Değişen Dispersite ve Uç Gruplara Sahip Sentetik Polimerlerin Karakterizasyonu için MALDI-ToF MS Yöntemi

Polimerlerin nasıl tepki verdiğini bilmek istiyoruz. Bunun için kütle spektrometrisi kullanıyoruz çünkü hem beklenen reaksiyonları hem de diğer yan reaksiyonları incelemek için harika bir araç. Son 10 yılda, MALDI-TOF MS, MS/MS içinde çok daha fazla çözünürlüğe ve parçalanmaya sahip olacak şekilde ilerledi.

Mono dağılmış, orta derecede dağılmış ve yüksek oranda dağılmış numuneler ve farklı izotopik çözünürlüğe sahip olanlar dahil olmak üzere çok çeşitli reaksiyonları tanımlıyoruz. Örneğin, halojenli gruplara sahip polimerler veya yarı kararlı iyon oluşumuna eğilimli olanlar. Başlamak için, katyon, analit ve matris stok çözeltilerini A tüpüne ekleyerek analit toplama çözeltisini hazırlayın ve karıştırmak için tüpü vorteksleyin.

Daha sonra katyon, kalibrant ve matris stok çözeltilerini B tüpüne ekleyin ve iyice karıştırın. Şimdi, kurutulmuş damlacık yöntemini kullanarak A tüpünden 0,5 mikrolitre katyon, analit ve matris numune karışımını MALDI-ToF MS hedef plakasına pipetleyin. Daha sonra 0,5 mikrolitre kalibrant karışımını B tüpünden hedef plaka üzerindeki bitişik bir noktaya pipetleyin.

Veri toplama sırasında referans olması için her noktanın tam satır ve sütun konumunu kaydedin. MALDI-ToF MS hedef plakasını cihaza yerleştirin ve cihaz kontrol yazılımını kullanarak hedef plakasını sabitleyin. Cihaz kontrol yazılımında bir metot dosyası seçin ve açın.

Analitin kütle aralığına göre reflektör pozitif veya doğrusal pozitif yöntemini seçin. Ardından, MALDI-ToF MS veri toplamayı başlatmak için cihaz kontrol yazılımındaki başlat düğmesine basın. Alımın otomatik olarak tamamlanmasına izin verin veya istediğinizde durdur düğmesine basın.

Ardından, MALDI-ToF MS tek spektrumunu toplam spektrum arabelleğine aktarmak için ekle'ye tıklayın. MALDI-ToF MS lazeri yeniden konumlandırın viewkamera beslemesi ve yeni bir konumu hedeflemek için seçilen aynı kuyucuk içinde herhangi bir yere tıklayın. Sonuçlar tatmin edici olana kadar spektrum eklemeye devam etmek için MALDI-ToF MS alımını tekrarlayın.

Şimdi, MALDI-ToF MS hedef plakasındaki kalibrasyon örneğini seçin ve daha önce açıklanan veri toplama adımlarını izleyerek yeni bir alım gerçekleştirin. Cihaz kontrol yazılımındaki kalibrasyon sekmesine gidin ve seçilen kalibranta karşılık gelen uygun kütle kontrol listesini açın. Elde edilen MALDI-ToF kütle spektrumundaki kalibrasyon tepe noktalarını, kütle kontrol listesinde listelenen referans kütlelerle eşleştirin.

Kütle kontrol listesinde, MALDI-ToF kütle spektrumunda gözlemlenen ilk kalibrasyon zirvesine karşılık gelen kütleyi seçin. Tepe noktasının seçilmesi için kalibrasyon sinyalinin soluna tıklayarak referans tepe noktasını ayarlayın. Ardından, kalibrasyon sinyalini referans kütle olarak atamak için uygula'ya tıklayın.

Kütle kontrol listesinden bir sonraki ilgilenilen kütleyi seçerek, karşılık gelen kalibrant tepe noktasını hizalayarak ve referans ayarını uygulayarak tüm ek kalibrasyon tepe noktaları için prosedürü tekrarlayın. Kalibre edilmiş polimer analit numunesi alımı için, cihaz kontrol yazılımını kullanarak katyon, analit ve matris karışımını içeren kuyucuğu bulun ve seçin. Daha önce gösterildiği gibi kalibre edilmiş yöntemi kullanarak MALDI-ToF MS veri toplama işlemini gerçekleştirin.

Uygun bir dosya adı ekleyin ve daha fazla analiz için kalibre edilmiş analit kütle spektrumunu kaydedin. Tris G1 6'nın MALDI-ToF MS spektrumu, 505.239 Dalton'da tek bir tepe noktası gösterdi, bu da teorik kütlesiyle eşleşti ve korumanın tamamen kaldırıldığını doğruladı. Klorür ve proton uç gruplarına sahip PDMP polimerleri, sodyum ikameli ve siklik varyantlarla birlikte 859.426 Dalton'da bir ana zirve sergiledi.

Tam PDMP dağılımı 600 ila 1.600 Dalton'u kapsıyordu ve tekrar birimleri ortalama 100.056 Dalton'du. Doğrusal polietilen brassilyat polimerleri, üç dağılımda alfa-hidroksi omega-propargil, alfa-propargil omega-propargil ve alfa-hidroksi omega-hidroksi tipleri sergiledi. Azid işlevselleştirilmiş lineer polietilen brassiliat polimerleri, alfa-azido omega-azido, alfa-propargil omega-propargil ve alfa-propargil omega-azido artı yarı kararlı iyonlar için zirveler gösterdi.

Tarak polimerleri, 16 Dalton aralıklı oksidasyon durumlarını ve dörtlü oksidasyonu doğrulayan K artı eklenti kaymalarını ortaya çıkardı. Propargil grubu 539 ve 583 olmadan metoksi PEG, reaktif olmayacak ve bu propargil gruplarının çoğu daha yüksek moleküler ağırlıklar oluşturduğunda artacaktır.