrol fareleri ve test grubu farelerine ayırın.

Deney başlamadan 30 dakika önce her fareyi davranışsal test odasına aktarın. Bir lüks ölçer kullanarak arenadaki aydınlatmayı yaklaşık 40 lükse ayarlayın ve aydınlatmanın eşit şekilde dağıldığını doğrulayın. Ardından, arenadaki iki Petri kabının her birine 42,5 milimetre ölçülerinde temiz bir filtre kağıdı ekleyin.

İlk gün, neofobiyi azaltmak için aynı barınak kafesindeki tüm fareleri 10 dakika boyunca yavaşça arenaya yerleştirin. Test gününde, doğru seyreltmeyi kullanarak kokuyu kimyasal bir başlık altında bir cam şişede hazırlayın. Koku vericiyi kimyasal özelliklerine bağlı olarak mineral yağ veya damıtılmış su ile seyreltin.

Her fareyi test etmeden hemen önce, kaputun altında 200 mikrolitre koku solüsyonu toplamak için filtre uçlu bir mikro pipet kullanın. Çözeltiyi Petri kaplarından birindeki filtre kağıdına dağıtın. İkinci filtre kağıdını diğer Petri kabında işlenmeden bırakın.

Petri kaplarını test odasına aktarın. Ardından bunları arenanın duvarına dikey olarak sabitleyin. Her fareyi iki bölme arasındaki arenaya ayrı ayrı yerleştirin.

Tepegöz kamerasını kullanarak davranışı 10 dakika boyunca kaydedin. Gözlem süresi sona erdikten sonra fareyi arenadan çıkarın. Kokuyu çıkarın Petri kabı arenadan.

Ardından arenayı %70 etanol dezenfektan solüsyonu kullanarak temizleyin ve iyice kurulayın. Kullanılmış filtre kağıdını atın ve bir sonraki fare için bir sonraki koku örneğini hazırlayın. Test boyunca farenin konumunu kaydetmek için otomatik bir izleme yazılımı kullanın.

Analiz için arena içinde farklı bölgeler tanımlayın. Alışma sırasında, tüm fareler hem koku hem de kontrol bölgelerinde en az 50 saniye geçirdi, bu da yeterli görev katılımını gösteriyor. Daha da önemlisi, UCMS'ye maruz kalan fareler, koku bölgesinde kontrollerle aynı zamanı geçirdiler.

Diğer bölgelerde bazı farklılıklar gözlemlenebilse de. Kontrol dişi fareleri, erkek idrarına maruz kaldıklarında UCMS dişilerinden önemli ölçüde daha fazla hareket etti, ancak alışkanlık veya TMT'ye maruz kalma sırasında hareket etmedi. Hedonik yanıtın tüm okumaları, kontrol ve UCMS kadınları arasında önemli farklılıklar veya istatistiksel bir eğilim gösterir.

Bu etki, hedonik ve lokomotor tepkinin birleşik bir ölçüsü olan Küresel Koku Keşif İndeksi aracılığıyla da görülebilir. Koku Araştırma İndeksi, dişi farelerde hem erkek idrarı hem de TMT için duygusallık puanı ile pozitif korelasyon gösterdi. Erkek farelerde, alışkanlık sırasında veya test boyunca kat edilen toplam mesafede hiçbir fark gözlenmedi.

Koku bölgesinde geçirilen süre, kontrollere kıyasla UCMS'de kadın idrarında ve TMT eksplorasyonunda önemli bir azalma olduğunu göstermektedir. UCMS fareleri, koku bölgesine önemli ölçüde daha az girer veya girme eğilimindedir ve hem dişi idrarı hem de TMT için önemli ölçüde azaltılmış bir tercih indeksi sunar. Koku Keşif İndeksi, kontrollere kıyasla UCMS farelerinin dişi idrarına ve TMT'sine negatif kaymış bir davranışsal tepki gösterir ve bu, hayvanın duygusallık puanı ile pozitif korelasyon gösterme eğilimindedir.