3 Temmuz 2025
Burada, standart kemirgen modellerinde teknik olarak zorlayıcı olan Daurian yer sincabında (DGS) uzun süreli bir karaciğer soğuk hava deposu ve nakli modeli oluşturmak için bir protokol sunuyoruz.
DGS gibi soğuğa uyum sağlamış memelileri inceleyerek daha iyi organ koruma yöntemleri geliştiriyoruz. Amacımız, doğal soğuk depolamalarını anlamak ve insan organlarının korunmasını iyileştirmek. Gelecekteki çalışmalarımız, kış uykusunun seviyesi, aşırı soğuk ve stresin nasıl etkilendiğini inceleyecek ve bu bilgiyi organ korumasını iyileştirmek, depolama süresini uzatmak ve nakilleri daha başarılı hale getirmek için kullanacak.
Başlamak için, anestezi altındaki hayvanın ksifoid sürecinden pubik simfizine kadar uzanan gerekli kesiyi yapın. Sağ böbrek veninin üzerindeki infrahepatik inferior vena kava'yı hayvanın çevresindeki dokulardan dikkatlice temizlemek için pamuklu çubuklar kullanın. Sonra, karaciğer yakınındaki alt vena kavaya akan sağ adrenal ve bel damarlarını 7-0 dikiş ile bağlayın.
Mikroforseps kullanarak çevredeki dokulardan doğru hepatik arter, gastroduodenal arteri ve ortak hepatik arteri izole edin. Aorta yedi kalibre intravenöz bir iğne yerleştirin ve kelepçeyle sabitleyin. Sonra, torasik aortayı açığa çıkarmak için diyaframı kesin ve torakal aortaya damar kelepçesi yerleştirin.
Karaciğer perfüze edildikten sonra, sağ böbrek veninin üzerindeki intratorasik vena kava ve infrahepatik inferior vena kava kesilerek perfüzyonun dışarı çıkmasına izin verin. Perfüzyon sırasında, safra kesesi cerrahi makasla çıkarılır. Safra kanalının ön duvarında küçük bir kesi açın ve safra kanalı stentini kanala yerleştirerek 7-0 ipek dikişle sabitleyin.
Şimdi, mikroforseps kullanarak, portal veni çevredeki bağ dokusundan izole edin. Pilor damarını 7-0 dikiş ile bağlayın ve kesin, portal ven gövdesini dalak damar seviyesinde kesin. Gastroduodenal arteri distal olarak bağlayıp kesin ve ortak hepatik arterin ön duvarında küçük bir kesi oluşturun.
Hepatik arter stentini ortak karaciğer arterine yerleştirin ve 7-0 ipek dikişle sabitleyin. Sol diyaframatik venanı suprahepatik alt vena kavadan izole edin ve 7-0 dikiş ile bağlayın. Suprahepatik inferior vena kava, ince cerrahi aletlerle diyaframa mümkün olduğunca yakın şekilde disseksiye geçirilin.
Hepatosplenik bağı 7-0 dikiş kullanarak bağlayın. Portal ven manşetinin sapını damar kelepçesiyle sabitleyin ve sivrisinek pensiyle stabilize edin. Portal damarı dikkatlice manşetten geçirin, bükülmediğinden emin olun ve portal damarı manşetin üzerine katlayın ve 7-0 dikişle sabitleyin.
Kistik kanalı sıkıca bağlayın. Karaciğerin sağ alt lobu ile bağlı manşet ile sağ alt lobu arasındaki infrahepatik alt vena kava etrafına tek bir 7-0 ipek dikiş yerleştirin. 8-0 Ekleyin Suprahepatik alt vena kavanın her iki yan köşesinde dış taraftan iç tarafa kadar kalıcı dikişler bulunur.
Suprahepatik alt vena kavanın arkasına dikkatlice künt pensleri geçirin ve etrafına 7-0 ipek dikiş yerleştirin. Ortak safra kanalını proksimal, 7-0 ipek dikiş ile bağlayın ve bunu ligatürün üstüne kesin. Safra kanalı ayrıldıktan sonra, ligasyonlar arasında gastroduodenal arter ve uygun hepatik arteri kesin.
Ortak karaciğer arterinin sonunda, Y şeklinde bir bifurkasyon oluşturun ve daha sonra kullanılmak üzere doğru hepatik arter ligatüründe iki santimetre uzunluğunda bir dikiş bırakın. Portal damarın sağ ve sol dallarını serbest bırakın. Sonra, her dalın üzerine beş santimetre 7-0 stabilizasyon dikişleri yerleştirerek daha sonra ele alınmasına yardımcı olur.
Şimdi, sağ böbrek veninin üstüne infrahepatik inferior vena kava sıkıştırın, ardından portal ven pylorik venin üstüne klepçe edilir. Karaciğerden kanı boşaltmak için iki mililitrelik bir şırınga kullanarak 10 saniye içinde sağ portal vena 1,5 mililitre salin enjekte edin. Diyaframı geri çekmek için, suprahepatik alt vena kava etrafına yerleştirilen 7-0 ipek dikişi nazikçe çekin.
Sonra, kelepçedeki diyafram kısmını da dahil olmak üzere, suprahepatik alt vena cava'ya bulldog kelepçesi uygulayın. Sonra, karaciğerin hemen üzerinde suprahepatik alt vena kava kesin. Her iki portal ven dalındaki 7-0 stay dikişlerini sabitleyin ve portal ven bu ligatürlerin üzerine kesin.
Sonra, infrahepatik inferior vena kava'yı karaciğer parenximasına yakın kesin ve kalan bağ bağlantılarını keserek karaciğeri hemen çıkarın. Arka duvarı sol köşeden başlayarak sekiz ila 10 sürekli dikiş ile dikin. Ön duvar kapanışını sağdan sola 10 ila 12 dikiş kullanarak aynı dikişle devam edin.
Portal ven rekonstrüksiyonu için, önceden yerleştirilmiş beş santimetrlik stabil dikişleri kullanarak damar kelepçeleriyle yukarıya doğru çekiş uygulayarak her iki portal ven bifurkasyonunu nazikçe yükseltirin. Portal ven lümenini mililitrede 300 uluslararası birim konsantrasyonda hepparinizlenmiş tuzlu suyla yıkayın. Manşeti portal damara yerleştirin ve 7-0 ipek dikiş ile sabitleyin.
Portal ven ve suprahepatik alt vena kava üzerindeki kelepçeleri ardışık olarak serbest bırakarak greft perfüzyonu yeniden sağlanır ve anhepatik faza tamamlanır. Sonra, alıcının ortak hepatik arterinin ucunda Y konfigürasyonunun bifurkasyonunda küçük bir kesi yapılabilir. Ortak hepatik arter lümenini heparinize tuzlu suyla mililitrede 300 uluslararası birimde yıkayın.
Arteriyel stenti ortak hepatik arteriye yerleştirin ve 7-0 ipek dikişle sabitleyin. Stenti stabilize etmek ve yer değiştirmesini önlemek için hem donör hem de alıcı taraflarına destek dikişlerini bağlayın. Mikrovasküler klipsi serbest bırakarak arterial kan akışını yeniden sağlayabilirsiniz.
Sonra, alıcının ortak safra kanalının ön duvarında küçük bir kesi yapın. Safra kanalı stentini lümenin içine yerleştirin ve 7-0 ipek dikiş ile sabitleyin. Son olarak, stenti güvenli bir şekilde yerinde tutmak ve yer değiştirmeyi önlemek için hem donör hem de alıcı safra kanallarına kurşun dikişlerini bağlayın.
Soğuk UW solüsyonunda 24 saat boyunca korunan karaciğer greftleri alanlar, nakil öncesi uyku uykusunda olup olmadıklarına bakılmaksızın, ekim sonrası yedi gün sonra %100 sağkalım oranı göstermiştir. Buna karşılık, diğer SD sıçanlardan karaciğer grefti alan tüm SD sıçanlar, soğuk UW solüsyonunda 24 saat boyunca korunmuştur, nakil sonrası 12 saat içinde hayatını kaybetmiştir.
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin
Bu çalışma, Daurian yer sincaplarında (DGS) uzun süreli karaciğer soğuk saklama ve transplantasyon modelinin kurulması için bir protokol sunmaktadır. Araştırma, soğuğa adapte olmuş memelilerin benzersiz adaptasyonlarından yararlanarak organ koruma yöntemlerini geliştirmeyi amaçlamaktadır.
Soğuk depolama kaynaklı greft hasarı, hem organ canlılığını hem de transplantasyon sonrası iyileşmeyi sınırlayarak karaciğer naklinde kritik bir darboğaz olmaya devam etmektedir. Daurian yer sincabı modeli, soğuk adaptasyonu ve iskemi-reperfüzyon toleransının incelenmesi için biyolojik olarak güçlü ve benzersiz bir sistem sunarak, organ koruma stratejilerindeki öngörü güvenilirliğini doğrudan ele almaktadır. Bu platform, keşif aşamasında mekanistik risklerin azaltılmasına olanak tanıyarak yeni nesil koruma çözümleri için translasyonel sürekliliği desteklemektedir.
Bu model, soğuk adaptasyon araştırmalarını erken keşif ve preklinik doğrulama arayüzüne konumlandırarak, organ korumasına yönelik iteratif hipotez testlerini ve mekanistik içgörüleri mümkün kılmaktadır.