Name: Miyokard yaralanmasının doğru ve güvenilir analizi için mikroskobik 2,3,5-trifeniltetrazolyum klorür testi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-11-28T12:30:00.000+00:00
Duration: 11 min 17 s
Description: Öğrenin mikroskobik TTC boyama yöntemiyle miyokard iskemi-reperfüzyon hasarının doğru analizini. Geliştirilmiş protokol, kriyoseksiyon ve görüntüleme teknikleriyle infarkt boyutunun güvenilir değerlendirilmesini sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Bolli, R., Becker, L., Gross, G., Mentzer, R., Balshaw, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myocardial+protection+at+a+crossroads%3A+the+need+for+translation+into+clinical+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Res%22%5BJournal%5D)">Myocardial protection at a crossroads: the need for translation into clinical therapy.</a> Circ Res. 95 (2), 125-134 (2004).</li>
<li>Murphy, E., Steenbergen, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms+underlying+acute+protection+from+cardiac+ischemia-reperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Rev%22%5BJournal%5D)">Mechanisms underlying acute protection from cardiac ischemia-reperfusion injury.</a> Physiol Rev. 88 (2), 581-609 (2008).</li>
<li>Bohl, S., Medway, D. J., Schulz-Menger, J., Schneider, J. E., Neubauer, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Refined+approach+for+quantification+of+in+vivo+ischemia-reperfusion+injury+in+the+mouse+heart%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">Refined approach for quantification of in vivo ischemia-reperfusion injury in the mouse heart.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 297 (6), H2054-H2058 (2009).</li>
<li>Liepinsh, E., Kuka, J., Zvejniece, L., Vilskersts, R., Dambrova, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rodent+heart+and+brain+tissue+preparation+for+digital+macro+photography+after+ischemia-reperfusion%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Rodent heart and brain tissue preparation for digital macro photography after ischemia-reperfusion.</a> J Vis Exp. (180), e62942(2022).</li>
<li>Kim, S. -C., Boehm, O., Meyer, R., Hoeft, A., Knüfermann, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+murine+closed-chest+model+of+myocardial+ischemia+and+reperfusion%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">A murine closed-chest model of myocardial ischemia and reperfusion.</a> J Vis Exp. (65), e3896(2012).</li>
<li>Lindsey, M. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Guidelines+for+experimental+models+of+myocardial+ischemia+and+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">Guidelines for experimental models of myocardial ischemia and infarction.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 314 (4), H812-H838 (2018).</li>
<li>Ding, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+refined+TTC+assay+precisely+detects+cardiac+injury+and+cellular+viability+in+the+infarcted+mouse+heart%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">A refined TTC assay precisely detects cardiac injury and cellular viability in the infarcted mouse heart.</a> Sci Rep. 14 (1), 25214(2024).</li>
<li>Zhu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((IL-6+coaxes+cellular+dedifferentiation+as+a+pro-regenerative+intermediate+that+contributes+to+pericardial+ADSC-induced+cardiac+repair%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Res+Ther%22%5BJournal%5D)">IL-6 coaxes cellular dedifferentiation as a pro-regenerative intermediate that contributes to pericardial ADSC-induced cardiac repair.</a> Stem Cell Res Ther. 13 (1), 44(2022).</li>
<li>Zhu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sfrp1+as+a+pivotal+paracrine+factor+in+the+trained+pericardial+stem+cells+that+foster+reparative+activity%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">Sfrp1 as a pivotal paracrine factor in the trained pericardial stem cells that foster reparative activity.</a> Stem Cells Transl Med. 13 (2), 137-150 (2023).</li>
<li>Yellon, D. M., Hausenloy, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myocardial+reperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22N+Engl+J+Med%22%5BJournal%5D)">Myocardial reperfusion injury.</a> N Engl J Med. 357, 1121-1135 (2007).</li>
<li>Li, C., Chen, M., Zhang, D., Xu, T., Wang, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiac+injury+induced+by+obstructive+jaundice%3A+a+comprehensive+review%5BTitle%5D)+AND+%22Perioper+Precis+Med%22%5BJournal%5D)">Cardiac injury induced by obstructive jaundice: a comprehensive review.</a> Perioper Precis Med. 28 (1), 28-38 (2025).</li>
<li>Chang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%C3%9F-tubulin+contributes+to+Tongyang+Huoxue+decoction-induced+protection+against+hypoxia%2Freoxygenation-induced+injury+of+sinoatrial+node+cells+through+SIRT1-mediated+regulation+of+mitochondrial+quality+surveillance%5BTitle%5D)+AND+%22Phytomedicine%22%5BJournal%5D)">ß-tubulin contributes to Tongyang Huoxue decoction-induced protection against hypoxia/reoxygenation-induced injury of sinoatrial node cells through SIRT1-mediated regulation of mitochondrial quality surveillance.</a> Phytomedicine. 108, 154502(2023).</li>
<li>Li, Z., Hu, B., Zou, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Research+advances+in+understanding+the+role+and+mechanism+of+pyroptosis+in+myocardial+ischemia-reperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Perioper+Precis+Med%22%5BJournal%5D)">Research advances in understanding the role and mechanism of pyroptosis in myocardial ischemia-reperfusion injury.</a> Perioper Precis Med. 2 (2), 52-63 (2024).</li>
<li>Ouyang, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+immunostaining-based+approach+for+assessing+myocardial+viability+in+the+infarcted+mouse+hearts%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Cardiovasc+Med%22%5BJournal%5D)">An immunostaining-based approach for assessing myocardial viability in the infarcted mouse hearts.</a> Front Cardiovasc Med. 12, 1598314(2025).</li>
<li>Benedek, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+TTC+staining+for+the+evaluation+of+tissue+injury+in+the+early+phases+of+reperfusion+after+focal+cerebral+ischemia+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Use of TTC staining for the evaluation of tissue injury in the early phases of reperfusion after focal cerebral ischemia in rats.</a> Brain Res. 1116 (1), 159-165 (2006).</li>
<li>Lindsey, M. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Guidelines+for+in+vivo+mouse+models+of+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">Guidelines for in vivo mouse models of myocardial infarction.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 321 (6), H1056-H1073 (2021).</li>
<li>Lujan, H. L., Janbaih, H., Feng, H. -Z., Jin, J. -P., DiCarlo, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myocardial+ischemia%2C+reperfusion%2C+and+infarction+in+chronically+instrumented%2C+intact%2C+conscious%2C+and+unrestrained+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Regul+Integr+Comp+Physiol%22%5BJournal%5D)">Myocardial ischemia, reperfusion, and infarction in chronically instrumented, intact, conscious, and unrestrained mice.</a> Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 302 (12), R1384-R1400 (2012).</li>
<li>Redfors, B., Shao, Y., Omerovic, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myocardial+infarct+size+and+area+at+risk+assessment+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Clin+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Myocardial infarct size and area at risk assessment in mice.</a> Exp Clin Cardiol. 17 (4), 268-272 (2012).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>1.25x hedef</td><td>Olympus</td><td>PlanApo 1.25X/0.04</td><td>Görüntüleme</td></tr><tr><td>10 mL Şırıngalar</td><td>B.Braum</td><td>4617100V</td><td>Retro-perfüzyon</td></tr><tr><td>2,3,5-triphenyltetrazolium klorür</td><td>Milipore</td><td>1.08380.0100</td><td>Kimyasallar</td></tr><tr><td>20 G kanül</td><td>BD</td><td>305895</td><td>Retro-perfüzyon</td></tr><tr><td>3&nbsp; mL Şıringerler</td><td>B.Braum</td><td>4617022V</td><td>Retro-perfüzyon</td></tr><tr><td>3 yönlü durdurma</td><td>B.Braum</td><td>16494C</td><td>Retro-perfüzyon</td></tr><tr><td>Aquamount&nbsp;</td><td>BDH</td><td>362262H</td><td>Sırozsiyon</td></tr><tr><td>Denge</td><td>Ohaus</td><td>Yok</td><td>Kimyasalları tartma</td></tr><tr><td>Dürbün mikkroskopu</td><td>Leica</td><td>MZ6</td><td>Kanülasyon</td></tr><tr><td>C57BL/6J</td><td>Janvier</td><td>Yok</td><td>Hayvanlar</td></tr><tr><td>Kamera</td><td>Olympus</td><td>UC30</td><td>Görüntüleme</td></tr><tr><td>Kapak slipleri</td><td>Epredia</td><td>BB02400500A113MN20</td><td>Sırozsiyon</td></tr><tr><td>Kriyostat</td><td>Leica</td><td>M850</td><td>Sırozsiyon</td></tr><tr><td>Çift Damıtılmış Su</td><td>Milipore</td><td>Yok</td><td>Çözünen kimyasallar</td></tr><tr><td>İnce diseksiyon makası</td><td>AESCULAP</td><td>BC702R</td><td>Cerrahi Aletler</td></tr><tr><td>İnce mikro-diseksiyon pensleri&nbsp;</td><td>AESCULAP</td><td>FM001R</td><td>Cerrahi Aletler</td></tr><tr><td>Cam mikroskop slaytları</td><td>Engelbrecht</td><td>11102</td><td>Sırozsiyon</td></tr><tr><td>ImageJ</td><td>NIH</td><td>1.54g</td><td>Görüntüleme işleme</td></tr><tr><td>İzofluran</td><td>Piramal</td><td>14150097146754</td><td>Kimyasallar</td></tr><tr><td>İzopropanol</td><td>Roth</td><td>&nbsp; 0733.1</td><td>Kimyasallar</td></tr><tr><td>Işık mikroskobu</td><td>Olympus</td><td>BX61</td><td>Görüntüleme</td></tr><tr><td>Mikro-disseksiya forsepsleri&nbsp;</td><td>F.S.T</td><td>11152-10</td><td>Cerrahi Aletler</td></tr><tr><td>OCT bileşiği</td><td>Sakura</td><td>4583</td><td>Kimyasallar</td></tr><tr><td>Petri kabı</td><td>Therno Scientific</td><td>172931</td><td>Retro-perfüzyon</td></tr><tr><td>Fosfat tamponlu tuzlu su</td><td>Roth</td><td>9143.1</td><td>Kimyasallar</td></tr><tr><td>Rstudio</td><td>Posit Yazılımı</td><td>2024.09.0</td><td>Görüntüleme işleme</td></tr><tr><td>İpek dikiş</td><td>F.S.T</td><td>18020-60</td><td>Retro-perfüzyon</td></tr><tr><td>Yazılım</td><td>Olympus</td><td>CellSens V3.2</td><td>Görüntüleme</td></tr><tr><td>Paslanmamış diseksiya makası</td><td>AESCULAP</td><td>BC257R</td><td>Cerrahi Aletler</td></tr><tr><td>Zamboni çözümü</td><td>Morphisto</td><td>12773.0050</td><td>Kimyasallar</td></tr></tbody></table>

miyokard yaralanmasının doğru ve güvenilir analizi için mikroskobik 2,3,5-trifeniltetrazolyum klorür testi

A Microscopic 2,3,5-Triphenyltetrazolium Chloride Assay for Accurate and Reliable Analysis of Myocardial Injury

Miyokard yaralanmasının doğru ve güvenilir analizi için mikroskobik 2,3,5-trifeniltetrazolyum klorür testi

In this protocol, we present a refined 2,3,5-Triphenyltetrazolium Chloride (TTC)-based method for the accurate and reliable analysis of myocardial ...

a-microscopic-235-triphenyltetrazolium-chloride-assay-for-accurate

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Karmaşık biyolojik örneklerde ölçüm biyolojik giderek karar verme klinik rehberlik. Biz aynı anda kalp miyozin bağlayıcı protein-C, kreatin kinaz MB ve miyokard infarktüsü ve sağlıklı kontrol grubu olan hastalarda serum örneklerinde kardiyak troponin I ölçmek için son derece hassas bir yöntem açıklanmaktadır.

Elektrokemiluminesan immunoassay Serum Kardiyak Miyozin Bağlayıcı Protein-C belirlenmesi için hassas ve özel miktar tayini yöntemi

Minimal invaziv manipülasyonlara sahip farelerde miyokard enfarktüsü için yüksek oranda tekrarlanabilir bir model tanımlanmıştır. Model kolayca gerçekleştirilebilir, bu da yüksek tekrarlanabilirlik ve hayatta kalma oranı ile sonuçlanır. Bu nedenle, açıklanan model, 3R ilkesinin (Değiştirme, İyileştirme ve İndirgeme) talep ettiği gibi gerekli hayvan sayısını azaltacaktır.

Farelerde Miyokard İnfarktüsü Oluşturan Minimal İnvaziv Cerrahi Prosedür

Bu yöntem, deneysel olarak indüklenen miyokard iskemisi olan farelerde kardiyak morfolojiyi, fonksiyonu, perfüzyonu, metabolizmayı ve iyotlu kontrast madde ile canlılığı değerlendirmek için Kuantum Mikro Bilgisayarlı Tomografi (MikroBT) kullanımını ana hatlarıyla belirtir. Teknik, insan kalbi hastalığının çeşitli hayvan modellerinin tahribatsız, yüksek verimli uzunlamasına in vivo görüntülenmesi için uygulanabilir.

Miyokard Yapı, Fonksiyon Vivo Kantitatif Değerlendirilmesi yılında Perfüzyon ve Canlılık Kardiyak Mikro-bilgisayarlı Tomografi ile

Kardiyak hipertrofi ve yeniden şekillenmeyi indükleyen abdominal aort daralmasının bir sıçan modeli tanımlanmıştır. Miyokard hipertrofisi ve disfonksiyonu araştırmaları için basit ama kullanışlı bir platform sağlamak için verimli, yüksek oranda tekrarlanabilir ve minimal invaziv bir yöntem kullanılır.

Sıçanlarda Karın Aort Konstrüksiyon sayesinde Kardiyak Yaptırma Bir Model

Kemirgenlerde miyokard enfarktüsünün (MI) ölüm sonrası değerlendirmesi, lekeli kalp bölümlerindeki enfarktüsün ölçülmesine dayanır. Hasat edilen sıçan kalplerinin tabandan apekse sistematik örneklemesini ve trikrom lekeli histolojik kesitlerin görüntü analizlerini kullanarak enfarktüs boyutunu ölçmek için doğru bir yöntem tarif ediyoruz.

Sıçanlar Kronik Kalp Enfarktüsü histolojik Niceleme

Bu protokol, MRI ile bütün kalp miyokard dokusu 3D karşılaştırmak için yeni bir yöntem tarif eder. Bu miyokard enfarktüsü, kronik domuz modelinde enfarktüs sınır bölgesinde intramiyokardiyal enjeksiyonları tam olarak değerlendirilmesi için tasarlanmıştır.

3D Tüm kalp Miyokard Doku Analizi

Burada biz miyokardiyal iskemi/reperfüzyon hasarı Patofizyoloji anlamada translasyonel değerini artırmak için örnekleme prosedürleri akut miyokard infarktüsü, kurulan bir domuz modelinin standart hale getirmek için bir protokol göstermek ve yeni ilaç adaylarının sınamak için.

Kapalı göğüs domuz miyokard infarktüsü manken standardizasyon doku ve kan örnekleme prosedürleri tarafından geliştirilmesi

Burada, hipoksi/reoxygenation veya koruyucu bir ajan olmadan maruz sonra hücreleri mitokondrial membran potansiyelini değerlendirmek için Dizayn Merkezi-1 boya kullanan bir iletişim kuralı mevcut.

Kardiyak miyositler mitokondrial membran potansiyeli hipoksi/Reoxygenation sonra ölçmek için akış sitometresi tabanlı tahlil

Yeterli anestezi altında, fare kalbi interkostal boşluktan dışsallaştırıldı ve miyokard enfarktüsü, çoğu laboratuvarda kolayca bulunabilen malzemeler kullanılarak sol ön inen arteri (LAD) bağlayarak başarılı bir şekilde indüklendi.

Farelerde Miyokard Enfarktüsünün İndüksiyonu için Değiştirilmiş Basit Bir Yöntem

Bu çalışma, geleneksel bir Uygur bitkisel preparatı olan Munziq'in anormal vücut sıvısına sahip sıçanlarda miyokardiyal iskemi-reperfüzyon hasarı (MIRI) üzerindeki kardiyoprotektif etkilerini araştırmaktadır. Kapsamlı deneysel yöntemler sayesinde, Munziq'in NF-κB sinyal yolunu baskılayarak MIRI'yi azaltma potansiyelini gösteriyoruz.

Herbal Munziq, iltihabı inhibe ederek miyokardiyal iskemi-reperfüzyon hasarını iyileştirir

Reperfüze akut miyokard enfarktüsünde (repAMI) kardiyak hasarın üç boyutlu (3D) rekonstrüksiyonu, ilişkili hastalığı etkileyen paternlerin aslına uygun olarak ölçülmesini ve birlikte lokalizasyonunu sağlar. Burada, kardiyak hasarın, risk altındaki alanın ve bağışıklık hücresi tepkisinin eşzamanlı ölçümü için otomatikleştirilebilir bir ışık tabakası kılavuzluğunda görüntüleme yaklaşımı sağlanmıştır.

Işık Tabakası Floresan Mikroskobu Kullanılarak Reperfüze Akut Miyokard Enfarktüsünde Kardiyak Hasar ve İmmün Yanıtın Eşzamanlı 3D Analizi

Öğrenin mikroskobik TTC boyama yöntemiyle miyokard iskemi-reperfüzyon hasarının doğru analizini. Geliştirilmiş protokol, kriyoseksiyon ve görüntüleme teknikleriyle infarkt boyutunun güvenilir değerlendirilmesini sağlar.

Miyokard yaralanmasının doğru ve güvenilir analizi için mikroskobik 2,3,5-trifeniltetrazolyum klorür testi

Daha fazla video keşfet